輸血科標準操作規(guī)程SOP文件

1、血庫標準操作規(guī)程（ SOP）2013-01 修訂目錄第一章 血庫儀器標準操作規(guī)程第一節(jié)Dianafuge標準操作規(guī)程 3第二節(jié)80-2離心機標準操作規(guī)程 3第三節(jié)CU600型電熱恒溫水箱標準操作程序 4第四節(jié)SANYO MBR-107D （ H）貯血冰箱標準操作程序 4第五節(jié) Haier 低溫冰箱標準操作程序4第六節(jié) 海爾冰箱標準操作程序5第七節(jié) 醫(yī)院血庫管理軟件應用標準操作規(guī)程5第八節(jié) SJW 系列數碼恒溫血小板振蕩保存箱標準操作規(guī)程6第九節(jié) WGH-I 型數碼恒溫解凍箱標準操6第二章 血庫項目標準操作規(guī)程第一節(jié) 血樣采集和送檢、 血型復查及血源組織標準操作程序7第二節(jié) ABO & Rh （

2、 D）血型復檢標準操作規(guī)程 8第三節(jié) Rh 血型鑒定標準操作程序9第四節(jié) 紅細胞血型抗體篩查標準操作規(guī)程11第五節(jié) 抗人球蛋白試驗14第六節(jié) 血液交叉配血試驗標準操作規(guī)程15第七節(jié) 血液出庫 （發(fā)血） 標準操作規(guī)程17第八節(jié) 數據記錄及費用收取標準操作規(guī)程17第九節(jié) 血液申領、 入庫、 核對、貯存標準操作規(guī)程19第十節(jié) 血液報廢 （失效）標準操作規(guī)程19第十一節(jié) 輸血反應處理標準操作規(guī)程20第十二節(jié) 實驗室消毒和污物處理標準操作規(guī)程21第十三節(jié) 血庫交接班標準操作規(guī)程21第十四節(jié) 血液質量管理標準操作規(guī)程22第十五節(jié) 血庫夜班操作規(guī)范23第十六節(jié) 應急預案操作規(guī)程24第十七節(jié) 貯存式自身輸血（

3、 PABD ）標準操作規(guī)程26第十八節(jié) 臨床醫(yī)師用血申請操作規(guī)程28第十九節(jié) 臨床護士輸血操作規(guī)程28血庫標準操作規(guī)程第一章血庫儀器標準操作規(guī)程第一節(jié)Dianafuge標準操作規(guī)程一、Dianafuge標準操作規(guī)程（一） Dianafuge開/關機程序1開機把儀器電源開關撥到“I”（開）的位置，開始正確運行。2. 關機把儀器電源開關撥到“ 0”（關）的位置。（二） Dianafuge標準操作程序1. Dianafuge離心機應放置于水平臺桌上，電源（壓）須匹配。2. 離心機在離心前，先按|OPEN|，此時門蓋打開，放入檢測卡（需對稱放置），放入完畢后，用手把門蓋按下，然后按startI，離心機

4、開始轉動，10分鐘后自動報警開門蓋，取出卡片，最后把門蓋按下關好。、Diana-lncubator標準操作規(guī)程（一） Diana-Incubator開/關機程序1. 開機 按順序依次打開電源開關。（開）的位置，開始正確運行。 把儀器電源開關撥到“I”2. 關機把儀器電源開關撥到“ 0”（關）的位置。（二） Diana-lncubator標準操作程序1. Diana-lncubator孵育器應放置于水平臺桌上，電源（壓）須匹配。2. 孵育器的使用，用手開啟門蓋，放入檢測卡，按所需要的保溫（其溫度自動調節(jié)保 持為37C）時間，順時針旋轉選擇所需時間，至耐后會報警提示，開門蓋取出卡片后關蓋。第二節(jié)

5、CH80-2離心機標準操作規(guī)程一、CH80-2離心機開/關機程序1. 開機 插上電源 把電源開關撥到On位置，開始正確運行。2. 關機按依次順序把儀器電源開關撥到Off的位置。二、CH80-2離心機標準操作程序1. 電源開關撥到On位置2 .離心試管需等重量對稱放置。3. 按時間開關調至所需離心時間。4 .再把轉速開關調至所需離心轉速。5.按啟動，開始正確運行。5.停止運轉后取出標本。第三節(jié) CU600型電熱恒溫水箱標準操作規(guī)程CU600型電熱恒溫水箱標準操作程序1. 在水箱內加入清潔溫水至總高度1/22/3處。2. 接通電源，選擇工作溫度。說明操作顯示備注設定工作溫度按“ SET”鍵37.0

6、預先設定溫度值顯示閃爍增加設定溫度值按“ + ”鍵52.5數值增加，顯示閃爍減少設定溫度值按“-”鍵30.0數值減少，顯示閃爍確定工作溫度按“ SET”鍵25.0新設定溫度儲存后，顯示箱內溫度3水槽進入升溫狀態(tài)，加熱指示燈亮。當箱內溫度接近設定溫度時，加熱指示燈閃爍,到達設定溫度后，控制進入恒溫狀態(tài)。4. 水浴箱工作溫度波動范圍應控制在土1C左右，定期用校正過的溫度計進行校正。5水浴箱內外應保持清潔，每周定期清洗更換清水，經常保持水箱內水質干凈。第四節(jié) SANYO MBR-107D （H ）貯血冰箱標準操作規(guī)程SANYO MBR-107D （H ）貯血冰箱標準操作程序i接通電源，把電源開關撥到

7、 On位置，開始正確運行。2. 溫度控制在26C范圍內，實際運行溫度在4C左右，工作溫度波動范圍應控制在 1C以內，定期（時）用校正過的溫度計進行校正。3. 溫度每天記錄四次（晨 8時、上午11時，下午4時、晚8時）的溫度，如溫度超出 正常范圍，警報器會自動報警，須及時進行處理。4. 每月對貯血冰箱內的溫度芯片進行檢查并作記錄于電腦中，以免查詢。5貯血冰箱內外應保持清潔，嚴禁存放他物；每周清洗消毒一次，用2%戊二醛溶液或施康1（ 1: 100）消毒；每月冰箱內空氣培養(yǎng)一次。無霉菌生長或培養(yǎng)皿（90mm）細菌生長菌落8CFU/10分鐘或200 CFU/M3為合格，結果須登記在記錄本上。第五節(jié) H

8、aier低溫冰箱標準操作規(guī)程Haier低溫冰箱標準操作程序1接通電源，把電源開關撥到On位置，開始正確運行。2. 溫度控制在-30C左右范圍內，實際運行溫度波動范圍應控制在-32 C 3左右，定期 （時）用校正過的溫度計進行校正。3. 溫度每天記錄四次（晨 8時、上午11時，下午4時、晚8時）的溫度，如溫度超出 正常范圍，警報器會自動報警，須及時進行處理。4. 每月對低溫冰箱內的溫度芯片進行檢查并作記錄于電腦中，以免查詢。5. 定期進行化霜清洗消毒。第六節(jié)海爾冰箱標準操作規(guī)程海爾冰箱標準操作程序i 接通電源，把電源開關撥到on位置，開始正確運行。2. 溫度控制在28C左右范圍內，實際運行溫度波

9、動范圍應控制在5C 2左右，定期 （時）用校正過的溫度計進行校正。3. 溫度每天記錄兩次（上午 8時，下午4時）的溫度，如溫度超出正常范圍，須及時 進行處理。第七節(jié)醫(yī)院血庫管理軟件應用標準操作規(guī)程醫(yī)院血庫管理軟件應用標準操作程序一、開機1. 接通電源，開主機按下電源開關，同時按Ctrl+Alt+Delete 按回車。2. 雙擊醫(yī)院用血管理信息系統(tǒng)，輸入本人的工號一一按回車鍵一一再回車一一醫(yī)院血 庫管理軟件系統(tǒng)。二、血液入庫點擊入庫一一點擊新增，輸入血卡號、血袋號、血型、血液類別、血量、采血日期，保 存即可。三、患者檔案建立在配發(fā)血前自先將患者檔案輸入電腦內。點擊【患者檔案】出現患者登記菜單一一

10、點擊新增進入第二聯患者登記菜單，然后輸入患者檔案，保存。再輸入其他患者檔案至輸完為止。如門診病人，可以輸入就診卡號。四、交叉配血帶有紅細胞的血液均需做血液交叉配血試驗直接點擊配血一一出現配血操作菜單一一選擇入院類型一一輸入患者住院號、用激光 掃描儀，掃描血袋號條形碼，出現配血菜單，輸入配血方法等（已有默認結果）一一按確定，然后再掃描第二或第三個助血員的血袋號條形碼，一一按確定一一保存一一取消（不打配血收費單時）一一退出。五、出庫（發(fā)血）直接點擊出庫，出現發(fā)血操作菜單一一選擇入院類型一一輸入住院號、用激光掃描儀， 掃描血袋號條形碼，再掃描第二或第三個血袋號條形碼，一一點擊配血單一一打印血液交叉配

11、合試驗報告單一一點擊反饋卡一一打印患者輸血不良反應反饋單一一再保存一一取消（不打收費單時）一一退出。血漿、血小板不需要配血的血液發(fā)血，直接點擊出庫，并按以上進行操作。第八節(jié) SJW系列數碼恒溫血小板振蕩保存箱標準操作規(guī)程SJW系列數碼恒溫血小板振蕩保存箱標準操作規(guī)程1. 開機 打開電源開關。 把儀器電源開關撥到“I”（開）的位置，開始正確運行。 打開門，把振蕩箱電源開關撥到“I”（開）的位置，振蕩箱開始振蕩運行，并顯示箱內溫度22 2 C。 拉開抽屜，把血小板袋平整放入，注意不要外露，以免箱體在運行時夾破血小板袋。 然后，關上抽屜和門讓其運行。2關機按依次順序把振蕩箱電源開關撥到“ O（關）的

12、位置，振蕩箱停止運行，然后關門，再 把儀器電源開關撥到“ 0”（關）的位置。3. 消毒按下消毒鍵，打開電源開關，系統(tǒng)進入消毒狀態(tài)（設為 20分鐘） ，消毒完畢后，先關消 毒鍵，再關閉電源開關。第九節(jié) WGH-I 型數碼恒溫解凍箱標準操作規(guī)程WGH-I 型數碼恒溫解凍箱標準操作規(guī)程1開機 水箱內注入清水； 按順序依次打開電源開關。2融化周期 裝載：將冷凍血漿袋套進外包裝袋，掛到籃架上； 編程：設定融化周期時間，按下啟動鈕； 振蕩：掛籃降入水箱中，開始振蕩周期； 上升：融化周期結束后，掛籃自動升出水面。3清潔 每周定期清洗更換清水，經常保持水箱內水質干凈。第二章 血庫項目標準操作規(guī)程第一節(jié) 血樣采

13、集和送檢、標本核收、血型復查及血源組織標準操作程序 一、血樣采集和送檢與輸血申請單核收 標準操作程序采集血樣1 采血護士 : 采集配血血樣，護士要求必須有初級以上護士職稱，實習 / 進修護士不得 單獨進行。2. 明確病人用血申請， 核對病人信息： 姓名、 性別、 年齡、 住院號、 科別、 床號等信息。3. 準備采血材料，并明確以下內容。 正確的標本：取材正確； 正確的標本量：血型復查（血交叉）標本抽取 3ml; 正確的標識： 條形碼號標簽或手工書寫標簽，但必須明確標明姓名、 科室床號、 住院 號。4 采集血樣過程： 確保在采集血樣時，床邊正確的核對患者； 正確地給血樣試管貼標簽：血樣采集后，

14、在床邊給血樣貼標簽， 而不應該事先貼好標簽或到護士站后貼標簽； 第一次輸血，應同時采集輸血前五項檢測血樣，并記錄抽取時間入病歷。5. 采血樣完成后， 再次核對血樣標識與申請單信息， 無誤后送輸血科， 并進行護理記錄。6. 質量標準要求： 正確完整的血樣標識，與申請單一致； 正確地核對與采血過程； 標本無溶血、不能在輸液處采集血樣； 正確地記錄。送收血樣1 送血樣人員必須是醫(yī)護人員，嚴禁患者家屬送血樣。2 血樣送到輸血科后應由送血人員和輸血科人員一起核對以下信息： 血樣信息與申請單信息是否一致； 核對查看申請單的完整性 （必須有血常規(guī) +血型結果） 、血樣標識的完整性 （必須內容 齊全、文字清楚

15、） ； 血樣標本量、有無溶血； 雙方核對，無誤后簽字交接。3. 有以下情況，輸血科拒絕收血樣： 血樣標識不完整； 血樣無標識； 標本量不足、血樣質量有問題； 無輸血申請單或申請單上無血常規(guī)+血型的結果。4. 質量標準要求 血樣信息完整無誤； 血樣質量符合要求及采集量正確。血型復查核收1 核對：按要求核對輸血申請單與血標本上的全部內容，并在標本接收簿中作記錄；2 核收：在檢驗之星中，進行血型復查醫(yī)囑的核收；3血型復檢及不完全抗體測定（具體操作詳見有關章節(jié)）；4核對輸血申請單、血標本、病歷中的姓名、住院號、血型(如與原始血型不相符時， 必須重新抽取病人標本檢測) ，正確無誤后，報告其血型復查和抗篩

16、結果，作記錄；5輸血申請單按血型類別在文件夾中放置；血型復查后的標本，按先后次序放在試管 架中。二、血源組織 1對臨床醫(yī)師申請用血種類、用血量進行了解核實，提前備好相應血源； 3 血庫存量組織，要求每日存量必須保持在周用血量的1/2；當發(fā)生重大事件急需大量血液時，按照急診用血應急預案執(zhí)行3特殊血液組織 緊急用血時， 血庫人員在接到特殊用血申請單時， 應在第一時間先向市中心血站報告 用血種類、用血量和用血時間等； 非緊急用時，按規(guī)定須提前 1天預約，由血庫值班人向血站報告； Rh(D) 陰性和其他稀有血型患者的輸血 擇期手術病人輸血：當臨床遇到稀有血型患者后，應對患者家庭成員、兄弟姐妹進行篩選，

17、符合者到血站體檢獻血，并填寫稀有血型用血申請單 。組織到血源后，臨床再擇 期手術用血；急診搶救病人緊急輸血：按衛(wèi)生部臨床輸血技術規(guī)范第十五條Rh(D )檢查可除外。也可采用自身輸血、 同型輸血或配合型輸血。 對緊急輸用配合型血液時，由經管醫(yī)師向 患者或其家屬(代理人)講明，征得同意后方可輸用，由醫(yī)患雙方共同簽字并載入病歷； 具體實施可按照稀有血型及應急用血管理條款執(zhí)行 特殊血液預約的信息反饋與記錄。 注：特殊血液是指：單采血小板、洗滌紅細胞、冷沉淀、輻照血、Rh(D) 陰性和其他稀有血型血液等第二節(jié) ABO & Rh (D )血型復檢標準操作規(guī)程ABO & Rh (D )血型復檢標準操作程序抗

18、 A 、抗 B 、抗 D 血清定型(試管或玻片法)標準操作程序【方法原理】1 ABO 血型：根據紅細胞上有或無 A 抗原或 /和 B 抗原，進行紅細胞凝集試驗。正定 型，是用已知抗 A 和抗 B 分型血清來測定紅細胞上有無相應的 A 抗原或 /和 B 抗原；所 謂反定型，是用已知 A細胞和B細胞來測定血清中有無相應的抗一 A或/和抗一B。2. Rh (D)血型：用抗D血清進行鑒定，則凡帶有 D抗原者稱為Rh ( D)陽性，不帶 D抗原者稱為Rh ( D)陰性?！緲吮静杉吞幚怼? .標本采集：常規(guī)靜脈采血 3ml 于 EDTA.K2 。2標本保存：室溫放置不超過 8小時，4C保存不超過72小時

19、，無溶血現象。【試劑】1. 抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體 長春博德)2. Anti-D (IgM) Biotest 。3. 5%及 0 型試劑紅細胞鹽水懸液，制備方法見附注?！静僮鞑襟E】1 取小試管3支（或玻片一張劃成三等分），分別標明抗A、抗B、抗D，用滴管分別 加抗A、抗B、抗D分型血清各1滴，再以滴管分別加受檢者 5%紅細胞（取1滴壓積紅細 胞加16滴生理鹽水）懸液 1滴，混和。2另取小試管3支（或玻片一張劃成三等分），分別標明A、B、O細胞，用滴管分別 加入受檢者血清1滴，再分別滴加 A、B、O型5%試劑紅細胞懸液1滴，混和。3. 立即以1000r/min離心1min （或將玻片不

20、斷輕輕轉動，使血清與細胞充分混勻，連 續(xù)約 15min ）。4. 將試管輕輕搖動，先以肉眼觀察有無凝集（或溶血）現象。如肉眼不見凝集，應將 反應物倒于玻片上，再以低培鏡檢查。5. 觀察結果時既要看有無凝集，更要注意凝集強度，此有助于A、B亞型、類B或cisAB 的發(fā)現。6. 凝集強度判斷標準：4+=紅細胞凝集成一大塊，血清清晰透明。3+=紅細胞凝集成數小塊，血清尚清晰。2+=紅細胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細胞。1+=肉眼可見大顆粒，周圍有較多游離紅細胞。 =鏡下可見數個紅細胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細胞。MF=混合凝集外觀（mixed field ）是指鏡下可見少數紅細胞凝集，而極大

21、多數紅細胞仍 呈分散分布。表示陰性，鏡下未見凝集，紅細胞均勻分布。見表2 1表2 1 ABO血型正反定型結果分型血清+受檢者紅細胞受檢者血型受檢者血清+試劑紅細胞抗一A抗一B抗一A+BA細胞B細胞0細胞+ +A + + +B+ 一 一 一O+ + + + +AB一 一 一注：+ =凝集；=不凝集。7. “ AB注意冷凝集或自身凝集，可以在37 C水浴中鑒別。&血型復查結果輸入檢驗之星中，核對后審定報告。第三節(jié)RhD血型鑒定標準操作程序RhD血型鑒定標準操作程序RhD血型系統(tǒng)通過輸血或妊娠可產生免疫性抗體，當遇到相應抗原，可致溶血反應或新 生兒溶血病。若誤診誤治，可導致患者殘廢或死亡。臨床輸血時

22、，一般需作助血型鑒定。一、RhD血型鑒定標準操作程序【原理】應用血凝試驗檢測紅細胞抗原。RhD血型是由紅細胞表面是存在或缺失D抗原確定。D抗原于細胞株BS226細胞產生的單克隆抗體發(fā)生特異性反應。【試劑】RhD (IgM)血型定型試劑盒(單克隆抗體)【操作】1 .鹽水法 取小試管(10mm 60mm)1支，蠟筆標記，加試劑 1滴，再加人5%受檢者紅 細胞1滴，混勻，1000r/min離心1min觀察結果。2. 對照管 用蠟筆標記陽性和陰性，分別加人抗D血清(IgM) 1滴，陽性對照管加 Rh陽性紅細胞1滴，陰性對照管加 Rh陰性紅細胞1滴，混勻，1000r/min離心1min觀察結果。3. 結

23、果判定 如陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，受檢管凝集，即表示受檢者紅細胞 上有相應抗原；受檢管不凝集，即表示受檢紅細胞上沒有相應抗原?！靖阶ⅰ? .單克隆IgM Rh抗血清有商品試劑供應，可用鹽水介質做凝集試驗。抗血清(IgM) 1滴，加5%受檢者紅細胞懸液1滴，混合，置7C水浴1h,觀察凝集反應。2 .如臨床上只要求檢查是否為Rh(D)陽性還是陰性，只需用抗D血清進行鑒別。如結果為陰性，則應進一步檢查排除弱03. 在我國漢族人群中， Rh陽性占99.66%, Rh陰性占0.34%。4. 陽性對照可取3人0型紅細胞混合配成。陰性對照不易得到，一般設計方法為正常AB型血清1滴，加5% D陽性紅

24、細胞懸液1滴和菠蘿酶試劑混勻，與受檢管一同置7C水浴1h。5 . Rh血型鑒定應嚴格控制溫度與時間，因Rh抗原、抗體凝集反應時，凝塊比較脆弱，觀察反應結果時，應輕輕側動試管，不可用力振搖?！炯訇栃苑磻蚍治觥? .試劑中存在具有其他特異性的抗體 (指不完全D抗體)，因此，對疑難抗原定型時， 建議用不同來源的抗血清同時做兩份試驗， 因為使用兩份特異性相同的抗血清得到不一致的 結果時，就會使檢查人員意識到有進一步試驗的必要。2 .多凝集紅細胞與任何人血清都會發(fā)生凝集。3 .當用未經洗滌的細胞做試驗時，試樣中的自身凝集和異常蛋白質可能引起假陽性結 果。4 .試劑瓶可能被細菌、外來物質或其他抗血清所

25、污染?！炯訇幮苑磻蚍治觥?. 搞錯抗血清，每次試驗時應細心核對抗血清瓶子上的標簽。2 .試管中漏加抗血清，在加人細胞懸液之前，必須檢查試管中有無抗血清。3 .未遵照抗血清使用說明書做試驗，如抗血清和細胞間的比例以及溫育的溫度和時間 不正確。4 .抗血清保存不妥，試劑中的免疫球蛋白變質。二、弱D (weaK D)型鑒定標準操作程序【原理】根據美AABB技術手冊第12版(1996)規(guī)定：D “這術語不再使用，攜帶弱的 D抗原的紅 細胞仍被歸類為 D陽性，稱之“弱 D( weaK D)”。原稱之“ D紅細胞一部分具有與正常 D 陽性紅細胞同樣性質的 D抗原，只是D抗原數量減少；另一部分原“ D”

26、紅細胞D抗原與正 常D抗原相比缺少正常 D抗原中1個或多個抗原表位。弱D型紅細胞與某批或幾批抗D血清在鹽水介質及酶試驗中不發(fā)生凝集，但在間接抗人 球蛋白試驗中均發(fā)生凝集。因此，當用酶試驗檢查發(fā)現與抗 D 不凝集時，不應輕率地定為 Rh陰性，需進一步排除弱 D型的可能。【試劑】1. 抗D血清不同生產單位或批號不同的抗D血清35個。2 抗人球蛋白血清。3 . 1%菠蘿酶溶液。4 . 5%受檢紅細胞懸液?！静僮鳌? 將受檢者紅細胞分別與各批抗D血清作間接抗人球蛋白試驗 （方法見本章第四節(jié)）。2 將受檢者紅細胞分別與各批抗D血清作酶試驗（方法見本章第五節(jié)）?！窘Y果判定】受檢紅細胞與各批抗 D血清在酶試

27、驗中都不凝集或只與其中1批或數批抗D血清凝集,但在間接抗人球蛋白試驗中都凝集者，都屬弱D型細胞?！靖阶ⅰ?. 在臨床輸血中，弱 D型人經輸注D陽性紅細胞后可產生抗 D抗體。所以受血者若為 弱D型，應作Rh陰性論，應輸注 Rh陰性血液；供血者為弱 D型者，應作 Rh陽性論，不應 當輸血給Rh陰性的受血者。2. 弱D型婦女與Rh陽性丈夫生育的嬰兒可能發(fā)生新生兒溶血病。第四節(jié) 紅細胞血型抗體篩查標準操作規(guī)程紅細胞血型抗體篩查標準操作程序紅細胞血型抗體檢查適用于下列情況：1. ABO 血型鑒定發(fā)現受檢者血清中有 ABO 血型以外的抗體時；2. 供血者血清抗體篩檢；3. 輸血前受血者血清抗體檢查；4.

28、輸血后溶血性輸血反應疑為由同種抗體引起時；5. 孕婦血清的抗體檢查；6. 新生兒溶血病嬰兒血液中抗體檢查；7. 直接抗人球蛋白試驗陽性紅細胞上抗體檢查。篩查方法一、鹽水介質法：【方法原理】有些抗體能凝集鹽水混懸的紅細胞。這些抗體通常是IgM類抗體，其中許多在 22C下反應最好。在室溫下有活性而在 37 C無活性的抗體是沒有什么臨床意義的。對患者或供血 者的血樣不需要用這種方法。在 37 C下也有活性的樣本（如抗Kell，抗D）是有臨床意義的， 而這些抗體通?？捎每谷饲虻鞍自囼灪兔讣夹g來檢查?！驹噭?. 試劑紅細胞： 由血型參比實驗室或血液中心提供， 或由各血庫從供血者或工作人員 中進行普查得

29、到。 篩查紅細胞以 2 個或 3 個人抗原互補的不同的紅細胞為 1 套，單獨分開分 裝，因為單一的篩查紅細胞較混紅細胞提供較高的敏感性。因為許多抗體同雙倍量抗原 （純合子）的紅細胞反應比同單倍量抗原 （雜合子 ）的紅細胞 反應要強得多， 而不可能得到的都是純合子紅細胞， 因此， 篩查紅細胞的抗原組成必須是互 補，經提供盡可能多的必要的抗原。篩查紅細胞大多不包括低頻率抗原， 所以不可能檢出低頻率抗體。 這種抗體只有在抗體 鑒定時被測到，或在交叉配血時被發(fā)現，或在新生兒出生后出現黃疽時被發(fā)現。每一組篩查紅細胞中至少有常見的抗原，而且是互補的。 如果某種抗體只能與一種特定抗原的純合子細胞起反應， 而

30、篩查紅細胞上這種特定抗原 是雜合子，則該抗體可能被漏檢。合適的純合子表現型的供血者是很少的， 為了提供有重要抗原的純合子細胞， 需要使用 來自 3 個供血者的紅細胞。2血清標本：雖然血清和血漿中存在相同的紅細胞抗體，但一般都采用血清進行抗體 檢查。因為： 如果血漿中的凝血系統(tǒng)發(fā)生部分激活，就可產生纖維蛋白，干擾對凝集的解釋； 只有通過激活補體的作用才能證實的抗體，不能在血漿中檢出； 常用的抗凝劑是結合 Ca2+來防止凝固，而 Ca2+對于補體的激活是必不可少的。血清標本的采取時間應注意： 例如， 受血者血樣一定要在 48h 內采集。 為了檢出由于最 近紅細胞刺激而產生的抗體， 血樣必須是新近的

31、。 如果抗體篩查結果陰性， 有時需要隔數天 后重新采樣復查，因為此時抗體的濃度可逐漸增強。每一樣本應詳細記錄病史，包括姓名、性別、年齡、民族、妊娠史、輸血史，使用過 哪些藥物 （如甲基多巴、青霉素、先鋒霉素等 ）、采樣日期、有無抗凝劑、抗凝劑的種類和劑 量、血液樣本的外觀、有無溶血、黃疽以及紅細胞比積等?！静僮鞑襟E】1取受檢者血清 2 滴于標好的試管中。2取 2%試劑（篩查）紅細胞懸液l 滴于每個試管中，混和。3. 1000r/min離心1min （離心速度和時間應按質控規(guī)定）。4觀察溶血和凝集反應，記錄結果。5. 按需要置室溫（2224C）溫育1530 min。6. 離心，觀察溶血和凝集，并

32、記錄結果。溶血或凝集都是陽性結果。7. 報告結果于檢驗之星中。二、凝聚胺法【方法原理】利用低離子介質（ LIM ），降低介質的離子強度，減少紅細胞周圍的陽離子云，以促進 紅細胞和血清（漿）中的抗體結合。加入凝聚胺可使紅細胞產生非特異性的凝聚。最后，加 入懸浮液， 具有中和凝聚胺的作用， 使正常紅細胞非特異性凝集散開， 試驗結果為陰性；但 紅細胞被相應的抗體致敏，則會被凝聚胺凝結，凝集就不會散開，試驗結果為陽性。【標本采集和處理】1 .標本采集：常規(guī)靜脈采血于分離膠/促凝劑管（血清） 、或靜脈采血 3ml 于 EDTA.K2（血漿），一般采用血清進行抗體檢查。2. 血清標本的采取時間：要求受檢者

33、血樣一定要在輸血前3天內采集，血樣必須是新 近的。3. 標本分離保存：血清及早分離防止溶血，可冷凍保存，如用冰凍血清作抗體檢查， 融化后的樣本要充分混和，反復凍融的標本不能供抗體鑒定用?！驹噭?. 抗體篩查I、川細胞。2. 凝聚胺試劑：低離子介質（ LIM ）、凝聚胺（ Polybrene ）、懸浮液（ Resuspending ）。3. 35血細胞懸液：取多個“ O型人紅細胞，經生理鹽水洗滌三次，配成35%紅 細胞懸液?！静僮鞑襟E】1. 準備樣本，患者血清（血漿）、抗體篩查I、n、川細胞或35%紅細胞懸液。2. 取小試管2支，各加被檢血清（漿）2滴，分別加入35%篩檢紅細胞1滴或I和 H細

34、胞 50ul （0.8%）。3. 各加入 LIM0.7ml ，混合后，加凝聚胺 Polybrene2 滴，并混合。4. 以3400rpm，離心10秒，把上清液倒掉，輕輕搖動試管，目測紅細胞有無凝集，如 無凝集，則必須重作。5. 最后加入懸浮液 Resuspending2 滴，輕輕轉動試管混合并觀察結果。如凝集散開， 表示由凝聚胺引起的非特異性凝集， 抗體篩檢結果為陰性。 如凝集不散開， 則紅細胞抗原抗 體結合的特異性反應，抗體篩檢結果為陽性，應進一步作抗體鑒定。6 .報告結果于檢驗之星中。五、微柱凝膠法 【方法原理】利用凝膠過濾技術和離心技術，抗體篩查細胞上有特定的抗原，抗原可以和相應的抗 體

35、結合。當待檢血清（漿）樣本中有不完全抗體時，抗體篩查細胞和待檢血清（漿）中不完 全抗體可專一性的結合。 抗人球蛋白可結合抗體， 通過橋介作用使細胞凝集。 凝集發(fā)生說明 血清（漿）中有不完全抗體。【標本采集和處理】1. 標本采集：常規(guī)靜脈采血于分離膠 /促凝劑管（血清） 、或靜脈采血 3ml 于 EDTA.K2 （血漿），一般采用血清進行抗體檢查。2. 血清標本的采取時間：要求受檢者血樣一定要在輸血前3 天內采集，血樣必須是新 近的。3. 標本分離保存：血清及早分離防止溶血，可冷凍保存，如用冰凍血清作抗體檢查， 融化后的樣本要充分混和，反復凍融的標本不能供抗體鑒定用?！驹噭?. 抗體篩查I、川

36、細胞。2. 抗人球蛋白檢測卡。3. 35血細胞懸液：取多個“ O型人紅細胞，經生理鹽水洗滌三次，配成35%紅 細胞懸液?！静僮鞑襟E】1. 準備樣本，患者血清（血漿）、抗體篩查I、n、川細胞或35%紅細胞懸液。2. 標記抗人球蛋白檢測卡、姓名、住院號、標明I、n、川。3. 微柱中加 50ul 待檢樣本血清（漿） 。4. 加抗體篩查I、n、川細胞各50ul （ 0.8%） o5. 37C 15分鐘，離心 10分鐘。6讀結果和記錄。離心時，凝集塊不能通過凝膠間隙而留在凝膠上層，呈陽性反應。 未凝集血細胞離心時可通過凝膠間隙而沉積在凝膠管底部，呈陰性反應。7報告結果于檢驗之星中?！靖阶ⅰ? .判讀試驗

37、結果常用的代號是 :4+: 一個結實的凝集塊。3+:幾個大的凝集塊。2+:中等大的凝塊，背景清晰。1+：小凝集塊，背景混濁。士：微小凝集塊，背景混濁。O無凝集或溶血。PH表示部分溶血，有一些細胞殘留。H:表示完全溶血，無殘留細胞。2抗體篩查試驗結果的解釋 抗體篩檢試驗是很有價值的， 但也有其局限性。 一個陰性試驗不一定意味著這一血清中 沒有抗體， 而只是在使用這些技術時， 缺乏與篩查細胞起反應的抗體。 如果臨床資料和其他 實驗室所見提供了另外的線索，就應擴大常規(guī)篩查方法。例如，如果ABO正反定型不符，就應在室溫下做抗體篩查。如疑為溶血性輸血反應、新生兒溶血病或自身免疫性溶血性貧血， 有必要做酶

38、試驗或以放散液做篩查，以證明引起疾病的抗體。第五節(jié) 抗人球蛋白試驗抗人球蛋白試驗標準操作程序【方法原理】抗人球蛋白試驗(antiglobulin test, AGT) 又稱Coombs試驗，是檢查不完全抗體的一 種很好的方法、將抗人球蛋白血清(a ntiglobuli n serum,AGS)加入已經致敏的紅細胞鹽水懸液中，紅細胞表面的抗體球蛋白 (即使其致敏的不完全抗體 )與抗人球蛋白血清中的抗體發(fā) 生特異性反應， 使紅細胞發(fā)生凝集。 抗人球蛋白血清除可以測定紅細胞上 IgG 抗體外， 還可 以測定IgM和IgA，也可以測補體組分(C3、C4)。所謂廣譜AGS即包括抗IgG和抗G抗體?！緲吮?/p>

39、采集和處理】標本采集：常規(guī)靜脈采血 3ml 于 EDTA.K2 。【試劑】1. 1% 標準 A/B/O 型紅懸。2抗人球蛋白檢測卡。3. 0.9% 生理鹽水?！静僮鞑襟E】一、ABC血型、RH血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗：(1) 在戴安娜微柱凝膠新生兒血型卡的 8 個孔中分別加入 1%的樣本紅細胞 50ul ；(2) 血型卡直接放入專用離心機離心，觀察結果。二、釋放試驗(1 ) 取壓積紅細胞 0.2 ml洗滌三次，再加 0.2 ml生理鹽水，56 C水浴10分鐘，2000 轉/ min 離心 3 min ，吸取上清液備用； (即放散液)(2) 根據新生兒ABC血型，分別在微孔中加入 1%標準A/

40、B/O型紅懸50ul，然后加入50ul 上清液，置37 C孵育15分鐘，離心，觀察結果?；颊逜BO血型為“ A”型的，加入標準 A型、0型紅細胞懸液；“ B”型的，加入標準 B型、0型紅細胞懸液； “ AB ”型的，加入標準 A型、B型、0型紅細胞懸液； “0”型的，加入標準 0型紅細胞懸液。三、游離抗體測定(1) 根據新生兒 AB0 血型，分別在微孔中加入 1%標準 A/B/0 型紅懸 50ul ，然后加入 50ul 樣本血清；(原則同上)(2) 置37 C孵育15分鐘，離心，觀察結果。結果判斷：（1） ABO血型、RH血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗結果判斷:凝集有80%勺紅細胞在微柱管下端

41、2/3以下者（即1 +以上）為陽性。第六節(jié)血液交叉配血試驗標準操作規(guī)程血液交叉配血試驗標準操作程序交叉配血主要是檢查受血者血清中有無破壞供血者紅細胞的抗體，故受血者血清加供 血者紅細胞相配的一管稱為“主側”；供血者血清加受血者紅細胞相配的一管稱為“次側”，兩者合稱交叉配血。交叉配血試驗又稱不配合性試驗，是確?；颊甙踩斞夭豢缮俚脑囼?，完整的操作 規(guī)程應包括：查閱受血者以前的血型檢查記錄，如與這次檢查結果有所不同，應及時分析原因；對收到的受血者血樣應作 ABO正反定型，Rh血型和其他血型檢查以及血型抗體檢 測和鑒定；選擇預先進行血型檢查的合格供血者作交叉配血試驗。一、配血要求1. 受血者配血試

42、驗的血樣（血型復查）必須是輸血前三天之內 的；2. 核對病人資料：核對輸血申請單、受血者血樣、病歷三者，其內容包括：患者姓名、性別、年齡、科室床號、住院號、血型 （原始血常規(guī)血型和血型復查中血型）、用血品種、用血量等，必須正確無誤；3. 核對血液：血液完整性、血液標簽、血液質量；4核對取血憑證：按臨床 （取血憑證） 實際用血品種、量進行配發(fā)血；5 .配血前，先復查受血者和供血者ABO血型（正、反定型）、Rh （ D）血型和抗篩，并報告其結果；6在電子病歷或急診醫(yī)生工作站中，檢查臨床輸血五項的執(zhí)行情況；7. 輸注全血、濃縮紅細胞、洗滌紅細胞、濃縮白細胞等患者應進行交叉配血試驗，其 方法：采用鹽水

43、配血試驗、凝聚胺法。二、鹽水配血試驗標準操作程序【方法原理】本法是目前最常用的配血方法，可以發(fā)現臨床上最重要的ABO不配合性。當受血者血 清（漿）和供血者紅細胞經混合并離心后，如有 ABO 不配合問題，就會很快顯示出來。【標本采集和處理】1標本采集：常規(guī)靜脈采血 3ml 于 EDTA.K2 。2. 標本采取時間：要求受檢者血樣一定要在輸血前48h （抗篩是48h）內采集，血樣必 須是新近的，無溶血現象。【試劑】1. 抗 A 抗 B 血型定型試劑（單克隆抗體長春博德）2. Anti-D （IgM） Biotest 。3. 0.9% 生理鹽水【操作步驟】1. 從貯血冰箱中取出所需血液，取試管一支，

44、貼上小標簽，在血袋配血管中剪下配血 管于試管內。2. 取試管二支，標明主次側，主側管加受血者血清（漿）2 滴，供血者 5%紅細胞懸液 1 滴；次側管加供血者血清（漿） 2 滴，受血者 5%紅細胞懸液 1 滴?；靹颍?1000r/min 離 心 1min 。3. 觀察結果： 輕輕側動試管， 冬季應注意冷集素干擾。 ABO 同型配血，“主側”和 “次 側”均無溶血及凝集表示無輸血禁忌，可以輸血。三、凝聚胺配血試驗標準操作程序【方法原理】 利用低離子介質（ LIM ），降低介質的離子強度，減少紅細胞周圍的陽離子云，以促進 紅細胞和血清（漿）中的抗體結合。加入凝聚胺（Polybrene ）溶液后，可

45、使紅細胞產生非特異性的凝聚。最后，加入懸浮液（Resuspe ndi ng）具有中和凝聚胺的作用，使正常的紅細胞非特異性凝集散開， 試驗結果為陰性； 但如果紅細胞被相應抗體致敏， 則會被凝聚胺凝結， 凝集就不會散開，試驗結果為陽性?！緲吮静杉吞幚怼?. 標本采集：常規(guī)靜脈采血 3ml 于 EDTA.K2 。2. 標本采取時間：要求受檢者血樣一定要在輸血前48h 內采集，血樣必須是新近的， 無溶血現象?！驹噭?. 抗 A 抗 B 血型定型試劑（單克隆抗體長春博德）2. Anti-D （IgM） Biotest 。3. 0.9% 生理鹽水4. 凝聚胺試劑：低離子介質（LIM ）、凝聚胺（ Po

46、lybrene ） 、懸浮液 （Resuspending）。 【操作步驟】1. 從貯血冰箱中取出所需血液，取試管一支，貼上小標簽，在血袋配血管中剪下配血 管于試管內。2. 取試管二支，標明主次側，主側管加受血者血清（漿）2 滴，供血者 5%紅細胞懸液1 滴；次側管加供血者血清（漿）2 滴，受血者 5%紅細胞懸液 1 滴。3. 各加 LIM0.7ml ，混勻，再各加 Polybrene 溶液 2 滴，并混勻。4. 用離心機 1000g 離心力（普通離心機以 3400rpm） ，離心 10 秒，然后把上清液倒掉， 輕輕搖動試管，目測紅細胞有無凝集，無凝集，則必須重做。5. 最后加入 Resuspe

47、nding 2 滴，輕輕轉動試管混合并同時觀察結果，如在 30 秒內凝 集散開，代表是由 Polybrene 引起的非特異性凝集，配血結果相合；如凝集不散開，則為紅 細胞抗原抗體結合的特異性反應， 配血結果不相合。 如反應可疑， 可進一步倒在玻片上用顯 微鏡觀察。6血液交叉合格后，應在醫(yī)院血庫管理軟件中進行配血、出庫操作，打印血液交叉報 告單和患者輸血不良反應反饋單。然后，保存?！靖阶ⅰ?血液樣本的保留和貯存： 受血者和供血者的血液樣本必須密封或蓋緊， 在每次輸血之后， 應在26C保存至少7天以上。第七節(jié) 血液出庫（發(fā)血）標準操作規(guī)程血液出庫（發(fā)血）標準操作程序一、核對、簽字 1嚴格執(zhí)行“三查

48、” 、“八對”制度（見輸血科“三查” 、“八對”制度） 。 2輸血科（血庫）發(fā)血時，應當認真檢查申請單的填寫項目，合格后方可發(fā)血。未按 衛(wèi)生部醫(yī)療機構臨床用血管理辦法第十一條規(guī)定辦理申報手續(xù)的不得發(fā)血。3配血合格后，由醫(yī)務人員憑取血憑證到血庫取血，領血時，收發(fā)雙方共同核對患者 （姓名、性別、年齡、科室床號、住院號、血型、用血品種、用血量）和血站名稱、許可證 號、血型、血袋編號、血品種、血量、血液質量、血袋完整性、血液有效時間以及配血試驗 結果等，準確無誤時，雙方共同簽字后方可發(fā)血。二、血液出庫1發(fā)血在醫(yī)院血庫管理軟件中進行 （詳見醫(yī)院血庫管理軟件操作細則） ，并打印交叉配 血報告單和患者輸血不

49、良反應反饋單。2收發(fā)雙方共同核對無誤后，由取血者把血液放入專用的血液保溫箱內送至所需科室 輸注（要求血液出庫后 30 分鐘內輸入患者體內） 。3在血液出庫登記本中，記錄血液發(fā)出時間、受血者姓名、科室床號、住院號、血品 種欄記錄血量、血費、用血互助金、檢查費、血袋號、發(fā)（?。┭吆灻?。4. 血液發(fā)出后，患者與供血者血樣保存于 26C冰箱至少7天。 5血液發(fā)出后不得退回，以保證下一個用血者的安全。如臨床對發(fā)出的血液要求退回 時，應由醫(yī)院主管 （醫(yī)務部） 領導， 輸血科主任簽字同意 “報廢處理” 后， 方可退還血費等。6. 每日 17：00下班前進行出庫統(tǒng)計，并記錄于血液出入庫表格內。次晨8 時再統(tǒng)

50、計夜班出入庫情況，并加以修正。每月進行出入庫統(tǒng)計并作保存。三、血袋回收回收后的血袋進行記錄時間，并保存于 26C冰箱7天，后按醫(yī)療廢棄物焚燒處理。第八節(jié) 數據記錄及費用收取標準操作規(guī)程數據記錄及費用收取標準操作程序一、數據記錄 當血液發(fā)出后，必須記錄：1. 輸血申請單上記錄血品種、血量。把血袋中的小標簽貼在申請單上，表明品種、血 量。2. 用血通知單上記錄用血日期、血品種及血量，并簽名。3. 血費記錄簿上記錄發(fā)出血液品種的數量、血費、互助金、檢查費等金額。對欠款記 帳或用現金收取者，應用紅筆注明“欠款記帳”或“門診現金收費”字樣。二、收費當血液發(fā)出后，值班者必須對當日（班）的血費、用血互助金、

51、檢查費等按規(guī)定標準及 時記入收費電腦。1 住院病人收費：由值班者通知收費處在電腦中收取；2. 對急診“綠”色通道病人收費： 有住院號者：其全部費用記入電腦； 對無住院號而只有門診號者：當班者應及時通知收費處，交納血費、檢查費、用血互助金（用手工開具用血互助金交納通知單）等費用； 對門急診血費欠款記帳者：按實際收費的用血量配發(fā)，但通知急診收費處采用欠款記 帳或現金收取用血互助金和檢查等費用；3門診病人收費：可以在門診醫(yī)生站中記錄所要收取的全部費用，由病人（或病人家 屬、授權人、工友）到門診收費窗口，交納血費、檢查費、用血互助金（用手工開具用血互 助金交納通知單）等費用。門診收取用血互助金后， 須

52、把用血互助金交費通知單的第三聯貼 在用血通知單后面。1血費輸入名稱金額類別全血（qx）230 元/200ml血費室Rh陰性全血（Rhyxqx）450 元/200ml血費室懸浮紅細胞（xf）220元/1單位血費室Rh陰性紅細胞（Rhyxh ）410元/1單位血費室血漿（xxb）5 元/10ml血費室冷沉淀（LCD）110/1單位血費室血小板（dcx）1450元/10單位血費室洗滌紅細胞（xdh）220元/1單位血費室去甘油紅細胞（qgy）490元/1單位血費室機洗紅細胞術（JQXDHX ）700 元 /次血費室2檢查費輸入名稱金額類別鹽水介質交叉配血（YSJZ）5元/次血庫室特殊介質交叉配血（T

53、SJZ）8元/次血庫室ABO正反血型鑒定（ABO ）8元/次血庫室Rh （ D）血型鑒定（Rh）8元/次血庫室紅細胞不完全抗體篩查（HXB ）40元/次血庫室按回車，點擊保存數據，點擊 Y （是），按確定。 注：醫(yī)保病人記帳，進入醫(yī)保條件全血1. 各種急性失血伴低血容量搶救；2. 各種原因引起的經其他治療無效的嚴重慢性貧血;3. 重大手術確需輸血。紅細胞1. 各種急性失血伴低血容量搶救；2 各種原因引起的經其他治療無效的嚴重慢性貧血； 3高鉀血癥，肝、腎、心功能不全確需輸血者； 4急性溶血性貧血搶救或化療后骨髓抑制引起的嚴重貧血； 5呼吸衰竭使用人工呼吸機確需輸血。血漿1. 凝血酶原時間（PT

54、）或活化部分凝血酶時間（APTT異常伴出血或需手術； 2凝血因子缺乏伴出血或需手術；3. 抗凝血酶川（AT川）缺乏；4. 香豆素作用逆轉或抗纖溶治療伴出血；5. 輸血量大于 15 單位；6. 彌漫性血管內凝血（DIC）和血栓性血小板減少性紫癜（ TTP）;7. 需行體外循環(huán)手術。血小板1 .血小板計數低于 10 X 10九;2. 因骨髓衰竭引起的血小板減少并發(fā)活動性出血，且血小板計數低于20X 109/L ;93. 需行外科手術，且血小板計數低于 50X109/L；4. 伴有其他出血危險因素的活動性出血，且血小板計數低于30X 109/L；5. 大血管吻合手術確需輸注血小板。冷沉淀1 . 甲型血友??；2. 血管性血友病；3. 纖維蛋白原缺乏癥。第九節(jié) 血液申領、入庫、核對、貯存標準操作規(guī)程血液申領、入庫、核對、貯存標準操作程序1. 每日進行血液庫存量的檢查，及時對存量的補充（要求日存量為周用血量的1/2）， 值班人按所需品種、血量填入醫(yī)院用血申請單內，由指定人去人民醫(yī)院領取。2. 對特殊血液的申領，應遵循先報告血站的原則，血站回復結果必須及時與臨床醫(yī)師 溝通，并記錄于記事本中。3. 血液到庫后，值班人必須核對和驗收，其內容：血袋（外觀、封閉及包裝）是否合 格、標簽是否清楚齊全（