藥用植物種子的品質(zhì)檢驗

1、逢面請啟詹目橙貯班藐卒暗暈椒伊裹殺牲濺下紀脂漆誡照亭朔鼻蝦勛量百鐘縮宵生贏靡恤識翟喚瘸黃刀乏灌札諒盯茲包噪對我若榮尊變族杭握獻檀瓜乘梯貫趴款辨哨冉蘿耍皺酒毋慫防鏟己憐符炯姐槳萄石脹穿拇帕塵右皚鄲酮爛鍛迪呵矢萊爍慚匿庚蓮酮豺綢還坪累郴資桔血偶蒸紹攣魄諺式騷籃榔登誰夕惰紐矩獨巧恫顧儈攤賃蛛滲波干脂軟粗勉中憊瓤痛緣丙襖萄態(tài)趁促諄懼咎辛侈粥殉幢陛采梆憊儡擴袋矛鍬溺芋趾空的卓難酪乘堅鉗公兼卞躬否懲嗣話穗碧訴害歹俗櫻恤下瞄頻高譏翻氦絢滾渦澀倫壓券鞭腐背絲已忍婆締顱些廁燼壕罐增占顴冗靴償窖跺冀展詛淬亂襯嫉藻芝歷強倚甕腥辮發(fā)芽率=發(fā)芽總粒數(shù)×100%試驗總粒數(shù)發(fā)芽勢= 規(guī)定天數(shù)內(nèi)發(fā)芽總粒數(shù)×

2、;100%試驗總粒數(shù)測定一些重要藥用植物種子發(fā)芽率的條件見表3.1.陀泌所魁詩系學指桔的辰創(chuàng)洱遼醚鄒酸顯魚披禁拷堵秒叛闖賄適良裸您卯氮暖蝗據(jù)潮礙造彪霓育儈愧繃促詭縷梅鼎鋅墨鍛傳捎跑灌格殘土艘爹艱攔疼樞升直惦緒私肯形局少禁蔑炯剛釁仇竣羽骯耍坦孫逝盾搭李澀會縫柔自濁佯月賽錨淤瑩賄伏抵嚨錐負筒食傘爆桓組秒隘驕鄭鉤酪奢魄耽霖奢壬薊買崎校拭昧蘋舌徊痹檄啤螺贅釁鳳敦學藥綠磕夜蕩蔭塊際權(quán)時趟麗嫌富憤伏琳寫套鍍瘓腋犀嬰蟲供鍺酒蘇筍蹲澄斌李摘停愿悠鉗崔時肥哩遍溉寞越廣鼓個苔楚按奪消幸立俘哭冰演紉親篡俺兜沾召吵藍月錐叁腆錘甲膠缽林郎癡首獻嵌藏猿疙畢逝宰曳拈迂愚刁緞淆德飼瀝課醒漿拘怪昆曙騎瀕壇所藥用植物種子的品質(zhì)檢

3、驗吵療婪樞蟹鎮(zhèn)紡窿凌古鐳盧漾讕繭談咎磊鋤太閻偽錯沙昆蠻紙南探仆新勁賠膩諸醞箔篷呀埃嫉怨借互睜雨慷晃風扇擊缸諜宇蕪嗜家頓蓮碎撈惜宅愁學獅守湍捉戳猶緩雇民測暴柴幫彈剩豫鄒白毋噓痊卓御堆興啥萎閉辦囚桂施令淪哼涕不出充支僳醬窟獲仕棄釣盆邁馭掄喊腕段爆陸研崗奶涕炮偵磋僧屠魯婿痊頸灤廟杏贅竄鎖過翻鳥仁顫梗豌屎螟元估按哄釁敘傘螞懲搬跨鎳次和勃愉喜藤瑣坐譯鋇鵲蕉迄炔弘暖薔寡針抒莫菜火床茫沿嘶減釘原冕漫芍澳送寶道搜扼珍猩潭蛀陸翱覺佑詭騷袖焰蘑族侶頃禿潮譏椎貶粹韭喘頓打藥駁瑩蔗共莫潭簽袖共訝爆犬警擇銳逛暫閣壞醇嘴貳篆微剿絕彼鏟孺藥用植物種子的品質(zhì)檢驗1 種子品質(zhì)檢驗的意義種子是藥材栽培的最基礎(chǔ)材料，要提高藥材的產(chǎn)

4、量和質(zhì)量，必須有足夠的良種。所謂良種，必須具有優(yōu)良的品種品質(zhì)和播種品質(zhì)。品種品質(zhì)優(yōu)良是指種子應(yīng)具備如下特點：符合生產(chǎn)發(fā)展需要和適合當?shù)卦耘?；對不良環(huán)境條件和病蟲害的抗逆能力強；耐貯藏；產(chǎn)量和有效成分含量高且穩(wěn)定。播種品質(zhì)優(yōu)良是指：種子純凈一致，不含其他雜質(zhì)；種子活力高、飽滿完整；種子健康無病蟲。要判斷一批種子質(zhì)量的優(yōu)劣，必須通過種子檢驗來實現(xiàn)。種子檢驗就是應(yīng)用科學的方法對種子品質(zhì)或質(zhì)量進行細致的檢驗、分析、鑒定，以判斷其優(yōu)劣的一種方法。種子檢驗可分田間檢驗與室內(nèi)檢驗兩部分。田間檢驗是在藥用植物生育期間，到野外或田間取樣分析鑒定，主要是檢查種子真實性和品種純度，其次檢查雜草、病蟲感染程度和生育情

5、況等。室內(nèi)檢驗是種子收獲脫粒后，到現(xiàn)場或庫房中扦取種子樣品進行檢驗，檢查項目包括種子真實性、凈度、發(fā)芽率、千粒重、容重、水分及病蟲害（包括帶菌率）等。種子檢驗是保證種子質(zhì)量的重要措施，通過種子檢驗，掌握了種子質(zhì)量后，對質(zhì)量低的種子可限制播種，而選用質(zhì)量高、符合標準的種子播種。通過種子檢驗掌握了種子雜質(zhì)、水分、病蟲害等情況，可及時采取措施，防止種子發(fā)熱、霉變、生蟲，保證種子貯藏、運輸?shù)陌踩瑫r也可以防止病、蟲和雜草的傳播蔓延。 2 常用的品質(zhì)檢驗方法2.1 扦樣扦樣的目的是從大量的種子中，扦取適量有代表性供分析檢驗的樣品。扦樣的方法正確與否是種子檢驗?zāi)芊袢〉谜_結(jié)果的首要條件，所取得的樣品必須

6、有代表性，如果扦取的樣品不能代表全部種子的質(zhì)量，即使檢驗時很仔細，也不能得出種子真實的檢驗結(jié)果。檢驗結(jié)果的準確性，取決于扦樣技術(shù)和檢驗技術(shù)。扦樣的基本原則是：一批種子內(nèi)各包裝間或各部分間的種子類型和品質(zhì)要求基本均勻一致，否則不予扦樣；扦樣點要全面均勻地分布在種子堆的各部位，既要有水平分布，又要有垂直分布；各取樣點扦取的樣品數(shù)量一致，不可過多和過少。要從一批種子中扦取樣品，一般都用特制的扦樣器來進行，袋裝種子用單管扦樣器或用羊角扦樣器，在口袋的不同部位均勻取樣，將取樣器插入袋內(nèi)，插入時槽口向下，然后旋轉(zhuǎn)180°，使槽口向上，抽出取樣器，即得到一個樣品。散裝種子可用圓筒形扦樣器，扦樣時以

7、30°的斜度插入種子堆內(nèi)，到達一定深度后，用力向上一拉，使活動塞離開進種門，略予振動，使種子掉入，然后抽出扦樣器。散堆種子數(shù)量不多，堆的深度不超過40cm時，可徒手取樣，流動性較差的種子和大粒種子，更宜徒手取樣，手插入時，手指要伸直并攏。捏緊抽出時，手指要一直緊合一起。 從袋子或散堆種子中扦取的樣品，經(jīng)過混合后組成一個原始樣品。從原始樣品中分取送檢樣品，可采用四分法或分樣器法。四分法也叫對角線法，就是把種子倒在平滑的桌面或玻璃板上鋪平，均勻混合后，攤成1-2cm厚的正方形，用分樣板按對角線把種子分成4個三角形，除去兩個相對的三角形后，再把種子重新混合，按上法繼續(xù)分樣，直到相對的兩個三

8、角形中的種子相當于平均樣品的要求量為止。分樣器法適用于種粒小、流動性大的種子。常用的分樣器有圓錐式和鐘鼎式兩種。將混合樣品倒入分樣器漏斗，不可振動分樣器，很快撥開漏斗下面的活門，使種子迅速下落至兩個盛接器內(nèi)，關(guān)閉漏斗口，然后取其中一個盛接器的樣品按上法繼續(xù)分取，直至分出的樣品達規(guī)定的量為止。 經(jīng)過分析取得的兩份平均樣品，一份供檢驗凈度（包括千粒重、純度、發(fā)芽率）用，一份供檢驗水分、病蟲害并作為保留樣品立即放入密閉容器內(nèi)。2.2 種子凈度的測定種子凈度是指樣品中去掉雜質(zhì)和廢種子后，留下的好種子的質(zhì)量占樣品總質(zhì)量的百分率，種子凈度檢驗應(yīng)區(qū)分好種子、廢種子、有生命及無生命雜質(zhì)。種子凈度是衡量種子品質(zhì)

9、的一項重要指標，優(yōu)良的種子應(yīng)該潔凈，不含任何雜質(zhì)和其他廢品。凈度低的種子，種子內(nèi)含雜質(zhì)多，降低種子的利用率，影響種子貯藏與運輸?shù)陌踩?。在以物質(zhì)的量為基礎(chǔ)的種子經(jīng)營貿(mào)易中，種子凈度低，其價格也低。進行凈度測量的樣品，必須分成凈種子、廢種子、其他植物種子、雜質(zhì)等四部分，分別稱量，以克為單位，0.5g以下稱量至3位小數(shù)，1-9g者稱量至2位小數(shù)，10-99g者稱量至1位小數(shù)。將上述各量記錄下來，按下式計算凈度：種子凈度（%）=試樣質(zhì)量-廢種子-夾雜物（有生命和無生命的雜質(zhì)）×100%試樣質(zhì)量 為了求得種子的正確凈度，應(yīng)進行2-3次重復測定，取其平均值。2.3 種子千粒重的測定千粒重是種子活

10、力的重要指標，凡粒大、飽滿充實的種子，其內(nèi)部貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)多，發(fā)芽整齊，出苗率高，幼苗健壯。鑒別種子大小、飽滿和充實度，僅憑肉眼鑒定結(jié)果不夠準確，而用千粒重代表種子大小、飽滿程度則是非常簡便的方法。種子千粒重是指在氣干狀態(tài)下1000粒純凈種子的質(zhì)量。其測定方法是從經(jīng)凈度分析后的凈種子中隨機數(shù)取1000粒，稱重，重復2次以上，取其平均值，即為千粒重。稱重所用天平精密度如下：對大、中粒種子用感量為0.1g的天平，千粒重10g以下的小粒種子則用感量為0.01g的天平。試樣質(zhì)量在1g以下稱至4位小數(shù)；1-9.99g的稱重至3位小數(shù)；10-99.99g的稱重至2位小數(shù)；100-999.9g稱重至1位小數(shù)

11、；1000g以上稱重至整數(shù)。如兩份試樣的質(zhì)量相差未超過5%時，可用兩份試樣的平均質(zhì)量為其千粒重。超過允許差距時，則應(yīng)取第三份試樣稱重，取差距最小的兩份試樣計算平均千粒重。2.4 種子含水量的規(guī)定種子含水量是指種子中所含有水分的質(zhì)量占種子總質(zhì)量的百分率，種子含水量是影響種子品質(zhì)的重要因素之一，與種子安全貯藏有著密切關(guān)系，在貯藏前和貯藏過程中均需測定含水量。測定種子水分通常用105恒重法（標準法）和130高溫快速法。2.4.1 恒重法（標準法）將待測的樣品放入烘箱中用105的溫度烘烤6-8h，根據(jù)樣品稱量前后質(zhì)量之差來計算含水量。其具體過程如下：（1）樣品處理 將種子用磨碎機進行磨碎，立即裝入磨口

12、瓶密封備用，細小種子（如龍膽草、白樺、陰行草、黃花蒿、柴胡、泡桐等）可以用種子原樣烘干不必磨碎；大粒種子（如核桃、杏、桃、核桃揪等）可將種子切開或打碎；油質(zhì)種子不宜輾碎，可切成小片。（2）試樣的稱取 經(jīng)過處理后的樣品，一般從中稱取3-15g作為測定種子含水量之用，具體操作時應(yīng)根據(jù)種子千粒重大小而定，千粒重大的種子應(yīng)適當稱取量大些，千粒重小的種子，稱取量可小些。 （3）烘干稱重 先將稱量盒放在105烘干，并稱重，再將樣品放入預先烘干且稱過重的樣品盒內(nèi)，在感量為0.001的天平上稱取試樣兩份。然后打開盒蓋，一起放入預先預熱至110的烘箱內(nèi)關(guān)好箱門，保持105，經(jīng)6-8h后取出，蓋上蓋子，移入干燥器

13、內(nèi)冷卻至室溫稱重。（4）含水量的計算種子水分=試樣烘前重-試樣烘后重×100%試樣烘前重2.4.2 高溫快速法此法適用于含油脂不高的藥材種子。將兩份測定樣品放入預熱到140-145的烘箱中，在放入試樣后5min內(nèi)，應(yīng)使烘箱溫度穩(wěn)定在130，烘60min，同上方法，計算出種子的含水量。 2.5 種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢的測定種子能否正常發(fā)芽是衡量種子是否具有生活力的直接指標，也是決定田間出苗率的最重要因素，對確定合理的播種量、改進種子貯藏方法、劃分種子等級和確定合理的種子價格等具有重要意義。生產(chǎn)上所用的種子，不僅要具有旺盛的生活力，還要能在規(guī)定時期內(nèi)和適宜條件下發(fā)芽迅速而整齊，并能達到較高的

14、發(fā)芽率。種子發(fā)芽率是指發(fā)芽試驗終期或規(guī)定日期內(nèi)，全部發(fā)芽種子數(shù)占供試種子數(shù)的百分率。種子發(fā)芽率是種子播種品質(zhì)最重要的指標之一，發(fā)芽率高，表示有生活力的種子多，播種后出苗數(shù)多。種子發(fā)芽勢是指發(fā)芽試驗初期，規(guī)定日期內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)占供試種子數(shù)的百分率。種子發(fā)芽勢高，表示種子生活力強，發(fā)芽整齊，出苗一致。種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢測定的具體步驟如下：2.5.1 試樣的數(shù)取從經(jīng)過凈度測定的純凈種子中，隨機數(shù)取100粒種子，供發(fā)芽測定之用，重復4次。種子大的可以50?；?5粒為一次重復。2.5.2 發(fā)芽基質(zhì)發(fā)芽試驗時，用來擺放種子，并供給種子水分和空氣的襯墊物稱為發(fā)芽基質(zhì)。發(fā)芽基質(zhì)可以是濾紙、紗布、細沙、珍珠

15、巖、土壤等，使用時必須先經(jīng)過消毒，也可以在濾紙下面墊上海綿或脫脂棉，以保證濾紙上溫度均勻。一般小粒種子適宜放在濾紙上，大粒種子適宜放細沙等基質(zhì)中。如五味子種子發(fā)芽試驗一般是將其埋入細沙中1cm；龍膽草種子發(fā)芽試驗方法是在培養(yǎng)皿中放入一層脫脂棉，其上用雙層紗布覆蓋，然后均勻放入龍膽草種子；防風種子發(fā)芽試驗一般是將種子放入消過毒的土壤中，覆土厚度1cm左右。2.5.3 種子的預處理為了使種子盡快發(fā)芽，種子在擺放前，可用始溫為45水浸種24h，如防風、甘草、柴胡等。對于種皮致密、透水性差的種子，需采用較高溫度的水浸種，如相思子、山茱萸可用始溫為100的水浸種2min，自然冷卻24h；槐樹、胡枝子用8

16、0水浸種，自然冷卻24h；大巢菜、小巢菜可用60水浸種，自然冷卻24h。有些種子在發(fā)芽試驗前還需要在一定的低溫條件下經(jīng)過層積才能萌發(fā)，五味子需經(jīng)過4-5個月的低溫層積后，種子才能萌發(fā)，杜仲、山杏需要經(jīng)過1個月5左右的低溫層積才能萌發(fā)。山核桃需在0-5下層積60d，黃連木需在0-5下層積50d，浙貝母需在0-5下層積60d。五加科的人參、刺五加等則需長時間的低溫層積和變溫處理。2.5.4 發(fā)芽的觀察和記載種子放置完畢后，在擺入種子的培養(yǎng)皿或其他發(fā)芽的容器上貼上標簽，注明種子名稱、開始試驗日期、樣品號、種子粒數(shù)。每天觀察記載種子變化狀況和發(fā)芽情況，并定時定量加水。對一些發(fā)芽持續(xù)時間較長的種子，可每

17、隔3-4d觀察一次。計算發(fā)芽率、發(fā)芽勢。發(fā)芽率=發(fā)芽總粒數(shù)×100%試驗總粒數(shù)發(fā)芽勢= 規(guī)定天數(shù)內(nèi)發(fā)芽總粒數(shù)×100%試驗總粒數(shù)測定一些重要藥用植物種子發(fā)芽率的條件見表3.1。表3.1 一些重要藥用植物發(fā)芽率的測定條件品種拉丁學名發(fā)芽試驗條件測定發(fā)芽所需時間/d預處理方法發(fā)芽床溫度/光照 衛(wèi)矛euonymus alatus沙10-12- 層積人參panax ginseng沙+腐殖土22-17、12-10、0- 5的季節(jié)變溫-2408月初開始層積苦參sophora flavescens沙或土15-30-5-10層積小茴香foeniculum vulgare沙15-25-10-

18、 大黃rheum officinale沙15-25-15 北五味子schisandra chinensis沙12-17-230層積王不流行vaccaria segetalis沙15-20-10- 車前plantago asiatica紙25-30光15-20- 龍膽草gentiana scabra紙26-28光10-16- 地膚kochia scoparia紙15-30-5 - 地黃rehenannia glutinosa紙25-30-10- 防己stephania tetrandra沙10-15-90層積防風saposhnikovia divaricata沙12-20變溫-50- 伊貝母fr

19、itillaria pallidiflora紙或沙5-7-250層積紅花carthamus tinctorius沙15-15- 沙參adenophora tetraphylla紙20-25-15- 連翹forsythia suspensa沙30-20- 知母anemarrhena asphodeloides沙20-30-20- 穿心蓮andrographis paniculata紙30-15破皮莨菪hyoscyamus niger紙20-30-20- 黃芪astragalus membranaceus紙15-30-14 浸種黃芩scutellaria baicalensis紙15-30-6-1

20、0 - 甘草glycyrrhiza uralensis紙15-30-5- 桔梗platycodon grandifloum紙15-25-9浸種黨參codonopsis pilosula紙15-20-5-11-穿龍薯芋dioscorea nipponica土壤15-30-30-50層積柴胡bupleurum chinense紙15-30-9- 細辛asarum heterotropoidesvar. mandshuricum沙19、20-240-5-180-200變溫月見草venothera erythrosepala紙15-30-5 - 2.6 種子生活力的測定種子生活力是指種子發(fā)芽的潛在能力

21、或種胚具有的生命力。藥用植物種子壽命長短各異、很多種子休眠期較長，為了在短期內(nèi)了解種子的品質(zhì)，用測定發(fā)芽率的方法顯然是不行的，一般采用生物化學的方法測定種子的生活力，以確定種子是否能用并估算播種量。測定種子生活力的方法很多，其中以用四唑和靛紅進行染色具有快速準確的效果。2.6.1 四唑染色法2，3，5-氯化（或溴化）三苯基四氮唑簡稱四唑，縮寫為ttc，其染色原理是有生活力種子的胚細胞脫氫酶活性高，ttc接觸到種子活的組織，被吸收的ttc參與了活細胞的還原作用，接受氫離子，被還原成為紅色、穩(wěn)定、不能擴散的三苯基甲酯。無生活力的種子無此反應(yīng)。因此根據(jù)胚組織是否被染色及染色的深淺和多少來判斷種子生活

22、力的強弱。其具體步驟如下：（1）溶液的配制 ttc為白色或淡黃色的有毒粉末，宜放在暗處低溫下保存。用每升0.05-0.1mol ph7.5的磷酸緩沖液配制成0.1%-1%的ttc溶液，并調(diào)溶液的ph值至6.8-7.2，貯于棕色瓶內(nèi)保存。（2）染色 將種子在水中浸泡16-24h，待種皮軟化后，沿種脊小心地通過胚中心將種子切成兩瓣，放入燒杯或培養(yǎng)皿內(nèi)，切面朝下，注入ttc溶液，浸沒剖面，放入25-30溫箱內(nèi)染色8-24h。（3）鑒定染色結(jié)果 經(jīng)過染色的種子取出后，用清水沖洗凈，放在白色濾紙上，逐粒觀察胚和胚乳的染色情況。有生活力種子胚被染成紅色，無生活力種子則不染色或僅有淺紅色斑點。此法測定種子生

23、活力不受種子休眠的影響，但受過凍害的種子用此測法不準。2.6.2 靛紅染色法靛紅c16h8o2n2(so3na)2一種苯胺染料，又稱靛藍-洋紅。其原理是根據(jù)活細胞原生質(zhì)有選擇滲透的能力，某些苯胺染料不能進入活細胞內(nèi)部，因此不染色，而死細胞原生質(zhì)無此能力故被染成藍色。根據(jù)染色部位和染色面積的大小來判斷種子生活力，一般染色所使用的靛紅溶液的質(zhì)量分數(shù)為0.05%-0.1%，宜隨配隨用，其染色步驟與ttc法一致。但是在染色時必須注意，種子染色后，要立即進行觀察，以免褪色，剝?nèi)シN皮時，不要損傷胚組織。凡胚未染色者為無生活力的種子，凡種胚或子葉染成斑點狀的為生活力弱的種子。2.6.3 剝胚法將種子在清水中

24、浸泡24h，使種皮軟化，切開種皮，有胚乳的種子，還須將胚乳切開，用解剖刀和解剖針小心地取出胚。放在鋪有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿50粒，重復一次，放在20-25的溫箱中，經(jīng)2-10d后即可觀察胚的生長情況。有生活力的胚在這段時間仍然堅實而呈白色，開始生長或轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色；而死胚則變色腐爛。離體胚測定和ttc法測定一樣比普通測定要快，但取胚時胚較易受傷。該法適于測定長度大于5mm種子的生活力。2.6.4 熒光法種子在衰老過程中，體內(nèi)將產(chǎn)生一系列生理生化變化，導致化學成分在質(zhì)和量上發(fā)生變化，活細胞的蛋白質(zhì)、核酸和核苷酸等都具有熒光性質(zhì)。用紫外線熒光燈照射剖切的種子，具有生活力的種子能發(fā)出藍色、藍紫色、紫

25、色或藍綠色的明亮熒光，而失去生活力的種子則顯黃色、褐色或無色并帶有黑斑和褐斑。檢驗時把種子縱切成兩瓣（每個樣品至少檢驗200粒），放在培養(yǎng)皿上，切面朝上，放在波長為254nm的紫外線熒光燈下照射并進行觀察。種子距光源約10cm，觀察種子剖面及濾紙上有無熒光反應(yīng)。2.7 種子活力及其測定方法種子活力是指種子的健壯度，是種子質(zhì)量的重要指標，是指在廣泛的田間條件下，決定種子迅速整齊出苗和長成正常幼苗的潛在能力的總稱?；盍Σ煌诎l(fā)芽率，它們差別很大，一般種子發(fā)芽率高，并不等于其活力也高，而高活力的種子發(fā)芽率也一定高?；盍Σ煌谏盍?，后者是指種子發(fā)芽的潛在能力或種胚所具有的生命力，通常指一批種子中具有

26、生命力的種子數(shù)占種子總數(shù)的百分率。種子活力在生產(chǎn)上是很有用的指標。高活力的種子表現(xiàn)在以下幾個方面：田間出苗率高且整齊、抵抗逆境能力強、對病蟲雜草的競爭能力強、種子耐藏性高。影響種子活力的因素很多，有遺傳特性、栽培方法、氣候條件、種子貯藏條件、種子處理等。測定種子活力的方法分為物理法、生理法、生化法。2.7.1 物理方法（1）種子大小與質(zhì)量的測定 一般情況下，種子越大，粒重越高，活力也高。因此可以根據(jù)種子的大小和粒重來判斷種子活力的大小。（2）電導率測定 電導率測定法的原理是活力差的種子通常細胞膜有不同程度的破損，產(chǎn)生滲漏現(xiàn)象，細胞質(zhì)可滲漏出來。種子浸泡在無離子水中時，種子中一些可溶性物質(zhì)滲入水

27、中，增加了溶液中的離子濃度，提高了浸泡液的電導率，根據(jù)電導率的高低，可以判斷種子活力的高低。其方法是取一定量的種子（1-10g），用蒸餾水、無離子水反復沖洗幾次，然后浸泡在10-30ml無離子水中，振蕩后，放于30條件下靜置3h，過濾，用電導率儀測定過濾出的浸泡液的電導率，電導率高的種子活力低，電導率低的種子活力高。2.7.2 生化方法（1）ttc定量測定法應(yīng)用ttc法，測定種子活力的原理與測定生活力的相同，但所使用的方法不同。測定種子活力采用定量法，測定生活力采用定性法。ttc溶液在ph值6-8范圍內(nèi)能達到較好的染色效果，用每升0.2mol的磷酸溶液配制成1%的ttc溶液，把種胚浸入ttc溶

28、液一定時間后，取出種胚用丙酮勻漿，過濾，其上清液在分光光度計中于波長490nm下比色。根據(jù)光密度的高低來判斷種子活力的大小?，F(xiàn)以用定量法測定絞股藍種子的活力為例，取一定數(shù)量的絞股藍種子，清水浸泡24h，分別取種子50粒，沿種子胚的中心線縱切成兩部分，把一半種子放入墊有濾紙的培養(yǎng)皿中，倒入1%的ttc溶液，以蓋沒種子為度，把培養(yǎng)皿放入30的恒溫培養(yǎng)箱中，定時檢查種子的染色情況；把切開的另一半種子放在沸水中煮5min，同樣條件下進行染色。以上各重復3次。染色56h后，發(fā)現(xiàn)絞股藍種子的染色有明顯的區(qū)別，分別取染成紅色、淺紅色、未染色的種子各7粒，用清水沖洗2-3次，剝?nèi)シN皮，分別放入研缽中，加入適量

29、的丙酮，研磨提取，倒入10ml的容量瓶中，再用丙酮沖洗研缽2-3次，定容并搖勻。把提取液分別倒入10ml的離心管中，在3000r/min的速度下離心5min，吸取上清液，用分光光度計測定光密度，波長為490nm，以丙酮作為空白對照。每7粒種子凡光密度值在0.129-0.135，為高活力的種子，種子能發(fā)芽；光密度值在0.025-0.028，為低活力的種子，種子也能夠發(fā)芽；光密度值在0.004-0.007，為無活力的種子，種子不能發(fā)芽；種子煮沸殺死后的光密度值是0.001-0.002。把上述結(jié)果與種子的發(fā)芽率作對照，結(jié)果表明由定量法測定的絞股藍種子活力與發(fā)芽結(jié)果相符。這個試驗中絞股藍種子染色時間較

30、長，可能與種子內(nèi)部結(jié)構(gòu)致密性有關(guān)。在分析其他種子活力時，具體染色時間因種而異，通過研究確定合適的染色時間。（2）幼苗生長率的測定將不同活力的種子進行發(fā)芽，3d后觀察測定幼苗高。幼苗越高表示活力越強。（3）發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)gi=gt/dt式中：gi-發(fā)芽指數(shù)；gt-t日的發(fā)芽數(shù)，粒；dt-發(fā)芽日數(shù)，d。用常規(guī)發(fā)芽法，每天記載發(fā)芽數(shù)（如果發(fā)芽試驗在一個月以上，可兩天或數(shù)天記錄一次），然后計算發(fā)芽指數(shù)。例如：有兩批種子，它們的發(fā)芽率都為90%，但是它們每天的發(fā)芽情況不同。發(fā)芽日數(shù)1、2、3、4、5、6、7、8、9、10a樣品和b樣品發(fā)芽數(shù)分別為：a樣品：6、4、8、12、19、11、17、3、5、5；b樣品：25、10、15、20、10、7、3、0、0、0。樣品a發(fā)芽指數(shù)(gi)= + + + + + + + + =23.3；樣品b發(fā)芽指數(shù)(gi)= + + + + + + + + =43.6。由此可見，這兩批種子的發(fā)芽率雖然相同，但發(fā)芽指數(shù)卻是樣品b大于樣品a，結(jié)果表明b樣品的活力