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文檔簡介
1、高三生物選修一復(fù)習(xí)提綱一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)1.果酒制作:1)原理:酵母菌的無氧呼吸反應(yīng)式:c6h12o62c2h5oh+2co2+ 能量。2)菌種來源:附著在葡萄皮上的野生酵母菌或人工培養(yǎng)的酵母菌。3)條件: 18-25 ,密封,每隔一段時間放氣(co2)4)檢測:在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈灰綠色。2、果醋制作:1)原理:醋酸菌的有氧呼吸。o2,糖源充足時,將糖分解成醋酸o2充足,缺少糖源時,將乙醇變?yōu)橐胰?,再變?yōu)榇姿?。c2h5oh+o2ch3cooh+h2o 2)條件: 30-35 ,適時通入無菌空氣。3、腐乳制作:1)菌種:青霉、酵母、曲霉、毛霉等,主要是毛霉(都是真菌)。2)原理:毛
2、霉產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和aa;脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3)條件: 15-18 ,保持一定的濕度。4)菌種來源:空氣中的毛霉孢子或優(yōu)良毛霉菌種直接接種。5)加鹽腌制時要逐層加鹽,隨層數(shù)加高而增加鹽量,鹽能抑制微生物的生長,避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。4、泡菜制作:1)原理:乳酸菌的無氧呼吸,反應(yīng)式:c6h12o62c3h6o3+ 能量2)制作過程:將清水與鹽按質(zhì)量比4:1 配制成鹽水,將鹽水煮沸冷卻。煮沸是為了殺滅雜菌, 冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響。將新鮮蔬菜放入鹽水中后,蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,以保證乳酸菌發(fā)酵的無氧環(huán)境。3)亞硝
3、酸鹽含量的測定:方法:比色法;原理:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與n-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1、培養(yǎng)基的種類:按物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基,按化學(xué)成分分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基,按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。2、培養(yǎng)基的成分一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽3、微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。4、培養(yǎng)基還需滿足微生物對ph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及o2的要求。5、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。6、常用滅菌方法有: 灼燒滅菌,將接種工具如接種環(huán)、 接種針滅菌; 干熱滅菌:如玻璃器皿、金屬用具
4、等需保持干燥的物品。高壓蒸汽滅菌:如培養(yǎng)基的滅菌。7、用固體培養(yǎng)基對大腸桿菌純化培養(yǎng),可分為兩步:制備培養(yǎng)基和純化大腸桿菌。8、固體培養(yǎng)基的制備:計算稱量溶化滅菌倒平板9、微生物常用的接種方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法。10、平板劃線法是通過連續(xù)劃線, 將菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面,稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,分別涂布到培養(yǎng)基表面。 當(dāng)它們稀釋到一定程度后,微生物將分散成單個細(xì)胞,從而在培養(yǎng)基上形成單個菌落。11、微生物的計數(shù)方法:活菌計數(shù)法、顯微鏡直接計數(shù)法、濾膜法。12、活菌計數(shù)法就是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落, 來源于樣品稀釋液中的一個活菌。 通
5、過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù), 就能推測出樣品中大約含有多少個活菌。 統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察的只是一個菌落。13、 顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量的常用方法,但它包括了死亡的微生物。14、設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響。提高實驗結(jié)果的可信度。 如何證明培養(yǎng)基是否受到污染:實驗組的培養(yǎng)基中接種要培養(yǎng)的微生物,對照組中的培養(yǎng)基接種等量的蒸餾水(設(shè)置空白對照)。如何證明某選擇培養(yǎng)基是否有選擇功能:實驗組中的培養(yǎng)基用該選擇培養(yǎng)基,對照組中培養(yǎng)基用普通培養(yǎng)基 (牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基) 。如果普通培養(yǎng)基的菌落數(shù)明顯大于選擇培養(yǎng)基中
6、的數(shù)目,則說明該選擇培養(yǎng)基有選擇功能。15、如何分離分解尿素的細(xì)菌?培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源,加入酚紅指示劑,如果 ph 升高,指示劑變紅,可初步鑒定該菌能分解尿素。16、如何分離分解纖維素的微生物?以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基。17、纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三組分:c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。18、篩選纖維素分解菌的方法: 剛果紅染色法, 其原理是剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物, 但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅纖維素的復(fù)合物無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解
7、菌為中心的透明圈。(產(chǎn)生了透明圈, 說明纖維素被分解了,說明有纖維素分解菌)三、植物組織培養(yǎng)1、菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。2、常用的培養(yǎng)基是 ms培養(yǎng)基:主要成分包括:大量元素: n、p、k、ca、mg、s;微量元素: b、mn、cu、zn、fe、mo、i、co;有機(jī)物:如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素以及蔗糖等,常常還要添加植物激素。3、生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。1)按照不同的順序使用,會得到不同的實驗結(jié)果。先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素:有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素:細(xì)胞既分裂也分化。同時使用:分化頻率
8、提高。四、dna 和蛋白質(zhì)技術(shù)1、提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。2、dna 溶解性: dna 在不同濃度的 nacl溶液中溶解度不同。在0.14mol/l的 nacl溶液中,溶解度最小。dna 不溶于酒精。3、 dna 對酶、高溫和洗滌劑的耐受性: 因為酶有專一性, 蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但對 dna 沒有影響。 dna 比較能耐高溫。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對dna無影響。4、在沸水浴條件下, dna 遇二苯胺會被染成藍(lán)色。5、提取 dna 的材料一般用雞血而不用豬血,因為哺乳動物(豬)成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,無 dna。6、破碎雞血細(xì)
9、胞時,可以加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。7、為了純化提取的dna,需要將濾液進(jìn)一步處理。在濾液中加入nacl,使其濃度為 2mol/l , 過濾除去不溶的雜質(zhì), 再加入蒸餾水,使 nacl濃度為 0.14mol/l ,析出 dna,過濾除去溶液中的雜質(zhì)。8、向溶解了 dna 的 nacl溶液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精溶液, 目的是提取含雜質(zhì)更少的dna。9、pcr原理: dna 體外復(fù)制10、pcr 的條件:一定的緩沖溶液;dna 模板;分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物;四種脫氧核苷酸;耐熱的dna 聚合酶;控制溫度的儀器設(shè)備。11、為什么要引物?因為dna 聚合酶不能從頭開始合成dna,而只能從 3端延伸 dna 鏈。dna 的合成方向總是從子鏈的5端向 3端延伸。12、pcr三步驟:變性、復(fù)性和延伸。 在 pcr循環(huán)之前, 常要進(jìn)行一次預(yù)變性,以便增加大分子模板dna 徹底變性的概率。13、pcr的結(jié)果:特異地復(fù)制處于兩個引物之間的dna 序列,使這段固定長度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。14、dna 在 260nm 的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰。15、蛋白質(zhì)分離的方法:凝膠色譜法
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