土壤硝態(tài)氮的測定

1、土壤硝態(tài)氮的測定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO-,在紫外分光光度計波長 210nm處有較高吸光度， 而浸出液中的其它物質(zhì)，除OH、CQ2-、HCO、NQ和有機(jī)質(zhì)等外，吸光度均很小。將浸出液加酸中和酸化，即可消除OH、CO2-、HCO的干擾。NO-一般含量極少， 也很容易消除。 因此， 用校正因數(shù)法消除有機(jī)質(zhì)的干擾后， 即可用紫外分光光度法直接測定NO-的含量。待測液酸化后，分別在 210nm和275nm處測定吸光度。陽。是NO-和以 有機(jī)質(zhì)為主的雜質(zhì)的吸光度；A275只是有機(jī)質(zhì)的吸光度，因為NO-在275nm處已無吸收。但有機(jī)質(zhì)在275nm處的吸光度比在 210nm處的吸光度

2、要小 R倍，故將A275校正為有機(jī)質(zhì)在210nm處應(yīng)有的吸光度后，從 A210中減去，即 得NO-在210nm處的吸光度( A)。2、適用范圍本方法適用于各類土壤硝態(tài)氮含量的測定。3、主要儀器設(shè)備3.1 紫外可見分光光度計；3.2 石英比色皿；3.3 往復(fù)式或旋轉(zhuǎn)式振蕩機(jī)，滿足 180r/min 20r/min 的振蕩頻率或 達(dá)到相同效果；3.4 塑料瓶： 200mL。4、試劑4.IH2SQ溶液(1 : 9):取10mL濃硫酸緩緩加入 90mL水中。4.2 氯化鈣浸提劑c(CaCI 2)=0.01mol L-1:稱取2.2g 氯化鈣 (CaCl2 6H2O,化學(xué)純)溶于水中，稀釋至1L。4.3

3、硝態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液 p （N）=100mg L-1:準(zhǔn)確稱取 0.7217g經(jīng)105110C烘2h的硝酸鉀（KNQ,優(yōu)級純）溶于水，定容至1L,存放于冰箱 中。4.4硝態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)溶液p （N）=10mg L-1:測定當(dāng)天吸到 10.00mL硝態(tài) 氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液于100mL容量瓶中用水定容。5、操作步驟稱取10.00g 土壤樣品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化鈣浸提劑， 蓋嚴(yán)瓶蓋，搖勻，在振蕩機(jī)上于20 C25 C振蕩 30min（180r/min 20r/min） ，干過濾。吸取25.00mL待測液于50mL三角瓶中，力口 1.00mL1: 9 HSQ溶液酸化， 搖勻。用滴管將此液裝入1cm

4、光徑的石英比色槽中，分別在210nm和275nm 處測讀吸光值（A210和A275），以酸化的浸提劑調(diào)節(jié)儀器零點。以NO-的吸光值（ A）通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求得測定液中硝態(tài)氮含量。空白測定除不加試樣外， 其余均同樣品測定。NO-的吸光值（ A）可由下式求得： A= A210- A 275 X R式中R為校正因數(shù)，是土壤浸出液中雜質(zhì)（主要是有機(jī)質(zhì)）在210nm和275nm處的吸光度的比值。其確定方法為：A210是波長210nm處浸出液中NO-的吸收值（A210硝）與雜質(zhì)（主要是有機(jī) 質(zhì)）的吸收值（A210雜）的總和，即A210= A 210硝+ A 210雜， 得出A210雜=A 210- A 210

5、硝。 選取部分土樣用酚二磺酸法測得NO3 N 的含量后，根據(jù)土液比和紫外法的工作曲線，即可計算各浸出液應(yīng)有的A210硝值，即可得出A210雜。A275是浸出液中雜質(zhì)（主要是有機(jī)質(zhì)）在275nm處的吸收值（因為NO-在 該波長處已無吸收），它比A210雜小R倍，即A210雜=R *A275,得出校正因數(shù) R=Ae 雜/ A 275。各不同區(qū)域可根據(jù)多個土壤測定R值的統(tǒng)計平均值，作為其他土壤測 試NO- N的校正因數(shù)，其可靠性依從于被測土壤的多少，測定的土壤越 多，可靠性越大。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取10mgL-1NO- N標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.00、2.00、 4.00、6.00、8.00mL，用氯化

6、鈣浸提劑定容至 50mL，即為0、0.2、0.4、 0.8、1.2、1.6mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。各取 25.00mL于50mL三角瓶中，分 別加1mL1: 9 HSQ溶液搖勻后測 A210,計算 陽。對NQ- N濃度的回歸方程， 或者繪制工作曲線。6、計算結(jié)果土壤硝態(tài)氮， mg- kg-1= (N) V Dm式中：p (N)查標(biāo)準(zhǔn)曲線或求回歸方程而得測定液中NQ- N的質(zhì)量濃度，mg - L-1;V 浸提劑體積， mL(50mL);D 浸出液稀釋倍數(shù)，或不稀釋則D=1;m 土壤質(zhì)量，g。7、注釋土壤硝態(tài)氮含量一般用新鮮樣品測定，如需以硝態(tài)氮加銨態(tài)氮反映 無機(jī)氮含量，則可用風(fēng)干樣品測定。一般土

7、壤中NO-含量很低，不會干擾NO-的測定。如果NO-含量高時， 可用氨基磺酸消除(HNQ+NHSQH=N+H2SQ+H2O),它在210nm處無吸收，不 干擾NO-測定。浸出液的鹽濃度較高，操作時最好用滴管吸取注入槽中，盡量避免 溶液溢出槽外，污染槽外壁，影響其透光性。大批樣品測定時，可先測完各液(包括浸出液和標(biāo)準(zhǔn)系列溶液 )的A210 值，再測A75值，以避免逐次改變波長所產(chǎn)生的儀器誤差。如需同時測定土壤 NH+ N,可選用2 mol - L-1KCI或1 mol - L-1NaCI 溶液制備待測液。但 2 mol L-1KCI溶液本身在210nm處吸光度較高，因 此同時測定土壤 NH+ N和NQ- N時，可選用吸光度較小的 1 mol L-1NaCI 溶液為浸提劑。如果吸光度很高（A 1時），可從比色槽中吸出一半待測液， 再加一 半水稀釋，重新測讀吸光度，如此稀釋直至吸光