蛋白質(zhì)基本組成單位氨基酸及其連接方式

1、會(huì)計(jì)學(xué)1蛋白質(zhì)基本組成單位氨基酸及其連接方蛋白質(zhì)基本組成單位氨基酸及其連接方式式H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式RC+NH3COO-H色氨酸 tryptophan Try W 5.89絲氨酸 serine Ser S 5.68酪氨酸 tyrosine Try Y 5.66 半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07 蛋氨酸 methionine Met M 5.74天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41 谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65 蘇氨酸 threonine Thr T 5.602. 極性中性氨基酸目 錄天冬氨酸 aspartic acid As

2、p D 2.97谷氨酸 glutamic acid Glu E 3.22賴氨酸 lysine Lys K 9.74精氨酸 arginine Arg R 10.76組氨酸 histidine His H 7.593. 酸性氨基酸4. 堿性氨基酸目 錄CH2CHCOO-NH2+CH2CH2CH2CHCOO-NH2+CH2CH2-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3-OOC-CH-CH2-SH+NH3-OOC-CH-CH2-SH+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3HS-CH2-CH-COO-+N

3、H3（二）氨基酸的理化性質(zhì)1. 兩性解離及等電點(diǎn)氨基酸是兩性電解質(zhì)，其解離程度取決于所處溶液的酸堿度。等電點(diǎn)(isoelectric point, pI) 在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等，成為兼性離子，呈電中性。此時(shí)溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。CHNH2COOHR CHNH2COOHRCHNH3+COO-R CHNH3+COO-RCHNH2COO-R CHNH2COO-RCH COOHRNH3+CH COOHRNH3+2. 紫外吸收 色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在 280 nm 附近。大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩種氨基酸殘基，所以測(cè)定蛋白質(zhì)溶液280nm吸光值是分析

4、溶液中蛋白質(zhì)含量的快速簡(jiǎn)便方法。芳香族氨基酸的紫外吸收OOOHOHR CH COOHNH2OOHOH+ RCHO + NH3 + CO2茚三酮 氨基酸 茚三酮(還原型) 醛OOHOH+ NH3OOOON茚三酮 藍(lán)色或紫色化合物2NH2-CH-CHOOH甘甘氨氨酸酸NH2-CH-CHOOH甘甘氨氨酸酸NH-CH-CHOHO OH甘甘氨氨酸酸+-HOH甘氨酰甘氨酸肽鍵NH2-CH-C-N-CH-COOHHHHONH2-CH-C-N-CH-COOHHHHOC末端GSH過氧化物酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH還原酶NADPH+H+ NADP+ The Molecular Structu

5、re of Protein目 錄CHCNCHOHCCHNCRHNHCCOHOH2NROORHR水解肽鍵的位置水解肽鍵的酶或試劑 對(duì)被水解肽鍵羧基側(cè)R的要求胰蛋白酶 精、賴胰凝乳蛋白酶 芳香族氨基酸：苯丙、酪、色金黃色葡萄球菌內(nèi)肽酶V8 谷溴化氰 蛋亞碘酰基苯甲酸 色-螺旋-轉(zhuǎn)角螺旋螺旋轉(zhuǎn)角NCZn組氨酸殘基半胱氨酸殘基-折疊-折疊-螺旋ZnYKCGERSFVEKSALSRHQRVHKNCLZn目 錄N 端 C端 肌紅蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)肌紅蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)含有8個(gè)-螺旋，分別取名為A、B、C、D、E、F、G、H。血紅素位于E和F之間，F(xiàn)8組93(綠色)與Fe形成第5個(gè)配位鍵。ABCDEFGH9364血

6、紅蛋白肌紅蛋白結(jié)合氧釋放氧 肌紅蛋白與血紅蛋白的帶氧曲線肌紅蛋白的氧飽和曲線為距形雙曲線,血氧飽和度為20%時(shí)仍能帶氧,肌肉缺氧時(shí)(氧飽和度為5%)大量釋放氧,以供肌肉收縮需要;血紅蛋白的氧飽和曲線為S形曲線,表明血紅蛋白四個(gè)亞基對(duì)氧的結(jié)合具有正協(xié)同效應(yīng)。NNNNOHOHOONNFe2+O2NNF8 HisE7 HisIIIIIIIVNNF8 HisNNF8 HisO2O2卟啉平面 正常朊病毒蛋白與朊病毒空間結(jié)構(gòu)的差異 朊病毒（PrPsc）是蛋白質(zhì)，不含核酸。它是正常朊病毒蛋白（PrPc）的空間構(gòu)象由-螺旋變成-片層結(jié)構(gòu)所致。因此，這類疾病又稱蛋白質(zhì)構(gòu)象病。朊病毒本身不能復(fù)制，但它卻可以攻擊大

7、腦的正常朊病毒蛋白，使其發(fā)生構(gòu)象改變，并與其結(jié)合，成為致病的朊病毒二聚體。此二聚體再攻擊正常的朊病毒蛋白。這樣，腦組織中的朊病毒不斷積蓄，造成腦組織發(fā)生退行性變。 正常朊病毒蛋白結(jié)構(gòu) （顯示-螺旋） 朊病毒結(jié)構(gòu)（顯示-片層結(jié)構(gòu)）變性沉淀改變pH至pI破壞水溶液中蛋白質(zhì)的水化膜和中和電荷（變性蛋白質(zhì)）（蛋白質(zhì)未變性）凝固加熱（變性，不再溶解）加熱雙縮脲反應(yīng)（biuret test）：堿性條件下，Cu2+與蛋白質(zhì)分子中的肽鍵形成紫紅色絡(luò)合物酚試劑呈色反應(yīng)（Lowry test）：除蛋白質(zhì)分子中肽鍵與堿性Cu2+發(fā)生二縮脲反應(yīng)外，蛋 白質(zhì)分子中的色氨酸與酪氨酸殘基還將試劑中的磷鎢酸和磷鉬酸鹽還原生成

8、藍(lán)色化合物（鉬藍(lán)） 親水膠體, 分子直徑1100nm 色氨酸與酪氨酸殘基含共軛雙鍵，280 nm紫外 光下有吸收峰 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)與常用的純化方法 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 常用的純化方法分子質(zhì)量 離心 凝膠過濾 透析、超濾電荷 離子交換層析 電泳 等電聚焦溶解度 調(diào)整 pH 調(diào)整離子強(qiáng)度 降低介電常數(shù)特異結(jié)合部位 親和層析 親和洗脫其他性質(zhì) 吸附層析 液相層析 氣相層析透析(dialysis):磁力攪拌器透析前透析后透析袋通過透析，小分子通透透析袋，散布于透析液中，大分子量的蛋白質(zhì)不能通透透析袋，留在透析袋內(nèi)。從而，蛋白質(zhì)溶液中的小分子物質(zhì)通過透析被分離除去。磁力攪拌器待超濾的蛋白質(zhì)溶液加壓的氮?dú)?/p>

9、超濾膜洗脫液膠粒樣品小分子大分子蛋白濃度洗脫體積各試管進(jìn)行連續(xù)收集試管走行方向 凝膠過濾分離蛋白質(zhì)示意圖凝膠過濾洗脫洗脫洗脫樣品凝膠顆粒大分子先洗脫下來小分子后洗脫下來 凝膠過濾分離蛋白質(zhì)示意圖低鹽濃度 洗脫液高鹽濃度 洗脫液各試管進(jìn)行連續(xù)收集混合蛋白質(zhì)離子交換層析柱+試管走行方向 離子交換層析分離蛋白質(zhì)示意圖用高濃度的陰離子洗脫 帶負(fù)電荷少的蛋白質(zhì)先洗脫下來+用低濃度的陰離子洗脫+ 帶負(fù)電荷多的蛋白質(zhì)后洗脫下來陰離子交換劑原點(diǎn)帶負(fù)電荷蛋白質(zhì)的泳動(dòng)方向?yàn)V紙、醋酸纖維素薄膜或其他支持物陽(yáng)極陰極電極緩沖液電極緩沖液電泳示意圖電泳（electrophoresis）：1.蛋白質(zhì)的基本組成單位是什么?2.什么是肽鍵?肽鍵平面?肽單位?3.什么是蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)?二級(jí)結(jié)構(gòu)?三級(jí)結(jié)構(gòu)?維持這些結(jié)構(gòu)的作用力各是什么?二級(jí)結(jié)構(gòu)的基本形式有哪些?a-螺旋的