免疫SOP：乙肝表面抗原抗體作業(yè)指導(dǎo)書(shū)

1、33文件編號(hào)：LABOPMY020第 頁(yè)，共 頁(yè) 版本：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX 醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室分析項(xiàng)目作業(yè)指導(dǎo)書(shū) Elecsys E 170/E 411乙乙肝表面抗原抗體1. 分析原理采用雙抗原夾心法原理，整個(gè)過(guò)程18分鐘完成。 第1步：40l標(biāo)本中的抗-HBs、生物素化的HBsAg（ad/ay）和釕（Ru）標(biāo)記的HBsAg（ad/ay）混勻，形成夾心復(fù)合物。 第2步：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過(guò)生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 第3步：反應(yīng)混和液吸到測(cè)量池中，微粒通過(guò)磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，

2、通過(guò)光電倍增管進(jìn)行測(cè)定。檢測(cè)結(jié)果由機(jī)器自動(dòng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過(guò)2點(diǎn)定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得。2. 標(biāo)本要求血清：按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)方法采集。血漿：EDTA-K3抗凝。如用肝素鋰、枸櫞酸鈉或氟化鈉/草酸鉀抗凝，測(cè)定值會(huì)降低約25%。標(biāo)本在28度可穩(wěn)定6天，-20度可穩(wěn)定3個(gè)月。標(biāo)本可凍融6次。有沉淀的標(biāo)本使用前需離心。不可使用加熱滅活的標(biāo)本。標(biāo)本和質(zhì)控品禁用疊氮鈉防腐。標(biāo)本、定標(biāo)液和質(zhì)控品在測(cè)定前的溫度應(yīng)與室溫平衡。3. 試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和其他所需材料采用羅氏原裝配套試劑。試劑：M：鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/m

3、l，生物素結(jié)合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。R1：生物素化的HBsAg（灰蓋），1瓶，10ml，濃度高于0.5mg/l，MES緩沖液0.085mol/l，pH6.5，含防腐劑。R2：Ru(bpy)32+標(biāo)記的HBsAg（黑蓋），1瓶，8ml。濃度高于0.3mg/l，MES緩沖液0.085mol/l，pH 6.5含防腐劑。校準(zhǔn)品：Cal 1 定標(biāo)液（白蓋）1，2瓶，1.3ml/瓶 ，含抗-HBs，人血清, 含防腐Cal 2 定標(biāo)液（黑蓋）2，2瓶，1.3ml/瓶, 含抗-HBs,人血清, 含防腐劑質(zhì)控品：Elecsys 抗- HBs 質(zhì)控品1和2 （PreciControl 抗-

4、 HBs）貨號(hào)其他所需材料： Elecsys通用稀釋液 貨號(hào)11732277 Elecsys1010或2010分析儀 Elecsys 系統(tǒng)緩沖液（ProCell）貨號(hào)11662988 Elecsys測(cè)量池清洗液（CleanCell）貨號(hào)11662970 Elecsys 添加劑液（SysWash）貨號(hào)11930346 Elecsys 系統(tǒng)清洗液（SysClean）貨號(hào)112985004. 儀器和校準(zhǔn)使用儀器：瑞士羅氏診斷公司生產(chǎn)Elecsys 2010/E 170/E 411全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫自動(dòng)分析儀儀器校準(zhǔn)：每批抗-HBs試劑盒必須用新鮮試劑和抗-HBs Cal 1,Cal 2定標(biāo)一次。另

5、外，以下情況需要再次定標(biāo)：Elecsys2010： 一個(gè)月（同一批號(hào)試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒）各種分析儀均適用的情況： 根據(jù)要求進(jìn)行標(biāo)定：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)。 根據(jù)規(guī)定進(jìn)行多次標(biāo)定。定標(biāo)液范圍（IU/l）： Cal 1： 4-15；Cal 2： 350-6005. 操作方法按儀器操作說(shuō)明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過(guò)掃描試劑盒條形碼自動(dòng)輸入測(cè)試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無(wú)法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。Elecsys2010：將冷藏試劑預(yù)溫到20 度后放置于儀器的試劑盤(pán)上，避免產(chǎn)生泡沫。系統(tǒng)自動(dòng)控制試劑溫度和開(kāi)/關(guān)試劑

6、瓶蓋。Elecsys1010：將冷藏試劑預(yù)溫到2025度后放置于儀器的樣品/試劑盤(pán)上（室溫2025度），避免產(chǎn)生泡沫。使用前手工打開(kāi)試劑瓶蓋，使用后手工關(guān)閉試劑瓶蓋并放回28 度。將抗-HBs Cal 1和Cal 2放在分析儀的標(biāo)本測(cè)試區(qū)。只在標(biāo)定時(shí)打開(kāi)瓶蓋。條形碼自動(dòng)提供定標(biāo)所需的數(shù)據(jù)資料。定標(biāo)完成后，將Cal 1和Cal 2放回28 度保存。6. 質(zhì)量控制用 Elecsys 抗- HBs質(zhì)控品1和2 （PreciControl）。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時(shí)或每一次定標(biāo)后測(cè)定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實(shí)驗(yàn)室的具體要求。檢測(cè)值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取校正措施。

7、7. 計(jì)算方法對(duì)每一個(gè)標(biāo)本，儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算抗- HBs含量，單位是IU/l。8. 參考范圍標(biāo)本的抗-HBs含量=10IU/l判斷為抗- HBs有反應(yīng)性。9. 分析性能檢測(cè)范圍：2.001000IU/ml10. 干擾因素該方法不受黃疸（膽紅素30mg/dl）、溶血（血紅蛋白1.5g/dl）、脂血（脂質(zhì)1500mg/dl）和生物素5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時(shí)后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（2100U/ml）。抗-HBs濃度高達(dá)150，000IU/ml也不出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。17種常用藥物經(jīng)試驗(yàn)對(duì)本測(cè)定無(wú)干擾。偶爾會(huì)遇到抗鏈酶親和素抗體和抗釕抗體的干擾。Elecsys 抗- HBs 測(cè)定結(jié)果應(yīng)結(jié)合病人病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合起來(lái)進(jìn)行診斷。11. 結(jié)果解釋標(biāo)本的抗-HBs含量=10IU/l判斷為抗- HBs有反應(yīng)性。12. 臨床意義抗-HBs (一般是IgG)出現(xiàn)在感染乙肝病毒或接種乙肝疫苗以后?？贵w針對(duì)HBsAg 的a決定簇及各亞類的決定簇。對(duì)于乙肝疫