高中生物《第三章 第一節(jié) 菊花的組織培養(yǎng)》課件3 新人教版選修1.ppt

菊花的組織培養(yǎng) jlssybyh 菊花是菊科菊屬的多年生宿根草本植物 是我國(guó)的傳統(tǒng)名花和世界四大切花之一長(zhǎng)期以來(lái)菊花采用分株 扦插等無(wú)性繁殖方法進(jìn)行繁殖但是傳統(tǒng)的繁殖方法易受環(huán)境影響 繁殖周期長(zhǎng) 隨著市場(chǎng)需求的急劇增加 已經(jīng)不能滿足市場(chǎng)日益發(fā)展的需要 植物組織培養(yǎng)具有增殖效率高 繁殖速度快的特點(diǎn) 可以用較短的時(shí)間和較少的空間生產(chǎn)出大量的試管苗 扦插 嫁接 壓條 植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程影響植物組織培養(yǎng)的因素菊花的組織培養(yǎng) 植物組織培養(yǎng) 關(guān)鍵詞 外植體 脫分化 再分化 愈傷組織 在無(wú)菌和人工控制條件下 將離體的植物器官 組織 細(xì)胞 培養(yǎng)在人工配置的培養(yǎng)基上 給予適宜的培養(yǎng)條件 誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織 叢芽 最終形成完整的植株 切取形成層 無(wú)菌接種 誘導(dǎo)愈傷組織的形成 試管苗的形成 培養(yǎng)室 移栽 脫分化 再分化 舉例 1 培育無(wú)病毒植株 2 大規(guī)模培養(yǎng)愈傷組織 提取紫草素 治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝品的原料 4 基因工程中亦需用到植物組織培養(yǎng)的方法 受體細(xì)胞為植物細(xì)胞 植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用 3 人工種子 解決有些作物品種繁殖能力差 結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題 植物組織培養(yǎng)過(guò)程 離體組織或細(xì)胞 植物體 細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 愈傷組織 芽 根 細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 植物細(xì)胞培養(yǎng) 不需要光 需要光 脫分化 讓已經(jīng)分化的細(xì)胞 經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后 失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過(guò)程 再分化 脫分化的細(xì)胞 在一定的條件下 又重新分化成各種特異性的組織細(xì)胞的過(guò)程 外植體 離體的植物器官 組織或細(xì)胞 愈傷組織 細(xì)胞排列疏松 無(wú)規(guī)則 高度液泡化的無(wú)定形的薄壁細(xì)胞 植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ) 細(xì)胞全能性 概念 高度分化的植物細(xì)胞 仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能 基礎(chǔ) 生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì) 表達(dá)條件 離體條件無(wú)菌操作適宜物質(zhì)的誘導(dǎo)和調(diào)節(jié) 植物激素 適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)溫度 酸堿度 光照等條件的控制 影響植物組織培養(yǎng)的因素 材料的種類 年齡及保存時(shí)間長(zhǎng)短等營(yíng)養(yǎng)植物激素ph 溫度 光照等條件 1 植物材料的選擇 煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易 枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難 材料的年齡 保存時(shí)間的長(zhǎng)短 菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝 2 ms培養(yǎng)基主要成分包括 a 大量元素 n p s k ca mg等 b 微量元素 b mn cu zn fe mo i co等 c 有機(jī)物 甘氨酸 煙酸 肌醇 維生素 蔗糖等 d 植物激素 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素 赤霉素等 討論 你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎 同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比 ms培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同 答 微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽 蔗糖提供碳源 同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓 甘氨酸 維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求 微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主 與微生物的培養(yǎng)不同 ms培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) 無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類 常用的植物激素 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素和赤霉素生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂 脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素在生長(zhǎng)素存在的情況下 細(xì)胞分裂素的作用呈加強(qiáng)的趨勢(shì)激素的使用順序 使用的量及比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向 3 植物激素的影響 生長(zhǎng)素類 2 4 二氯苯氧乙酸 2 4 d 吲哚乙酸 iaa 萘乙酸 naa 吲哚丁酸 iba 細(xì)胞分裂素類 激動(dòng)素 kt 6 芐基嘌呤 6 ba 玉米素 zt 赤霉素類 赤霉酸 ga3 4 ph 溫度 光照 ph控制在5 8左右溫度控制在18 22 每日用日光燈照射12h 菊花的組織培養(yǎng) 一 制備ms固體培養(yǎng)基 二 外植體消毒 三 接種 四 培養(yǎng) 五 移栽 六 栽培 一 制備ms固體培養(yǎng)基 ms培養(yǎng)基包括20多種營(yíng)養(yǎng)成分 實(shí)驗(yàn)室一般使用4 保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備 1 配制各種母液 無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮10倍 微量元素濃縮100倍 常溫保存 激素類 維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按1mg ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液 用母液配制培養(yǎng)基時(shí) 需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù) 計(jì)算用量 2 配制培養(yǎng)基 分裝到錐形瓶中 每瓶分裝50ml或100ml 配制培養(yǎng)液 調(diào)ph 培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易 因此不必添加植物激素 3 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 1 選材 菊花莖段 取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝 二 外植體消毒 2 消毒 流水沖洗 菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉 用軟刷輕輕刷洗 刷洗后在流水下沖洗20min左右 酒精處理 用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分 放入體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精中搖動(dòng)2 3次 持續(xù)6 7s 立即將外植體取出 在無(wú)菌水中清洗 消毒液處理 取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分 放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0 1 的氯化汞溶液中1 2min 取出后在無(wú)菌水中至少清洗3次 漂凈消毒液 三 接種 污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子 接種室消毒是至關(guān)重要的 用70 的酒精噴霧使空氣消毒 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線照射20分鐘 1 接種室消毒 2 無(wú)菌操作要求 操作要在酒精燈火焰旁完成 每次使用器械后 都需要用火焰灼燒滅菌 接種后立即蓋好瓶蓋 3 材料的切取和接種 4 接種注意事項(xiàng) 每接種一塊外植體前 鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為75 的酒精溶液中消毒一次 然后在酒精燈火焰上燒一遍 冷卻后再接種 外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻 放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定 一般胡蘿卜3 4塊 菊的莖或葉6 8塊 也不要太少 以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件 插入時(shí)應(yīng)注意方向 不要倒插 莖段 莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分 正常苗 污染苗 1 外植體帶菌 2 培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底 3 接種操作時(shí)帶入 4 環(huán)境不清潔 污染途徑 思考 你打算做幾組重復(fù) 你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎 答 每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù) 設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶 與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng) 用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格 沒(méi)有被雜菌污染 四 培養(yǎng) 接種后的錐形瓶最好放在無(wú)菌箱中培養(yǎng) 培養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒培養(yǎng)溫度控制在18 22 每日用日光燈光照12h 五 移栽 移栽生根的菊花試管苗之前 應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜 讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日 1 打開封口膜 2 清洗轉(zhuǎn)移 用流水清洗根部的培養(yǎng)基 將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間 3 移栽 幼苗長(zhǎng)壯后 移栽到土壤中 固體基質(zhì)型 含水量高 蓄水性強(qiáng) 透性好 適合栽培 珍珠巖 珍珠巖是一種火山噴發(fā)的酸性熔巖 經(jīng)急劇冷卻而成的玻璃質(zhì)巖石 有弧形或圓形裂隙 如珍珠的結(jié)構(gòu) 所以被