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文檔簡介

1、核桃粕發(fā)酵飲料預實驗(2)一、順利完成核桃粕發(fā)酵飲料的基本制作流程,發(fā)酵后的核桃乳放冰箱中冷藏,為測定指標待用二、通過預實驗后工藝過程有所修改核桃粕篩選預處理磨(打)漿過濾前調配殺菌冷卻接種發(fā)酵澄清、過濾后調配均質冷卻灌裝成品操作要點:1.篩選2.預處理:去皮:采用堿液去皮法,在90100,1%的NaOH溶液中燙漂2.53分鐘后,立即冷卻,用清水反復漂洗并手工去皮。3.磨(打)漿:林業(yè)樓117攪拌機 之后 生物樓206高剪切乳化機 4.過濾:將磨漿后的漿液用100目的濾布過濾3至4次,進行漿渣分離,即制得核桃乳。5.前調配:白砂糖 7%,增加乳酸菌發(fā)酵糖源。6.殺菌:采用巴氏滅菌法,將均質后的

2、核桃乳在水浴鍋中6065下滅菌3Omin,備用。7.發(fā)酵:殺菌后迅速冷卻40左右,接種量3%,發(fā)酵溫度發(fā)酵溫度為40,發(fā)酵時間為8h,酸度達到77·8°T時終止發(fā)酵。8.澄清、過濾:核桃粕中的脂肪含量過多,發(fā)酵過后脂肪上浮現象嚴重,也有未添加穩(wěn)定劑和未均質的原因。用澄清方式(如何操作的?)去除脂肪層,而后再過濾一次9.后調配:黃原膠0·09%,CMC-Na 0·09%,單甘酯0·20%,蔗糖酯0·10%與核桃乳混合攪拌均勻。10.均質:于20MPa30MPa下高壓均質兩次。由于實驗室沒有小型均質機,故不要這一步,可以由生物樓206高剪

3、切乳化機代替。三、 去實驗室學習凱氏定氮法測蛋白質含量四、計劃確定基本測定指標后,用預實驗樣品聯系測定法方法,以及分析測定數據。實驗步驟寫得很詳細,很好!后面需要檢測哪些活性指標,也可以列出來考慮一下。 苗苗組 1.完成抗氧化實驗剩余的部分,并作數據結果分析。(見附錄1)2.設計提取的正交試驗(見附錄2)3. 完善論文(更新內容見附錄3)4. 抗血栓實驗結果分析附錄1 抗氧化實驗數據結果Table 2 The relation of the concentration of Vitamin C/GLA and theratio of scavenging DPPH(Scavenging rat

4、io=(Asample-Ablank)/Ablank*100%)Concentration of VC(mg/L)Inhibition ratio(%) Concentration of GLA(mg/L)Inhibition ratio(%)10013.180.10.2220024.2811.4540058.96102.1260072.021003.4580091.3310004.46這幾個表中的結果值都需要以mean ± SE表示。一般統(tǒng)計方法中都會說以下類似的話:Measurements were performed in triplicate 三次或多次and express

5、ed as mean ± SD或± SE,即± standard deviation 或±standard error。也就是說,試驗要重復(嚴格地說是多個樣本分別檢測,而不是同一個樣本檢測多次),結果值須以平均值±標準差或標準誤差表示,以表現出統(tǒng)計學意義。SE相對于SD來說更表現出檢測手段的結果精確度(The standard error of a method of measurement or estimation is the standard deviation of the sampling distribution associa

6、ted with the estimation method.)。Table 3 Hydroxyl radical scavenging activity of various concentrations(Inhibition ratio=As-Au/Au-Am*100%)Concentration of VC(mg/L)Inhibition ratio(%)Concentration of GLA(mg/L)Inhibition ratio(%)5013.840.0014.7210023.130.016.1920032.900.18.4740049.6719.4580063.68109.9

7、3Table 4 lipid peroxidation inhibitory activity of various concentrations(Inhibition ratio = ( Ac-As/Ac) x100%)Concentration of VC(mg/L)Inhibition ratio(%)Concentration of GLA(mg/L)Inhibition ratio(%)1023.610.0017.465028.360.0115.1310046.050.124.9350068.49136.11100081.731047.67Fig.4 The inhibition o

8、f 10mg/L GLA and 100mg/L VC in different situations附錄2 單因素實驗初篩結果物料比 (w/v)gla/DB (wt %)1:80.621:100.651:120.691:150.701:180.72提取時間 (min)gla/DB (wt %)溶料比 (w/v)300.651:12600.631:12900.691:121200.701:121500.721:12提取溫度 ()gla/DB (wt %)物料比 (w/v)提取時間 (min)300.231:1290400.331:1290500.371:1290600.671:1290700.

9、831:1290800.451:1290正交設計試驗方案3因素3水平水平因素提取料溶比提取時間(min)提取溫度()ABC11:10606021:12907031:1512080料液比的間隔不能取成一樣嗎?利用正交表安排試驗 4:正交表列數(最多可安排的因素數)3:因素的水平數9:正交表行數(試驗次數)處理號ABC空GLA提取率(%)111112122231333421235223162312731328321393321附錄3 論文intro部分這一部分改得很好,體現了邏輯思路。結果和討論部分類似,按照論述邏輯引用恰當的別人結果或論點來比較、支持自己的結果或論點。具體修改待你們最后論文統(tǒng)一、

10、完善后從頭修改。文中的引用及參考文獻列表須嚴格按照相應雜志要求撰寫。-linolenic acid (GLA) is one of the essential polyunsaturated fatty acids (PUFA) in human metabolism and a precursor of prostaglandin E1, which is not synthesized by humans but must be consumed in diet. According to the recent study of Yang-Yi FanYang-Yi Fan et al.,

11、 1998. Importance of Dietary Linolenic Acid in Human Health and Nutrition. The Journal of Nutrition. 128(9), 1411-1414 (1998), dietary GLA increased the content of its elongate products, such as dihomo-linolenic acid (DGLA) and arachidonic (AA), and then converted to one particular type of prostagla

12、ndin E1. Such processes are of signification because all these compounds possess many pharmacological applications. It has been reported that GLA has a special value for reduction of low-density lipoprotein in hyper-cholesterolemic patients by IshikawaIshikawa T, et al., 1989. Effects of gammalinole

13、nic acid on plasma lipoproteins and apolipoproteins. Atherosclerosis 75:95104. in 1989. It also exhibited antiviral action studied by NaiduNaidu MRC, et al., 1992. Intratumoral gamma-linolenic acid therapy of human gliomas. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids. 45:1814. qr Ziboh in 1992. Besides

14、, other beneficial medical values such as anti-diabeticsCameron NE, et al., 1996. Comparion of the effects of ascorbyl gamma-linolenic acid and gamma-linolenic acid in the correction of neurovascular deficits in diabetic rats. Diabetologia, 39: 1047-1054. (Cameron, et al., 1996), anti-lipid peroxida

15、tionZHAO Peng, et al., 2004. Experimental study on the effect of- linolenic acid in reducing blood lipids in animals (in Chinese). China Tropical Medicine. 04(05): 722-728 (ZHAO Peng, et al., 2004), anti-thrombusKernoff, P.B.A., Willis, A. L., Stone, K. J., Davies, J. A. & McNicol, G. P. ,1977.

16、Antithrombotic potential of dihomo-gamma-linolenic acid in man. British Medicine Journal. 2: 14411444. (Kernoff, et al., 1977) activities have also been asserted recent years. The traditional sources of GLA are many vegetable seeds such as evening primrose and borage oil. It also found in considerab

17、le quantities in algaeDe B.K, et al., 1999. Effect ofnitrogen sources on -linolenic acid accumulation in Spirulina platensi. Journal of the American Oil Chemists' Society.76: 153-156. (De et al., 1999.) and Mucorales fungalGandhi S.R., Weete J.D. 1991. Production of the polyunsaturated fatty aci

18、ds arachidonic acid and eicosapentaenoic acid by the fungus Pythium ultimum. Journal of General and Applied Microbiology, 137: 1825-1830. (Gandhi et al., 1991). Spirulina platensis (SP) has been well recognized as a healthy food universally for producing large variety of nutritional compos

19、itions, such as phycocyanin, vitamins and minerals. Particularly , as the only natural autotroph rich in polyunsaturated fatty acids (Manabe, 1992Manabe E. -linolenic Acid Production by Microalgae. Onoda Kenkyu Hokoku,1992,44(1):15-2l.), the -linolenic acid (GLA) content in SP is up to 8%-25% of tot

20、al fatty acid (Cohen, 1993Cohen Z. Production and Partial Purification of -linolenic Acid and some Pigmentsfrom irulina spltensis. Journal of Applied Phycology,1993,5(1):109-115.), which is far more than the traditional sources such as evening primrose, black currant and borage (James, 1995James C P

21、hillips, Yung-sheng Huang. Natural sources and biosynthesis of linolenic acid: An overview(A). The United States of America: AOCS Press,1995:1-6.). Besides, the Spirulina is revealed to be non-toxic and safe by Salazar et al. (1998)Salazar M., et al., 1998. Subchronic toxicity study in mice fed Spir

22、ulina. Journal of Ethnopharmacology, 62, 235-241., which contributed to SP to be a valuable source for much sought after GLA. The current methods of extracting unsaturated fatty acid from alga include organic solvent, supercritical fluid extraction (SCE), urea inclusion and fractional distillation.

23、Supercritical is favored by producing solvent-free extractions; however, the yield of GLA from SP with SCE alone was lower compared to using ethanol as a co-solvent (M.G. Sajilata, 2007M.G. Sajilata, et al., 2007. Supercritical CO2 extration of linoenic acid(GLA) from Spirulina platensis ARM 740 usi

24、ng response surface methodology. Journal of Food Engineering. 84: 321-326). The urea inclusion method is easily to have urea remaining, which could form a carcinogenic substance named carcinogen ethyl carbamate (Alkio, et al., 2000Alkio M, et al., 2000. Purification of polyunsaturated fatty acids es

25、ters from Tuna with supercritical fluid J. Chromatography. Journal of the American Oil Chemists' Society. 77(3): 315-321.). Fractional distillation is new technology supposed to be avoiding the degradation of thermally labile components but demanding highly for the equipment, which is not suitab

26、le for industrial production (Chen Fang, et al., 2005Chen Fang, et al., 2005. Effect of Pocess Parameters on the refining of higher fatty alcohol extracts during molecular distillation (in Chinese). Transactions of the CSAE. 21(9):189-191.). Thus, to satisfy the increasing need and consumption of -l

27、inolenic acid and to improve the exploitation and utilization of SP, optimizing solvent extraction parameters and applying to practical production is worthy and urgent. Our present study is aiming at carrying out extraction process of GLA from SP with organic solvent and assessing the effect of para

28、meters such as the sample-solvent ratio, extraction temperature and time. Subsequently optimize the extraction process. Meanwhile, we conduct two studies evaluating the anti-oxidative and the anti-thrombotic activities in order to investigate the bioactivities of -linolenic acid in vitro further mor

29、e.附錄 4 抗血栓結果(加分析)上圖中的結果需要以mean ± SE表示。下面的討論參考簡介部分意見以及前幾次在你們論文中的修改意見,多參考英文文獻,比較、分析、討論討論:國外學者研究(這是一般中文文章的引用方法,英文論文中避免使用,需客觀、平等地引用他人結果或觀點,加以論述),GLA可明顯抑制體內血小板的凝集和血栓素A2:(TXA2)合成。TXA2:是最強烈的內源性血小板聚集劑和血管收縮劑,而前列腺素是最強烈的血管擴張劑(這些定性的論述需要有事實和數據加以支持,即討論中的引用不能僅有泛泛的推論,也就是言之有據)。二者都來源于AA,一旦兩者失去平衡,TXA2的合成增多,前列腺素生成

30、減少,則血小板的聚集作用便增強。GLA作為前列腺素的前體,一方面通過直接產生前列腺素抑制血小板的聚集,另一方面通過衍生成DGLA減少AA產生,抑制血小板TXA,合成酶的活性,調整TXA2:和前列腺素的比值以改善心腦血管狀況。本實驗結果表明GLA在ADP的誘導下對體外血小板聚集有抑制作用,并且隨著GLA濃度的增加,其對血小板聚集的抑制作用更加明顯,由上圖知。該實驗是對GLA抑制體內血小板聚集作用的補充,完善了其抗血栓功能,也為今后的抗凝血研究提供更豐富的資源。 王菲 小鼠急性毒性實驗1、0.1ml0.9ml/只 雞冠花籽油毒性預實驗。(雄10只,雌10只,進行標號)。日期4月12號13號14號1

31、5/16/17號編號雄1雄2雄3雄4雄5雌1雌2所有灌胃鼠灌胃量0.10.20.40.80.90.80.90狀態(tài)正常正常正常正常正常正常正常正常灌胃當天觀察三小時,都正常。小鼠灌胃最大量0.9時,小鼠都正常,則進行長期毒性試驗。2、 0.8ml灌胃量長期毒性試驗日期18號19號20號雄8/9/10號0.80.80.8 雌8/9/10號0.80.80.8 新買10只雄0.800 新買10只雌0.800 好的。 張琨 n 查閱文獻:富油微藻的篩選與培養(yǎng)1. 富油微藻光生物反應器1.1 光生物反應器的類型1.1.1 開放式反應器工業(yè)級實驗室使用的各種封閉式反應器,比開放式反應器具有更好的海藻培養(yǎng)和控

32、制條件。封閉式反應器可以使藻細胞的密度提高6-12倍,總體積相對減少,分離成本大大降低,各種生長參數及工藝采用自動化、集約化控制和管理,提高了生產效率和產品質量可避免受其它生物和非生物物質的污染。1.1.2 封閉式光生物反應器1.1.2.1 封閉式光生物反應器結構介紹光生物反應器生長系統(tǒng)單元,是由相對獨立的反應器裝置組合而成的培養(yǎng)海藻的基本單元。要在反應器管道內培養(yǎng)海藻必須配有儲存適合海藻生長的各種物質和對海藻各種生長參數進行檢測和控制的裝置。1.1.2.1.1 營養(yǎng)液儲罐系統(tǒng)營養(yǎng)液控制參數主要有H3PO4、CO2、NaOH、氨水、NaHCO3、鹽度和導電率等。在儲罐需要配制營養(yǎng)液時??刂葡到y(tǒng)

33、根據已確定的配料參數,控制原料添加裝置自動定量添加液料和粉料,同時定量輸送水到儲罐并啟動攪拌裝置。1.1.2.1.2 混合藻液儲罐系統(tǒng)為了提高富集反應器的效率,當反應器生長單元的海藻密度達到收獲密度時。將反應器生長單元中20-30的藻液定量泵入藻液過濾器,過濾器濾掉大部分藻液將過濾后的海藻送入反應器富集單元。由于要將過濾后的藻液送回生長反應器,因此一個海藻生長系統(tǒng)模塊需要一個混合藻液儲罐。1.1.2.1.3 富集液儲罐系統(tǒng)一個富集液儲罐向反應器生長系統(tǒng)內的所有反應器富集單元輸送配制好的不含氮源的富集液,由于每次向富集反應器加入的富集液為富集反應器總容積的8090。所需富集液數量很大,為減少儲罐

34、容積,配制的富集液采用濃縮液,經富集液稀釋裝置稀釋后通過恒壓裝置輸送到各富集反應器。通過控制閥門開啟時間,控制輸送量。1.1.2.1.4 pH值調節(jié)液儲罐系統(tǒng)一個pH值調節(jié)液儲罐向所有生長系統(tǒng)中的混合藻液儲罐和反應器輸送配制好的pH值調節(jié)液?;旌显逡簝?、生長反應器和富集反應器對pH調節(jié)液輸入量的要求是不同的。通過控制pH調節(jié)液儲罐管道閥門的開啟時間控制輸送量。1.1.2.1.5 光生物反應器檢測、控制系統(tǒng)反應器主要控制參數:pH、PO2、CO2、CO2流通率、密度、藻液傳導率、O2、鹽度、溫度、管道內混合氣體壓力等。每個生長系統(tǒng)模塊為一個控制單元,檢測控制系統(tǒng)可對所有模塊進行自動檢測和控制。

35、就整個生產海藻和藻油萃取系統(tǒng)而言需要檢測和控制的參數不多,技術上實現不復雜。1.1.2.2 封閉式光生物反應器的分類1.1.2.2.1 垂直式光生物反應器美國亞利桑那州立大學研制的氣升垂直式反應器,由32個丙烯酸制作的圓柱體管子組成每個反應器管柱內徑為15.24 cm,高18288 cm。整個裝置分為4排,每排有8個反應器管,每個管容積為32 L,反應器總容積超過1000 L。采用這種設計,反應器系統(tǒng)的擴展性是有限的。因為當反應器管柱彼此接近時,管柱產生的投影會相互影響。除反應器管柱相互之間須要有較大的間距以避免“自我陰影”外,還須要解決每個管柱的內壁自動清洗問題在技術實施上非常困難,維護上也

36、不方便。目前尚無海藻生物柴油公司采用這種設計。1.1.2.2.2 水平式多層管道光生物反應器增加水平式管道光生物反應器的層數,使單位面積內反應器容積和反應器受光面積分別達到最大,是研究人員常會考慮到的設計方案。如德國Astaxa公司采用水平式多層管道反應器進行海藻培養(yǎng)研究;以色列Algatech公司在阿拉瓦沙漠建造了管道總長度為150000 km水平式多層反應器進行試驗;德國BBI公司建造了有效容積為700 m3,管道總長度為500000 km的水平式多層反應器進行研究試驗。此外,美國的Jacobs大學和德國Salata等多個公司也都研究過類似的多層管道反應器目前。全球采用封閉式光生物反應器的

37、生物燃料公司,均沒有采用小內徑多層管道結構的反應器作為生產海藻的裝置。1.1.2.2.3 水平式管道光生物反應器戶外管道式光生物反應器用玻璃或塑料管建造,被認為是最適合于進行戶外大規(guī)模的海藻培養(yǎng),反應器與泵組合構成培養(yǎng)海藻的循環(huán)系統(tǒng)。藻液在反應器內循環(huán)流動,使大部分海藻能夠有效吸收陽光進行光合作用,光合作用產生的氧氣在藻液循環(huán)過程中氣液分離。美國Diversified公司反應器設計原理和AlgaeLink公司基本相同,采用水平式管道反應器。使反應器受光面積最大??紤]到未來技術的發(fā)展,管道式光生物反應器培養(yǎng)海藻的效率會大幅度提高,管道內徑在20-35 cm較為合適。1.1.2.2.4 軟管式反應

38、器目前。世界上使用軟管式反應器生產海藻的公司主要有美國的Solix Biofuels公司、Vertigro process公司、GreenFuel Technology公司、A2BE Carbon Capture公司和德國的Phytolutions公司等。海藻極易附生在反應器內壁上附壁海藻密度增加,光線穿透能力降低,長期使用均存在塑料軟管老化破裂問題。因此必須定時更換塑料軟管耗費大量的人力和時間,造成管理成本增高。1.1.2.2.5 罐式反應器美國OriginOil公司的罐式反應器,采用沉浸式螺旋式燈管作為光源,罐的內壁和燈管也會產生海藻附壁問題。罐式反應器缺點:海藻極易附生在燈管壁上,必須定

39、時取出燈管進行清洗;人工光源耗能高;控制系統(tǒng)復雜。1.1.2.2.6 其他幾種光生物反應器平板式光生物反應器、浮式薄膜袋光生物反應器、環(huán)形管式反應器和螺旋盤繞管式反應器等是在實驗室和小試中常用的反應器,將這類反應器用于工業(yè)化生產,同樣存在清洗反應器內壁技術上的難題。1.1.2.2.7 美國宇航局開發(fā)出藻類生物反應器用作可持續(xù)能源來源美國宇航局(NASA)科學家發(fā)明了一種微藻光生物反應器,它可使藻類在城市污水中生長,以生產生物燃料和其他各種產品。該生物反應器是一種用于藻類生長的海上膜附件(OMEGA),這將不與農田生長的農作物、化肥或新鮮水相競爭。OMEGA系統(tǒng)由帶有前行運動反滲透膜的大型塑料袋

40、構成,反滲透膜可使廢水被處理,微藻藉助新鮮水通過光合成作用生長。利用太陽能源,海藻吸收大氣中的CO2,以及來自廢水的營養(yǎng)物質而產生生物質和O2。隨著藻類的生長,營養(yǎng)物被包含在外殼中,而被凈化的新鮮水,通過前行運動的反滲透膜被釋放到周圍的海洋中。美國航天局成功開發(fā)的這項技術將有助于支撐新的藻類基生物燃料工業(yè)和廢水處理的商業(yè)化開發(fā)。1.2. 生物反應器生產廠家及其產品1.2.1 新奧科技發(fā)展有限公司1.2.1.1 光生物反應器該光生物反應器包括緩沖/收集系統(tǒng)、檢測裝置、反應區(qū)域以及氣體交換裝置,所述緩沖/收集系統(tǒng)為錐形底部的透明圓通,連接兩條管路分別用于循環(huán)培養(yǎng)和藻體收集,檢測裝置從緩沖/收集系統(tǒng)

41、上部接入;所述反應區(qū)域由多根圓形透明光反應管構成,氣體交換裝置接于反應區(qū)域內部。該光生物反應器通過蠕動泵實現培養(yǎng)體系的循環(huán),通過氣泵和多個氣閥調節(jié)各個光反應管的通氣量,操作簡便、傳質效率高,十分適于微藻快速大量培養(yǎng)。1.2.1.2. 微藻培養(yǎng)的光生物反應器一種微藻培養(yǎng)的光生物反應器,包括固定在架子上的光生物反應系統(tǒng)、通氣裝置、檢測裝置。光生物反應系統(tǒng)為環(huán)形管狀,在環(huán)形管頂部伸出幾個接口,通氣裝置和檢測裝置與光生物反應系統(tǒng)頂部接口連接。通過氣體流動調節(jié)培養(yǎng)液流動,并且沒有死角。該環(huán)形管式光生物反應器結構簡單、光利用率高,反應條件易控制,適于培養(yǎng)微藻。1.2.1.3 一種光生物反應器一種光生物反應

42、器,包括曝氣系統(tǒng),用于控制所述箱體中培養(yǎng)液的溫度的控溫系統(tǒng),反應器控制系統(tǒng)和至少一個反應器單元;其反應器單元包括箱體及其支撐框架;箱體頂部是開放式開口,內腔整體貫通,至少一個長側面是透明的,橫向相對的兩端側面和底面為圓弧形面;支撐框架成梯形,垂直地面,兩支撐框架立柱間固夾箱體。這種光生物反應器有效解決了存在的死角問題,且便于整體收獲,從培養(yǎng)到收獲的過程中不需要所有培養(yǎng)液的泵出,從而大大降低了過程能耗,實現了連續(xù)培養(yǎng)。用本發(fā)明的光生物反應器培養(yǎng)小球藻,培養(yǎng)基為:NaNO3 0.25g、K2HPO4·3H2O 0.075g、MgSO4·7H2O 0.075g、CaCl2

43、3;2H2O 0.025g,KH2PO4 0.015g、NaCl 0.025g、FeCl3·6H2O 0.005g,接種量為10%,溫度控制在25,曝氣氣速為1m3/h,連續(xù)培養(yǎng)20天,通過進行整體貫通打撈式收獲,不比循環(huán)培養(yǎng)液,產量達到18g/(m2·d)。1.2.1.4 一種微藻培養(yǎng)方法及其光生物反應器系統(tǒng)一種培養(yǎng)微藻的新式的光生物反應器系統(tǒng),以及用所述光生物反應器系統(tǒng)培養(yǎng)微藻的方法。在培養(yǎng)微藻的不同階段用不同的光生物反應器,每一階段反應器的設計都合理地考慮到了該階段的微藻最佳培養(yǎng)條件,以實現微藻的高密度培養(yǎng)和產品快速積累,從而為微藻的規(guī)?;B(yǎng)殖提供新的工藝和裝置。對三

44、步培養(yǎng)法和氮脅迫在牟氏角毛藻培養(yǎng)中的應用進行了詳盡的介紹。1.2.1.5 工業(yè)級光生物反應器遠程監(jiān)測控制系統(tǒng)一種工業(yè)級光生物反應器遠程監(jiān)測控制系統(tǒng)。該遠程監(jiān)測控制系統(tǒng)包括探測器、在線pH分析儀、在線溶解氧分析儀、在線二氧化碳分析儀等檢測分析終端以及遠程控制平臺,各個檢測分析終端通過通訊網絡與遠程控制平臺通訊。所述遠程檢測控制系統(tǒng)的各檢測分析終端安裝在工業(yè)級光生物反應器內,通過檢測分析終端與遠程控制平臺之間的通訊,在培養(yǎng)環(huán)境發(fā)生改變時,由遠程控制平臺對各項理化指標進行遠程調節(jié),實現了光生物反應器和遠程控制平臺之間的雙向互動。1.2.2. 上海大祺環(huán)保工程有限公司1.2.2.1 曝氣式光生物反應器

45、及其應用方法涉及微藻培養(yǎng)工程領域,具體地說是一種培養(yǎng)微藻的曝氣式光生物反器及其應用方法,包括環(huán)狀淺水池、進液總管、環(huán)狀補液管、霧化噴嘴、熱水盤管、進氣總管、環(huán)狀進氣干管、布氣支管、曝氣裝置,其特征在于曝氣裝置曝氣產生的微小氣泡與周圍藻液的密度差,促使氣泡上浮以及藻液下降,由此環(huán)狀淺水池內產生無數個氣液上下循環(huán)流動,使上下層藻液進行混合,而起泡的上浮強化了藻液中溶氧的解吸,氧氣被起泡帶至液面而釋放,并且二氧化碳氣體經曝氣后也同時溶解在藻液中,為微藻的生長提供碳源。結合開放式與封閉式光生物反應器各自優(yōu)點,形成一種能以二氧化碳氣體為碳源,低成本、大規(guī)模培養(yǎng)微藻的新型封閉式光生物反應器。1.2.3 云

46、南愛爾發(fā)生物技術有限公司1.2.3.1 一種系統(tǒng)化培養(yǎng)微藻的光生物反應器一種系統(tǒng)化培養(yǎng)微藻的光生物反應器。它包含并聯平行管道組、控制閥、pH值傳感器、溫度傳感器、光照傳感器、水霧噴淋器、液位報警器、管道泵、冷熱交換器等。將管道組、閥門有效閉合連接在一起,解決了微藻培養(yǎng)過程中體積增大的同時比表面積也可增大,占地面積小,有效利用立體空間,氣體交換更充分,利用率增加,在培養(yǎng)過程中溫度、pH值、培養(yǎng)液濃度、光照強度等參數能實時調控,給微藻生長代謝提供最佳適宜條件,能有效縮短養(yǎng)殖時間,避免外界敵害生物的危害,降低生產成本,可用于連續(xù)或半連續(xù)微藻細胞培養(yǎng),生產微藻蛋白、生物柴油或水產餌料等產品。1.2.4

47、 英國埃維斯通格列佛有限公司提供了用于培養(yǎng)光養(yǎng)微生物的封閉光生物反器的操作方法。光生物反應器包含培養(yǎng)液,部分或完全被水體的水圍繞。在培養(yǎng)液與周圍的水之間提供密度差,以便控制光生物反應器在水體中的位置。1.2.5 大連匯新海洋科技發(fā)展有限公司(專利號:ZL022838279)實例:整套設備包括培養(yǎng)器、水處理器、溫控系統(tǒng)、CO2充氣系統(tǒng)及人工光源等。容積為350 L,采用自然光和人工光(外置)連續(xù)照明,光照強度為15008000 Ix,水溫1620 。2. 國內外高產油藻種信息根據初步的調查,富油微藻的種類主要是有以下幾種:布朗葡萄藻油脂含量高達75%,微綠球藻油脂含量高達68%1,其中顆粒微綠球

48、藻、鹽生微綠球藻和海洋微綠球藻的總脂含量分別為(57.5±7.3)、(60.04±6.5)和(58.54±2.2)4,金藻油脂含量45%2,萊茵衣藻油脂含量37.73。參考文獻1 CHISTI Y. Biodiesel from microalgaeJ. Biotechnology Advances,2007,25:294-306.2 孫珊. 富油微藻篩選及油脂組分與影響因素研究D. 田黎: 青島科技大學,2009.3 薛飛燕,張栩,羅暉,譚天偉. 四種微生物油脂的比較研究. 會議 全國工業(yè)生物技術在資源與能源領域應用發(fā)展研討及成果交流會工業(yè)生物技術在資源與能源領

49、域應用發(fā)展研討及成果交流會論文集 4 李秀波,徐旭東,孔任秋. 五種微綠球藻產油和產多不飽和脂肪酸的研究J. 水生生物學報,2010,34(5):893-897.3. 葡萄藻的培養(yǎng)方法最初的Chul0培養(yǎng)液,在組成和稀釋度上,可以同富營養(yǎng)的湖水相比,適合多種浮游藻類生長,但生長率較慢。至20世紀80年代,用Chu13培養(yǎng)液成功促進了葡萄藻的生長繁殖。現在改良Chu13(medified Chu13)培養(yǎng)基是葡萄藻培養(yǎng)的常用培養(yǎng)基。 1葡萄藻培養(yǎng)方法一: 不同無機碳源的搖瓶培養(yǎng):將Chu13x2培養(yǎng)基分裝到3個250 ml三角瓶中,每瓶100 ml,各接入l0 ml藻種液,使培養(yǎng)初期OD680在

50、0.1左右,一瓶用可透過無菌空氣的封口膜包扎;一瓶通入含1()CO2的加富空氣,通氣量為 20 ml/min;另一瓶培養(yǎng)基中加入200 mg/L NaHCO3,用封口膜包扎。3瓶均置于HZQ-QG旋轉式搖床進行培養(yǎng),培養(yǎng)條件為:溫度25,光強2.5 mW/cm2(持續(xù)光照),轉速120 /min。培養(yǎng)過程中定期取樣測定細胞生長和光合活性。2葡萄藻培養(yǎng)方法二:選定的培養(yǎng)基為ChulO,Chul3,Chul3×2,Chul3×2+200mgL的NaHC03。在4個500 ml三角瓶中,分別裝入上述培養(yǎng)基160ml,各接入40 ml預培養(yǎng)藻種,使培養(yǎng)初期0D680在025左右,用

51、滅菌后的紗布包扎瓶口,置于往復式搖床進行培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為:光強為3000LUX(24h持續(xù)光照),溫度25,轉速120 rmin。培養(yǎng)過程中定期取樣,測定細胞生長和生物量,在第22d測烴含量。3葡萄藻培養(yǎng)方法比較結果: 研究了布朗葡萄藻(Botryococcus braunii) 764株和765株在3種培養(yǎng)基Chu10、Chu13×2和SE中的生長效應。結果表明:(1)B.braunii 764在Chu10中的細胞密度、生物量、總脂含量和總烴含量均高于Chu13×2和SE;B.braunii 765在Chu10中的細胞密度、生物量和總脂含量高于Chu13×2和S

52、E,而總烴含量在Chu13×2中較高。(2) B.braunii 764 的總脂和總烴含量分別為19.4、23.4,顯著高于B.braunii 765。4幾種葡萄藻培養(yǎng)基的配方:1、CHU13 Modified CHU13 Medium, one liter 3Compoundmg/LKNO3 400K2HPO4 80CaCl2 2H2O 107MgSO4 7H2O 200Ferric Citrate 檸檬酸鐵20Citric acid 檸檬酸100CoCl2 0.02H3BO3 5.72MnCl2 4H2O 3.62ZnSO4 7H2O 0.44CuSO4 5H2O 0.16Na2

53、MoO4 0.072 N H2SO4 0.0841 drop2、Chu's #10 Medium ModifiedCa(NO3)2·4H2O0.232 gK2HPO40.01 gMgSO4·7H2O0.025 gNa2CO30.02 gNa2SiO3·5H2O0.044 gFerric citrate3.5 mgCitric acid3.5 mgAgar15.0 gMetal Solution1.0 mlDistilled water1.0 LMetal Solution:H3BO32.4 gMnCl2·4H2O1.4 gZnCl20.4 gCo

54、Cl2·6H2O0.02 gCuCl2·2H2O0.1 mgDistilled water to1.0 L3、Chu's #10 Medium ATCC Medium 341Ca(NO3)2·4H2O0.232 gK2HPO40.01 gMgSO4·7H2O0.025 gNa2CO30.02 gNa2SiO3·5H2O0.044 gFerric citrate3.5 mgCitric acid3.5 mgAgar15.0 gDistilled water1.0 L參考文獻1 馬梅王,朋云. 布朗葡萄藻培養(yǎng)方面的研究概況J. 現代農業(yè)科技

55、,2008,15:35-38.2 王軍,楊素玲,叢威等營養(yǎng)條件對產烴葡萄藻生長的影響J. 過程工程學報,2003,3(2):141-1453 謝仁榮. 叢粒藻的搖床培養(yǎng)和固定化嘗試D. 莊惠如:福建師范大學.4 胡章喜,徐寧,李愛芬等.布朗葡萄藻在不同培養(yǎng)基中的生長效應J.生態(tài)科學,2007,,26(4):332-336.4. 小球藻的培養(yǎng)方法培養(yǎng)方法一1:watanabe培養(yǎng)基的基本成分:KH2PO4 1.25 g/L,MgSO4·7H2O 1.25 g/L,Fe2SO4·7H2O 20mg/L,A5微量元素液 1 mg/L。在氮源充足的培養(yǎng)條件下,依據實驗設計往watanabe 培養(yǎng)基中加入適量濃度的葡萄糖和KNO3,在氮源缺失培養(yǎng)條件下,依據實驗設計只改變培養(yǎng)基中的KNO3含量。培養(yǎng)方法:在進行高壓滅菌前,將pH值調到6.0,并在120下滅菌20min。在超凈臺上將種子液接種于新鮮培養(yǎng)液中,于(23±1) 、4000 lx、150 r/min的條件下進行搖瓶培養(yǎng)。將C.pyrenoidosa在以上優(yōu)化的watanabe培養(yǎng)基中培養(yǎng),其營養(yǎng)成分為:KNO3, 1.50g/L、KH2PO4 1.25 g/L、MgS04·7H20 1.25g/L、FeS04&

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