實驗方案：聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽.doc

聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽消毒凝膠制備方案：方案1：卡波姆基質(zhì)的制備：卡波姆940 10g，乙醇50g ，甘油 50g，聚山梨酯80 2g， 羥苯乙酯1g， 氫氧化鈉4g，純化水加至1000g (藥劑書)方案2：聚六亞甲基雙胍鹽酸:1326.5， 乙醇3436，異丙醇10.515.5，聚丙烯酸0.251，三乙醇胺0.51.5甲基苷-20 0.61，丙三醇0.21，維生素E0.20.5，純化水至100方案3:乙醇50-70，卡波姆940 0.2-2，pH值調(diào)節(jié)劑0.2-2，保濕劑0.11.0，香精0.011.5，純化水加至100.方案4：羧甲基纖維素:60g，甘油150g，羥苯甲酯2g, 純化水至1000g方案5：海藻酸鈉30g，葡萄糖酸鈣 0.5g,甘油450g,羥苯乙酯2g,加純化水至1000g。方案6：消毒凝膠: 稱取 聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽置于 ml（50）濃度為體積分?jǐn)?shù) %（50）乙醇中溶解，加入羧甲基纖維素鈉 g（10）及其他輔助成分，充分?jǐn)嚢?2min然后將其置于沸水浴中揮發(fā)脫除乙醇，繼續(xù)在高速攪拌條件下加沸水至 ml（500），靜置過夜去除氣泡，即成消毒凝膠。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：方案1：采用紫外分光光度法，對測定聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽的含量的準(zhǔn)確度進行了觀察。聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽在 234nm處有紫外吸收波長，不同濃度的樣品溶液在 234nm處有不同的吸光度值，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，將所測樣品的吸光值帶入曲線方程即可獲得樣品的含量值。試驗步驟1 工作曲線的繪制準(zhǔn)確稱取0.500 g (準(zhǔn)確至 0.001g) Vantocil IB溶液于100 mL 容量瓶中, 定容, 混勻。再從上述溶液中分別吸取0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL和2.5 mL于100 mL容量瓶中, 定容, 混勻。在 236 nm 處用 1 cm 石英比色池, 以蒸餾水為參比, 分別測量各稀釋液的吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度( 單位 g/L) 為縱坐標(biāo), 以相應(yīng)的吸光度為橫坐標(biāo), 繪制工作曲線。計算工作曲線方程 ( C= KA +B) 。要求相關(guān)系數(shù) r0.999。2 檢測吸取消毒液 V 為 0.250 mL 于 100 mL 容量瓶中,定容混勻。測量其吸光度, 要求消毒液測定濃度應(yīng)在工作曲線范圍內(nèi), 并按下式進行計算。式中:C1聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù) /%;K曲線方程斜率;B曲線方程截距;V消毒液稀釋前的體積 /mL消毒液的密度 /g/mL;A1樣品的吸光度值用紫外分光光度法測定聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽含量的線性范圍為330mg/L ，線性相關(guān)系數(shù)為 0.9999，加標(biāo)回收率范圍為 99.85%102.0% ，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.49% 。方案2：精確稱取 0.20g鹽酸聚六亞甲基雙胍純品到100ml 容量瓶，用蒸餾水定容配置成濃度 2g/l 的母液，再分別精確吸取3、4、5、6、7、8ml母液至 100ml 容量瓶，使鹽酸聚六亞甲基胍的最終含量分別為 60、80、100、120、140、160mg/l分別取25ml 稀釋液置 250ml碘量瓶中，加甲苯胺藍指示液 2 滴，用0.0025mol/ml , 聚乙烯基硫酸鉀滴定液滴定至溶液由藍色顯紫色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正以鹽酸聚六亞甲基胍含量為橫坐標(biāo)，消耗聚乙烯基硫酸鉀滴定液的體積為縱坐標(biāo)作圖，得標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,按照相關(guān)回歸法計算出標(biāo)準(zhǔn)回歸方程. 樣品含量測定 精確吸取適量消毒劑樣品于 100ml容量瓶中用蒸餾水稀釋在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，取稀釋液 25ml，按上述步驟進行滴定,把消耗聚乙烯基硫酸鉀滴定液的體積代入標(biāo)準(zhǔn)回歸方程，計算出相應(yīng)的聚六亞甲基單胍鹽酸鹽含量精密度試驗 取配置好的120mg/ml 溶液重復(fù)測定 6 次，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差.回收率試驗 取 2 份含量為 60ml的平行已測樣品，分別添加 0與 50mg 的聚六亞甲基單胍標(biāo)準(zhǔn)品，測定含量，計算平均回收率重復(fù)測定 3次. 最低檢出濃度 將 0.0025mg/l的聚乙烯基硫酸鉀滴定液稀釋 50倍，配置 10/1/0.1mg/l 的聚六亞甲基單胍，各取25ml，加兩滴甲苯胺藍，用稀釋后的聚乙烯基硫酸鉀進行滴定，終點顯藍紫色明顯的為其最低檢出濃度.方案3： 聚六亞甲基雙胍含量的測定方法(比色法 )1 原理 檢測原理是聚六亞甲基雙胍(PHMB)和 曙紅(Eosin染料)之 間顯色反應(yīng),顏 色改變可以通過在波 長545nm處 測量吸光度值。 2 儀器2.1 可見光分光光度計。2.2 2cm 1cm玻 璃ce11s。 2.3 容量瓶:25mL、100mL、250mL、500mL。 2.4 移液管:1.0 mL、2.0mL、2.5mL、4.0mL、6.0mL、8.0 mL 和 10.0mL。3 需要的反應(yīng)物3.1 曙紅Y水溶液(Eosh Y)。 3.2 PHMB標(biāo)準(zhǔn)品。3.3 三水合醋酸鈉。 4 程序步驟4.1 指示溶液的制備 稱0.6g水 溶性 曙紅Y,放入250mL的 燒杯,以 大約50mL的 溫蒸餾水溶解并冷卻。轉(zhuǎn)移至 100mL的標(biāo)準(zhǔn)容量瓶中 ,用 蒸餾水定容到100mL。 充分混勻,得 到溶液A。 用移液管吸取10mL A液 ,以 蒸餾水定容至250mL,得 到指示液。4.2 醋酸鹽溶液的制備 將10g醋酸鈉溶解于100mL蒸餾水中。 4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 用標(biāo)準(zhǔn)品分別配制濃度為0.8mg/L,1.6mg/L,3.2mg/L,4.8mg/L,6.4mg/L的 PHMB標(biāo)準(zhǔn)液。 將波長調(diào)至545nm,測 定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光值,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 4.4 測定 用移液管吸取10mL濃度未知的PHMB溶液至25mL容量瓶，加1mL醋酸溶液和2.5mL指示液，以蒸餾水定容至25mL，用力振搖，充分混勻。用分光光度計測未知濃度的PHMB溶液的吸光度值。 5 結(jié)果計箅 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算未知溶液的PHMB含量,計算公式:式中 : c樣品溶液中PHMB的 含量 ,單位為克每升(g/L);m以標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出樣品溶液的PHMB的質(zhì)量,單位為微克(ug); V樣品溶液的體積單位為毫升(mL)。 6 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。消毒滅菌，菌落檢測：方案1：各實驗組試驗以白色念珠菌和金黃色葡萄球菌為試驗菌，試驗在 20水浴條件下進行，設(shè)若干組試驗大致分為如下情況： 分別將等量菌片與相應(yīng)量的消毒凝膠原藥作用取出，放入緩沖液中振蕩打混勻，取一定量傾注法培養(yǎng)；白色念珠菌用消毒凝膠原藥、金黃色葡萄球菌用對倍稀釋液，每片菌片與相應(yīng)的消毒凝膠作用取出，放入緩沖液中振蕩打混勻，取一定量傾注法培養(yǎng)；定量菌片與對照凝膠作用取出，放入緩沖液中振蕩打混勻，取一定量傾注法培養(yǎng)。 判定:各組的菌落生長情況長借此來判定凝膠的消毒作用。方案2：試驗菌為白色念珠菌(ATCCl0231)、銅綠假單胞菌(ATcC 15442)、大腸桿菌(8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC 6538)。取其510代24 h新鮮培養(yǎng)物，用加有30 gL牛血清白蛋白的稀釋液配制成試驗菌懸液備用。試驗菌為白色念珠菌和大腸桿菌，試驗設(shè)平行6組，按中和劑選擇試驗程序進行。試驗結(jié)果，以第1組不長菌或菌數(shù)遠少于第2組，第2組菌數(shù)100 cfuml，第3、4、5組組問菌數(shù)相差15，第6組不長菌時，為所選中和劑及其濃度適宜。 用無菌硬水將消毒劑配制成待測濃度的1.25倍；在無菌試管內(nèi)加入05 ml菌懸液