實(shí)驗(yàn)檢測生物組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì)課件.ppt

實(shí)驗(yàn)檢測生物組織中的糖類 脂肪和蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)原理 還原糖 斐林試劑 脂肪 蛋白質(zhì) 雙縮脲試劑 50 65 溫水浴 蘇丹 染液橘黃色蘇丹 染液 紅色 紫色 磚紅色沉淀 實(shí)驗(yàn)步驟 1 還原糖的檢測 選材 含糖量較高 的植物組織結(jié)論 組織樣液中含有可溶性 剛配制的斐林試劑 磚紅色沉淀 白色或近于白色 還原糖 2 脂肪的檢測 方法一 花生種子勻漿 3滴蘇丹 染液 方法二 取材 花生種子 浸泡 去掉種皮 將子葉切成薄片 制片 觀察 先在 下尋找已著色顆粒 再用 觀察 結(jié)論 圓形小顆粒呈 證明有脂肪存在 取最薄的切片 放在載玻片中央 染色 滴2 3滴 染色3min 去浮色 加1 2滴體積分?jǐn)?shù)為50 的 制成臨時(shí)裝片 滴一滴 蓋上蓋玻片 橘黃色 蘇丹 染液 酒精溶液 蒸餾水 低倍顯微鏡 高倍顯微鏡 橘黃色 3 蛋白質(zhì)的檢測 選材與制備 蛋清稀釋液或豆?jié){濾液結(jié)論 組織樣液中存在 紫色 蛋白質(zhì) 1 在檢測生物組織中還原糖 脂肪和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中 對(duì)于選材有什么要求 提示 主要有兩個(gè)方面的要求 1 含量較高 如檢測還原糖時(shí)宜選用蘋果 蘋果含大量還原糖 不能選擇甘蔗 甜菜等 因?yàn)檫@兩種實(shí)驗(yàn)材料中含蔗糖較高 蔗糖不具有還原性 2 顏色為白色或淺色 白色或淺色的材料可以避免材料本身的顏色遮蓋反應(yīng)結(jié)果 如檢測還原糖時(shí)一般不選擇西瓜 檢測蛋白質(zhì)時(shí)一般不選擇血紅蛋白等 2 蔗糖溶液中加入斐林試劑后呈現(xiàn)什么顏色 提示 蔗糖屬于非還原糖 不與斐林試劑發(fā)生反應(yīng) 觀察到的現(xiàn)象不是無色 而是淺藍(lán)色 Cu OH 2的顏色 3 檢測生物組織中的還原糖 脂肪和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中 哪些實(shí)驗(yàn)需要加熱 哪些實(shí)驗(yàn)需要用顯微鏡觀察 提示 1 只有檢測還原糖的實(shí)驗(yàn)需要加熱 且實(shí)驗(yàn)中需要用溫水浴加熱 不能用酒精燈直接加熱 2 只有檢測脂肪的實(shí)驗(yàn)需要用顯微鏡觀察 因?yàn)橹绢w粒儲(chǔ)存于細(xì)胞中 必須用顯微鏡觀察 4 用蛋清稀釋液作為實(shí)驗(yàn)材料鑒定蛋白質(zhì) 為什么一定要稀釋到一定程度 提示 如果不充分稀釋蛋清液 與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會(huì)粘在試管的內(nèi)壁上 使反應(yīng)不徹底 試管也不容易洗刷干凈 5 鑒定還原糖時(shí)使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用 提示 因?yàn)殪沉衷噭┖懿环€(wěn)定 容易產(chǎn)生藍(lán)色的Cu OH 2沉淀 所以應(yīng)將甲液和乙液分別配制 使用時(shí)現(xiàn)配現(xiàn)用 6 斐林試劑與雙縮脲試劑成分相同 但在使用時(shí) 斐林試劑甲液與乙液必須混合使用 而雙縮脲試劑則先滴加A液 再滴加B液 請(qǐng)分析原因 提示 兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)原理不同 所以使用方法不同 1 檢測還原糖 反應(yīng)原理是Cu OH 2與還原糖反應(yīng)生成磚紅色的Cu2O沉淀 所以先將甲液和乙液混合生成Cu OH 2后再與還原糖反應(yīng) 2 檢測蛋白質(zhì) 反應(yīng)原理是肽鍵在堿性環(huán)境中與Cu2 反應(yīng)產(chǎn)生紫色絡(luò)合物 所以先滴加A液的目的是制造堿性環(huán)境 7 在還原糖 蛋白質(zhì)和脂肪的檢測實(shí)驗(yàn)中 加相應(yīng)試劑檢測之前 為什么要留出一部分組織樣液 提示 留出一部分組織樣液的目的是與檢測后的樣液顏色作對(duì)比 以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力 應(yīng)用點(diǎn)撥 本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的原理是顏色反應(yīng) 發(fā)生顏色反應(yīng)后 一方面觀察顏色種類 推斷被檢測的物質(zhì)種類 另一方面觀察顏色的變化和深淺 推斷被檢測物質(zhì)的變化和含量的多少 所以應(yīng)從顏色種類 過程和深淺等方面 考慮該原理在實(shí)際中的應(yīng)用 典例1 為進(jìn)一步確定來源不同的A B C D E五種物質(zhì) 或結(jié)構(gòu) 的具體類型 進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn) 現(xiàn)象與結(jié)果如下 1 各種物質(zhì) 或結(jié)構(gòu) 的性質(zhì) 染色反應(yīng)的結(jié)果 見下表 注 有 溶解 無 不溶解 灰分指物質(zhì)充分燃燒后剩下的部分 2020 1 30 18 可編輯 2 A為紅色 檢測A的灰分后發(fā)現(xiàn)其中含有鐵元素 3 將適量的E溶液加入盛有D的試管中 混合一段時(shí)間后 混合液能與斐林試劑發(fā)生反應(yīng) 生成磚紅色沉淀 根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果 推斷出 A B C D E 解題指南 解答本題需注意以下兩點(diǎn) 1 結(jié)合不同染液所鑒定的對(duì)應(yīng)組織 根據(jù)表格中 染色反應(yīng) 是否發(fā)生 初步判斷五種物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì) 2 注意關(guān)鍵信息 E溶液加入盛有D的試管中 發(fā)生反應(yīng) 生成磚紅色沉淀 說明E與D混合后發(fā)生分解 產(chǎn)物有還原糖 解析 根據(jù)題意A物質(zhì)中含有鐵元素 且可以與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng) 因此可以判斷為血紅蛋白 B物質(zhì)能夠和蘇丹 染液發(fā)生反應(yīng) 因此為脂肪 C物質(zhì)能和雙縮脲試劑反應(yīng) 說明內(nèi)含蛋白質(zhì) 又可以和甲基綠反應(yīng)說明內(nèi)含DNA 因此可以判斷為染色體 質(zhì) D物質(zhì)中沒有灰分 說明只含C H O三種元素 且不與提供的各種試劑反應(yīng) 因此最可能為纖維素 E物質(zhì)能與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng) 還能與D物質(zhì)反應(yīng) 且反應(yīng)后能與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀 因此可以判斷為纖維素酶 答案 A 血紅蛋白B 脂肪C 染色體 質(zhì) D 纖維素E 纖維素酶 典例2 某人身體不適 全身浮腫 去醫(yī)院做尿液檢查時(shí) 化驗(yàn)師做了如下操作 取稀釋尿液2mL 加0 1g mLNaOH溶液2mL搖勻 加0 01g mLCuSO4溶液3 4滴 搖勻 觀察結(jié)果有紫色出現(xiàn) 該人可能患有 A 糖尿病B 腎小球炎C 乙型肝炎D 營養(yǎng)性貧血 解題指南 解答本題的突破口是實(shí)驗(yàn)操作的 和 兩步驟及實(shí)驗(yàn)結(jié)果 出現(xiàn)紫色是鑒定蛋白質(zhì)具有的顏色反應(yīng)現(xiàn)象 解析 選B 因?yàn)槌霈F(xiàn)紫色是雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)相互作用產(chǎn)生的特定顏色反應(yīng) 故可知尿液中含有蛋白質(zhì) 又因血液中的蛋白質(zhì)只有在腎小球發(fā)炎 毛細(xì)血管壁通透性增大時(shí) 才會(huì)滲入尿液中 故可知B項(xiàng)符合題意 典例3 香蕉果實(shí)成熟過程中由于儲(chǔ)存的物質(zhì)變?yōu)榭扇苄蕴?從而使果實(shí)甜度增加 某興趣小組對(duì)此生理變化進(jìn)行了初步探究 取未成熟香蕉果實(shí)若干放在適宜條件下 讓其自然成熟 每天定時(shí)取10g果肉研磨配制成100mL待測樣液平均分為A B兩份 分別用碘液和斐林試劑檢測 記錄顏色深淺的變化情況 1 樣液A用碘液檢測的目的是 樣液B用斐林試劑檢測的目的是 2 斐林試劑使用時(shí)需甲 乙液等量混合均勻后再注入樣液B 并觀察顏色變化 3 如果探究過程中每天的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯 可施加一定濃度的促進(jìn)果實(shí)成熟 也可適當(dāng)提高促進(jìn)果實(shí)成熟 因?yàn)?4 根據(jù)預(yù)期結(jié)果繪制坐標(biāo)圖并畫出兩種顏色的變化 解題指南 解答本題時(shí)明確以下兩點(diǎn) 1 碘液用于鑒定淀粉 斐林試劑用于鑒定還原糖 2 顏色的深淺代表物質(zhì)含量的高低 結(jié)合題干中的關(guān)鍵信息 香蕉果實(shí)成熟過程中由于儲(chǔ)存的物質(zhì)變?yōu)榭扇苄蕴?分析物質(zhì)含量的變化 解析 本題以香蕉的成熟為背景考查淀粉和還原糖的鑒定 1 碘液用來鑒定淀粉 斐林試劑用來鑒定還原