新藥臨床前毒理學(xué)評價(jià)

1、Contents 目的意義 急性毒性試驗(yàn)(acute) 長期毒性試驗(yàn)(chronic) 特殊毒性試驗(yàn)(遺傳、生殖、致癌) 其它毒性試驗(yàn)(過敏、刺激 etc.) 藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（GLP） SFDA新藥審評會 案例學(xué)習(xí) Acute Toxicity Test 概念、目的意義 傳統(tǒng)方法基本內(nèi)容和要求 有關(guān)問題 其它實(shí)驗(yàn)方法 Concept 動物單次或24h內(nèi)多次給予受 試物后，一定時(shí)間內(nèi)(14天) 所產(chǎn)生的毒性反應(yīng) 毒理研究早期階段進(jìn)行 目的意義(DO STAR) 毒性劑量 Toxic Dose 安全劑量范圍 Safety margin 毒性反應(yīng) Toxic reaction: 性質(zhì)、程

2、度、量 毒關(guān)系、產(chǎn)生、達(dá)峰、持續(xù)時(shí)間及反復(fù)產(chǎn)生 毒性反應(yīng)時(shí)間、遲發(fā)性、蓄積性、耐受性 尋找毒性反應(yīng)靶器官 Target Organ 毒性反應(yīng)是否可逆 Reversibility 解毒或解救措施 Antidote 確保臨床用藥安全(重點(diǎn)監(jiān)測指標(biāo)) 目的意義 q闡明藥物毒性作用及強(qiáng)度、計(jì)算 相對毒性參數(shù) q了解毒性靶器官 q為長毒、特殊毒性試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì) q為期臨床試驗(yàn)起始劑量選擇 q為臨床毒副反應(yīng)監(jiān)護(hù)提供參考 q其它 (DO STAR) OECD口服急性毒性分級 等 級LD50 高毒（Very Toxic)25 mg/kg 有毒（Toxic)25200 mg/kg 有害（Harmful)20020

3、00 mg/kg 不分級（Unclassified)2000 mg/kg 相對毒性參數(shù) 治療指數(shù)TI =LD50/ED50 安全系數(shù)SF=LD5/ED95 可靠或確實(shí)安全系數(shù)CSF =LD1/ED99 安全范圍SM=(LD1/ED99-1) X 100% SED50/ED50, 越大越安全 qLD5基本無害量 ED95基本有效量 qLD1肯定無害量 ED99肯定有效量 為臨床毒副反 應(yīng)監(jiān)護(hù)提供參考 中毒癥狀,起始、持續(xù)、恢復(fù)時(shí)間 中毒靶器官 對抗試驗(yàn)為臨床急救提供依據(jù) 為長毒等試驗(yàn)選 擇劑量提供依據(jù) 長期毒性劑量設(shè)計(jì) qLD50法 (1/10, 1/50, 1/100) qMTD法 ( 1,

4、1/3, 1/10) 生殖毒性試驗(yàn)高劑量為母鼠MTD 主要藥效學(xué)劑量限度、一般藥理學(xué)和藥 動學(xué)劑量設(shè)計(jì)也要參考急性毒性的LD50 為特殊毒性試驗(yàn) 選擇劑量提供依據(jù) 致突變試驗(yàn) q嚙齒類動物微核試驗(yàn)高劑量為 1/2 LD50 q果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)的高、低 劑量分別為1/2 LD50和1/4 LD50 q精原細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)高劑量 =1/2 LD50 短期致癌試驗(yàn)高劑量=MTD I 期臨床選擇起 始劑量提供參考 細(xì)胞毒類抗癌藥，I期臨床 起始劑量= 1/10 LD50 其 它 系列化合物的合格率分析(除理化性質(zhì)為主外) 也參考LD50 復(fù)方藥物的相互作用, 也可通過拆方及合用 的LD50來判別

5、相互作用性質(zhì) 比較不同途徑的LD50，獲得一些生物利用度信 息，為劑型開發(fā)提供參考 基本原則 執(zhí)行GLP 整體性 具體問題具體分析 階段性 隨機(jī)、對照、重復(fù) 方法公認(rèn) 動 物 獲得盡量多信息前提下，使用盡量少動物 嚙齒類-小鼠或大鼠 非嚙齒類-犬或猴 二種動物(嚙齒類及非嚙齒類) 小鼠18-22g; 大鼠120-150g; 犬用成年犬 初始體重不應(yīng)超過或低于平均體重的20% 各半 (勤儉辦事，服從命令) 受 試 物 工藝穩(wěn)定、符合臨床用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)明名稱、來源、批號、含量（或規(guī)格）、 保存條件及配制方法等，附質(zhì)檢報(bào)告 輔料、溶劑、試劑等應(yīng)標(biāo)明批號、規(guī)格和生 產(chǎn)廠家，符合試驗(yàn)要求 受 試 物 原

6、料藥 臨床擬用劑型 復(fù)方制劑：復(fù)方 + 拆方 (增毒？新毒？) 易降解：含降解產(chǎn)物量最高的受試物進(jìn)行 急毒試驗(yàn)，并與臨床樣品的急毒試驗(yàn)結(jié)果 比較 給藥途徑 臨床擬用途徑 + 原型藥物較完全進(jìn) 入循環(huán)途徑（如靜脈注射） 嚙齒類ig給藥前應(yīng)禁食12h，不禁水 劑量和分組 給藥劑量：未見毒性量嚴(yán)重毒性量 設(shè)空白和/或溶媒（輔料）對照 小動物4-6個(gè)劑量組, 組距0.65-0.85,求LD50 大動物可用50%等量遞升法(近似致死劑量法), 求出ALD和MTD，不必達(dá)到致死量 給藥容積 不等濃度等容量給藥 常規(guī)及最大給藥容量為: 動物給藥途徑 給藥量 小鼠 ig 0.2-1.0 ml/20g iv、i

7、p、sc 0.1-0.5 ml/20g 大鼠 ig1.0-2.0 ml/100g iv、ip、sc0.5-1.0 ml/100g 觀察指標(biāo)及時(shí)間 藥后4h內(nèi)詳觀, 后每天上下午各一,觀察14d 記錄毒性反應(yīng)、死亡情況, 中毒癥狀、發(fā)生時(shí) 間、持續(xù)時(shí)間、嚴(yán)重程度、恢復(fù)期及動物最短、 最長死亡時(shí)間 其它指標(biāo)：一般指標(biāo)、體重變化等 觀 察 指指 征征 可能涉及的器官、組織、系統(tǒng) . 鼻孔呼吸阻塞，呼吸頻率和 深度改變，體表顏色改變 A AE ECNS，感官，神經(jīng)肌肉等 .運(yùn)動功能：運(yùn)動頻率和特點(diǎn)的 改變 A AJ J CNS，感官，神經(jīng)肌肉等 .驚厥(抽搐)：隨意肌明顯的無 意識收縮或驚厥性收縮 A

8、 AE ECNS,CNS,呼吸衰竭,神經(jīng)肌肉,自主神經(jīng) .反射A AF F感官，神經(jīng)肌肉 .眼檢指征A AH H自主神經(jīng)；出血，感染 .心血管指征A AE E自主神經(jīng),CNS,心輸出量降低等 .唾液分泌 A A 自主神經(jīng) .豎毛 A A自主神經(jīng) .痛覺喪失 A A感官，CNS .肌張力A AB B自主神經(jīng)等 .胃腸指征A AB B自主神經(jīng)，胃腸動力等 .皮膚A AB B刺激性，炎癥，過敏等 急性毒性研究的一般觀察和指征 病理學(xué)檢查 大體解剖(瀕死動物+死亡動 物+存活動物) 組織病理學(xué)檢查: 體積、顏 色、質(zhì)地等改變時(shí) 結(jié)果處理 實(shí)驗(yàn)資料用Bliss法計(jì)算LD50。必要時(shí)求不同 性別LD50

9、表. XXX急性毒性結(jié)果及LD50計(jì)算 劑劑 量量 對數(shù)劑量對數(shù)劑量 動物數(shù)動物數(shù) 死亡動物數(shù)死亡動物數(shù) 死亡率死亡率 機(jī)率單位機(jī)率單位 LD50及可信限及可信限 (mg/kg) (X) (只只) (只只) % (Y) (mg/kg) 結(jié)果處理 劑量反應(yīng)、時(shí)間反應(yīng)關(guān)系 反應(yīng)可能涉及組織、器官或系統(tǒng) 肉眼病變和組織病檢，初步判斷 毒性靶器官 病檢報(bào)告應(yīng)附：病檢者簽名+單位 蓋章+病理照片 確定NOAEL、 MTD、ALD etc，初步判 斷受試物的安全范圍 綜合評價(jià) 判斷反應(yīng)與藥物作用相關(guān)性： q時(shí)間、發(fā)生率、劑量-反應(yīng)關(guān)系 q動物種屬及背景數(shù)據(jù) q病理學(xué)檢查結(jié)果 q同類藥物特點(diǎn) 安全范圍、毒性

10、嚴(yán)重程度及可恢復(fù)性 毒性作用靶器官 q毒性可能涉及部位 q大體解剖和組織病理學(xué)檢查結(jié)果 注意問題 光化學(xué)治療藥和輻射增敏劑急毒試驗(yàn) 照光 + 不照光分別測定LD50 復(fù)方(a+b)中各組分毒性相互作用評價(jià) 注意問題 充分重視預(yù)試 毒理學(xué)界對LD50看法 q 試驗(yàn)結(jié)果（信息）的一部分 q LD50測定不足： v動物消耗量大 v獲得信息有限 v測得數(shù)值不準(zhǔn) EPA Policies Discourages the use of the Classical LD50 test Uses Structurally Related Activities (SRA) to obviate the need

11、 for testing on animals Recommends the Limit test EPA Policies Beyond the Limit, recommends qapproximate lethal dose qthe up-and-down methods 近似致死劑量法(非嚙齒類動物) 6只健康Beagle犬或猴。犬6- 12 m，猴2-3 y 估計(jì)可能引起毒性和死亡的劑 量范圍。按50%遞增法，設(shè)計(jì) 出劑量序列表 First 最低致死劑量 最高非致死劑量 最低致死劑量 最高非致死劑量 OR 近似致死 劑量范圍 近似致死 劑量范圍 Second MTDMTD法 最大

12、允許濃度和最大允許容積仍未測出 LD50, 可只求MTD值 一次或24h多次(總量5g/kg)給20只動物 q觀察14d, 未見死亡, 則MTD XX g/kg; 個(gè)別死亡, 則寫成LD50 XX g/kg qiv要求 pH 5-8，速度：大、小鼠 10-20s qig時(shí)空腹, 即禁食12-16h左右 常用容量和最大容量(ml) 給藥 途徑 小 鼠 20 g 大 鼠 200 g 豚 鼠 400 g 家 兔 1.5 kg 犬 10 kg ig0.2-1.01.0-4.01.0-5.05.0-10.0 50-100 ip0.2-1.01.0-3.02.0-5.05.0-10.05-15 im0.1

13、-0.20.2-0.50.2-0.50.5-1.02-5 iv0.2-0.51.0-2.01.0-5.03.0-10.035-50 sc0.1-0.50.5-1.00.5-2.01.0-3.03-10 最大無毒性反應(yīng)劑量（no observed adverse effect level, NOAEL) ： 指受試物在一定時(shí)間內(nèi)，按一定方式與機(jī)體接觸， 用靈敏的現(xiàn)代檢測方法和觀察指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)損害作用的 最高劑量 最小毒性反應(yīng)劑量： 動物出現(xiàn)毒性反應(yīng)的最小劑量 最大耐受量（maximal tolerance dose，MTD）： 不引起受試動物死亡的最高劑量 最小致死劑量（minimal letha

14、l dose，MLD）： 引起個(gè)別受試動物出現(xiàn)死亡的劑量 半數(shù)致死量（median lethal dose, LD50）： 在一定試驗(yàn)條件下引起50%受試動物死亡的劑量。 長 期 毒 性 試 驗(yàn) Long-term Toxicity Study 目的意義 基本內(nèi)容和要求 有關(guān)問題 Mechanic? Innovative ? 目的意義(DO STAR) 毒性劑量 Toxic Dose 安全劑量范圍 Safety margin 毒性反應(yīng) Toxic reaction: 性質(zhì)、程度、量 毒關(guān)系、產(chǎn)生、達(dá)峰、持續(xù)時(shí)間及反復(fù)產(chǎn)生 毒性反應(yīng)時(shí)間、遲發(fā)性、蓄積性、耐受性 尋找毒性反應(yīng)靶器官 Target

15、Organ 毒性反應(yīng)是否可逆 Reversibility 解毒或解救措施 Antidote 確保臨床用藥安全(重點(diǎn)監(jiān)測指標(biāo)) 基本原則 執(zhí)行GLP 整體性 具體問題具體分析 階段性 隨機(jī)、對照、重復(fù) 方法公認(rèn) Procedure Animals Housing Drug Route Dosage Group Duration Index Recovery Time Report （動飼藥徑劑組 周指恢時(shí)報(bào)告） Animal in vitro體系篩選實(shí)驗(yàn)動物種屬或品系 理想動物 q對受試物生物轉(zhuǎn)化與人體相近 q對受試物敏感 q已有大量歷史對照數(shù)據(jù) Animals rodent non-roden

16、t rat beagle dog mouse monkey Animal 二種動物，嚙齒類首選大鼠，非嚙齒類用Beagle 犬, 必要時(shí)用猴、豬等 符合等級要求 來源、品系、遺傳背景清楚，有動物質(zhì)量合格證 大鼠6-9 w， Beagle犬6-12 m,體重CV20 各半 必要時(shí)，可用疾病模型動物進(jìn)行試驗(yàn) Duration 6m, natural death ( rat: 1y-15%, 1.5y-50%, 2y-70-80%) (勤儉辦事，服從命令） XXX 體外代謝種屬比較研究 代謝產(chǎn)物 Area(%) 人 猴 犬 大鼠 小鼠 M0 原形 84.7 63.2 47.6 86.2 78.5 M

17、1 去乙基 5.63 27.7 9.87 7.35 16.4 M2-1 羥基化 - 0.26 8.19 0.17 0.69 M2-2 羥基化 0.29 0.46 8.48 0.35 - 動物選擇 XXXX西地那非 已上市藥枸櫞酸鈉西地那非改酸根（化4） PDE5抑制劑，治療男性ED 選用雄性動物進(jìn)行下列試驗(yàn) 急性毒性（大鼠、小鼠） 安全藥理學(xué)（小鼠、犬） 須與已上市藥物進(jìn)行對比 （已上市藥需國外進(jìn)口或買不到時(shí)？） 動物選擇 治療HER2陽性乳腺癌藥物 治療婦女HER2陽性乳腺癌 用雌性動物進(jìn)行一般毒理學(xué)研究 廠家要求選用雌雄各半動物，何故？ 動物選擇 Housing T, humidity,

18、light, ventilation, animal feeds Rat: 5 /cage or separated， acclimation 1w Dog: TB test, anthelmintic acclimation: 1-2w / 1m 飼養(yǎng)管理 主要因素 動物類別 小鼠、大鼠豚鼠、家兔犬 溫度( )20-2618-2818-28 濕 度40-70%40-70%40-70% 換氣次數(shù)10-15次/h10-15次/h10-15次/h 氣流速度13-18cm/s13-18cm/s13-18cm/s 壓 力正 壓正 壓負(fù) 壓 潔 凈 度100000級100000級 落下細(xì)菌3個(gè)/皿3個(gè)/

19、皿 照 明150-300 Lux150-300 Lux 噪 聲60 db60 db 臭 氣氨濃度20 ppm氨濃度20 ppm Drug test article / solvent / excipient name, batch No. , source, specification, purity, preserve condition, etc same quality criterion Route 與臨床用藥途徑一致 臨床iv , 大鼠給藥1月，ip代替 im或sc應(yīng)變換注射部位 必要時(shí)改變給藥途徑但應(yīng)說明原因 模擬臨床給藥途徑 纖維蛋白膠：犬腹腔給藥 小兒止瀉貼劑：相當(dāng)于臍部給藥

20、途徑方式 Dose and Group 三個(gè)給藥組, 單位：mg (IU)/kg 或 mg (IU)/m2 不等濃度等容量給藥 低劑量組高于有效劑量，不出現(xiàn)毒性 中劑量組輕微或中等度毒性 高劑量組明顯/嚴(yán)重毒性，或個(gè)別動物死亡 空白對照溶媒或賦形劑 q 溶媒或賦形劑有毒性時(shí)則增加正常對照組 陽性對照 Dose and Group 大鼠各15只/組 大動物各5只/組 特例：等濃度不等容量給藥 白蛋白：療效與蛋白濃度有關(guān) 紫杉醇脂肪乳：乳劑的比例影響紫杉醇安全性 途徑方式 1 23 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 1 2 3 Ph1 Ph2

21、 Ph3 ON C6H5 O H C6H5O O O O OH H AcO HOH OH AcO C6H5 O Paclitaxel (Taxol) Correspond duration of clinical ad. with animal ad. clinical ad. durationanimal ad. duration 2 w1 m 2 w1 m3 m 3 m 6 m 3 m6 m (rat) 9 m (dog) duration 3m ad. 6 day weekly (Mon. to Sat. ) 藥物臨床療程 嚙齒類 非嚙齒類 可支持臨床研究階段 2周1個(gè)月 1個(gè)月1個(gè)月I

22、I期 3個(gè)月3個(gè)月III期（生產(chǎn)） 3個(gè)月 3個(gè)月3個(gè)月II期 6個(gè)月6個(gè)月III期（生產(chǎn)） 6個(gè)月 6個(gè)月6個(gè)月II期 6個(gè)月9個(gè)月III期（生產(chǎn)） 6個(gè)月 6個(gè)月9個(gè)月II期 6個(gè)月9個(gè)月III期（生產(chǎn)） 注：表中給藥期限均為最短給藥期限，不包括恢復(fù)期，均為完整試驗(yàn) Index-Clinical Examinations rodent non-rodent signs of ill health +pupil , T behavioral changes breath, sialosis reaction to treatment vomiting Dead or moribund ani

23、mal: necropsy within 1h Index-Hematology 受試物對造血系統(tǒng)有影響，應(yīng)重視骨髓檢查 細(xì)胞計(jì)數(shù) Red Blood Cell (RBC) 血紅蛋白 Hemoglobin(Hb) 紅細(xì)胞容積 Hematocrit (Hct) 平均紅細(xì)胞容積 (MCV) 平均紅細(xì)胞血紅蛋白 (MCH) 平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度 (MCHC) 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) Reticulocyte 白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類 WBC & DC 血小板計(jì)數(shù) Platlet 凝血酶原時(shí)間 Prothrombin Time (PT) Index-Clinical Chemistry 天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶 As

24、partate Aminotransferase (AST) 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶 Alanine Aminotransferase (ALT) 堿性磷酸酶 Alkaline Phosphatase (ALP) 肌酸磷酸激酶 Creatine Phosphokinase(CPK) 尿素氮 Blood Urea Nitrogen（BUN） 肌酐 Creatinine（Cr） 總蛋白 Total Protein（TP） 白蛋白 Albumin（Alb） 血糖 Glucose (Glu) 總膽紅素 Total Bilirubin（Tbill） 總膽固醇 Total Cholesterol（Tch） 甘油

25、三酯 Triglyceride (TG) -谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（非嚙齒類動物） -GT (non-rodent) 鉀離子濃度 K 氯離子濃度 Cl 鈉離子濃度 Na Index-Urinalysis 尿液外觀 Color and appearance 比重 Specific gravity pH 值 pH value 尿糖 Glucose 尿蛋白 Protein 尿膽紅素 Bilirubin 尿膽原 Urobilinogen 酮體 Ketones 潛血 Blood 白細(xì)胞 WBC 亞硝酸鹽 Nitrite 鏡檢* Microscopy of centrifuged deposit Index-Pat

26、hology稱重并計(jì)算系數(shù) 心臟 heart肝臟 liver 脾臟 spleen 肺臟 lung 腎臟 kidneys 腦 brain 腎上腺adrenals胸腺 thymus 睪丸 testes 附睪 epididymides 子宮 uterus卵巢 ovaries calculate organ weights relative to body weight , paired organs weigh together Index-Pathology病檢臟器組織 腦（大腦、小腦、腦干）脊髓（頸、胸、腰段） 垂體胸腺 甲狀腺甲狀旁腺 食管唾液腺 胃小腸和大腸 肝臟膽囊* 腎臟腎上腺 脾臟胰腺

27、 氣管肺 Index-Pathology病檢臟器組織 主動脈心臟 附睪睪丸 卵巢子宮 前列腺乳腺 坐骨神經(jīng)膀胱 眼（發(fā)現(xiàn)異常時(shí)）*視神經(jīng)* 給藥局部骨髓 淋巴結(jié)（包括給藥局部淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)） Index-Pathology heart liver spleen lung kidney brain adrenals pancreas stomach duodenum jejunum ileum colon cecum（盲） pituitary thymus spinal cord prostate testes epididymides uterus ovaries optic nerve

28、 injection site bone and marrow urinary bladder lymph nodes(mesenteric, local) thyroid & parathyroid lobes 臟器取材樣式（SOP) 肺臟 腦 01 肝臟 02 03 04 05 腎臟 膀胱 心臟 肺 06 脾臟 胸腺 07 甲狀腺 08 氣管 09 腦垂體 10胃 切片中組織排列和方向 IndexECG, Eye 大動物長期毒性必須做 ECG觀察指標(biāo)：心率、P 波電壓、P-R間期、R波 電壓、QRS時(shí)間、ST段、 T波電壓和Q-T間期 Recovery Observation : 1/31

29、/2 animal, 26w Late toxic reaction and reversibility Items : same as treatment period 測試次數(shù) 能反映動態(tài)變化 q一般行為、食量每天觀察記錄 q大鼠體重每周一次 q大動物生理指標(biāo)每半月一次 q大動物ECG 導(dǎo)聯(lián)，給藥前、給藥 期間、停藥及恢復(fù)期均要檢測 q發(fā)現(xiàn)有陽性指標(biāo)應(yīng)加大觀察密度 Observations Western Chinese Recombinant 34 times 2 times antibody 6m(rat) 9m(dog) Toxic reaction: properties, deg

30、ree, dose-toxicity relationship, initiating time，peak time, lasted time, late reaction toxicity, accumulating toxi- city, tolerance Frequency of lab. investigations rat單個(gè)動物，背景數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)數(shù) 據(jù)可參考 qNon-rodent：數(shù)量少、個(gè)體差異大，單個(gè)動物的 試驗(yàn)數(shù)據(jù)具有重要毒理學(xué)意義。須與給藥前、對 照組和背景數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，文獻(xiàn)數(shù)據(jù)參考價(jià) 值有限 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義并不一定有生物學(xué)意義 判斷因素 q數(shù)據(jù)

31、變化劑量反應(yīng)關(guān)系 q其他相關(guān)參數(shù)改變 q與歷史背景數(shù)據(jù)比較 q異常數(shù)據(jù)合理解釋 正確判斷毒性反應(yīng) 給藥組和對照組之間差異來源 q與受試物有關(guān)的毒性反應(yīng) q動物對藥物適應(yīng)性改變 q正常生理波動 判斷關(guān)注 q劑量反應(yīng)關(guān)系 q參數(shù)變化幅度和性別差異 q分析毒理學(xué)變化參數(shù)關(guān)聯(lián)和機(jī)制 q單個(gè)參數(shù)變化判斷應(yīng)慎重 q結(jié)合TK 毒性反應(yīng)對于臨床試驗(yàn)意義 種屬差異 無關(guān)毒性：高劑量， 非線性動力學(xué)代謝 特異反應(yīng) 難以檢測：頭痛、頭 昏、頭暈、腹脹、皮 膚搔癢、視物模糊 疑毒從有 機(jī)制研究（探索藥理/毒理信號通路） 鑒別新分子實(shí)體是否有新的藥理/毒理作用機(jī)制，加深 對藥物的認(rèn)識 與已有類似藥物作用比較，判斷是否屬

32、于新作用機(jī)制 采用多種先進(jìn)的生理、生化和分子生物學(xué)方法和技術(shù) 對機(jī)制進(jìn)行多層次研究 例：1971年美國頒布國家 癌癥法以來，前列腺癌、 肝癌、胰腺癌等發(fā)病率和/或 死亡率沒有明顯改變 Pfizer研發(fā)CETP抑制劑損失8億$ Torcetrapib的副作用源自脫靶效應(yīng) 輝瑞公司ILLUMINATE試驗(yàn)詳細(xì) 數(shù)據(jù)表明torcetrapib提高死亡率 可能源于其脫靶效應(yīng) 動物研究發(fā)現(xiàn)切除腎上腺，可以 阻斷torcetrapib的升壓效應(yīng)，驗(yàn) 證了醛固酮所起的作用 美國轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)協(xié)會的主席Bruce Littman指出，torcetrapib事件另 一個(gè)教訓(xùn)是，當(dāng)涉及到黑箱機(jī)制 時(shí)，尤其是與安全性有關(guān)

33、的問題 時(shí)，一定不要把所觀察到的問題 僅僅作為風(fēng)險(xiǎn)那么簡單 Nat Rev Drug Discov VOL 10 | MAR 2011 | 163 2011年立普妥專利到期 排名通用名商品名公司適應(yīng)癥 2009(億) 2010(億) 1阿伐他汀 立普妥輝瑞 高膽固醇血癥124.5114.0 輝瑞急切希望torcetrapib彌補(bǔ)2011年立普妥專利到期帶來的巨額損失， 過度擴(kuò)大了torcetrapib可能帶來的經(jīng)濟(jì)效益，偏離了研發(fā)的科學(xué)性 20102015，輝瑞至少失去18個(gè)藥物的獨(dú)家專利權(quán)。這些藥物2009年 銷售收入達(dá)256億美元，占總收入60% 2012年全球處方藥市場銷售20強(qiáng) 排名通

34、用名商品名2012年2011年2010年 1阿達(dá)木單抗修美樂937960 2沙美特羅舒利迭797986 3利妥昔單抗美羅華736551 4甘精胰島素來得時(shí)675347 5曲妥珠單抗赫賽汀645743 6立伐他汀拜斯亭626668 7英夫利西單抗瑞米凱德625561 8阿瓦斯汀貝伐單抗625756 9度洛西汀欣百達(dá)604239 10氯吡格雷波立維539888 單位：億美元 排名通用名商品名2012年2011年2010年 11依那西普423762 12非格司亭紐拉思塔424038 13普瑞巴林瑞卡4237 14西他列汀4133 15阿托伐他汀立普妥3996114 16埃索美拉唑耐信394484 1

35、7孟魯司特鈉順爾寧395555 18依非韋倫Atripla3632 19布地奈德和福莫特羅信必可3231 20 恩曲他濱和替諾福韋 富馬酸 TRUVADA3229 單位：億美元 2012年全球處方藥市場銷售20強(qiáng) 整體性綜合評價(jià) 結(jié)合藥學(xué)、藥理學(xué)、PK、TK和其它毒理學(xué)研 究(+臨床研究)，利弊權(quán)衡，綜合評價(jià) 找到：不良反應(yīng)、毒性靶器官、安全范圍、 臨床需重點(diǎn)檢測指標(biāo)及臨床監(jiān)護(hù)或解救措施 26 SCIENCE VOL 334 7 OCT 2011 人卵細(xì)胞培養(yǎng)出胚胎干細(xì)胞 Cell 153, 111, June 6, 2013 人卵細(xì)胞停滯于 減數(shù)分裂中期 目前還無法進(jìn)行 人類克隆 精子指導(dǎo)胚胎 早期發(fā)育 子代繼承父源 的DNA甲基化 圖譜，拋棄了 母源的圖譜， 精子中攜帶的 信息指導(dǎo)胚胎 的發(fā)育 Cell 153, 759772, May 9, 2013 The fourth mutation allowed the virus to spread more effectively, infecting ferrets in neighbouring cages. 3 MAY 2012 | VOL 485 | NATURE | 13 22 JUNE 2012 | VOL 336 | SCIENCE 22 J