紅細(xì)胞參數(shù)篩查地中海貧血在產(chǎn)前檢查中的應(yīng)用價(jià)值

1、臨床醫(yī)學(xué)論文-紅細(xì)胞參數(shù)篩查地中海貧血在產(chǎn)前檢查中的應(yīng)用價(jià)値作者：許曉清吳方貴宋丹譚玉梅邱耀芳【關(guān)鍵詞】 紅細(xì)胞參數(shù)摘 要：目的:探討紅細(xì)胞平均體積(mcv)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(mch)、紅 細(xì)胞體積分布寬度(rdw)并結(jié)合hba2、hbf檢測(cè)結(jié)果在篩查圍產(chǎn)期地中海貧血中 的應(yīng)用價(jià)値。方法:采用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀分別對(duì)120例地中海貧血患者、90例非 地中海貧血者和60例對(duì)照者進(jìn)行mcv、mch、rdw測(cè)定，層析法測(cè)定hba2，堿變性 法測(cè)定hbf，并對(duì)結(jié)果作相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。同時(shí)將部分篩查結(jié)果與地中海貧血基因 診斷(pcr)結(jié)果進(jìn)行比較，分析篩查方法的敏感度和特異度。結(jié)果:地中海貧血 組mc

2、v、mch、rdw與對(duì)照組比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)；對(duì)照pcr結(jié)果， mcv、mch、rdw診斷輕型地中海貧血的敏感性98.3% »特異性76.7%。結(jié)論:mcv、 mch、rdw可作為篩查圍產(chǎn)期地中海貧血的有效指標(biāo)，可疑者建議做進(jìn)一步的檢查， 以明確診斷。關(guān)鍵詞：紅細(xì)胞參數(shù)；地中海貧血the value of erythrocytic parameters on screening thalassanemia inprenatal diagnosisabstract ： objcctive ： to study the value of the tests of

3、 mean corpuscular vo1ume (mcv) 、mean corpuscular hemoglobin (mch) 、red blood cell distribution width (rdw )and hemoglobin zones analyses for the diagnosis of halassemial .methods : mcv、mch and rdw were detected from 120 cases with thalassanemia 90 cases with nonthalassanemia and 60 cases control by

4、automatic blood analyzer system. hba2 were detected by chromatography ' hbf were analyzed by anti -base test and compared wi th the test of gene diagnosis (pcr test) in order to evaluating their sensitivity and speci f ici ty. resul t :the resul ts o f mcv »mch and rdw showed significantly

5、different between the thalassanemia group and the control group (p< 0.01) .the sensitivity and specificity of mcv » mch ，rdw wa s 98.8% and 73.6% comparing with pcr. conclusion : mcv，mch and rdw could use as significance level on screening thalassanemia in prenatal diagnosis.key words : eryt

6、hrocytic parameters ； thalassanemia地貧的檢驗(yàn)方法很多，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，地貧的基因診斷已被應(yīng) 用于臨床，成為目前診斷地貧的金標(biāo)準(zhǔn)，目前國(guó)內(nèi)外用于明確診斷的是聚合酶鏈 反應(yīng)(pcr)技術(shù)結(jié)合其他分子生物學(xué)手段檢測(cè)a、/3地貧基因的方法1，2。 但由于其方法煩瑣、設(shè)備要求高、費(fèi)用昂貴等原因，在基層單位不能作為常規(guī)診 斷手段。因此，國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室仍常用方便、簡(jiǎn)捷的血液學(xué)檢測(cè)方法，包括平均紅細(xì) 胞參數(shù)(mcv、mch、mchc)、紅細(xì)胞脆性等檢測(cè)3，4。本文對(duì)近年我院2870 例患者分別進(jìn)行mcv、mch、rdw測(cè)定篩查輕度地貧患者，并將其中確診的110 例地貧

7、患者和90例非地貧結(jié)果與地貧基因診斷結(jié)果作對(duì)照，分析該篩查方法的 敏感度及特異度。1資料與方法1.1臨床資料：1999年12月至2005年8月我院住院患者及門診婚檢者共2870例，年齡介于1940歲之間。正常對(duì)照組：男、女各30例，血液學(xué)常規(guī) 檢查正常，排除肝腎等方面疾患的婚檢人群中隨機(jī)抽取。1.2方法1.2.1 mcv、mch和rdw測(cè)定：用日本sysmex公司的sf-3000血細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定mcv、mch和rdw。1.2.2 hba2 :用西班牙biosystems s.a公司層析柱試劑盒測(cè)定。1.2.3 hbf ：按全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程堿變性試驗(yàn)測(cè)定。1.2.4地貧基因診斷：a 地貧

8、基因檢測(cè)使用四重pcr技術(shù)，b 地貧基因檢測(cè)使用反向點(diǎn)雜交法，基因診斷試劑由深圳益生堂生物企業(yè)有限公司提供。1.3 本室的正常參考値：mcv: 82 fl102 fl;mch:27pg-33pg;rbc:3.6x1012/l54xlo12/l ； rdw:0.1180.135 。14統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用統(tǒng)計(jì)軟件spss11.5進(jìn)行x2檢驗(yàn)及成組t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1共檢出a 地貧：男90例，女69例；地貧：男60例，女46例。a地貧的檢出率為5.5%，b地貧為3.7%，男女發(fā)病率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0. 05）。見表1。2.2男性a地貧hba2含量及女性a地貧rbc，與正常對(duì)照組差別無(wú)統(tǒng)計(jì)意

9、義 （p0. 05），其余各指標(biāo)a、地貧組與正常對(duì)照組均差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p < 0. 05）。見表2，表3。23篩查結(jié)果與pcr結(jié)果對(duì)照敏感度二a / （a+c） xloo% »特異度二d/（b+d） x 100%，從表4可得敏感度為98.3 %，特異度76.7%。見表4。表1成人地中海貧血檢山率（略）表2男子組血液學(xué)指標(biāo)的檢驗(yàn)結(jié)果（略）表3女性血液學(xué)指標(biāo)的檢驗(yàn)結(jié)果（略）表4 mcv、mch篩查結(jié)果與pcr結(jié)果對(duì)照（略）3討論地中海貧血是遺傳性溶血性貧血癥，按受累基因分為a地貧、b地貧° 20世 紀(jì)80年代廣東省衛(wèi)生廳地貧篩查發(fā)現(xiàn)'a地貧為73 % 較全國(guó)高

10、295 % b地貧為1. 85%3. 36%。較全國(guó)高0. 67 %5。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示a地 貧發(fā)生率為5.5 %，3地貧3. 7 %，男、女地貧檢出率差異無(wú)顯著性。與李堅(jiān)等 報(bào)道的檢出率相似6。地貧患者可出現(xiàn)不同程度貧血'重癥a地貧胎兒常于出生前或出生吋窒息死 亡'重癥“地貧患者則于未成年前死亡，目前尙無(wú)根本有效治療地貧的方法'通 過(guò)圍產(chǎn)前遺傳篩查淘汰重癥地貧胎兒是控制該病發(fā)生的唯一途徑。地中海貧血基 因攜帶者的篩查，國(guó)際上并無(wú)統(tǒng)一的臨床實(shí)驗(yàn)方法，用于確診地貧的基因檢測(cè)， 因操作繁瑣、費(fèi)用高、耗時(shí)長(zhǎng)不能作為產(chǎn)前篩查的首選。近來(lái)由于血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 的普遍應(yīng)用，擴(kuò)大了血液

11、學(xué)常規(guī)檢測(cè)的范疇，所提供的mcv、mch、及rdw、rbc等 紅細(xì)胞參數(shù)在地貧中的變化已h益受到重視。從表2、表3可知，部分地貧患者可 無(wú)貧血，國(guó)內(nèi)有些硏究報(bào)道其紅細(xì)胞脆性也可表現(xiàn)為正常7，提示在作地貧的 產(chǎn)前篩查時(shí)不能僅靠這兩項(xiàng)指標(biāo)。在地中海貧血中除hb成分及含量發(fā)生改變外， 幼紅細(xì)胞利用鐵也發(fā)生障礙，主要是原嚇麻與鐵結(jié)合受到障礙，呈小細(xì)胞低色素 性貧血，mcv降低。目前，國(guó)內(nèi)外已較普遍應(yīng)用mcv來(lái)篩查地中海貧血基因攜帶 者3，4但在外周血中存在雙型紅細(xì)胞（正色素與低色素兩者并存）時(shí)，mcv 常處于正常范圍'從而無(wú)法反映紅細(xì)胞體積大小離散狀態(tài)'并且在缺鐵性貧血時(shí)mcv値也是降

12、低的7。rdw是表示紅細(xì)胞體積大小分布的參數(shù)'是反映紅細(xì)胞異質(zhì)的重要指標(biāo)，用變異系數(shù)rdw-cv表示，從量化上表示紅細(xì)胞形態(tài)改變的程 度，地貧組rdwcv> 0. 15，與正常組差異存在顯著性。其升高表示紅細(xì)胞體積大小不一，差異增大。同屬小細(xì)胞性疾病的缺鐵和非貧血性雜合子型地中海貧血，他們的區(qū)別在于前者的rdw增高，后者的rdw正?；蛏栽龈?。從表2、3也可以 看出，6項(xiàng)紅細(xì)胞指標(biāo)中，mcv、mch的降低最為明顯'與正常人的差距較大，基 本上不存在重疊，i司時(shí)rdw與正常人對(duì)比變化不大統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異主要是其中有 部分地貧患者存在溶血現(xiàn)象，所產(chǎn)生的紅細(xì)胞碎片或增加的網(wǎng)織紅細(xì)胞至

13、rdw增 高，輕型地貧患者rdw 般增高不明顯，可以與缺鐵性貧血進(jìn)行鑒別，表明mcv、 mch和rdw結(jié)合可作為篩查a、0地貧的首選。當(dāng)mcv < 80 fl » mch < 26 pg， 伴有rbc升高，男6.0x1012/l，女4.9xlo12/l吋，應(yīng)高度重視。hba2是鑒別輕型a、仔地貧的一項(xiàng)特異性診斷指標(biāo)，凡輕型仔地貧hba2兒乎 都升高，本組b地貧患者h(yuǎn)ba2均3 7%。hbf對(duì)輕型者意義不大，但對(duì)重型/3地 貧（b純合子）患者的診斷較為重要，增高范圍一般為10 %90%。對(duì)照匹1?結(jié) 果，mcv、mch、rdw診斷輕型地中海貧血的敏感性98. 3 % ，特異

14、性76. 7 % ， 與l au8及a ydinok9的報(bào)道相似，造成假陽(yáng)性的主要原因是其他小細(xì) 胞低色素性貧血，如：缺鐵性貧血、某些慢性內(nèi)科疾患等，臨床診斷時(shí)應(yīng)注意加 以鑒別。mcv、mch、rdw結(jié)果在血細(xì)胞分析時(shí)，可一次獲取，符合初篩指標(biāo)的原 則。因此，臨床上根據(jù)mcv、mch、rdw初篩后，再測(cè)hba2、hbf對(duì)于地中海貧血 的檢出靈敏度高、假陰性率低，是一項(xiàng)簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、較準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)方法。但當(dāng)患 者同時(shí)遺傳a、地貧基因雙重雜合時(shí)'由于b 和a 肽鏈同時(shí)缺陷'體內(nèi)可出 現(xiàn)互補(bǔ)現(xiàn)象，往往表現(xiàn)為hba2和hbf升高等/3地貧的特征，a 地貧的特征被掩 蓋，臨床多診斷為仔地貧，

15、本文中通過(guò)基因診斷確診了 5例a、0地貧雙重雜合 子，所以，mcv、mch、rdw以及hba2只能進(jìn)行地貧的初篩，要確診還要進(jìn)一步的 檢測(cè)'對(duì)篩查為b 地貧的患者要注意有無(wú)復(fù)合a 地貧基因'及時(shí)進(jìn)行基因分析 才能為臨床確診提供依據(jù)，有效避免重型地中海貧血患兒的出生。參考文獻(xiàn):1鐘梅，金志魁，徐湘民，等.聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)用于缺失型a地中海 貧血的產(chǎn)前診斷j中華婦產(chǎn)科雜志'1995，30 : 5972599.2xux » liaoc j liuz ?et a 1 antenatal screening and fetal diagnosis of betahala

16、ssemia in a chinese population: p revalence of the beta-thalassemia trait in guangzhou area of chinaj. hum genet，1996， 98 : 199-202.3蔡稔，梁，潘麗珍，等血液學(xué)指標(biāo)在育齡人群地貧篩查中的診斷價(jià) 値j中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2003，11 : 129-132.4鄧捷，文u新質(zhì)，文【j穎琳，等.應(yīng)用平均紅細(xì)胞體積測(cè)定法及紅細(xì)胞脆 性一管定量法篩查地中海貧血j中華婦產(chǎn)科雜志，2000, 35: 610-612.5亦逵廣東省地中海貧血的硏究現(xiàn)狀與展望j廣東醫(yī)學(xué)，1998，19 (4) : 243.6李堅(jiān)，廖燦，鐘惠珠，等大人群地中海貧血產(chǎn)前篩查及產(chǎn)前診斷結(jié) 果j熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2005，5(6) ： 783-785.7 陳建霞羅友娣蔡遠(yuǎn)鳳等輕型地中海貧血者的血液學(xué)實(shí)驗(yàn)參數(shù)硏究j江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2005 23 (2) : 113-114.8 l au yl chan yy. prevalence and geno type of