核醫(yī)學(xué)體外放射分析ppt課件

1、分類：分類：1、競爭性：競爭性：放射免疫分析放射免疫分析RIA競爭性蛋白結(jié)合分析競爭性蛋白結(jié)合分析CPBA放射受體分析放射受體分析RRA放射酶分析放射酶分析放射微生物分析放射微生物分析2、非競爭性：、非競爭性：免疫放射分析免疫放射分析IRMA K值大表示親和力大 P0Q0=Ab的初始含量當(dāng)*Ag為固定量時，P0為自變量實踐為AgP0與復(fù)合物B呈一定的函數(shù)關(guān)系5、Ab用量：用量：B=3350%斜率最大。斜率最大。6、反響條件和溫度見后、反響條件和溫度見后免疫反響條件要求：1、PH：大多PH=7.52 、 離 子 強(qiáng) 度 ： 常 用0.050.1M3、反響溫度：實驗確定范曲線具有良好的穩(wěn)定性能保證

2、較長時間不改動性能規(guī)范抗原的用途：制備抗體制備*Ag 規(guī)范曲線抗血清抗血清檢查抗血清的目的：檢查抗血清的目的：1、親和常數(shù)、親和常數(shù)KP1922、交叉反響率、交叉反響率P1933、滴度、滴度標(biāo)志抗原標(biāo)志抗原Ag*根本要求：根本要求：免疫活性與待測物及規(guī)范品一致免疫活性與待測物及規(guī)范品一致適度的比活度：太高、化學(xué)量少、適度的比活度：太高、化學(xué)量少、不具競爭性，太低統(tǒng)計誤差大。不具競爭性，太低統(tǒng)計誤差大。足夠高的放化純度足夠高的放化純度95%分別方法分別方法非特異分別法：非特異分別法：吸附法活性炭吸附法活性炭層析電泳法層析電泳法過濾法過濾法磁性分別法磁性分別法沉淀法聚乙二醇，硫酸胺等沉淀法聚乙二醇

3、，硫酸胺等RIA加樣方法加樣方法1、平衡法：三種反響物同時加樣、平衡法：三種反響物同時加樣優(yōu)：簡便易掌握優(yōu)：簡便易掌握重現(xiàn)性好重現(xiàn)性好競爭反響較典型競爭反響較典型缺：靈敏度不高缺：靈敏度不高2、順序加樣法：、順序加樣法：Ag+Ab溫育后再加溫育后再加*Ag優(yōu)：規(guī)范曲線起始段斜率高、優(yōu)：規(guī)范曲線起始段斜率高、靈敏度高靈敏度高缺：曲線任務(wù)波度范圍窄、重缺：曲線任務(wù)波度范圍窄、重現(xiàn)性差現(xiàn)性差3、一天法：特殊情況下運(yùn)用、一天法：特殊情況下運(yùn)用樣品采集與保管應(yīng)留意的幾個樣品采集與保管應(yīng)留意的幾個問題問題用原樣品、新穎樣品、減用原樣品、新穎樣品、減少存放、最好不純化、濃少存放、最好不純化、濃縮縮萃取、減少

4、變異萃取、減少變異盡快做實驗，防止反復(fù)凍盡快做實驗，防止反復(fù)凍融融盡能夠少用添加劑等，抗盡能夠少用添加劑等，抗凝劑也少用。凝劑也少用。 RIA數(shù)據(jù)處置的數(shù)學(xué)模型 補(bǔ)充概念后頁 B：結(jié)合的沉淀物樣品丈量值CPMED50：指B/B0為50%時對應(yīng)劑量值。ED25 、ED70 指 B/B0 為25%、70%所對應(yīng)的劑量。曲線模型分類曲線模型分類1、針對劑量反響的實踐曲線模型：、針對劑量反響的實踐曲線模型：如多項式函數(shù)，光滑樣條函數(shù)，線性內(nèi)插模型如多項式函數(shù)，光滑樣條函數(shù)，線性內(nèi)插模型2、直線化模型：、直線化模型：logitlog模型模型常用：將規(guī)范曲線橫坐標(biāo)各點取對數(shù)常用：將規(guī)范曲線橫坐標(biāo)各點取對數(shù)

5、lgX而縱坐標(biāo)用而縱坐標(biāo)用logitBx/B0,logitBx/B0=lgBx/B0Bx該直線法規(guī)范曲線的零點喪失零無對數(shù)呵斥靈敏度降低該直線法規(guī)范曲線的零點喪失零無對數(shù)呵斥靈敏度降低3、logistic模型：只能用于平衡反響兩點改良 a：橫坐標(biāo)不取對數(shù)而用 D b：不做NSB，靠計算機(jī)計算擬合扣除NSB。 ad模型：Y=- + d x 1+(-)b c 有四個參數(shù)：a=B0也稱四參數(shù)logistic模型c = E D 5 0 b = l o g i t l o g 直 線 斜 率 d=NSB4、五參logistic數(shù)模型： abY= - + d x 1+(-)bE c引入了一個不對稱因子E。

6、E計算機(jī)能求出?？捎糜诜瞧胶夥错懴到y(tǒng)5、四參數(shù)單位點質(zhì)量作用定律方式：按質(zhì)量作用定律導(dǎo)出的方式 優(yōu)點：質(zhì)量作用定律，穩(wěn)健回歸擬合； 適于平衡和非平衡系統(tǒng)； 個別壞點對曲線影響小。模型的選擇擬合優(yōu)度法來選 問題： 一組數(shù)據(jù)可用多種模型去處置，如何選用？ 線性擬合用最小二乘法，選殘差平方和最小的模型。 非線性擬合用百分比偏向DEV% DEV%=XX/X 100%DEV%10%即可運(yùn)用。儀器與設(shè)備不一致，差別等儀器與設(shè)備不一致，差別等丈量統(tǒng)計漲落丈量統(tǒng)計漲落數(shù)據(jù)處置：擬合不當(dāng)、方法不一致等。數(shù)據(jù)處置：擬合不當(dāng)、方法不一致等。誤差分類誤差分類系統(tǒng)誤差：緣由是確定要素如試系統(tǒng)誤差：緣由是確定要素如試劑變

7、性，稱量不準(zhǔn)，批號不同。劑變性，稱量不準(zhǔn)，批號不同。隨機(jī)誤差：緣由屬偶爾，難以確隨機(jī)誤差：緣由屬偶爾，難以確定，丈量結(jié)果忽高忽低呈雙向圍定，丈量結(jié)果忽高忽低呈雙向圍某數(shù)值動搖。某數(shù)值動搖。過失誤差：過失呵斥的誤差，結(jié)過失誤差：過失呵斥的誤差，結(jié)果失真無規(guī)律性可查。果失真無規(guī)律性可查。質(zhì)控目的：找出誤差緣由、采取質(zhì)控目的：找出誤差緣由、采取必要措施，保證明驗結(jié)果的可信必要措施，保證明驗結(jié)果的可信性。性。質(zhì)控分類質(zhì)控分類實驗室內(nèi)質(zhì)控實驗室內(nèi)質(zhì)控實驗室間質(zhì)控實驗室間質(zhì)控常用的質(zhì)控目的：靈敏度、特異性、精細(xì)度、偏向、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性、臨床有效性。1、靈敏度：10個B0管均值減去2SD后在規(guī)范曲線上查得的

8、劑量值。2、特異性：用交叉反響率來表示3、精細(xì)度：同一樣品多份丈量結(jié)果變異的大小。 SD可用SD或CV=-100% X4、偏向：偏離真值的程度 測定值真值偏向b=- -100% 真值5、準(zhǔn)確度：丈量值與真值的符合程度，也叫回收率 回收管丈量值對看管丈量值回收率= -100% 回收管內(nèi)參與的知量反響準(zhǔn)確度評價目的在空白樣品中參與知劑量的待測物得 測定值空白值 樣品 回收率= -100% 知值 回收率應(yīng)在90110%之間 測定值真值 偏向=-100% 真值 偏向允許在10%之內(nèi)。 留意：測定值應(yīng)取高、中、低三個劑量區(qū)的樣品分別求出高、中低三個劑量的回收率和偏向。 6、穩(wěn)定性：指批間反復(fù)性。對曲線穩(wěn)

9、定性考核的常用目的有：ED25、ED50、ED75、B0%、NSB%等。不同批實驗中這些值應(yīng)大體接近。 7、臨床有效性：陽性率與臨床診斷的符合率。 與正常值確實定有關(guān)。 上述幾種目的間的關(guān)系；靶圖。假設(shè)某點的CV%大于10%應(yīng)做為壞點剔除。反響精細(xì)度的幾個目的反響精細(xì)度的幾個目的1、2、3：1、平均批變異系數(shù)、平均批變異系數(shù)ABCV：指一批：指一批實驗數(shù)據(jù)的實驗數(shù)據(jù)的CV平均值：平均值：SDABCV%=-100%X2、反響誤差關(guān)系、反響誤差關(guān)系RER：指一批實驗：指一批實驗各復(fù)管的各復(fù)管的SD與其與其X之間的函數(shù)關(guān)系。之間的函數(shù)關(guān)系。SD為為CPM的誤差。它是反響實驗復(fù)管平行的誤差。它是反響實

10、驗復(fù)管平行性好壞的綜合目的，不是劑量的誤差。性好壞的綜合目的，不是劑量的誤差。RER的計算公式見的計算公式見P85，423RER0.04優(yōu)秀優(yōu)秀0.120.040.12差差3、精細(xì)度圖、精細(xì)度圖P、P圖：以劑量圖：以劑量lgD為橫坐標(biāo)，為橫坐標(biāo)，以各劑量復(fù)管的以各劑量復(fù)管的SD為縱坐標(biāo)做的圖。為縱坐標(biāo)做的圖。P、P圖步驟：圖步驟：1建立劑量反響曲線建立劑量反響曲線2計算各樣品的放射性丈量值計算各樣品的放射性丈量值X和誤差和誤差SDR3將放射性的將放射性的X和和SDR經(jīng)過劑量反響曲線查經(jīng)過劑量反響曲線查得 劑 量得 劑 量 D 并 計 算并 計 算 D 的的 S D 即即 S D 0 ， 或 換

11、 為， 或 換 為SD0/D=CV%4以以LgD為橫坐標(biāo)：以為橫坐標(biāo)：以CVD或或SDD為縱坐標(biāo)為縱坐標(biāo)做圖。做圖。PP圖的用途圖的用途1確定方法的靈敏度確定方法的靈敏度2確定劑量反響曲線的有效任務(wù)范確定劑量反響曲線的有效任務(wù)范圍圍3評價評價RIA的最正確任務(wù)條件的最正確任務(wù)條件4RIA的質(zhì)控評價的質(zhì)控評價5判別剔除壞點判別剔除壞點3、健全性實驗：指用規(guī)范品繪制的規(guī)范曲線、健全性實驗：指用規(guī)范品繪制的規(guī)范曲線與用不同釋稀度病人樣品繪制的曲線應(yīng)平行。與用不同釋稀度病人樣品繪制的曲線應(yīng)平行。影響健全性的要素：影響健全性的要素：a.規(guī)范品與待測物性質(zhì)不同規(guī)范品與待測物性質(zhì)不同b.反響系統(tǒng)有干擾反響反

12、響系統(tǒng)有干擾反響c.待測物在規(guī)范品確定的環(huán)境中不適宜。待測物在規(guī)范品確定的環(huán)境中不適宜。4、youden圖：在多批實驗中每一實驗丈量的首部和圖：在多批實驗中每一實驗丈量的首部和尾部放置二個一樣濃度的質(zhì)控樣品，將其丈量值求尾部放置二個一樣濃度的質(zhì)控樣品，將其丈量值求XSD。在直角坐標(biāo)中，做圖如下：。在直角坐標(biāo)中，做圖如下：QCH首首QCMQCLQC首首首樣品首樣品2SDABD尾樣尾樣品品QC尾尾A區(qū)：準(zhǔn)確區(qū)區(qū)：準(zhǔn)確區(qū)B區(qū)：正偏向區(qū)區(qū)：正偏向區(qū)C區(qū)：負(fù)偏向區(qū)區(qū)：負(fù)偏向區(qū)D區(qū)：不精細(xì)區(qū)區(qū)：不精細(xì)區(qū)意義：一種簡便，直觀、有效地評價精細(xì)度和偏倚的意義：一種簡便，直觀、有效地評價精細(xì)度和偏倚的方法。方法。

13、5、Cusum圖：把每批實驗的圖：把每批實驗的QC測定值與靶值相減后測定值與靶值相減后做圖。做圖。評價：評價：1小斜線延續(xù)上升或下降提示有正、負(fù)偏向小斜線延續(xù)上升或下降提示有正、負(fù)偏向2小斜線的斜率反映偏向的大小小斜線的斜率反映偏向的大小3斜線兩端點落差的絕對值超出斜線兩端點落差的絕對值超出QC的的3SD闡明有偏闡明有偏向出現(xiàn)，超出向出現(xiàn)，超出5SD闡明有明顯偏向，數(shù)據(jù)不可靠。闡明有明顯偏向，數(shù)據(jù)不可靠。反映穩(wěn)定性的評價目的可有反映穩(wěn)定性的評價目的可有Cusum圖、質(zhì)控圖等。圖、質(zhì)控圖等。質(zhì)控圖質(zhì)控圖Shewart作用法或作用法或LeveyJennings：可選多種參數(shù)如可選多種參數(shù)如B0、NSB%、EOX、QC0假設(shè)選假設(shè)選QC，求出它的求出它的SD需多批可靠實驗求出平均需多批可靠實驗求出平均SD值。值。然后作圖：以后的實驗中測