LB培養(yǎng)基怎樣配制

1、lb培養(yǎng)基怎樣配制b培養(yǎng)基怎樣配制 lb一般被解釋為liabeta，然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼（giseppe bertai）的說法,這個名字來源于英語lysgeny bt,即溶菌肉湯。l培養(yǎng)基是近年來用于培養(yǎng)基因工程受體菌(大腸桿菌)的常用培養(yǎng)基之一。 lb培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時又稱普通培養(yǎng)基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和nacl。酵母提取物:酵母經(jīng)破壁后將其中蛋白質(zhì)、核酸、維生素等抽提，再經(jīng)生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、維生素等天然活性成分的淡黃色粉末，其中氨基酸含量30以上,總蛋白50%以上，核苷酸10%以上,廣泛用作生物培養(yǎng)基和食品調(diào)味品制造原料

2、。 胰化蛋白胨：一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化,濃縮干燥而成的白色粉末,含有豐富的氮源、氨基酸等。酵母提取物為微生物提供碳源、能源、磷酸鹽、生長因子、維生素等;蛋白胨主要提供氮源;acl主要提供微生物生長環(huán)境(如滲透壓），其次是提供無機(jī)鹽。 在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96時溶化,一般實(shí)際應(yīng)用時在沸水浴中或墊以石棉網(wǎng)直接煮沸溶化。瓊脂在40時凝固,通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌，因此,要用稀酸或稀堿將其h調(diào)至中性或微堿性,以利于細(xì)菌的生長繁殖。 lb培養(yǎng)基配方(每升

3、) 酵母提取物5g 胰化蛋白胨 10g氯化鈉0g nao調(diào)h至0,121、20min高壓滅菌。l固體培養(yǎng)基 lb培養(yǎng)基 1l瓊脂粉 5g naoh調(diào)ph至70,2、20i高壓滅菌。有時需在培養(yǎng)基中添加抗生素,瓊脂凝固點(diǎn)為0,所以添加抗生素最好在55。 l培養(yǎng)基用途: 用于一般細(xì)菌培養(yǎng),特別用于分子生物學(xué)試驗(yàn)中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)。 培養(yǎng)基使用原理: 蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;葡萄糖提供碳源;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。 lb培養(yǎng)基配制方法配制每升培養(yǎng)基，應(yīng)該在9 ml去液態(tài)lb培養(yǎng)基離子水中加入:胰化蛋白胨1酵母提取物5g acl 0g 搖動容器直至溶質(zhì)溶解。用ollnao調(diào)h至7.0。用去離子水定容至1l。在15pi高壓下蒸汽滅菌20min。 .l固體培養(yǎng)基1和液體一樣,加15g瓊脂粉，一定要在溫度降下之前加好抗固態(tài)lb培養(yǎng)基生素,并且倒好板。b固體培養(yǎng)基倒板1。配制：100ml培養(yǎng)基加入1g瓊脂粉 2.抗生素的加入:高壓滅菌后，將融化的b固體培養(yǎng)基置與5的水浴中，待培養(yǎng)基溫度降到5時(手可觸摸）加入抗生素,以免溫度過高導(dǎo)致抗生素失效,并充分搖勻。3倒板：一般10ml倒個板子。培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后,打開蓋子，在紫外下照0-15分