生物學(xué)活性檢測(cè)--黃文龍_第1頁
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文檔簡介

1、重組蛋白藥物生物學(xué)活性檢測(cè)黃文龍2014年2月28日2021-10-292021-10-292021-10-292021-10-291.生物學(xué)活性檢測(cè)必要性 藥品有效性必須是療效確切，且含有特定的有效活性成分和一定濃度含量 凡是不能用理化方法測(cè)定其含量或有效成分或雖有理化方法測(cè)定但不能真實(shí)反映臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的藥物效價(jià)測(cè)定，可用生物測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定 生物學(xué)活性測(cè)定是生物測(cè)定的重要內(nèi)容2021-10-292.生物技術(shù)藥物的生物學(xué)活性檢測(cè)方法 體內(nèi)：動(dòng)物模型分析 體外：細(xì)胞（組織、器官）培養(yǎng)分析 酶促反應(yīng)法、免疫學(xué)法（體外）2021-10-29 蛋白藥物的細(xì)胞學(xué)活性檢測(cè)原理：相同條件下通過實(shí)驗(yàn)組與對(duì)

2、照組對(duì)特定細(xì)胞生理或生存狀況的影響程度來判斷藥物的活性 例：抗腫瘤藥物活性檢測(cè)2021-10-29例：抗腫瘤藥物細(xì)胞學(xué)活性檢測(cè)腫瘤細(xì)胞（對(duì)數(shù)期） 胰蛋白酶處理 細(xì)胞懸液 稀釋 96孔板培養(yǎng)24h 實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組設(shè)置 培養(yǎng)45d 棄去上清液 加MTT， 37繼續(xù)培養(yǎng)4 h 小心棄上清，加 DMSO 37繼續(xù)培養(yǎng)4 h 測(cè)定光密度值腫瘤細(xì)胞生長抑制率(1- OD實(shí)驗(yàn)/OD對(duì)照) 100在酶標(biāo)儀上以實(shí)驗(yàn)波長為570 nm，參比波長為450 nm2021-10-29細(xì)胞培養(yǎng)分析 優(yōu)點(diǎn)：時(shí)間較短（13d）成本低、重復(fù)性好 缺點(diǎn)：不精確 如：MTT顯色反應(yīng)2021-10-29酶促反應(yīng)、免疫學(xué)法 優(yōu)點(diǎn)：簡單、靈敏、快速、精確 缺點(diǎn)：不一定反應(yīng)整體活性2021-10-293.藥物生物學(xué)活性檢測(cè)的意義 2021-10-29 思考題:1.重組蛋白藥物的生物學(xué)活性檢測(cè)方法主要有哪些？2.抗腫

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