SEROZYME系統(tǒng)測定血清FT3、FT4及其臨床評價

1、serozyme系統(tǒng)測定血清ft3、ft4及其臨床評價【摘要】目的用serozyme系統(tǒng)檢測血清ft3、ft4并進(jìn)行 臨床與實驗室考核。方法將本系統(tǒng)與放射免疫法(ria)進(jìn)行對比研究。 結(jié)果健康人(n=68)血清ft3、ft4水平(+sd)分別為4. 1 ± 1. lpmol/l. 14. 1 ± 3. 2pmol/l0甲減組ft4水平下降(p< 0. 01); ft3水平與正 常對照組無顯著差異(p> 0. 05);初診甲亢組ft3、ft4(p均 < 0. 01)水平升高；糖尿病組ft3水平下降(0. 05> p&a

2、mp;gt; 0. 01), ft4水平與正常對照組無顯著差異(p>0. 05);其它各疾病組兩項 指標(biāo)與正常對照組均無顯著差異(p均> 0. 05);與ria對比檢測血 清ft3、ft4兩法符合率分別達(dá)81.5%. 74.8%;重復(fù)性：批內(nèi)與批 間變異系數(shù)(cv) ft 3分別為28%56%、6. 8% -9.0%, ft4分別 為 1.2% 3.4%、4.6% -7.0%;最少檢量：ft3 為 0. 9pmol/l, ft4為0. lpmol/l;真實性及診斷價值：ft3與ft4聯(lián)合對甲亢、甲 減診斷的靈敏度分別為92.2%、90.6%o特異性分別為97.1%.

3、 97. 1 %，總有效率均為95%;陽性預(yù)示值分別為95.9%. 91.7%;陰性預(yù)示值分別為97.1%、95.7%。結(jié)論本檢測系統(tǒng)對甲狀腺功能 的診斷靈敏、特異、可靠，與ria技術(shù)相當(dāng)，或有更多優(yōu)點?！娟P(guān)鍵詞】磁分離酶聯(lián)免疫測定法maia游離3, 5, 3，-三碘甲狀 腺氨酸(ft3)游離四碘甲狀腺氨酸(ft4)。血清游離3, 5, 3, -三碘甲狀腺氨酸(ft3)、游離四碘甲狀腺氨酸 (ft4)是甲狀腺疾病診斷與療效評定的重要指標(biāo)。在國內(nèi)，一般采用 放射免疫法(ria)檢測，其優(yōu)點是敏感可靠，缺點為試劑受同位素半 衰期的限制，有效期短，放射性輻射對人體有傷害，在試劑的管理和 處理上存在諸

4、多的麻煩。磁分離酶聯(lián)免疫測定系統(tǒng)(serozyme)檢測血 清ft3、ft4,是一種超微量的非放射性物質(zhì)標(biāo)記的免疫化學(xué)定量分 析技術(shù)，我們對其進(jìn)行了臨床考核，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。1對象與方法11研究對象本院門診及住院病人163例(其中臨床確診甲減32例、初診甲亢 51例、隨診甲亢26例、治愈甲亢6例、甲狀腺瘤14例、甲狀腺腫5 例、心腦血管疾病22例、糖尿病7例)，年齡14-75歲，男性61例， 女性102例；正常對照組68例，年齡1578歲，男性35例，女性 33例。12方法(1) 血樣本采集：研究對象靜脈采血，分離血清，-20貯存，一周 內(nèi)完成檢測。(2) 測定方法：1) serozyme系

5、統(tǒng)：由ft3、ft4試劑及serozyme-i型磁酶免內(nèi)分 泌定量測定儀組成；北京倍愛康生物技術(shù)有限公司提供。采用熒光素 標(biāo)記抗ft3、ft4單克隆抗體，用堿性磷酸酶標(biāo)記ft3、ft4,并與樣 本中的ft3、ft4競爭結(jié)合熒光素標(biāo)記的抗ft3、ft4克隆抗體，繼而 用抗熒光素抗體偶聯(lián)的磁分離劑與熒光素標(biāo)單克隆抗體結(jié)合，經(jīng)洗滌 后，加單磷酸酚歆底物作用，最后加naoh終止酶反應(yīng)，用serozyme-i 型磁酶免內(nèi)分泌定量測定儀同時測定三波長(492nm/ 550nm/ 630nm) 下的吸光度，儀器內(nèi)微機(jī)軟件自動擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算并打印出樣本 的測定結(jié)果。2)對照方法：ft3、ft4放免藥盒，由

6、中科院上海核技術(shù)開發(fā)公司 提供，按說明書操作，測定儀器為中國科學(xué)院上海原子核研究所日環(huán) 儀器廠生產(chǎn)的sn-682放射免疫y計數(shù)器。正常參考值：ft3為2. 8 11. 2pmol /l, ft4 為 9. 5 - 27. 4pmol/le2結(jié)果2. 1病人及正常人血清(maia)法ft3及ft4結(jié)果(1) 健康人血清ft3及ft4水平：68例健康人血清ft3水平算術(shù)平 均值為4. lpmol/l,標(biāo)準(zhǔn)差為1. lpmol/l,中值為4. lpmol/l,血清 ft4水平算術(shù)平均值為14. ipmol/l,標(biāo)準(zhǔn)差為3. 2pmol/l,中值為 13. 4pmol/l。注：與正常對照組比較,差異非

7、常顯著，p&lt;0. 01;差異顯著,0. 01&lt;p&lt; 0. 05。(2) 病人血清ft3及ft4水平：與正常對照組比較，初診甲亢組ft3 及ft4水平升高，差異非常顯著(t分別為9.0654、4.7191、 p&lt; 0. 01),糖尿病組ft3水平下降，差異顯著(t=2. 7357, 0. 01&lt; p < 0. 05):甲減組ft4水平降低，差異非常顯著(t=5. 996, p&l t; 0. 01); 其余均無顯著差異。(3) 正常參考值：本組測定68例正常人，ft3、ft4正常 參考值(x-±2sd)

8、范圍分別為 1.9 6. 3pmovl、7. 9 - 20. 5pmol / l 與 serono 公司的結(jié)果(ft3: 1. 86 - 6. 43pmol / l, ft4： 9. 3-22. lpmol /l)基本一致。22與放射免疫法(ria)結(jié)果的比較對151份病人血清標(biāo)本同時用maia及ria兩種方法檢測血清ft3、 ft4，兩法符合率分別為81.5%. 74. 8% o結(jié)果不一致的樣本，其值 多數(shù)處在正常值上下限交界處；個別樣本的兩法得值差距甚大，可能 系方法本身或其它原因；1份脂質(zhì)血樣(甲減患者之樣本)ft3、ft4用 maia法分別為2. 4、1. 6pmol /l,而ria法

9、卻分別高達(dá)42、118. 8pmol /l,明顯地脂質(zhì)干擾了 ria法測定，而maia法未受影響。2. 3maia法ft3、ft4試劑在甲亢和甲減診斷中的可靠性、真實性 及臨床價值(1) 重復(fù)性：對藥盒所附的質(zhì)控血清進(jìn)行了重復(fù)性測定，ft3變異 系數(shù)(cv)：批內(nèi)為2.8% -5.6%,批間為6.8% -9.0%; ft4變異 系數(shù)(cv),批內(nèi)為1. 2%34%，批間為4.6% -7.0%o(2) 最少檢測量(靈敏度)：以0標(biāo)準(zhǔn)光密度均值(x-)減去2個標(biāo)準(zhǔn) 差(2sd)計,ft3 為 0. 9pmol/l, ft4 為 0. lpmol/le(3) 真實性及診斷價值。3討論對serozym

10、e系統(tǒng)檢測血清颶、ft3、ft4,并進(jìn)行臨床與實驗室考 核。結(jié)果表明其對甲亢、甲減的診斷有較高的靈敏度與特異性；與 ria對比檢測結(jié)果表明，兩法有較好的一致性。maia法ft3、ft4試 劑靈敏度可分別達(dá)0. 9pmolfl. 0. lpmol/l,與放射免疫法相當(dāng)。本檢測系統(tǒng)，采用了 ft3、ft4堿性磷酸酶標(biāo)記物及抗ft3、ft4單 克隆抗體的熒光素標(biāo)記物，特別是單克隆抗體的引入，極大地提高了 測定的特異性；磁性分離技術(shù)的應(yīng)用，簡化了操作，縮短了流程，省 卻了低溫離心等儀器設(shè)備；單磷酸酚歆作為酶底物，呈色穩(wěn)定，對人 體無害、無環(huán)境污染，無公害，maia法ft3、ft4試劑有效期長，可 達(dá)4

11、6個月，適合標(biāo)本量不大的實驗室，特別是基層醫(yī)院。 serozyme-i型磁酶聯(lián)免疫定量測定儀設(shè)置人機(jī)對話程序，具有在三 波長下(492nm/550nm/630nm)同時測定樣本吸光度值，可自動排除比 色皿的干擾，進(jìn)行峰值與非峰值波長自動切換組合檢測、拓寬量程、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合及檢樣的數(shù)據(jù)處理和結(jié)果的打印等功能，儀器性能較 穩(wěn)定，故serozyme系統(tǒng)是一種理想的、可替代ria的、用于激素等 微量物質(zhì)定量和定性分析的免疫化學(xué)技術(shù)。參考文獻(xiàn)1 馮根寶，胡蘭萍，王曉春，等.直接法血清游離t3、游離t4 測定和臨床應(yīng)用.天津醫(yī)藥，1992, (20): 277.2 calddweug ,kellettha ,gowsm ,etal. anewstrategyforthyroidfunctiontesting. lancet, 1985, 8438： 1117.3 侯永健