專題12基因工程和細(xì)胞工程

1、專題12 基因工程和細(xì)胞工程一、高考要求內(nèi)容等級(jí)要求基因工程的誕生基因工程的原理及技術(shù)基因工程的應(yīng)用蛋白質(zhì)工程植物的組織培養(yǎng)動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆細(xì)胞融合與單克隆抗體基因工程的基本操作程序基因表達(dá)載體的構(gòu)建（基因工程的核心）基因表達(dá)載體的組成目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因目的基因的獲取目的基因：指編碼蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因方法從基因文庫中獲取人工合成利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細(xì)胞方法導(dǎo)入植物細(xì)胞的方法導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法導(dǎo)入微生物的方法目的基因的檢測(cè)和鑒定檢測(cè)鑒定限制性內(nèi)切酶（分子手術(shù)刀）：來源、功能、切割后的DNA末端DNA連接酶（分子縫合針）：種類、功能基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體（分

2、子運(yùn)輸車）：條件、種類DNA重組技術(shù)的基本工具基因工程的應(yīng)用轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因工程藥物蛋白質(zhì)工程的崛起基因工程二、知識(shí)建構(gòu)細(xì)胞的全能性：概念、原因、大小植物細(xì)胞工程過程：外植體愈傷組織胚狀體植物體脫分化：形成愈傷組織再分化：植物細(xì)胞選擇性表達(dá)，形成胚狀體特點(diǎn)：子代與親代性狀高度遺傳植物組織培養(yǎng)去細(xì)胞壁：纖維素酶、果膠酶誘導(dǎo)劑：PEG融合完成的標(biāo)志：新細(xì)胞壁的形成過程：原生質(zhì)體融合+組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)劑：PEG、滅活病毒 動(dòng)物細(xì)胞融合主要應(yīng)用：?jiǎn)慰寺】贵w微型繁殖作物脫毒人工種子植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用植物繁殖的新途徑單倍體育種突變體的利用細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物體細(xì)胞核移

3、植技術(shù)和克隆動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物的概念動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題細(xì)胞工程三、考點(diǎn)分析有關(guān)基因工程的備考，高考中可能涉及到本考題的熱點(diǎn)問題，有如下幾個(gè)方面：1.基因工程的基本步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)運(yùn)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因表達(dá)的檢測(cè)與鑒定幾個(gè)步驟。2.轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用：(1)轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物，如抗蟲、抗病、抗逆、抗除草劑，抗倒伏的植物；產(chǎn)肉、產(chǎn)蛋量高、生長(zhǎng)快、耐粗飼料的動(dòng)物；此外，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物為人類異體器官移植提供了可能。(2)基因藥物：如人造胰島素、人造生長(zhǎng)激素、溶血栓的尿激酶原等。(3)基因治療

4、：美國(guó)對(duì)復(fù)合型免疫缺陷癥的治療；糖尿病的治療：許多科學(xué)家希望利用基因工程手段將正常的合成胰島素基因?qū)牖颊唧w內(nèi)，并準(zhǔn)確表達(dá)，以此來修復(fù)或替代失去正常功能的胰島B細(xì)胞，從而維持機(jī)體血糖平衡。3.蛋白質(zhì)工程與基因工程的區(qū)別：蛋白質(zhì)工程就是根據(jù)蛋白質(zhì)的精細(xì)結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系，利用基因工程的手段，按照人類自身的需要，定向地改造天然的蛋白質(zhì)，甚至創(chuàng)造新的、自然界本不存在的、具有優(yōu)良特性的蛋白質(zhì)分子。蛋白質(zhì)工程自誕生之日起，就與基因工程密不可分?；蚬こ淌峭ㄟ^基因操作把外源基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)纳矬w內(nèi)，并在其中進(jìn)行表達(dá)，它的產(chǎn)品還是該基因編碼的天然存在的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程則更進(jìn)一步。它可以根據(jù)對(duì)分子預(yù)先設(shè)計(jì)的

5、方案，通過對(duì)天然蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行改造，來實(shí)現(xiàn)對(duì)它所編碼的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造。因此，它的產(chǎn)品已不再是天然的蛋白質(zhì)，而是經(jīng)過改造的、具有了人類所需要的優(yōu)點(diǎn)的蛋白質(zhì)。天然蛋白質(zhì)都是通過漫長(zhǎng)的進(jìn)化過程而形成的，而蛋白質(zhì)工程對(duì)天然蛋白質(zhì)的改造，好比是在實(shí)驗(yàn)室里加快了進(jìn)化的過程。有關(guān)細(xì)胞工程，高考中可能涉及到的考點(diǎn)有如下幾個(gè)方面：4理解細(xì)胞全能性的概念，把握細(xì)胞全能性的特點(diǎn)：細(xì)胞全能性是指生物體的細(xì)胞具有形成完整個(gè)體的潛能的特性。受精卵、生殖細(xì)胞和已分化的體細(xì)胞均具有全能性。生物體的細(xì)胞具有全能性的根本原因是細(xì)胞內(nèi)含有形成完整個(gè)體所需的全套基因。同一個(gè)體的每一個(gè)已分化的體細(xì)胞都由受精卵經(jīng)有絲分裂而來，體細(xì)胞核

6、內(nèi)基因與受精卵一樣，因此都具有全能性。分化的體細(xì)胞之所以沒有表達(dá)出全能性，是因?yàn)榛蜻x擇性表達(dá)。在離體和適當(dāng)?shù)臈l件下，分化的體細(xì)胞也能表達(dá)其全能性。全能性表達(dá)的難易程度：受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞；植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞。5植物組織培養(yǎng)操作的特點(diǎn)：（1）選擇外植體時(shí)，由于外植體的脫分化難易因植物種類、器官來源及生理狀況的不同而有很大差異?；ê陀啄鄣慕M織脫分化較為容易，而植物的莖、葉和成熟的老組織則較難。另外制備外植體時(shí)應(yīng)選取有形成層的部分，因?yàn)樾纬蓪蛹?xì)胞易脫分化。（2）消毒。植物組織培養(yǎng)要想取得成功，必須有效防止細(xì)菌等的污染。因?yàn)槿绻囵B(yǎng)基上有細(xì)菌等微生物存在時(shí)，它們比植物細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖得更快，而且它們會(huì)

7、產(chǎn)生毒素，使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒死亡。因此在培養(yǎng)過程中要求進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。（3）光照。離體的植物細(xì)胞、組織和器官脫分化形成愈傷組織時(shí)，需避光處理。愈傷組織再分化形成植物幼苗時(shí)，需光照處理。（4）激素調(diào)控：生長(zhǎng)素含量高于細(xì)胞分裂素時(shí)，主要誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基的形成；當(dāng)細(xì)胞分裂素的效應(yīng)高于生長(zhǎng)素時(shí)，主要誘導(dǎo)植物組織再分化和芽原基的形成。6植物體細(xì)胞雜交雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)：以煙草與大豆細(xì)胞融合為例。煙草與大豆的原生質(zhì)體融合后，將原生質(zhì)體轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)，使原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁。這時(shí)，在細(xì)胞混合物中，不僅有煙草-大豆細(xì)胞，還有煙草細(xì)胞、大豆細(xì)胞、煙草-煙草細(xì)

8、胞、大豆-大豆細(xì)胞，因此需要對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行篩選。得到煙草-大豆細(xì)胞后，再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，培育雜種植株。7微型繁殖與無性生殖：微型繁殖是用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，實(shí)際上是無性生殖的一種。在繁殖的過程中，細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，因此親、子代細(xì)胞內(nèi)DNA相同，具有相同的基因，因此能保證親、子代遺傳特性不變。利用這種技術(shù)能高效快速實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。8微型繁殖與作物脫毒、人工種子、單倍體育種：作物脫毒、人工種子、單倍體育種的培育過程均有采用微型繁殖的技術(shù)。作物脫毒主要是強(qiáng)調(diào)微型繁殖的取材一定是無毒（的如莖尖、根尖），才能繁殖出無毒的幼苗。人工種子采用的還是微型繁殖的技術(shù)，但是只需培育得到

9、胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽，包上人工種皮就可形成人工種子。人工種子與微型繁殖得到的幼苗一樣能保持親本的優(yōu)良性狀，另外還可不受氣候、季節(jié)和地域的限制。單倍體育種的優(yōu)點(diǎn)是后代無性狀分離，后代都是純合子，能夠穩(wěn)定遺傳，明顯縮短育種年限。單倍體育種從本質(zhì)上說屬于有性生殖，這一點(diǎn)與微型繁殖有所區(qū)別。但單倍體育種首先要進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)，采用還是微型繁殖的技術(shù)，然后用秋水仙素處理，獲得純合子。9動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程10代細(xì)胞動(dòng)物血清、葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素剪碎、胰蛋白酶、動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸浮液50代細(xì)胞細(xì)胞株細(xì)胞系原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)10動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別：動(dòng)物細(xì)胞培

10、養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有許多相似之處，也有許多不同點(diǎn)。一是它們用的培養(yǎng)基不同，植物組織培養(yǎng)用的一般是固體培養(yǎng)基，而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用的一般是液體培養(yǎng)基。第二是它們的培養(yǎng)基的成分不同。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽和維生素，另外還有動(dòng)物血清。植物組織培養(yǎng)所需要的培養(yǎng)基包含植物生長(zhǎng)和發(fā)育的全部營(yíng)養(yǎng)成分，如礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和有機(jī)添加物，沒有動(dòng)物血清。第三是植物組織培養(yǎng)最后一般得到新的植物個(gè)體，而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)因?yàn)閯?dòng)物體細(xì)胞一般不能表達(dá)其全能性，因此得到的是同一種的細(xì)胞。11把握動(dòng)物體細(xì)胞移植的特點(diǎn)：動(dòng)物體細(xì)胞移植依據(jù)的原理還是細(xì)胞的全能性，與植物組織培養(yǎng)一樣屬于無性生殖。雖

11、然細(xì)胞核內(nèi)具有發(fā)展成為一個(gè)完整個(gè)體所需的全套基因，但動(dòng)物體細(xì)胞分化程度較高，因此很難表達(dá)全能性。卵細(xì)胞體積大，易于操作，含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。將體細(xì)胞核移植入去核卵細(xì)胞內(nèi)，既保證了重組細(xì)胞的完整性，又能刺激體細(xì)胞核表達(dá)其全能性，發(fā)展成為一個(gè)新的個(gè)體。動(dòng)物體細(xì)胞移植產(chǎn)生的新個(gè)體的親本有三個(gè)：體細(xì)胞核供體、卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體、代孕母體。新個(gè)體細(xì)胞核基因型與體細(xì)胞核供體完全一樣，因此新個(gè)體性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中也有少量的DNA，新個(gè)體性狀與卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體有一些地方相同。代孕母體沒有為新個(gè)體提供遺傳物質(zhì)，新個(gè)體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系。12動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體

12、細(xì)胞雜交的異同：比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng)、聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)克服遠(yuǎn)源雜交不親和，獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，還有用滅活病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體13單克隆抗體的應(yīng)用：?jiǎn)慰寺】贵w可以作為診斷試劑，準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，與抗原的特異性結(jié)合具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的特點(diǎn)。單克隆抗體還可以用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥。單克隆抗體作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。四、典例解析例1科

13、學(xué)家將干擾素基因進(jìn)行定點(diǎn)突變導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)，使干擾素第17位的半胱氨酸改變成絲氨酸，結(jié)果大大提高-干擾素的抗病性活性，并且提高了儲(chǔ)存穩(wěn)定性，該生物技術(shù)為A、基因工程 B、蛋白質(zhì)工程 C、基因突變 D、細(xì)胞工程解析:基因工程是通過對(duì)基因的操作，將符合人們需要的目的基因?qū)脒m宜的生物體，原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)或或生活需要。本題中合成的干擾素不是天然的，因此，屬于蛋白質(zhì)工程。 答案B例2(07江蘇)很久以前科學(xué)家在土壤中發(fā)現(xiàn)了某種細(xì)菌能制造

14、一種對(duì)昆蟲有毒的蛋白質(zhì)，當(dāng)時(shí)許多人就想把編碼這一蛋白質(zhì)的基因(抗蟲基因)轉(zhuǎn)移到農(nóng)作物中，以降低昆蟲對(duì)農(nóng)作物造成的危害。20世紀(jì)90年代，美國(guó)科學(xué)家采用基因工程技術(shù)首次培育出抗蟲玉米新品種。下圖為這一轉(zhuǎn)基因玉米的主要培育過程。(1)獲得特定目的基因的途徑除了從該細(xì)菌中直接分離抗蟲基因外，還可以 。將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)必須用 酶和DNA連接酶。在基因工中，常用的運(yùn)載體有 等，而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)條件，例如，應(yīng)具有 以便進(jìn)行篩選。（2）由轉(zhuǎn)基因玉米細(xì)胞經(jīng)過 形成愈傷組織，然后發(fā)育成胚狀體和試管苗。若要制備轉(zhuǎn)基因玉米的人工種子，可選擇上圖實(shí)驗(yàn)過程中的 再包裹合適的 等。解析:本題考查基因工程的

15、工具和操作過程。（1）提取目的基因除可采用直接分離法外，還可進(jìn)行人工合成。目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)需先用同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，以產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接DNA分子的缺口形成重組DNA分子。該問的最后一空注意不能寫“抗性基因”，而應(yīng)是標(biāo)記基因，因?yàn)槌剐曰蛲膺€可以是顏色反應(yīng)的基因等。（2）問回顧教材內(nèi)容即可作答。答案:(1)人工合成 同種限制 質(zhì)粒(或動(dòng)植物病毒或噬菌體等) 標(biāo)記基因 (2)脫分化(或去分化) 胚狀體 人造種皮例3(07廣東) 香蕉原產(chǎn)熱帶地區(qū)，是我國(guó)南方重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。廣東省冬季常受強(qiáng)寒潮和霜凍影響，對(duì)香蕉生長(zhǎng)發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒（BBTV

16、，單鏈環(huán)狀DNA病毒）引起的香蕉束頂病，對(duì)香蕉生產(chǎn)的危害十分嚴(yán)重。當(dāng)前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現(xiàn)代科技手段提高其種質(zhì)水平，具有重要意義。請(qǐng)根據(jù)上述材料，回答下列問題：（1)簡(jiǎn)述香蕉大規(guī)?？焖俜敝臣夹g(shù)的過程。（2）脫毒香蕉苗的獲得，可采用 的方法，此方法的依據(jù)是 和 。(3）建立可靠的BBTV檢測(cè)方法可以監(jiān)控脫毒香蕉苗的質(zhì)量，請(qǐng)問可用哪些方法檢測(cè)病毒的存在？（列舉兩種方法）(4)在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對(duì)提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價(jià)值，該基因可以從這些魚的DNA中擴(kuò)增得到。試述在提取和純化DNA時(shí)影響提純效果

17、的因素及其依據(jù)。（列舉兩點(diǎn)）（5）如何利用afp基因，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得抗寒能力提高的香蕉植株？在運(yùn)用轉(zhuǎn)基因香蕉的過程中，在生態(tài)安全方面可能會(huì)出現(xiàn)什么問題？（列舉兩點(diǎn)）（6)從細(xì)胞工程的角度出發(fā)，簡(jiǎn)述一種培育抗寒香蕉品種的方法及其依據(jù)。另外，抑制果膠裂解酶的活性可以延長(zhǎng)香蕉果實(shí)儲(chǔ)藏期，請(qǐng)描述采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)降低該酶活性的一般過程。解析:脫毒植物就是培育無病毒的植物，采用植物的莖尖、芽等進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，可快速繁殖無病毒的植物。檢測(cè)病毒的存在可利用基因檢測(cè)、抗原抗體反應(yīng)等技術(shù)。利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可將不同香蕉的優(yōu)良性狀集中到雜種植株中答案: (1)選取香蕉外植體，通過誘導(dǎo)脫分化產(chǎn)生愈傷組織，

18、然后通過調(diào)整植物激素比例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗（或通過誘導(dǎo)大量形成胚狀體，制成人工種子，適宜條件下萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗）。(2）莖尖（分生組織）組織培養(yǎng)；莖尖不帶病毒（或病毒在植物體內(nèi)分布不均勻）；植物細(xì)胞全能性。(3)BBTV病毒基因的檢測(cè)（DNA分子雜交技術(shù)）；BBTV病毒蛋白的檢測(cè)（獲得抗血清，利用抗原一抗體的雜交反應(yīng)，判斷病毒是否存在）。(4）選擇NaCl溶液的合適濃度，利用DNA和其它雜質(zhì)在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，達(dá)到分離目的；加人一定量酒精，使部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)溶解于酒精，與DNA分離；加人蛋白酶，除去蛋白質(zhì)雜質(zhì)的干擾；控制DNA提 取的溫度，使大多數(shù)蛋白質(zhì)雜質(zhì)變性。（

19、5)將afp基因插人土壤農(nóng)桿菌的質(zhì)粒，構(gòu)建表達(dá)載體，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化導(dǎo)人香蕉受體細(xì)胞，成功轉(zhuǎn)化的香蕉細(xì)胞通過組織培養(yǎng)形成植株。生態(tài)安全問題包括：外源基因擴(kuò)散到其他物種（外源基因漂移）；轉(zhuǎn)基因植株擴(kuò)散影響生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能；轉(zhuǎn)基因植株擴(kuò)散對(duì)生物多樣性的影響；轉(zhuǎn)基因植物殘?bào)w或分泌物對(duì)環(huán)境的影響。（6）體細(xì)胞雜交育種，其依據(jù)是將不同品種的香蕉體細(xì)胞利用細(xì)胞融合技術(shù)融合成雜種細(xì)胞后培育出抗寒香蕉品種（或體細(xì)胞誘變育種，其依據(jù)是利用誘變劑等方法使香蕉離體培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生基因突變，然后篩選培育出抗寒品種）。蛋白質(zhì)工程方法的步驟為：果膠裂解酶蛋白的功能分析，果膠裂解酶蛋白的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)和設(shè)計(jì)，果膠裂解酶基因的改造

20、。五、隨堂練習(xí) 一選擇題：.在基因工程中使用的限制性核酸內(nèi)切酶，其作用是（ ）。 A.將目的基因從染色體上切割出來 B.識(shí)別并切割特定的DNA核苷酸序列 C.將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 D.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞.下圖所示限制酶切割基因分子的過程，從圖中可知，該限制酶能識(shí)別的堿基序列和切點(diǎn)是（ ）。 ACTTAAG，切點(diǎn)在C和T之間 BCTTAAG，切點(diǎn)在G和A之間CGAATTC，切點(diǎn)在G和A之間 DGAATTC，切點(diǎn)在C和T之間 .人們常選用的細(xì)菌質(zhì)粒分子往往帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗性基因的主要作用是（ ）。A.提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B.有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè)C.增加質(zhì)

21、粒分子的分子量 D.便于與外源基因連接.PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是（ ）。 目的基因 引物 四種脫氧核苷酸 DNA聚合酶等 mRNA 核糖體A.B.C.D. .下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是（ ）。A基因治療就是把缺陷基因誘變成正常基因 B基因診斷的基本原理是DNA分子雜交C一種基因探針能檢測(cè)水體中的各種病毒 D原核基因不能用來進(jìn)行真核生物的遺傳改良（ ）。.單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法是 A農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 B基因槍法 C花粉管通道法 D顯微注射法7.下列屬于組織培養(yǎng)的是（ ）。A.花粉培養(yǎng)成單倍體植株 B芽發(fā)育成枝條 C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū) D蜜蜂中未受精的卵發(fā)育成雄蜂8

22、.運(yùn)用下列各種細(xì)胞工程技術(shù)培育生物新品種，操作過程中能形成愈傷組織的是（ ）。植物細(xì)胞培養(yǎng) 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)ABCD9.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞融合，對(duì)得到的雜種細(xì)胞不正確的敘述是（ ）。A.有雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì) B.無增殖的本領(lǐng)C.可分泌特異性抗體 D.有大量增殖的本領(lǐng)10.下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（ ）。A用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞就會(huì)衰老死亡11.目前

23、常被使用的基因載體有(多選) （ ）。 A質(zhì)粒 B噬菌體 C染色體 D動(dòng)、植物病毒12.下列有關(guān)限制性內(nèi)切酶的說法中正確的是(多選) （ ）。 A.限制性內(nèi)切酶是從高等生物的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的 B.限制性內(nèi)切酶具有專一性C.限制性內(nèi)切酶切割DNA后都能形成黏性末端 D.限制性內(nèi)切酶是一種蛋白質(zhì)分子13.與植物體細(xì)胞雜交密切相關(guān)的下列敘述中,正確的是（多選）（ ）。A.利用離心、振動(dòng)、電刺激等誘導(dǎo) B.利用聚乙二醇（PEG）等試劑誘導(dǎo)C.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 D.快速繁殖、培育無病毒植物14在下列選項(xiàng)中，用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是(多選) （ ）。A.利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到多倍體植株

24、B.利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株C.利用基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株D.利用細(xì)胞工程培育“番茄馬鈴薯”雜種植株二非選擇題： 15以下是與基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程有關(guān)的內(nèi)容 （1）下表是有關(guān)酶名稱與作用的對(duì)應(yīng)關(guān)系，請(qǐng)完成下表內(nèi)容 酶名稱作用“縫合”雙鏈DNA片段的平末端膠原蛋白酶 獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（2）采用基因工程技術(shù)改良玉米的品質(zhì)時(shí)，選用大豆種子貯藏蛋白基因?yàn)槟康幕?。該目的基因與作為 的質(zhì)粒組裝成為重組DNA分子時(shí)，需要用限制性內(nèi)切酶和連接酶。為便于篩選獲得了目的基因的受體細(xì)胞，所用的質(zhì)粒通常具有 。將目的基因?qū)腚x體的玉米體細(xì)胞后，需要采用 技術(shù)才

25、能獲得具有目的基因的玉米植株。（3）動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有 、 、動(dòng)物細(xì)胞融合、 等，其中 是其他動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。16基因型為AaBb的水稻（含24條染色體）的花藥通過無菌操作接入試管后，在一定條件下形成試管苗，問：（1）愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)，愈傷組織形成過程中，必須從培養(yǎng)基中獲得_等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。（2）要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有_和_兩類激素。（3）愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過程必須給予光照，其原因是_能利用光能制造有機(jī)物，供試管苗生長(zhǎng)發(fā)育。（4）試管苗的細(xì)胞核中含_條脫氧核糖核苷酸鏈。17.右圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過

26、程，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用_技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。(2)若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自_,然后用_使其分散開來，A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞的手段是_ _，所形成的D稱為_(3)若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了_，注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的_生成了_。圖中B為_。(4)若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有_種，用來培養(yǎng)的D的細(xì)胞應(yīng)該是_。從中選擇出它的方法是_培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是_和_。六能力拓展一選擇題.下列關(guān)于各種酶作用的敘述，不正確的是（ ）。 A.D

27、NA連接酶能使不同脫氧核苷酸的磷酸與脫氧核糖連接 B.RNA聚合酶能與基因的特定位點(diǎn)結(jié)合，催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄.一種限制酶能識(shí)別多種核苷酸序列，切割出多種目的基因 D.胰蛋白酶能作用于離體的動(dòng)物組織，使其分散成單個(gè)細(xì)胞.現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(by）的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1酶單獨(dú)切得到400 by和600 by兩種長(zhǎng)度的DNA分用EcoRI,Kpnl同時(shí)酶切后得到200 by和600 by兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是（ ）。 .有關(guān)基因工程的成果及應(yīng)用的說法不正確的是（ ）。用基因工程方法培育抗蟲植

28、物和能抗病毒的植物 基因工程在畜牧業(yè)上應(yīng)用的主要目的是培育體型巨大、品質(zhì)優(yōu)良的動(dòng)物 任何一種假單孢桿菌都能分解四種石油成分，所以假單孢桿菌是“超級(jí)菌” 基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用主要是培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗逆性的農(nóng)作物A.B. C.D.不是基因工程方法生產(chǎn)的藥物是（ ）。 .干擾素 .白細(xì)胞介素 .青霉素.乙肝疫苗.下列既可以用于基因工程又可以用于細(xì)胞工程的是（ ）。.病毒 .氯化鈣 C.質(zhì)粒 D.聚乙二醇.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是（ ）。A纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理酶的專一性 B植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的全能性C原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合生物

29、膜的流動(dòng)性D紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞增殖7.蛋白質(zhì)工程的基本流程是（ ）。蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì) DNA合成 預(yù)期蛋白質(zhì)功能 推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列A.B. C. D.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的（ ）。A消毒滅菌 B適宜的溫度C充足的光照D適宜的養(yǎng)料和激素某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為錯(cuò)誤的是（ ）。比較內(nèi)容植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程A特殊處理酶解法去除細(xì)胞壁用胰蛋白酶處理后制成細(xì)胞懸浮液B融合方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法物理方法、化學(xué)方法C典型應(yīng)用人工種子、種間雜種植物單克隆抗體的制備D培養(yǎng)基

30、區(qū)別蔗糖是離體組織賴以生長(zhǎng)的成分動(dòng)物血清不可缺少10.通過細(xì)胞工程生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，要涉及到以下三個(gè)篩選過程： 在特定培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細(xì)胞 選出能產(chǎn)生抗體的效應(yīng)B細(xì)胞 選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細(xì)胞群。這三個(gè)過程的先后次序是（ ）。A. B. C. D.11.下列有關(guān)生物工程方面的敘述中，不正確的是(多選) （ ）。A葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，經(jīng)再分化過程可形成愈傷組織B培養(yǎng)流感病毒時(shí)應(yīng)選用無菌的牛肉湯C在青霉菌體內(nèi)獲取青霉素屬于基因工程的實(shí)例D基因工程、細(xì)胞工程都能克服遠(yuǎn)緣物種雜交障礙12.下列屬于單克隆抗體在實(shí)踐上應(yīng)用的實(shí)例是 (多選) （ ）。A將抗藥菌的某基因引入小鼠細(xì)胞內(nèi)B利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體，定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病C可用于遺傳病的治療D制成“生物導(dǎo)彈”，將藥物定向地帶到癌細(xì)胞所在部位13.下列轉(zhuǎn)基因生物與所運(yùn)用的目的基因正確是(多選) （ ）。A抗蟲棉Bt毒蛋白基因 B抗真菌立枯絲核菌的煙草抗毒素合成基因C耐寒的番茄抗凍蛋白基因 D抗鹽堿和干旱植物調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因二簡(jiǎn)答