cd44基因表達(dá)與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)性.doc

淺談乳腺癌是女性中最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，雖然50的乳腺癌經(jīng)手術(shù)治療后可治愈，但仍有50的病人在治療后5年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移而導(dǎo)致治療失敗。在淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移的病人中復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率高達(dá)7080，即使淋巴結(jié)無(wú)轉(zhuǎn)移的病人中亦有2030的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率，而乳腺癌轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞粘附分子 cd44的表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)。本文就近年來(lái)對(duì) cd44基因的研究現(xiàn)狀及其與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系作一簡(jiǎn)要綜述。 cd44基因的結(jié)構(gòu)、功能及其表達(dá) 1989年 stamenkovic等（1）使用不同的單抗分離和克隆到了編碼為 cd44cdna基因片段。人類的 cd44基因位于11號(hào)染色體短臂上，由20個(gè)高度保守的外顯子組成，完整基因組在染色體 dna上大約跨越50kb，每個(gè)外顯子長(zhǎng)度從70bp到210bp不等（2）。 cd44基因的外顯子按表達(dá)方式分為兩種類型：一種是組成型外顯子，其轉(zhuǎn)錄片段存在于所有 cd44轉(zhuǎn)錄子中，主要在間質(zhì)和造血源性（ haemo poietic）細(xì)胞中表達(dá)。僅含組成型外顯子的 cd44轉(zhuǎn)錄子，稱為標(biāo)準(zhǔn)型 cd44（ standardformcd44， cd44s）轉(zhuǎn)錄子；另一種是主要在上皮源性（ epithelial）細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中表達(dá)的 v區(qū)變異性拼接外顯子，在基因組上位于第5和第6個(gè)組成型外顯子之間，其表達(dá)片段位于 cd44肽鏈的細(xì)胞外區(qū)域靠近跨膜區(qū)部位， v區(qū)外顯子在轉(zhuǎn)錄時(shí)可隨機(jī)拼接，含有變異型拼接外顯子的 cd44轉(zhuǎn)錄子稱為變異型 cd44（ variantformcd44， cd44v）轉(zhuǎn)錄子。 cd44是分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，在淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞表面均能檢測(cè)到它的表達(dá)（3）。研究表明 cd44蛋白屬表面粘附分子，主要參與細(xì)胞細(xì)胞、細(xì)胞基質(zhì)間的特異性粘連過(guò)程。 cd44具有以下幾種功能：介導(dǎo)淋巴細(xì)胞與后毛細(xì)血管或小靜脈中的高內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合，使淋巴細(xì)胞穿過(guò)血管壁回到淋巴組織；參與淋巴細(xì)胞的激活過(guò)程；與細(xì)胞外基質(zhì)中的透明質(zhì)酸、膠原蛋白、纖維蛋白、層粘蛋白等基質(zhì)結(jié)合；與細(xì)胞骨架蛋白結(jié)合，參與細(xì)胞的偽足形成，并與細(xì)胞的遷移運(yùn)動(dòng)有關(guān)（3，4，5，6）。正常 cd44分子在淋巴細(xì)胞歸巢（ homing）、移行及與高血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合過(guò)程中起重要作用；而轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞表達(dá) cd44v，從而出現(xiàn)遷移和增殖，有研究表明，在大鼠胰腺癌細(xì)胞中非轉(zhuǎn)移性細(xì)胞株只表達(dá) cd44s，而轉(zhuǎn)移性細(xì)胞株表達(dá) cd44v，而且將變異型 cd44cdna轉(zhuǎn)染到非轉(zhuǎn)移性的細(xì)胞株亦引起轉(zhuǎn)移，因而認(rèn)為 cd44v與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（7）。但變異型 cd44在腫瘤的轉(zhuǎn)移和進(jìn)展中的作用也有相反的報(bào)道（8，9）。 2 cd44基因表達(dá)與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系 cd44基因在許多腫瘤中均有異常表達(dá)，而 cd44基因的異常表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性研究也是近年來(lái)的一個(gè)研究熱點(diǎn)。 fichtner等（10）對(duì)荷人乳腺癌的裸鼠是否表達(dá) cd44v及某種表達(dá)形式是否與某些生物學(xué)指標(biāo)如腫瘤大小、激素受體、組織類型、腫瘤增殖率、腫瘤耐藥性以及微環(huán)境等進(jìn)行了研究。他們將人乳腺癌細(xì)胞株 mcf7、 mcf7 adr、4296、 mda mb435、4143以及4151移植至裸鼠的皮下及乳腺脂肪墊，應(yīng)用免疫組化及 rt pcr技術(shù)對(duì)血循環(huán)中可溶性 cd44（ scd44）及不同時(shí)間的組織標(biāo)本的 cd44s（ cd44v6和 cd44v9）表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)所有的腫瘤均表達(dá) cd44s，以 mcf7瘤株表達(dá)水平最低； cd44v6及 cd44v9的順序和抗原決定簇明顯表達(dá)在 mcf1adm、 mda mb435、4134、4151及4296，而 mcf7則缺乏這些變異型 cd44；荷瘤4269的裸鼠血清 cd44v6水平最高，并具有高度的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移趨勢(shì)；56的荷瘤鼠其血清 scd44水平與腫瘤大小相關(guān)。 mcf7與 mcf7 adm的組織、血清 cd44v，多藥耐藥性及轉(zhuǎn)移性均有顯著性差異。組織 cd44的表達(dá)與腫瘤移植的部位及激素受體狀態(tài)無(wú)關(guān)。表達(dá) cd44v水平最高的瘤株4296與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)，而不表達(dá)的 mcf7株則與轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。 iida和 bourguignon（11）將 cd44vcdna轉(zhuǎn)染入含內(nèi)源性 cd44s的非致瘤性人乳腺上皮細(xì)胞（ hbl100），發(fā)現(xiàn)聯(lián)合表達(dá) cd44v和 cd44s的這些細(xì)胞改變了以下重要的生物學(xué)特性：透明質(zhì)酸（ ha）介導(dǎo)的細(xì)胞粘附明顯減少；膠原基質(zhì)凝膠（ collagen matrixgel）遷移能力增加；這些細(xì)胞可產(chǎn)生某些血管生長(zhǎng)因子并在無(wú)胸腺的裸鼠身上能有效地促進(jìn)腫瘤發(fā)生。認(rèn)為 cd44v和 cd44s的聯(lián)合表達(dá)可觸發(fā)乳腺癌發(fā)生的細(xì)胞轉(zhuǎn)化。 kaufmann等（12）應(yīng)用抗 cd44多抗血清及單克隆抗體對(duì)100例侵襲性乳腺癌，其中12例局部復(fù)發(fā)、18例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，以及8例正常對(duì)照組進(jìn)行了檢則，結(jié)果顯示，正常乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞和增生性病變組織不表達(dá) cd44v，而大多數(shù)腫瘤組織均表達(dá) cd44v3、 v5及 v6； cd44v6存在于84的原發(fā)腫瘤、100的腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及局部復(fù)發(fā)病灶； cd44v6表達(dá)陽(yáng)性者的總生存率明顯差于 cd44v6表達(dá)陰性者；多變量分析表明， cd44v6是一獨(dú)立于孕激素受體、淋巴結(jié)狀態(tài)、腫瘤大小及分級(jí)的較好的預(yù)后指標(biāo)。 guriec等（13）應(yīng)用 rt pcr技術(shù)對(duì)25例正常乳腺標(biāo)本、10例乳腺纖維瘤、8例囊性病變及52例乳腺癌的 cd4v6表達(dá)進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn) cd44v6的表達(dá)陽(yáng)性與否與無(wú)轉(zhuǎn)移患者的總生存率顯著相關(guān)（ p0.0032）， cd44v6表達(dá)陰性者，其生存期顯著高于 cd44v6表達(dá)陽(yáng)性者。但也有研究發(fā)現(xiàn)，在 t1期乳腺侵潤(rùn)性導(dǎo)管癌（ idc）中， cd44v6表達(dá)與淋巴結(jié)是否有轉(zhuǎn)移均無(wú)顯著性差異，因而認(rèn)為 cd44v6的表達(dá)與 t1期 idc的淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性（14）。 tokue等（15）應(yīng)用免疫組化和 rt pcr兩種方法檢測(cè)了95例乳腺癌標(biāo)本中 cd44的表達(dá)。 rt pcr檢測(cè)發(fā)現(xiàn)， cd44v2mrna高表達(dá)者總生存率明顯高于 cd44v2低表達(dá)者（ p0.05），但 cd44vmrna表達(dá)與總生存率無(wú)顯著相關(guān)性（ p0.06）；應(yīng)用免疫組化法結(jié)果也證實(shí)， cd44v2表達(dá)與總生存率顯著相關(guān)（ p0.02），而 cd44v6表達(dá)與生存率無(wú)顯著相關(guān)（ p0.67），因而他們認(rèn)為檢測(cè) cd44v2的表達(dá)可能比 cd44v6更具有臨床價(jià)值。 然而，也有一些研究不支持上述的觀點(diǎn)， friedrichs等（16）利用免疫組化技術(shù)檢測(cè)了119例淋巴結(jié)陽(yáng)性和108例淋巴結(jié)陰性的乳腺癌 cd44表達(dá)情況，并對(duì)其中43例高危病人應(yīng)用 rt pcr進(jìn)行了檢測(cè)。經(jīng)對(duì) cd44的表達(dá)與患者生存期及臨床危險(xiǎn)因素的相關(guān)性進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，認(rèn)為乳腺癌 cd44s、 cd44v6及 cd44v9與腫瘤細(xì)胞分化程度相關(guān)，與患者的預(yù)后無(wú)關(guān)。 delatorre等（17）應(yīng)用單克隆抗體 a3d8對(duì)52例未經(jīng)治療的乳腺癌及10例正常乳腺組織 cd44的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果亦不支持 cd44的表達(dá)與預(yù)后或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性。 regidor等（18）對(duì)81例侵襲性乳腺癌是否表達(dá)粘附分子 cd44v6及 cd44v45，應(yīng)用免疫組化方法進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示68例乳腺癌的 cd44v6及 cd44v45陽(yáng)性； t3及 t4癌的&nbs p;cd44陽(yáng)性率顯著高于 t1和 t2癌（ p0.05；同時(shí)發(fā)現(xiàn) cd44的表達(dá)與雌激素受體及組織蛋白酶 d（ cathepsin d）明顯相關(guān)，但與淋巴結(jié)狀態(tài)、有否遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤分級(jí)、孕激素受體及月經(jīng)情況無(wú)關(guān)。 heffer等（19）利用 elisa方法檢測(cè)了90例乳腺癌，9例纖維腺瘤以及22例正常對(duì)照組，發(fā)現(xiàn) cd44含量與臨床危險(xiǎn)因素?zé)o明顯相關(guān)，單因素和多因素分析結(jié)果表明， cd44v5和 cd44v6含量與預(yù)后生存不相關(guān)（ p0.16和 p0.08）。 jansen等（20）應(yīng)用免疫組化方法對(duì)338例乳腺癌 cd44v6的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，219例乳癌（64.8） cd44v6陽(yáng)性。但 cd44v6表達(dá)與臨床危險(xiǎn)因素，總生存率無(wú)關(guān)。因此認(rèn)為 cd44v6不是乳腺癌預(yù)后的指標(biāo)。 3結(jié)語(yǔ) 雖然目前對(duì) cd44基因的研究仍很粗淺，確切的功能及影響轉(zhuǎn)移的機(jī)理尚未被認(rèn)識(shí)，對(duì)其進(jìn)一步研究無(wú)疑將有助于闡明惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和侵襲的機(jī)制，從而為臨床對(duì)惡性腫瘤的診斷和鑒別診斷、治療選擇以及預(yù)后預(yù)測(cè)提供更充分的理論依據(jù)。 參考文獻(xiàn) 1 stamenkovici， amiotm， ppesandojm etal.aiymphocytemoleculeimplicatedinlymphnodehomingisamemberofthecartilagelinkproteinfamily.cell 1989；56：1057 2 screatongr， bellmv， jacksondg， c natl acad sci usa 1992；89：12160 3 haynesbf， liaohx， pattonkl.thetrans-memberanehyaluronatereceptor（ cd44）： mul-tiplefunctionsmultipleforms.cancercells1991；3：347 4 arch r， wirthk， hofmannm， 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