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1.2基因工程的基本操作程序題目1.2基因工程的基本操作程序課型新課第1課時學(xué)習(xí)目標(biāo)1.簡述基因工程的四個步驟。重點簡述基因工程操作程序的四個步驟。學(xué)習(xí)過程學(xué)習(xí)內(nèi)容 學(xué)生活動復(fù)習(xí)1.DNA重組技術(shù)需要那些工具?2.基因工程的載體具有那些特點?基礎(chǔ)部分1、目的基因的獲?。?。目的基因概念:_ 2。目的基因的舉例:_ 3。目的基因的獲取途徑 (1)從基因文庫中獲取基因文庫的概念:將含有某種生物不同_的許多_,導(dǎo)入_的群體中儲存,各個_分別含有_,稱為基因文庫基因文庫的類型:a.基因組文庫:將某種生物體內(nèi)的DNA_提取出來,選取用適當(dāng)?shù)腳,將DNA切成一定范圍大小的_,然后,將這些DNA片段分別與載體連接起來,導(dǎo)入_的群體中儲存,每個受體菌都含有了一段不同的_。也就是說,這個群體包含了這種生物的_ b.部分基因文庫:(如cDNA)用某種生物發(fā)育的某個時期的_反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種_DNA片段,與載體連接后儲存在一個_中,那么,這個受體菌群就叫做這種生物的cDNA文庫d:兩種基因文庫的區(qū)別主要如下表所示:文庫類型cDNA文庫基因組文庫文庫大小基因中啟動子(具有啟動作用的DNA片段)基因中的內(nèi)含子(位于編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)的非編碼DNA片段)基因多少物種間的基因交流從基因文庫中獲取目的基因的依據(jù)有:_、_、_、_、_(2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因: 概念:PCR是一項_的核酸合成技術(shù)。閱讀教材歸納原理:_條件:_過程:_、_、_(3)人工合成法:通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成,適用于_的基因反轉(zhuǎn)錄法:根據(jù)mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成目的基因2、基因表達載體的構(gòu)建工程的核心1。構(gòu)建基因表達載體的目的 (1)_ (2)_ 2?;虮磉_載體的組成(1)_(2)_位置:位于_,是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段作用:是_識別和結(jié)合部位,有了它才能驅(qū)動基因_,最終獲得需要的_(3)_ 位置:位于基因的末端,也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段作用:_(4)_: 作用:用于鑒別_,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。如:_3。基因表達載體的構(gòu)建有差別的原因: (1)受體細胞不同,有_、_、_之分(2)_閱讀歸納提升部分1.為什么要構(gòu)建基因文庫?直接從含目的基因的生物體內(nèi)提取不行嗎?2.如果基因小,核苷酸序列已知,可以用什么方法來合成DNA呢?3.將生物的所有DNA直接導(dǎo)入受體細胞不是更簡便嗎?如果這么做,結(jié)果會怎樣?拔高部分全品:當(dāng)堂自測題板書設(shè)計1、目的基因的獲?。悍椒ǎ海?)從基因文庫中獲取(2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因(3)人工合成法:2、基因表達載體的構(gòu)建 目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳下一代 使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用 組成:啟動子,終止子,標(biāo)記基因,復(fù)制原點,目的基因課后反思題目1.2基因工程的基本操作程序課型新課第1課時學(xué)習(xí)目標(biāo)1.簡述基因工程的四個步驟。重點簡述基因工程操作程序的四個步驟。學(xué)習(xí)過程學(xué)習(xí)內(nèi)容 學(xué)生活動復(fù)習(xí)1.獲取目的基因的方法有幾種?2.構(gòu)建基因表達載體的目的是什么?3.基因表達載體的組成有哪些?回答問題基礎(chǔ)知識3、將目的基因?qū)胧荏w細胞1。轉(zhuǎn)化:_2。將目的基因?qū)胫参锛毎?)受體細胞:_或_(2)導(dǎo)入方法:_法:農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的 微生物,能在自然條件下感染_植物和_植物。當(dāng)植物體受到損傷時,傷口處的細胞會分泌大量的_,吸引_移向這些細胞,這時農(nóng)桿菌的_上的T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)可轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且_到受體細胞染色體的_上a.轉(zhuǎn)化過程:_轉(zhuǎn)化的實質(zhì):將目的基因整合到受體細胞的染色體基因組中b.適合于:_和_植物。約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是通過這種方法獲得的 基因槍法:_中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法,但是成本較高花粉管通道法:植物花粉在柱頭上萌發(fā)后,花粉管要穿過花柱直通胚囊A過程:在植物受粉后,花粉形成的_還未愈合前,剪去柱頭,然后,滴加_(含目的基因),使目的基因借助花粉管通道進入_B.我國的_就是用此種方法獲得 3將目的基因?qū)雱游锛毎?(1)受體細胞:_ (2)導(dǎo)入方法:_ 基本操作程序:首先將含有_表達載體提純,并使DNA濃度保持在1-3g/mL;然后,從雌性動物體內(nèi)取出_(卵可以在體內(nèi)受精,也可以在體外受精),采用_進行顯微注射;再將注射了目的基因的_,經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時間后,再移植到雌性動物的輸卵管和子宮內(nèi),使其發(fā)育成有新性狀的的動物實例:1982年,世界上第一例轉(zhuǎn)基因“超級小鼠” 閱讀教材完成導(dǎo)學(xué)案4、目的基因的檢測與鑒定1.目的基因的檢測與鑒定的意義:_2.目的基因檢測:_水平(1) 檢測(2) _ :檢測方法:_(DNA分子與DNA分子雜交):檢測過程:將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來,在含有目的基因的DNA提取出來,在含有_的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記,以次作為_,使探針與基因組DNA雜交。:檢測結(jié)果:如果顯示出_,則表明目的基因已經(jīng)插入染色體DNA中(2)檢測_:檢測方法:_(DNA分子與_雜交):檢測過程:從轉(zhuǎn)基因生物中提取_,同樣用標(biāo)記的目的基因作探針,與mRNA雜交:檢測結(jié)果:_(3)檢測_ :檢測方法:分子雜交技術(shù)(抗體分子與_雜交):檢測過程:_:檢測結(jié)果:_3.目的基因的鑒定:_水平 (1)一個抗蟲或抗病的目的基因?qū)胫参锛毎?,是否賦予了植物抗蟲或抗病特性,需要做抗蟲或抗病的_實驗,以確定是否_(2)有的基因工程產(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品的功能進行_比較,以確定_1、導(dǎo)入檢測:DNA分子雜交技術(shù),即使用放射性同位素或熒光分子標(biāo)記的DNA作探針進行檢測 2、表達檢測:轉(zhuǎn)錄檢測:分子雜交技術(shù) 翻譯檢測:抗原抗體特異性反應(yīng)法 3、個體生物學(xué)水平鑒定:抗蟲或抗病的接種實驗
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