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比較不同機(jī)體代謝狀況對缺氧耐受性影響的實(shí)驗(yàn)研究目的 :比較不同機(jī)體代謝狀況對缺氧耐受性影響的實(shí)驗(yàn)研究方法:通過構(gòu)建小鼠低張缺氧模型,分別觀察咖啡因和氯丙嗪注射的小鼠的死亡時間實(shí)驗(yàn)原理:機(jī)體對缺氧的耐受性,除受缺氧程度、缺氧發(fā)生速度、缺氧持續(xù)時間以及缺氧類型的影響外,還與諸如年齡、性別、種屬、機(jī)體的代謝狀況、組織代謝特點(diǎn)、組織代謝耗氧率 及適應(yīng)性鍛煉等因索有關(guān)。本研究通過復(fù)制不同代謝狀態(tài)的動物模型,觀察機(jī)體對缺氧耐受性的影響及其影響因素。咖啡因?yàn)橹袠信d奮劑,注射后可使中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮,興奮大腦皮層的作用尤為突出。表現(xiàn)機(jī)體反應(yīng)性增強(qiáng),思維活躍,呼吸加深加快,心率加快,心肌收縮力加強(qiáng),心輸出量增多,致使機(jī)體處于高代謝狀態(tài)。氯丙嗪為中樞多巴胺受體的阻斷劑,具有抗精神病、鎮(zhèn)吐、能增強(qiáng)催眠、麻醉、鎮(zhèn)靜作用、阻斷外周-腎上腺素受體,抑制體溫調(diào)節(jié)中樞,使體溫調(diào)節(jié)失靈,體溫可隨外環(huán)境變化而變化。用較大劑量氯丙嗪時,置患者于冷環(huán)境中(如冰袋或用冰水浴),可出現(xiàn)鎮(zhèn)靜、嗜睡、體溫降低至正常以下(如34或更低)、基礎(chǔ)代謝降低、器官功能活動減少、耗氧量減低而呈“人工冬眠”。 注射后可誘導(dǎo)睡眠,抑制機(jī)體產(chǎn)熱,增加散熱,降低機(jī)體體溫,抑制心臟和血管運(yùn)動中樞,使器官活動減弱,機(jī)體對刺激的反應(yīng)性降低,從而降低基礎(chǔ)代謝率,使機(jī)體處于低代謝狀態(tài)。1 實(shí)驗(yàn)材料器材:200ml中間能隔開動物的長玻璃筒、1ml注射器、剪刀、鑷子。藥品:生理鹽水,0.25%氯丙嗪,1%咖啡因動物:小白鼠2 實(shí)驗(yàn)過程1) 取體重年齡相近同性別的小白鼠6只,稱重,標(biāo)記2) 實(shí)驗(yàn)小鼠分組情況:實(shí)驗(yàn)組I:1和2號小鼠分別腹腔注射 10 mlK g-1的咖啡因和氯丙嗪,然后分別放到兩個長玻璃筒中;實(shí)驗(yàn)組II:3和4號小鼠分別腹腔注射 10 mlK g-1的咖啡因和等量生理鹽水,然后分別放到兩個長玻璃筒中;實(shí)驗(yàn)組III:5和6號小鼠分別腹腔注射 10 mlK g-1的氯丙嗪和等量生理鹽水,然后分別放到兩個長玻璃筒中;3) 待玻璃筒中兩只實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)興奮或抑制狀態(tài)時,正常小鼠恢復(fù)安靜狀態(tài),將玻璃筒封閉4) 每隔兩分鐘觀察小鼠的呼吸次數(shù)和呼吸頻率,觀察小鼠死亡時間3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果61 2 3 4 5 組別編號重量(g)注射量(ml)注射時間封閉時間初始狀態(tài)瀕死狀態(tài)死亡時間存活時間(分)死亡狀態(tài)興奮狀態(tài)呼吸頻率興奮狀態(tài)呼吸頻率I115.40.1515:0215:07興奮加深加快劇烈抽搐變淺加快15:2619僵直215.00.1515:0215:07半睡眠正常輕微抽搐腹式呼吸變深變慢15:4538正常II315.30.1515:4715:55興奮加深加快劇烈抽搐變淺加快16:1722僵直414.80.1515:4715:55正常正常抽搐變淺加快16:2631正常III515.80.1516:2816:35半睡眠正常變淺加快腹式呼吸變深變慢17:1742正常615.30.1516:2816:35正常正常抽搐變淺加快17:0833正常討論 氧是生命活動所必須的重要物質(zhì)之一,當(dāng)組織得不到充分的氧或組織利用氧發(fā)生障礙時,組織器官的機(jī)能、代謝,甚至形態(tài)結(jié)構(gòu)將發(fā)生異常變化,嚴(yán)重時可導(dǎo)致機(jī)體死亡。缺氧是I臨床上常見的致病因素或重要的病理過程,與諸多疾病的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。如何提高機(jī)體對缺氧的耐受性,對于減輕缺氧的病理損傷,減少并發(fā)癥,都具有十分重要的意義。本實(shí)驗(yàn)旨在通過改變機(jī)體的代謝狀況,觀察機(jī)體在不同代謝狀況下對缺氧耐受性的影響,并對其影響因素進(jìn)行探討。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,咖啡因處理組小白鼠的存活時間明顯縮短,代謝耗氧率顯著增加,而總耗氧量卻減少,剩余氧濃度增大。這說明中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮后機(jī)體活動增加,呼吸運(yùn)動增強(qiáng),代謝率提高,對氧的需求量增大,故代謝耗氧率增高。但由于本實(shí)驗(yàn)是在密閉的政氧環(huán)境下進(jìn)行,呼吸運(yùn)動的增強(qiáng)非但不能攝取更多的氧,反而由于呼吸肌做功增加,需氧量增多。因隨時間的延長,瓶內(nèi)空氣中的剩余氧濃度越來越低,攝取的氧不能維持機(jī)體的代謝需要而致動物死亡加速,存活時間顯著縮短。由于動物代謝耗氧率增加,以致于在氧濃度較低的情況下所攝取的氧不能維持機(jī)體高代謝之需要,所以剩余氧濃度較對照組增高;又因動物存活時間短,故總耗氧量較對照組減少。實(shí)驗(yàn)組的小鼠通過人工冬眠的作用使動物體溫下降,組織器官活動及對各種刺激反應(yīng)下降,機(jī)體代謝率下降,耗氧量減少,耐缺氧能力提高,存活時間延長。另外,有研究表明氯丙嗪能夠減輕缺氧缺糖引起的細(xì)胞損傷,其機(jī)制可能與調(diào)控IB/ NF-B 途徑,減少凋亡相關(guān)基因的表達(dá)有關(guān)2。因此實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)組小鼠較對照組耗氧量及死亡時間均增加,耗氧率減少。氯丙嗪處理組小白鼠,其存活時間明顯延長,代謝耗氧率顯著降低,總耗氧量減少,剩余氧濃度增大。這可能由于注射氯丙嗪后,動物安靜少動,處于半睡眠狀態(tài),基礎(chǔ)代謝率明顯降低,對氧的需求量顯著減少,故代謝耗氧率明顯降低,因此在密閉的缺氧環(huán)境中可使動物存活時間顯著延長。剩余氧濃度增加說明動物對氧的攝取能力降低,因而也致總耗氧趕下降本實(shí)驗(yàn)證明,機(jī)體處于不同代謝狀態(tài)時,對缺氧的耐受性有顯著性差異。當(dāng)機(jī)體處于高代謝狀態(tài)時,活動增強(qiáng),代謝耗氧率增高,存活時間縮短、對缺氧的耐受性降低;反之,當(dāng)機(jī)體處于低代謝狀態(tài)時,代謝耗氧率降低,存活時間延長,機(jī)體對缺氧的耐受性日月顯增強(qiáng);同時也應(yīng)注意,機(jī)體過度抑制時對氧的攝取能力亦下降,因此,臨床上在進(jìn)行冬眠療法時,應(yīng)注意掌握冬眠的深度
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