疏肝和胃膠囊的質(zhì)量標準研究

1、疏肝和胃膠囊的質(zhì)量標準研究張建萍（鄭州市骨科醫(yī)院 河南鄭州450052）【摘要】目的 建立舒肝和胃膠囊的質(zhì)量標準。方法 采用薄層色譜法對枳 實、白芍進行鑒別；采用高效液相色譜法同時測定其中甘草昔和甘草酸錢。結(jié)果 薄層色譜鑒別法專屬性強，陰性無干擾。甘草昔、甘草酸鍍分別在0.08260.7021 μg, 0.18721.5912 μg范圍中線性關(guān)系良好。平均加樣回收率分別為 99.97% （rsd = 1.74%）, 99.13% （rsd = 2.10%）。結(jié)論 木法結(jié)果準確，靈敏度 高，可較好地控制木品的質(zhì)量。【關(guān)鍵詞】舒肝和胃膠囊甘草昔甘草酸薄層色譜高效液相色譜

2、【中圖分類號】r927.ll【文獻標識碼】a【文章編號】1672-5085 （2013） 46-0052-02舒肝和胃膠囊由枳實、白芍、甘草、柴胡、黃苓等藥物組成，有疏肝解郁, 降逆制酸之功效，主要用于反胃，吐酸等癥。白芍中的芍藥昔具有舒張胃腸平滑 肌的作用，且對由于緊張刺激而誘發(fā)的大鼠消化潰瘍有明顯抑制作用。木晶 中甘草具有抗炎、抗過敏、抗病毒、抗變態(tài)反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)等作用，乂無明顯副 作用2,為更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，木文建立了白芍和枳實的薄層色譜鑒別方法 及甘草中甘草昔和甘草酸的含量測定方法。1儀器與試藥shimadzu lc-10atvp型高效液相色譜儀（檢測器spd-mloavp）,工作站

3、 class-vp； sartorius cp225d型電子天平；芍藥昔對照品（批號:0833-9501,含 量測定用）,枳實對照藥材（批號:120936-201005, tlc法鑒別用），甘草昔對照 品（批號:111610-200604,含量測定用），甘草酸鞍對照品（批號:110731-200615, 含量測定用）均來源于中國藥品牛物制品鑒定所。舒肝和胃膠囊樣品（鄭州市骨 科醫(yī)院制劑室提供,批號:110616, 110707, 110821）o hplc用甲醇、乙月青為色 譜純，其它試劑為分析純，水為純化水。2方法與結(jié)果2.1舒肝和胃膠囊的薄層色譜鑒別2.1.1白芍取本品10g,加乙醇40m

4、l,振搖提取30min,濾過，濾液水浴 蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。取缺白芍的陰性樣品，同法 制陰性對照溶液。另取芍藥昔對照品，加乙醇制成每iml含lmg溶液，作為對 照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010版一部附錄vib）試驗，吸取上述兩 種溶液各10μl,分別點于同一硅膠g薄板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇 甲酸（40： 5： 20:0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液， 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏 色的藍紫色斑點。而陰性對照無相應(yīng)斑點。見圖圖1白芍tlc1缺白芍陰性對照；2芍藥苗對照品；3,

5、4, 5供試品2丄2枳實取枳實對照藥材粉末0.5g,加甲醇15ml,超聲處理20min,濾 過，濾液蒸干，用甲醇2ml溶解，得對照藥材溶液。取缺枳實的陰性對照樣品， 同法制成陰性對照溶液。取本品5g,加甲醇30ml,超聲處理30min,濾過，蒸干, 殘渣加甲醇iml,即供試品溶液。照薄層色譜法（附錄vi b）試驗，吸取上述兩 種溶液各2μl,分別點于同一用0.5%氫氧化鈉溶液制備的硅膠g薄層板上, 以醋酸乙酯一甲醇一水（100:17:13）為展開劑，展開約3cm,取出，晾干，再以 甲苯一醋酸乙酯一甲酸一水（20:10:1:1）的上層溶液為展開劑，展至約8cm,取 岀，晾干，噴以三

6、氯化鋁試液，置紫外光燈（365nm）下檢視。而陰性對照無相應(yīng) 斑點。見圖2。圖2枳實tlc1枳實對照藥材；2缺枳實陰性對照樣品；3, 4, 5供試品2.2舒肝和胃膠囊中甘草昔和甘草酸鞍的含量2.2.1 色譜條件 色譜柱：agilent zorbax xdb-c18 柱（4.6×150 mm, 5?m)；采用流動相0.05%磷酸溶液(a)乙臘梯度洗脫(08 min, 81%a； 835 min, 81%50%a； 3536 min, 50%0a； 3640 min,081%a,流速：1.0ml/min； 柱溫35°c；檢測波長為237nm)。2.2.2對照品溶液的制

7、備 取甘草昔對照品、甘草酸鞍對照品適量，精密稱 定，加70%乙醇制成每iml各含0.02 mg 0.2 mg的溶液,即得。2.2.3供試品溶液的制備取本品粉末約2 g,精密稱定，置50 ml容量瓶中加入甲醇約45 ml,稱量重量，超聲30min,放冷,用甲醇定容至刻度，搖勻， 濾過，取續(xù)濾液，即得。2.2.4線性關(guān)系的考察 精密吸取甘草卄對照品溶液(0.0413 mg/ml) 2、5、8、11、14、17 μl,甘草酸鞍對照品溶液(0.0936 mg/ml) 2、5、8、11> 14、17 μl,分別注入液相色譜儀，記錄峰面積。以含量為橫坐標，峰面積為縱坐 標

8、繪制標準曲線。甘草井和甘草酸鞍標準曲線方程分別為y=1.79e+06x 17742.5, r=0.9998 (n=6)和 y=5.95e+06x-16798, r=0.9998 (n=6)；表明甘草昔和甘草酸 鞍分別在0.08260.7021 μg和0.18721.5912 μg線性關(guān)系良好。2.2.5陰性干擾試驗 按照工藝制備缺甘草的陰性樣品，并照供試品溶液制 備項下的方法制成缺甘草的陰性對照溶液。精密吸取甘草昔和甘草酸鞍對照品溶 液、供試品溶液與陰性對照溶液各10μl,注入液相色譜儀，繪制色譜圖(見 圖3)。結(jié)果表明，甘草籽和甘草酸鞍的色譜峰與本品

9、其他組分分離良好，陰性無 干擾。圖3舒肝和胃膠囊hplc圖a甘草昔和甘草酸鞍對照品，b樣品，c陰性對照品1.甘草昔2甘草酸2.2.6精密度試驗 精密吸取同一供試品溶液10μl,重復進樣6次，分 別測定峰面積。結(jié)果甘草卄，甘草酸鞍峰面積積分值的rsd分別為0.39%和0.34%o2.2.7穩(wěn)定性試驗精密吸取同一供試品溶液10&mu兒分別于0、2 4、6、8、10、12 h進樣，分別測定峰面積。結(jié)果甘草昔，甘草酸錢峰面積積分值的rsd 分別為2.12%和1.88%o2.2.8重現(xiàn)性試驗 精密稱取同一批號樣品6份，制成6份供試品溶液，分 別進樣10μlo結(jié)果甘草昔

10、，甘草酸鞍峰面積積分值的rsd分別為3.49%和 2.58%o2.2.9加樣回收率試驗 精密稱取已知含量的樣品9份，分別精密加入甘草 昔和甘草酸鞍對照品，按照供試品溶液的制備方法操作，測定結(jié)果見表3, 4。表3甘草昔加樣冋收率試驗結(jié)果2.2.10樣品的含量測定 取三批樣品，分別制成供試品溶液，按照上述色譜 條件進行測定，結(jié)果甘草昔含量分別為1.12, 1.09、1.12mg；甘草酸錢含量分別 為 2.21, 2.16, 2.18mgo3討論3.1采用超聲提取法對同一批樣品提取30、40、50min,測定樣品中甘草昔 和甘草酸鞍的提取率，結(jié)果表明三種方法的提取率接近，無顯著差異，因此選擇 較為省時的超聲提取30mino3.2本實驗用梯度洗脫的方法同吋測定本品中甘草昔和甘草酸鞍的含量，大 大節(jié)省了實驗成本和時間。經(jīng)方法學考察，證明方法準確、靈敏、簡便、快速, 可作為舒肝和胃膠囊質(zhì)量控