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文檔簡介
1、實驗二 戊巴比妥鈉半數(shù)有效量測定Experiment 2 Determination of Median Effective Dose (ED50) of Sodium Pentobarbital in Mice 實驗操作過程1你所在實驗室,本次實驗的分組數(shù)為 5 ,r值為 1.316 。2預(yù)實驗中,Dm 代表 確定引起100%陽性反應(yīng)的劑量 ,Dn 代表 0%陽性反應(yīng)的劑量 ,3實驗中,各劑量組的劑量值要成 比例 ,且公比值要求在 1.2-1.5 之間,以確保其線性相關(guān)性,一般分成 4-8 個劑量組較為合適。4. 本次實驗所采用的計算方法是 改良寇氏法 。5較理想的實驗結(jié)果最小劑量組產(chǎn)生陽性
2、反應(yīng)率小于 30% ,最大劑量組產(chǎn)生陽性反應(yīng)率大于 70% 。6. 戊巴比妥鈉溶液的濃度為 1% ,你所在小組所用的稀釋濃度為 2.6mg/ml ,劑量為 26mg/kg 。7. 觀察指標(biāo)為 給藥15min內(nèi)翻正反射消失的動物數(shù) ,應(yīng)持續(xù) 1 分鐘以上。8. 小白鼠注射的容量為 0.1 ml/10g。你所在組的動物數(shù)為 10 只。9. 戊巴比妥鈉的藥理作用包括 鎮(zhèn)靜 、 催眠 、 抗驚厥 、 麻醉 (請寫出四種以上作用)。實驗操作過程 1.請描述你們小組探索劑量范圍的過程:(1)參考劑量(Dm:60mg/kg; Dn:20mg/kg ) (2)取小鼠12只,平均分成3組,腹腔注射不同劑量戊巴比
3、妥鈉(0.1ml/10g)(3)觀察給藥15min內(nèi)各組翻正反射消失的動物數(shù)(4)確定引起100% (Dm) 、0% (Dn)陽性反應(yīng)的劑量2.藥物稀釋過程Tab .1 Data Sheet for Drug DilutionGroup n Dose(mg/kg) Concentration(%) Volume (ml)1 10 20 0.20 52 10 26 0.26 53 10 35 0.35 54 10 46 0.46 55 10 60 0.60 53.請描述所在小組的實驗操作過程(1)每只小鼠稱重、標(biāo)號(2)按0.1ml/10g給每只小鼠腹腔注射戊巴比妥稀釋液。(3)將小鼠放回鼠籠,
4、 15min后觀察陽性反應(yīng)的小鼠只數(shù)。(4)記錄數(shù)據(jù)并計算陽性率。實驗結(jié)果Tab.2 Data Sheet for the ExperimentGroup Dosage n Positive response number(n) Percentage (P) P2 1 20.0mg/kg 10 0 0% 0%2 26.3mg/kg 10 1 10% 1% 3 34.6mg/kg 10 4 40% 16% 4 45.6mg/kg 10 7 70% 49% 5 60.0mg/kg 10 10 100% 100% p=220% p2=166%計算公式(以ED50為例):ED50 = lg-1Xm-i
5、(p-0.5) =37.62mg/kgSx50=i(p-p2)/(n-1)1/2 =0.029mg/kgED50的95%可信限 = lg-1(X501.96Sx50) =(32.97mg/kg,42.84mg/kg)ED50的95%可信限 = ED50(ED50高限-ED50 低限)/2 =(32.67mg/kg,42.56mg/kg)回答下列問題1為什么用ED50和LD50來衡量藥物療效和毒性(從質(zhì)反應(yīng)量效曲線角度分析)?因為質(zhì)反應(yīng)量效曲線中段近似呈直線,在此范圍內(nèi)藥物反應(yīng)陽性率與對數(shù)劑量成正比,且反應(yīng)敏感。因此以能引起50個體產(chǎn)生陽性反應(yīng)的劑量反映藥物的作用強弱最為合理。若反應(yīng)指標(biāo)為藥效,
6、稱半數(shù)有效量(ED50);若反應(yīng)指標(biāo)為毒性,則稱半數(shù)中毒量(TD50);反應(yīng)指標(biāo)為死亡率,則稱半數(shù)致死量(LD50)。曲線中段斜率不僅反映藥效強度,也反映受試對象個體差異的離散度,斜率陡峻提示標(biāo)準(zhǔn)差較小,個體差異也較小。2分析測定ED50(或LD50)的原理和意義原理:實驗動物對藥物的敏感性存在個體差異。以不同劑量對動物的死亡率繪制成曲線圖可發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)50%死亡率的變動比較驟急,說明50%死亡率是比較靈敏的指標(biāo)。為使圖像成為對稱的S形,數(shù)據(jù)改為劑量對數(shù)與死亡數(shù)分布的曲線。曲線上死亡率為50%點的劑量對數(shù),再從反對數(shù)求得劑量。意義:半數(shù)致死量(LD50)是評價化學(xué)物質(zhì)急性毒性大小最重要的參數(shù),也是對不同化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行急性毒性分級的基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)?;瘜W(xué)物質(zhì)的急性毒性越大,其LD50的數(shù)值越小。常與半數(shù)有效量(ED50)配合計算治療指數(shù)LD50/ED50,用以評價藥物的安全性,治療指數(shù)大的藥物相對安全。LD50越大越好,就是說濃度要很高很高才會導(dǎo)致半數(shù)死亡;ED50就越小越好,意思是很少的劑量就能發(fā)揮作用。單就以上某一項來說是沒有意義的,LD50大ED50也大,同樣是危險
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