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1、1化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)2第十章第十章 化學(xué)發(fā)光免疫化學(xué)發(fā)光免疫 分析技術(shù)分析技術(shù)第一節(jié)第一節(jié) 慨慨 述述一、化學(xué)發(fā)光一、化學(xué)發(fā)光二、化學(xué)發(fā)光效率二、化學(xué)發(fā)光效率第二節(jié)第二節(jié) 化學(xué)發(fā)光劑和標(biāo)記技術(shù)化學(xué)發(fā)光劑和標(biāo)記技術(shù)一、化學(xué)發(fā)光劑一、化學(xué)發(fā)光劑二、發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)二、發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)3第三節(jié)第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析三、電化學(xué)發(fā)光免疫分析三、電化學(xué)發(fā)光免疫分析四、臨床應(yīng)用四、臨床應(yīng)用思考題思考題小結(jié)小結(jié)4發(fā)光免疫分析發(fā)光免疫分析: :是將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)
2、合而建立起來的一種新的檢測微量抗原或是將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立起來的一種新的檢測微量抗原或抗體的新型標(biāo)記免疫分析技術(shù)。抗體的新型標(biāo)記免疫分析技術(shù)。 5第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述6放射免疫技術(shù)放射免疫技術(shù)酶免疫技術(shù)酶免疫技術(shù)發(fā)光免疫技術(shù)發(fā)光免疫技術(shù)三大經(jīng)典標(biāo)記技術(shù)三大經(jīng)典標(biāo)記技術(shù)7 發(fā)光發(fā)光: :是指分子或原子中的電子吸收能量后,由基態(tài)(較低能級)躍遷到激發(fā)態(tài)(較高能級),是指分子或原子中的電子吸收能量后,由基態(tài)(較低能級)躍遷到激發(fā)態(tài)(較高能級),然后再返回到基態(tài),并釋放光子的過程。然后再返回到基態(tài),并釋放光子的過程。根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同可分為根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同
3、可分為: :光照發(fā)光、生物發(fā)光、化學(xué)發(fā)光等。光照發(fā)光、生物發(fā)光、化學(xué)發(fā)光等。 8 光照發(fā)光光照發(fā)光(photoluminescence)是指發(fā)光劑(熒光素)經(jīng)短波長的入射光照射是指發(fā)光劑(熒光素)經(jīng)短波長的入射光照射后,電子吸收能量躍遷到激發(fā)態(tài),在其回復(fù)至基態(tài)時,發(fā)射出較長波長的可見光后,電子吸收能量躍遷到激發(fā)態(tài),在其回復(fù)至基態(tài)時,發(fā)射出較長波長的可見光(熒光)。(熒光)。 生物發(fā)光生物發(fā)光(bioluminescence)是指發(fā)生在生物體內(nèi)的發(fā)光現(xiàn)象,如螢火蟲的發(fā)光,是指發(fā)生在生物體內(nèi)的發(fā)光現(xiàn)象,如螢火蟲的發(fā)光,反應(yīng)底物為螢火蟲熒光素,在熒光素酶的催化下,利用反應(yīng)底物為螢火蟲熒光素,在熒光素
4、酶的催化下,利用ATPATP能,生成激發(fā)態(tài)氧化型熒能,生成激發(fā)態(tài)氧化型熒光素,它在回復(fù)基態(tài)時多余的能量以光子的形式釋放出來。光素,它在回復(fù)基態(tài)時多余的能量以光子的形式釋放出來。9 化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence)是指伴隨化學(xué)反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。某些物是指伴隨化學(xué)反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。某些物質(zhì)質(zhì)( (發(fā)光劑發(fā)光劑) )在化學(xué)反應(yīng)時,吸收了反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能,使反應(yīng)的產(chǎn)物分子或反應(yīng)在化學(xué)反應(yīng)時,吸收了反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能,使反應(yīng)的產(chǎn)物分子或反應(yīng)的中間態(tài)分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài),當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時,以發(fā)射光子的形式的中間態(tài)分子中的電子躍遷到激
5、發(fā)態(tài),當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時,以發(fā)射光子的形式釋放出能量,這一現(xiàn)象稱為化學(xué)發(fā)光。釋放出能量,這一現(xiàn)象稱為化學(xué)發(fā)光。一、化學(xué)發(fā)光一、化學(xué)發(fā)光10 一些化學(xué)反應(yīng)能釋放足夠一些化學(xué)反應(yīng)能釋放足夠的能量把參加反應(yīng)的物質(zhì)激的能量把參加反應(yīng)的物質(zhì)激發(fā)到能發(fā)射光的電子激發(fā)態(tài),發(fā)到能發(fā)射光的電子激發(fā)態(tài),若被激發(fā)的是一個反應(yīng)產(chǎn)物若被激發(fā)的是一個反應(yīng)產(chǎn)物分子,則這種反應(yīng)過程叫直分子,則這種反應(yīng)過程叫直接化學(xué)發(fā)光。反應(yīng)過程可簡單地描述如下:接化學(xué)發(fā)光。反應(yīng)過程可簡單地描述如下: A A十十B CB C* * C C* * C C h h其中其中為光子,為光子,C C* *表示表示C C處于單線激發(fā)態(tài)。處于單線激
6、發(fā)態(tài)。 11若激發(fā)能傳遞到另一個未參加化學(xué)反應(yīng)若激發(fā)能傳遞到另一個未參加化學(xué)反應(yīng)的分子的分子D D上,使上,使D D分子激發(fā)到電子激發(fā)態(tài),分子激發(fā)到電子激發(fā)態(tài),D D分子從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時發(fā)光,這種過分子從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時發(fā)光,這種過程叫間接化學(xué)發(fā)光。反應(yīng)過程可表示如下:程叫間接化學(xué)發(fā)光。反應(yīng)過程可表示如下: A A十十B CB C* * C C* *十十D CD C十十D D* * D D* * D D十十h h12 化學(xué)發(fā)光效率決定于生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物分子的化學(xué)激發(fā)效率(化學(xué)發(fā)光效率決定于生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物分子的化學(xué)激發(fā)效率(CE)和激發(fā)態(tài)分子的)和激發(fā)態(tài)分子的發(fā)射效率(發(fā)射效率(EM)。)?;瘜W(xué)
7、發(fā)光反應(yīng)的發(fā)光效率、光輻射的能量大小以及光譜范圍,完全化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的發(fā)光效率、光輻射的能量大小以及光譜范圍,完全由發(fā)光物質(zhì)的性質(zhì)所決定,每一個發(fā)光反應(yīng)都具有其特征性的化學(xué)發(fā)光光譜和不同的化由發(fā)光物質(zhì)的性質(zhì)所決定,每一個發(fā)光反應(yīng)都具有其特征性的化學(xué)發(fā)光光譜和不同的化學(xué)發(fā)光效率。學(xué)發(fā)光效率。二、化學(xué)發(fā)光效率二、化學(xué)發(fā)光效率13第二節(jié)第二節(jié) 化學(xué)發(fā)光劑和標(biāo)記技術(shù)化學(xué)發(fā)光劑和標(biāo)記技術(shù)14 在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物,稱為在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物,稱為化學(xué)發(fā)光劑或發(fā)光底物。化學(xué)發(fā)光劑或發(fā)光底物。 一、化學(xué)發(fā)光劑一、化學(xué)發(fā)光
8、劑15能作為化學(xué)發(fā)光劑的條件:能作為化學(xué)發(fā)光劑的條件:發(fā)光的量子產(chǎn)率高;發(fā)光的量子產(chǎn)率高;它的物理它的物理- -化學(xué)特性要與被標(biāo)記或測定的化學(xué)特性要與被標(biāo)記或測定的 物質(zhì)相匹配;物質(zhì)相匹配;能與抗原或抗體形成穩(wěn)定的偶聯(lián)結(jié)合物;能與抗原或抗體形成穩(wěn)定的偶聯(lián)結(jié)合物; 其化學(xué)發(fā)光常是氧化反應(yīng)的結(jié)果;其化學(xué)發(fā)光常是氧化反應(yīng)的結(jié)果;在所使用的濃度范圍內(nèi)對生物體沒有毒性。在所使用的濃度范圍內(nèi)對生物體沒有毒性。16 直接化學(xué)發(fā)光劑直接化學(xué)發(fā)光劑 直接化學(xué)發(fā)光劑在發(fā)光免疫分析過程中不需酶的催化作用,直接參與發(fā)光反應(yīng),它們在直接化學(xué)發(fā)光劑在發(fā)光免疫分析過程中不需酶的催化作用,直接參與發(fā)光反應(yīng),它們在化學(xué)結(jié)構(gòu)上有
9、產(chǎn)生發(fā)光的特有基團(tuán),可直接標(biāo)記抗原或抗體?;瘜W(xué)結(jié)構(gòu)上有產(chǎn)生發(fā)光的特有基團(tuán),可直接標(biāo)記抗原或抗體。 17 1. 1. 吖啶酯吖啶酯 在堿性條件下被在堿性條件下被H H2 2O O2 2氧化時氧化時, ,發(fā)出波長為發(fā)出波長為470nm470nm的光,具有很高的發(fā)的光,具有很高的發(fā)光效率,其激發(fā)態(tài)產(chǎn)物光效率,其激發(fā)態(tài)產(chǎn)物N-N-甲基吖啶酮是該發(fā)光反應(yīng)體系的發(fā)光體。甲基吖啶酮是該發(fā)光反應(yīng)體系的發(fā)光體。 182 2三聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕 三聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕 RU(bpy)3RU(bpy)32+2+是電化學(xué)發(fā)光劑,它和電子供體三丙胺(是電化學(xué)發(fā)光劑,它和電子供體三丙胺(TPATPA)在)在陽電極表面可同時
10、失去一個電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。陽電極表面可同時失去一個電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。 三聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕19電化學(xué)發(fā)光劑反應(yīng)原理電化學(xué)發(fā)光劑反應(yīng)原理 20 酶促反應(yīng)發(fā)光劑:酶促反應(yīng)發(fā)光劑: 是利用標(biāo)記酶的催化作用,使發(fā)光劑(底是利用標(biāo)記酶的催化作用,使發(fā)光劑(底 物)發(fā)光,這一類需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑物)發(fā)光,這一類需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑 稱為酶促反應(yīng)發(fā)光劑。稱為酶促反應(yīng)發(fā)光劑。 1魯米諾及其衍生物魯米諾及其衍生物 2AMPPD211 1魯米諾魯米諾魯米諾發(fā)光原理魯米諾發(fā)光原理22魯米諾增強(qiáng)發(fā)光反應(yīng)原理魯米諾增強(qiáng)發(fā)光反應(yīng)原理 232AMPPD3-(23-(2- -螺旋金剛烷螺旋金剛烷)-4-)-4-甲氧
11、基甲氧基-4-(3-4-(3“- -磷酰氧基磷酰氧基) )苯苯-1,2-1,2-二氧雜環(huán)丁烷二氧雜環(huán)丁烷241. 1. 碳二亞胺(碳二亞胺(EDCEDC)縮合法)縮合法 二、發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)二、發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)252. 2. 過碘酸鈉氧化法過碘酸鈉氧化法 263 3重氮鹽偶聯(lián)法重氮鹽偶聯(lián)法 274. N-4. N-羥基琥珀酰亞胺活化法羥基琥珀酰亞胺活化法 28 1 1發(fā)光劑的選擇發(fā)光劑的選擇 2 2被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì)被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì) 3 3標(biāo)記方法的選擇標(biāo)記方法的選擇 4 4原料比原料比 5 5標(biāo)記率標(biāo)記率 6 6溫度溫度 7 7純化與保存純化與保存 影響標(biāo)記的因素影響標(biāo)記的因素29第三節(jié)第
12、三節(jié) 化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型 30 用吖啶酯直接標(biāo)記抗體用吖啶酯直接標(biāo)記抗體( (抗原抗原) ),與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原,與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原( (抗體抗體) )發(fā)生免疫反應(yīng)后,形發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體成固相包被抗體- -待測抗原待測抗原- -吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時只需加入氧化劑(吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時只需加入氧化劑(H H2 2O O2 2)和)和NaOHNaOH使成堿性環(huán)境,吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光使成堿性環(huán)境,吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光 。 由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能,這部分光的積分與由集光器
13、和光電倍增管接收、記錄單位時間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能,這部分光的積分與待測抗原的量成正比,可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出待測抗原的含量。待測抗原的量成正比,可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出待測抗原的含量。一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析31發(fā)光發(fā)光YYY磁微粒磁微粒被測抗原被測抗原+抗體抗體+帶丫啶酯帶丫啶酯標(biāo)記物抗標(biāo)記物抗體體YYYYYYYYYYY沖洗后沖洗后(1 1)加入加入H H2 2O O2 2(pH10)直接化學(xué)發(fā)光的機(jī)理直接化學(xué)發(fā)光的機(jī)理32磁磁微粒微粒模式圖模式圖Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY
14、YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY Y特點(diǎn)特點(diǎn) 抗原和抗體結(jié)抗原和抗體結(jié)合與未合與未結(jié)合部分結(jié)合部分的的易易分分離離磁微粒磁微粒技術(shù)技術(shù)33 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用參與催化)是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶(某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶或堿性磷酸酶(ALP)(ALP)來標(biāo)記抗原或抗體,在來標(biāo)記抗原或抗體,在與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原( (抗體抗體) )發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體發(fā)
15、生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體- -待測抗原待測抗原- -酶標(biāo)記抗體復(fù)酶標(biāo)記抗體復(fù)合物,經(jīng)洗滌后,加入底物合物,經(jīng)洗滌后,加入底物( (發(fā)光劑發(fā)光劑) ),酶催化和分解底物發(fā)光,由光量子閱讀系統(tǒng)接收,光電,酶催化和分解底物發(fā)光,由光量子閱讀系統(tǒng)接收,光電倍增管將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒓右苑糯?,再把它們傳送至計算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),計算出測定倍增管將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒓右苑糯?,再把它們傳送至計算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),計算出測定物的濃度。物的濃度。二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析34該分析系統(tǒng)采用辣根過氧化物酶(該分析系統(tǒng)采用辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記抗體)標(biāo)記抗體(或抗原或抗原),在與反應(yīng)體
16、系中的待測標(biāo)本,在與反應(yīng)體系中的待測標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體-待測抗原待測抗原-酶(酶(HRP)標(biāo)記抗體復(fù)合物,)標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時加入魯米諾發(fā)光劑、這時加入魯米諾發(fā)光劑、H2O2和化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑使產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。和化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑使產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。 辣根過氧化物酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析辣根過氧化物酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析35辣根過氧化物酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖辣根過氧化物酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖 36該分析系統(tǒng)以堿性磷酸酶該分析系統(tǒng)以堿性磷酸酶 標(biāo)記抗體標(biāo)記抗體(或抗原或抗原),在與反應(yīng)體系中的待測標(biāo)本和固相載體發(fā)生,在與反
17、應(yīng)體系中的待測標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體免疫反應(yīng)后,形成固相包被抗體-待測抗原待測抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時加入酶標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時加入AMPPD發(fā)光劑,發(fā)光劑,堿性磷酸酶使堿性磷酸酶使AMPPD脫去磷酸根基團(tuán)而發(fā)光。脫去磷酸根基團(tuán)而發(fā)光。 堿性磷酸酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析堿性磷酸酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析37堿性磷酸酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖堿性磷酸酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖 38分配樣品分配樣品,磁顆粒磁顆粒和試劑和試劑孵育孵育使反應(yīng)物使反應(yīng)物結(jié)合結(jié)合在磁場中在磁場中清洗去除清洗去除未結(jié)合物質(zhì)未結(jié)合物質(zhì)加入加入底物底物產(chǎn)生產(chǎn)生信號信號孵育孵育,促使信號促使信號的產(chǎn)
18、生的產(chǎn)生信號信號檢測檢測39電化學(xué)發(fā)光免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)是以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記是以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記 抗體抗體( (抗原抗原) ),以三丙胺,以三丙胺(TPA)(TPA)為電子供體,為電子供體, 在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光 反應(yīng),它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程。反應(yīng),它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程。 三、電化學(xué)發(fā)光免疫分析三、電化學(xué)發(fā)光免疫分析40在電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中,磁性微粒為固相載體包被抗體在電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中,磁性
19、微粒為固相載體包被抗體( (抗原抗原) ),用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體,用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體( (抗原抗原) ),在反應(yīng)體系內(nèi)待測標(biāo)本與相應(yīng)的抗原,在反應(yīng)體系內(nèi)待測標(biāo)本與相應(yīng)的抗原 ( (抗體抗體) )發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成磁性微粒包被抗發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成磁性微粒包被抗體體- -待測抗原待測抗原- -三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時將上述復(fù)合物吸入流動室,同時引人三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時將上述復(fù)合物吸入流動室,同時引人TPATPA緩沖緩沖液。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時,被安裝在電極下面的電磁鐵吸引住,而未結(jié)合的標(biāo)記抗體和液。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時,被安裝在電極下面的電磁鐵吸引住,而未結(jié)合的標(biāo)記抗
20、體和標(biāo)本被緩沖液沖走。與此同時電極加壓,啟動電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),使三聯(lián)吡啶釕和標(biāo)本被緩沖液沖走。與此同時電極加壓,啟動電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),使三聯(lián)吡啶釕和TPATPA在電極表在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移,產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光,光的強(qiáng)度與待測抗原的濃度成正比。面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移,產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光,光的強(qiáng)度與待測抗原的濃度成正比。41電化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖電化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖42電化學(xué)發(fā)光免疫測定示意圖電化學(xué)發(fā)光免疫測定示意圖43標(biāo)記磁顆粒在電場中發(fā)光工作示意圖標(biāo)記磁顆粒在電場中發(fā)光工作示意圖44 1. 1.甲狀腺激素甲狀腺激素 2 2生殖激素生殖激素 3 3垂體激素和皮質(zhì)激素垂體激素和皮質(zhì)激素 4 4貧血因子貧血因子 5 5腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物 6 6感染性疾病感染性疾病 7 7糖尿病糖尿病 胰島素、血清胰島素、血清C-C-肽、血漿胰高糖素等。肽、血漿胰高糖素等。 8 8心臟標(biāo)志物心臟標(biāo)志物 9 9病毒標(biāo)記物病毒標(biāo)記物 1010過敏性疾病過敏性疾病 1111治療藥物監(jiān)測治療藥物監(jiān)測 四、臨床應(yīng)用四、臨床應(yīng)用451 1什么是發(fā)光免疫分析?什么是化學(xué)發(fā)光免疫分析?什么是發(fā)光免疫分析?什么是化學(xué)發(fā)光免疫分析?2 2化學(xué)發(fā)光與熒光的區(qū)別?化學(xué)發(fā)光
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