白細(xì)胞分類計數(shù)

1、白細(xì)胞分類計數(shù)定義 白細(xì)胞分類計數(shù)是將血液制成分布均勻的薄膜涂片，用染料染色，根據(jù)各類白細(xì)胞著色特征，在顯微鏡下觀察其數(shù)量、形態(tài)和質(zhì)量的變化、予以分類計數(shù)并求出各種白細(xì)胞所占的百分率。意義血液中的白細(xì)胞一般包括：顆粒細(xì)胞（嗜中性、嗜酸性和堿性細(xì)胞）、淋巴細(xì)胞（大、中、小淋巴細(xì)胞）和單核細(xì)胞，它們分工不同，在體內(nèi)發(fā)揮各自的作用。嗜中性白細(xì)胞，成熟的嗜中性白細(xì)胞通過吞噬作用而消滅入侵的細(xì)菌，特別是球菌。在嚴(yán)重感染和炎癥初期時最活躍；嗜酸性白細(xì)胞，常積聚在抗原-抗體反應(yīng)的部位，因此，認(rèn)為它抑制組胺等物質(zhì)的活動；嗜堿性白細(xì)胞，堿性顆粒中有肝素，表明它有抗凝作用；淋巴細(xì)胞；參與機體免疫反應(yīng)；單核細(xì)胞；它

2、有特殊的酶系統(tǒng)，能對付頑強的病原體，如真菌、原生動物、結(jié)核桿菌及布病等。在慢性感染時或體內(nèi)有較多組織碎片需要清除時，它會大量出現(xiàn)。在正常情況下，白細(xì)胞構(gòu)成的比例、形態(tài)和質(zhì)量基本是不變的，但在病理情況下，這種比例、形態(tài)、質(zhì)量將會發(fā)生變化，故臨床上常把計數(shù)白細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù)結(jié)合起來，進行分析和診斷某些感染性疾病的種類。目的與要求掌握計數(shù)的原理、方法和臨床意義原理由于白細(xì)胞內(nèi)含有帶不同電荷的物質(zhì)，其中帶正電荷的物質(zhì)易與酸性染料結(jié)合呈現(xiàn)紅色（這種物質(zhì)叫嗜酸性物質(zhì)或顆粒，而其本身呈堿性）；而帶負(fù)電荷的物質(zhì)易與堿性染料結(jié)合呈現(xiàn)藍色（這種物質(zhì)叫嗜堿性物質(zhì)或顆粒，而其本身呈酸性）；當(dāng)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)帶的正負(fù)電荷相

3、等時，那么結(jié)合的酸性染料和堿性染料幾乎相等，這些物質(zhì)就呈現(xiàn)紅、藍相混的紫紅色（這種物質(zhì)叫嗜中性物質(zhì)或顆粒）。這樣血片中的白細(xì)胞經(jīng)過染色后就被染成紅、藍及紫紅色，從而可以識別分類?！酒鞑呐c試劑】器材：載玻片、染色缸及支架、洗瓶、顯微鏡及鏡油、白細(xì)胞分類計數(shù)器、吸水紙等。試劑：染液、緩沖液步驟1采血2制作血涂片：取潔凈載玻片數(shù)張，選擇邊緣光滑的載片作為推片（也可用血細(xì)胞計數(shù)板的蓋玻片做為推片），用左手的拇指及中指夾持載片并置于平穩(wěn)的臺面上，右手持推片。取被檢血（經(jīng)EDTA抗凝）1小滴，放于載玻片的右端，手持推片放于血滴之前并與載片接觸，以3040角向后拉動推片，使之與血滴接觸，待血液擴散形成一條線

4、狀之后，以均等的速度輕輕向前推動推片，則血液就被均勻地涂于載片上而形成一薄血膜。良好的血片，血液應(yīng)分布均勻，厚度要適當(dāng)，對光觀察時呈霓紅色，血膜應(yīng)位于玻片中央，兩端留有空隙，以便標(biāo)上患畜名稱、畜別、編號、日期。常溫下自然風(fēng)干（冬天可適當(dāng)加溫）。3染色31單染色瑞氏染色：滴加染液（約20滴）蓋滿血膜，染1分鐘后，再加等量的緩沖液，繼續(xù)染色310分鐘（外界溫度低染色時間長，反之亦然），用水沖去染液，吸干染片，干燥后，油鏡觀察。對胞漿及顆粒染色效果好。姬姆薩氏染色：在血膜上先加2-3滴甲醇使血膜固定，3-5分鐘后待甲醇揮發(fā)后再加染液；染色20-60分鐘（依外界溫度高低而定染色時間長短）；水洗，干后油

5、鏡觀察。對胞核及血液原蟲染色效果好。32復(fù)染色（混合染色）瑞氏-姬姆薩氏復(fù)合染色：先加瑞氏染液，半分鐘后用水洗去染液；再加姬姆薩氏染液染約10分鐘，水洗、干燥鏡檢?；蛟谂R染色時向瑞氏染液中加入適量的姬姆薩氏原液，即每10毫升瑞氏染液中，加入0.5-1.0毫升姬姆薩氏原液，混勻后，按瑞氏染色的步驟進行染色。4鏡檢分類計數(shù)方法: 四角曲則計數(shù)法或三段曲則計數(shù)法.步驟: (1)先用低倍鏡觀察血片上白細(xì)胞的分布情況. 一般嗜中性白細(xì)胞, 單核細(xì)胞及體積較大的細(xì)胞分布在血片的上, 下邊及尾端, 中小淋巴細(xì)胞則多在涂片的起始端. (2)滴加鏡油, 轉(zhuǎn)用油鏡頭進行計數(shù). 至少數(shù)100個白細(xì)胞，根據(jù)染色特點，

6、分別計數(shù)各類白細(xì)胞的數(shù)量，最后求出各類白細(xì)胞占總數(shù)的百分比。白細(xì)胞分類計數(shù)的臨床意義1判斷可能的感染或疾病的狀況1）嗜中性白細(xì)胞：（1）增多：見于某些急性傳染?。ㄘi丹毒、炭疽、出敗等）和慢性傳染?。ū蔷?、結(jié)核等），某些化膿性疾?。撔孕啬ぱ?、膿性腹膜炎、肺膿腫及創(chuàng)傷性心包炎等），某些急性炎癥（急性胃腸炎、急性肺炎、急性子宮內(nèi)膜炎和乳房炎等），術(shù)后一周內(nèi)，酸中毒的初期，毛地黃中毒以及腎上腺素中毒等。（2）減少：見于病毒性疾病以及病危期，造血機能受阻或衰弱；懷騾子的母驢在妊娠中毒癥時，嗜中性白細(xì)胞顯著減少。2）嗜酸性白細(xì)胞：（1）增多：見于某些寄生蟲?。ǜ纹x病、球蟲病、旋毛蟲病等），某些過敏疾

7、?。暡葸^敏、尋麻疹、注射血清后等），皮膚?。裾?、疥癬等）（2）減少：見于毒血癥、尿毒癥、嚴(yán)重創(chuàng)傷及中毒等。3）嗜堿性白細(xì)胞：增多或減少較少見。4）淋巴細(xì)胞：（1）增多：見于某些慢性傳染?。ㄈ缃Y(jié)核、布病等），急性傳染病的恢復(fù)期，某些病毒?。ㄘi瘟、流感等）以及血孢子蟲病等。（2）減少：常在嗜中性白細(xì)胞數(shù)絕對增多時，出現(xiàn)淋巴細(xì)胞減少的現(xiàn)象。說明機體與病原正處于激烈的斗爭，此后若淋巴細(xì)胞漸漸增多，表示預(yù)后良好。5）大單核細(xì)胞：（1）增多：見于某些原蟲病，某些慢性細(xì)菌感染以及某些病毒?。ㄈ珩R傳染性貧血）。（2）減少：見于急性傳染性病的初期及各種疾病的垂危期。2判斷預(yù)后1）預(yù)后不良：白細(xì)胞總數(shù)及嗜中性

8、白細(xì)胞的百分比顯著升高者；嗜中性桿狀核細(xì)胞及晚幼細(xì)胞顯著增多者；白細(xì)胞總數(shù)未能隨病情的發(fā)展而適時升高者；嗜酸性白細(xì)胞完全消失者。2）預(yù)后良好：白細(xì)胞總數(shù)及嗜中性白細(xì)胞的百分比隨病情的好轉(zhuǎn)而逐步下降者；嗜中性桿狀核細(xì)胞及晚幼細(xì)胞逐漸減少而分葉核細(xì)胞漸次相應(yīng)恢復(fù)者；淋巴細(xì)胞的百分比逐漸恢復(fù)者；大單核細(xì)胞暫時增多者；嗜酸性白細(xì)胞重新出現(xiàn)或暫時增多者。白細(xì)胞的染色（瑞氏或姬姆薩氏）特點1. 嗜堿性粒細(xì)胞：細(xì)胞較大，呈圓形或橢圓形，胞漿中有深紫色的較小的染色顆粒。2. 嗜酸性粒細(xì)胞：細(xì)胞較大，呈圓形或橢圓形，胞漿中有鮮紅色的染色顆粒。3. 中性粒細(xì)胞：細(xì)胞中等大小，呈圓形或橢圓形，胞漿中有淡玫瑰紅的小顆

9、粒。依細(xì)胞核的形態(tài)分為髓細(xì)胞、幼稚型、桿狀核及分葉核細(xì)胞。髓細(xì)胞的細(xì)胞核色淡，著色不均，呈長圓形或豆型。幼稚型的細(xì)胞核著色較淡，核染色質(zhì)疏松，多呈腎型、豆型。桿狀核細(xì)胞的核致密、色深，呈桿狀的香腸形、蹄鐵型或S型，兩邊平行。分葉核細(xì)胞其核分成26個不等，并在其間有細(xì)絲狀連接為其特征。4. 淋巴細(xì)胞：胞體呈圓形，直徑大者為大淋巴細(xì)胞，小者稱小淋巴細(xì)胞；核呈深藍紫色，圓形，致密且常偏在；胞漿呈淡天藍色，核周圍有淡染色帶（或呈透明帶）；小淋巴細(xì)胞的胞漿極少，有時僅呈月牙形，位于一側(cè)。5. 單核細(xì)胞：個體極大，呈不正、多邊、多角形，胞漿呈較暗的煙灰色，核呈紫褐色，形如腎形、山字形、折疊狀，核染色質(zhì)疏松

10、網(wǎng)狀?！菊⒖贾怠恳姳?-1表1-1各種動物白細(xì)胞分類正常平均值（%）動物種類白細(xì)胞總數(shù)109/L嗜堿性白細(xì)胞嗜酸性白細(xì)胞嗜中性白細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞晚幼細(xì)胞桿狀核分葉核牛8.00.54.00.53.033.057.02.0馬9.50.54.50.54.054.034.02.5羊綿8.2,山9.60.54.51.03.033.055.53.5豬14.80.52.51.05.532.055.03.5駱駝 0.58.01.06.547.035.02.0犬9.4少見4.00.00.870.020.05.0貓12.04.50.250.254.563.525.81.2雞19.01-45-825-30%

11、55-6010附注：1白細(xì)胞的染色（用瑞氏或姬姆薩氏）特點：1.嗜堿性粒細(xì)胞：細(xì)胞較大，呈圓形或橢圓形，胞漿中有深紫色的較小的染色顆粒。2.嗜酸性粒細(xì)胞：細(xì)胞較大，呈圓形或橢圓形，胞漿中有鮮紅色的染色顆粒。3.中性粒細(xì)胞：細(xì)胞中等大小，呈圓形或橢圓形，胞漿中有淡玫瑰紅的小顆粒。依細(xì)胞核的形態(tài)分為髓細(xì)胞、幼稚型、桿狀核及分葉核細(xì)胞。髓細(xì)胞的細(xì)胞核色淡，著色不均，呈長圓形或豆型。幼稚型的細(xì)胞核著色較淡，核染色質(zhì)疏松，多呈腎型、豆型。桿狀核細(xì)胞的核致密、色深，呈桿狀的香腸形、蹄鐵型或S型，兩邊平行。分葉核細(xì)胞其核分成26個不等，并在其間有細(xì)絲狀連接為其特征。4.淋巴細(xì)胞：胞體呈圓形，直徑大者為大淋巴

12、細(xì)胞，小者稱小淋巴細(xì)胞；核呈深藍紫色，圓形，致密且常偏在；胞漿呈淡天藍色，核周圍有淡染色帶（或呈透明帶）；小淋巴細(xì)胞的胞漿極少，有時僅呈月牙形，位于一側(cè)。5.單核細(xì)胞：個體極大，呈不正、多邊、多角形，胞漿呈較暗的煙灰色，核呈紫褐色，形如腎形、山字形、折疊狀，核染色質(zhì)疏松網(wǎng)狀。2各種畜禽血細(xì)胞的染色特點：禽血細(xì)胞的形態(tài)特點：雞白細(xì)胞總數(shù)19109/L. 異嗜性白細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的25-30%;嗜酸性白細(xì)胞占5%-8%; 嗜堿性白細(xì)胞占1-4%;淋巴細(xì)胞占55-60%;單核細(xì)胞占10%.(1)紅細(xì)胞: 呈卵圓形, 大小為101469微米, 體積比馬的紅細(xì)胞大. 中央有橢圓形的核, 核中有不規(guī)則的深

13、染色質(zhì). 胞漿呈橙紅色. (2)異嗜性白細(xì)胞: 又叫假嗜酸性白細(xì)胞,相當(dāng)于哺乳動物的嗜中性粒細(xì)胞, 近乎圓形, 大小為0-14微米, 胞漿淡染, 其中有許多嗜酸性桿狀或紡錘型結(jié)晶顆粒, 這種顆粒被染成淺紅色. 胞核呈多型性, 核通常為2-5葉, 葉間的連接帶較明顯. 核內(nèi)染色質(zhì)塊較粗大, 呈藍紫色. 鴨的異嗜性白細(xì)胞顆粒為不正圓形; 鵝的為大米粒樣.(3)嗜酸性白細(xì)胞: 大小為4-11微米. 嗜酸性顆粒大而呈球形(鴨的呈桿狀),染成深紅色. 胞漿為淡藍灰色; 核常為2葉, 染成藍色. (4)嗜堿性白細(xì)胞:胞漿內(nèi)有中等大小的深紫色顆粒; 核為圓形、卵圓形或分葉, 核染色較淺.(5)淋巴細(xì)胞: 分

14、大、中、小淋巴細(xì)胞, 小的居多, 常有突起. 淋巴細(xì)胞胞漿微嗜堿性(淡藍色); 核呈圓形或一側(cè)凹陷(核的凹陷側(cè)有時可見到嗜天青顆粒), 核常偏在, 染色質(zhì)粗糙或細(xì)勻. (6)單核細(xì)胞: 占白細(xì)胞總數(shù)的10%. 比大淋巴細(xì)胞稍大, 其胞漿為藍灰色(與大淋巴細(xì)胞相似, 但胞漿比淋巴細(xì)胞多). 核不規(guī)則, 核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)疏松均勻為細(xì)絲狀.(7)凝血細(xì)胞: 相當(dāng)于哺乳動物的血小板, 呈卵圓形, 胞漿清晰,其中央有一圓形的核. 在細(xì)胞的一端常有一個或多個染成紅色的小顆粒; 胞核的染色質(zhì)密集并結(jié)成較大的塊.馬的血細(xì)胞形態(tài)特征：馬的白細(xì)胞總數(shù)9.5109/L.嗜中性白細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的58.5%; 嗜酸性白細(xì)

15、胞占4.5%; 嗜堿性白細(xì)胞占0.5%;淋巴細(xì)胞占34%;單核細(xì)胞占2.5%.(1) 紅細(xì)胞：大小一致，平均直徑為5.7微米,染色濃且均勻,中心淡染區(qū)不明顯.紅細(xì)胞常形成長鏈狀(錢串狀),一般不出現(xiàn)未成熟的紅細(xì)胞.(2) 嗜中性白細(xì)胞:成熟的細(xì)胞,核呈劇齒樣外觀, 核分葉明顯.母馬的嗜中性白細(xì)胞核上有時可見鼓錘狀突起.胞漿染成淡紅色,其中有桃紅色微細(xì)的顆粒.在健康馬的末梢血液中,嗜中性桿狀核白細(xì)胞的核比分葉核白細(xì)胞的核大,呈馬蹄形或S形, 核的邊緣有染色較深的斑點.(3) 嗜酸性白細(xì)胞:細(xì)胞中有明亮的,被染成橙紅色的,大而圓的顆粒,這種嗜酸性顆粒充滿整個胞漿,甚至覆蓋在胞核上,致使淡藍色的胞漿

16、幾乎看不到.(4) 嗜堿性白細(xì)胞:胞漿中有散在的或密集的被染成深藍紫色的,大小和形狀一定的顆粒.(5) 淋巴細(xì)胞:大多數(shù)為小淋巴細(xì)胞,其特點是核大且染色濃,僅有一小片月牙形的天藍色的胞漿. 大淋巴細(xì)胞的胞漿相對較多, 呈淡藍色,胞漿中含有為數(shù)不多的天藍色小顆粒.(6) 單核細(xì)胞:核多呈腎形,偏于細(xì)胞一側(cè). 胞漿呈灰藍色,內(nèi)有微細(xì)的天藍色顆粒.(7) 血小板:一般呈卵圓形, 也有呈精子形狀者,常聚集在一起,內(nèi)有細(xì)小的天藍色顆粒.牛的血細(xì)胞形態(tài)特點：牛的白細(xì)胞總數(shù)8.0109/L.嗜中性白細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的36.5%; 嗜酸性白細(xì)胞占4.0%; 嗜堿性白細(xì)胞占0.5%;淋巴細(xì)胞占57%;單核細(xì)胞占

17、2.0%.(1) 紅細(xì)胞:大小不均勻,平均直徑為5.5微米,不易形成串錢狀.在重劇疾病時,可見到紅細(xì)胞形成串錢狀, 因此根據(jù)串錢形成的程度,對判斷預(yù)后有一定的幫助.(2) 嗜中性白細(xì)胞:成熟細(xì)胞的核分葉明顯, 各葉間有較短的核絲連接, 胞漿呈淡桃紅色, 含有大量紫紅色的細(xì)小顆粒. 桿狀核細(xì)胞的核短而粗且稍彎曲, 胞漿染色比成熟型的淡,顆粒也較少. 晚幼粒細(xì)胞的核較大,呈圓形,腎形,核染色質(zhì)出現(xiàn)斑點狀構(gòu)造, 胞漿為淡灰色,顆粒不明顯.(3) 嗜酸性白細(xì)胞:嗜酸性顆粒較小,呈圓形,有屈光性, 顆粒之間有空隙, 呈現(xiàn)出淡灰色的細(xì)胞漿.胞核多呈桿狀,也有呈分葉狀的,核染色質(zhì)濃淡不勻.(4) 嗜堿性白細(xì)

18、胞:嗜堿性顆粒呈卵圓形,大小和馬的相似.(5) 淋巴細(xì)胞:大小極不一致,小淋巴細(xì)胞的大小似紅細(xì)胞, 往往只能看到核,胞漿很少. 大淋巴細(xì)胞大小似單核細(xì)胞.各種淋巴細(xì)胞的胞漿中有大小不等的紫紅色顆粒.(6) 單核細(xì)胞:核呈牛腎形或多角形, 染色質(zhì)呈彌散性或紐扣狀.胞漿呈灰色,常有空泡出現(xiàn).(7) 血小板:每一血小板的體積較小, 有時可出現(xiàn)比紅細(xì)胞還大的巨型血小板,內(nèi)有紫紅色的小顆粒. 常聚集成堆, 有時浮在紅細(xì)胞上.綿羊的血細(xì)胞形態(tài)特點：綿羊的白細(xì)胞總數(shù)8.2109/L.嗜中性白細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的26.9%; 嗜酸性白細(xì)胞占2.9%; 嗜堿性白細(xì)胞占0.2%;淋巴細(xì)胞占68.1%;單核細(xì)胞占1.

19、9%.(1) 紅細(xì)胞:大小略有差異,平均直徑為4.5微米,多數(shù)是單個存在,少數(shù)可有串錢狀,細(xì)胞中央淡染.(2) 嗜中性白細(xì)胞:分葉的核明顯分為數(shù)葉, 葉間有細(xì)絲連接, 核染色質(zhì)為斑點狀,在母羊?？煽吹酵黄鸬娜旧w. 胞漿的染色性較弱,一般呈淺桃色, 其中有彌散性的微細(xì)小顆粒. 嗜中性桿狀核型的細(xì)胞核多呈U字形, 也有呈S形的, 核染色質(zhì)的斑紋比分葉核型的淺, 胞漿稍帶藍紫色. 成年健康綿羊的血液中,桿狀核細(xì)胞非常少.(3) 嗜酸性白細(xì)胞: 嗜酸性顆粒大小一致, 卵圓形,呈橙紅色,輪廓明顯.胞漿為淺藍色.(4) 嗜堿性白細(xì)胞:有暗紫色的大小均勻的圓形嗜堿性顆粒,分布在胞漿及胞核上.胞核的顏色比胞

20、漿稍深,但兩者的界限帶不明顯.(5) 淋巴細(xì)胞:特點是胞漿內(nèi)有大的嗜天青顆粒. 在核與胞漿之間,有明顯的淡染區(qū),好象形成了空隙.(6) 單核細(xì)胞:核為變形蟲樣, 多為三葉, 每一葉較寬,核的染色質(zhì)呈星芒狀. 胞漿呈灰藍色.(7) 血小板:為深紫色的小顆粒,常聚集在一起, 有時可見到巨型血小板.山羊的血細(xì)胞形態(tài)特點: 山羊的白細(xì)胞總數(shù)9.6109/L.嗜中性白細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的41.8%; 嗜酸性白細(xì)胞占0.7%; 嗜堿性白細(xì)胞占0.7%;淋巴細(xì)胞占54.5%;單核細(xì)胞占2.3%.(1) 紅細(xì)胞: 為家畜中紅細(xì)胞最小者, 其平均直徑為4.1微米, 形狀圓形乃至橢圓形, 染色均勻,常單個存在.(2

21、) 嗜中性白細(xì)胞:成熟的嗜中性白細(xì)胞核分葉比綿羊少,母羊的核有鼓錘狀突起. 胞漿著色與綿羊的相似.(3) 嗜酸性白細(xì)胞:有明顯紫紅色的圓而小的嗜酸性顆粒充滿于胞漿中. 核多呈桿狀,也有分成2-3葉的.(4) 嗜堿性白細(xì)胞:嗜堿性顆粒的顏色與核的顏色相似(藍紫色),但顆粒周圍有一稍紅的帶.(5) 淋巴細(xì)胞:胞漿呈淺藍色, 但在邊緣為深藍色, 胞漿內(nèi)有大小不一的紅紫色的小顆粒.(6) 單核細(xì)胞:胞漿呈淡藍色, 胞漿內(nèi)有空泡, 并有細(xì)小的藍紫色顆粒.胞核呈卵圓形,桿狀或分葉, 核染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)呈鈕扣狀(7) 血小板:與綿羊血小板相似,為深紫色的小顆粒,常聚集在一起.豬的血細(xì)胞形態(tài)特點：豬的白細(xì)胞總數(shù)1

22、4.8109/L.嗜中性白細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的38.5%; 嗜酸性白細(xì)胞占2.5%; 嗜堿性白細(xì)胞占0.5%;淋巴細(xì)胞占55.0%;單核細(xì)胞占3.5%.(1) 紅細(xì)胞: 平均直徑為6.2微米,可形成串錢狀,有時中央呈現(xiàn)淡染蒼白.(2) 嗜中性白細(xì)胞:成熟的核分為數(shù)葉,核絲不明顯,核染色質(zhì)呈鮮明的斑點狀構(gòu)造.桿狀核細(xì)胞的核呈U字形或S形,核膜平滑. 在1日齡健康仔豬的血液中常出現(xiàn)晚幼嗜中性白細(xì)胞, 胞漿呈淡藍色乃至藍色.(3) 嗜酸性白細(xì)胞: 顆粒呈圓形或卵圓形, 染成橙紅色,均勻分布于胞漿中. 核為腎形, 桿狀或分葉.(4) 嗜堿性白細(xì)胞:胞核明顯,呈淡紫色. 嗜堿性顆粒為藍紫色,顆粒比馬的稍大

23、.(5) 淋巴細(xì)胞:胞漿與核之間有一透明帶,胞漿的邊緣有小而細(xì)長的嗜天青顆粒.(6) 單核細(xì)胞: 核的邊緣不整齊,核染色質(zhì)呈紐扣狀. 胞漿為灰藍色,幾乎看不到胞漿的顆粒.(7) 血小板: 呈小的卵圓形,有時也可見到細(xì)長的巨型血小板.白細(xì)胞分類計數(shù)血液中的白細(xì)胞一般包括：顆粒細(xì)胞（嗜中性、嗜酸性和堿性細(xì)胞）、淋巴細(xì)胞（大、中、小淋巴細(xì)胞）和單核細(xì)胞。在正常情況下，其構(gòu)成的比例、形態(tài)和質(zhì)量基本是不變的，但在病理情況下，這種比例、形態(tài)、質(zhì)量將會發(fā)生變化，故臨床上常把計數(shù)白細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù)結(jié)合起來，進行分析和診斷某些感染性疾病的種類?！驹怼堪准?xì)胞分類計數(shù)是將血液制成分布均勻的薄膜涂片，用復(fù)合染料染

24、色，根據(jù)各類白細(xì)胞著色特征，在顯微鏡下觀察其數(shù)量、形態(tài)和質(zhì)量的變化、予以分類計數(shù)并求出各種白細(xì)胞所占的百分率，對疾病有輔助診斷意義。 【器材與試劑】器材：載玻片、染色缸及支架、洗瓶、顯微鏡及鏡油、白細(xì)胞分類計數(shù)器、吸水紙等。試劑：染液、緩沖液1.瑞（Wright）氏染液 瑞氏染粉0.lg，甲醇60.0ml。將染粉置于研缽中，加少量甲醇研磨，使其溶解，然后將已溶解的染液倒入潔凈的棕色玻瓶，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此繼續(xù)操作，直至全部染料溶解并用完甲醇為止。在室溫中保存7日后即可應(yīng)用。新配制的染液偏堿性，放置后可呈酸性。保存時間愈久，染色力愈佳。2.吉（Giemsa）氏染液 吉氏染粉0

25、.5g，純甘油33.0ml，純甲醇33.0m1。先將染粉置于研缽中，加入少量甘油，充分研磨，然后加入其余量的甘油，水浴加溫（60）12h，經(jīng)常用玻璃棒攪拌，使染色粉溶解，最后加入甲醇混合，裝棕色瓶中保存1周后過濾即成原液。臨用時取此原液1ml，加pH68的緩沖液或新鮮蒸餾水10ml，即成應(yīng)用液。3.瑞吉氏復(fù)合染色液 瑞氏染粉1.0g，吉氏染粉0.3g，中性甘油10ml，甲醇500ml。先將瑞氏染粉與吉氏染粉置于研缽中，加入少量甘油和甲醇，充分研磨，吸出上層染液置棕色瓶中，在加甲醇繼續(xù)研磨，再吸出上液，如此連續(xù)數(shù)次，直至500ml甲醇用完。配好后每天早、晚各振搖3 min，共5天，存放1周后可使

26、用。4.緩沖液（pH6.8） 磷酸氫二鈉（Na2HPO4）3.8g，磷酸二氫鉀（KH2PO4）5.47g，用蒸餾水溶解并定容到1000 ml?！狙磕ā?.取潔凈載玻片數(shù)張，選擇邊緣光滑的載片作為推片（也可用血細(xì)胞計數(shù)板的蓋玻片做為推片），用左手的拇指及中指夾持載片并置于平穩(wěn)的臺面上，右手持推片。2.取被檢血（經(jīng)EDTA抗凝）1小滴，放于載玻片的右端，手持推片放于血滴之前并與載片接觸，以3040角向后拉動推片，使之與血滴接觸，待血液擴散形成一條線狀之后，以均等的速度輕輕向前推動推片，則血液就被均勻地涂于載片上而形成一薄血膜。良好的血片，血液應(yīng)分布均勻，厚度要適當(dāng)，對光觀察時呈霓紅色，血膜應(yīng)位

27、于玻片中央，兩端留有空隙，以便標(biāo)上患畜名稱、畜別、編號、日期。常溫下自然風(fēng)干（冬天可適當(dāng)加溫）?！狙旧坑袉稳竞蛷?fù)染1.瑞氏染色法 是最常用的染色法之一。將干燥的血片用蠟筆于血膜之兩端各劃一道橫線，以防染色液外溢。置血片于水平支架上，滴瑞氏染液于血片上，并計其滴數(shù)，直至將血膜浸蓋為止，待染12 min后，滴加等量緩沖液或新鮮蒸餾水，輕輕吹動使之混勻，再染410 min，用蒸餾水或常水沖洗，吸干，油鏡觀察。此染液對胞漿及顆粒的染色效果較好。2.姬姆薩氏染色法 血涂片用甲醇固定12 min。待甲醇揮發(fā)后再將血片直立于裝有姬姆薩氏應(yīng)用液的染色缸中，染色3060 min，取出用蒸餾水或常水沖洗，干

28、燥后鏡檢。此染液對細(xì)胞核及血液原蟲的染色效果較好。3.瑞氏與姬姆薩氏復(fù)合染色法將血片置于染色架上，滴加復(fù)合染液35滴，使其迅速布滿血膜，約1 min后，滴加緩沖液510滴，輕輕搖動玻片使之充分混合，510 min后用流水沖去染液，待干鏡檢?！痉诸愑嫈?shù)】1.先用低倍鏡檢視血片上白細(xì)胞的分布情況，一般是粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及體積較大的細(xì)胞分布在血片的上、下緣及尾端，淋巴細(xì)胞多在血片的起始端。滴加顯微鏡油，轉(zhuǎn)過油鏡頭進行分類計數(shù)。2.計數(shù)時，為避免重復(fù)和遺漏，可用四區(qū)、三區(qū)或中央曲折計數(shù)法推移血片，記錄每一區(qū)的各種白細(xì)胞數(shù)。每張血片最少計數(shù)100個白細(xì)胞，連續(xù)觀察23張血片，求出各種白細(xì)胞的百分比。3.

29、記錄時，可用“白細(xì)胞分類計數(shù)器”，也可事先設(shè)計一表格，用畫“正”字的方法記錄，以便于統(tǒng)計百分?jǐn)?shù)?！菊⒖贾怠恳姳?-1表1-1各種動物白細(xì)胞分類正常平均值（%）動物種類嗜堿性白細(xì)胞嗜酸性白細(xì)胞嗜中性白細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞晚幼細(xì)胞桿狀核分葉核牛0.54.00.53.033.057.02.0馬0.54.50.54.054.034.02.5羊0.54.51.03.033.055.53.5豬0.52.51.05.532.055.03.5駱駝 0.58.01.06.547.035.02.0【臨床意義】白細(xì)胞分類計數(shù)可發(fā)現(xiàn)各種白細(xì)胞的量或質(zhì)的變化，結(jié)合白細(xì)胞總數(shù)，可進一步揭示機體防御機能的狀況，對疾病的診斷、病程、預(yù)后判斷及治療等有著重要的指導(dǎo)意義。 由于外周血液中白細(xì)胞的組成主要為中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，尤其是中性粒細(xì)胞數(shù)最多，約占白細(xì)胞總數(shù)的50%70%（除牛、豬外），所以，在多數(shù)情況下，白細(xì)胞數(shù)的變化主要受中性粒細(xì)胞的影響，其增多或減少的臨床意義與中