《動物細(xì)胞融合與單克隆抗體》課件(新人教版選修3)

1、1(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交2雜雜種種植植株株融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細(xì)細(xì)胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物細(xì)胞的融合植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞植物細(xì)胞A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A雜種雜種細(xì)胞細(xì)胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)方法？方法？促進(jìn)融合促進(jìn)融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的標(biāo)志標(biāo)志植物細(xì)胞植物細(xì)胞B 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程過程3動物細(xì)胞與植物細(xì)胞的差別：無細(xì)胞壁全能性受限制，不能發(fā)育成雜種動物動物細(xì)胞雜交與植物細(xì)胞雜交的不同：不需去除細(xì)胞壁不

2、能發(fā)育成新的動物個體4一、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）1、概念：指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。2、結(jié)果：形成單核的雜交細(xì)胞3、原理： 細(xì)胞膜的流動性4、誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒5不同不同DNADNA的兩個細(xì)胞的兩個細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合融合后的細(xì)胞融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂進(jìn)行有絲分裂5、動物細(xì)胞融合過程65、過程：動物細(xì)胞A動物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合2個完整的雜交細(xì)胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）注意：動物細(xì)胞的融合也需要把多個兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再從中篩選雜交細(xì)胞76、意義：突破了有性雜交

3、方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。7、應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體8主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用途用途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、物理（離心、振動、電刺激）振動、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞膜的流動

4、性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性原理原理動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項目比較項目植物、動物細(xì)胞融合的比植物、動物細(xì)胞融合的比較較9二、單克隆抗體傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？B淋巴細(xì)胞每個每個B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體抗體要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群1975，米爾斯坦和柯勒 雜交瘤技術(shù)10設(shè)計方案：設(shè)計方案：一個一個B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體?；瘜W(xué)

5、性質(zhì)單一、特異性強的抗體。雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞112.2.制備過程：制備過程：誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點瘤細(xì)胞有何優(yōu)點注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選一抗體檢測，多次篩選大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法抗的方法121、原理：雜交瘤細(xì)胞具有兩個親本的特性，即能迅速大量增殖，又能足夠數(shù)量的單一抗體。2、過程B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合B-B細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇培

6、養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（ B-瘤細(xì)胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體13除通過雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體外，還除通過雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體外，還有什么方法？有什么方法？143. 3.單克隆抗體的應(yīng)用：單克隆抗體的應(yīng)用：單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、產(chǎn)單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大量大 作為診斷試劑：準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)，并與作為診斷試劑：準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合特異性結(jié)合 優(yōu)點：優(yōu)點：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速準(zhǔn)確、高效、簡易、快速用于用于運載藥物：制成運載藥物：制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療既不損

7、傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。15一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一種新細(xì)胞一種新細(xì)胞滅活病毒滅活病毒雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個優(yōu)勢一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性強、單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢靈敏度高的優(yōu)勢161 1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A.A.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 B.B.沒經(jīng)過免疫的沒經(jīng)過免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞C.C.

8、經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 D.D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞A172.動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是-（ ）A.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和克服遠(yuǎn)緣雜交不親和 B. 制備單克隆抗體制備單克隆抗體 C.培育新品種培育新品種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞生產(chǎn)雜種細(xì)胞3.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同所用的技術(shù)手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 D. 都能形成雜種細(xì)胞都能形成雜種細(xì)胞 A D184. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是-（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合淋巴細(xì)胞與肝