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1、根際微生物種群的測(cè)定細(xì)菌的測(cè)定一、試劑: 將牛肉青3.0g、蛋白棟1.0g、瓊脂粉15.0g放到1000mL水混勻用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值為7.0,分裝于滅菌的三角瓶中,塞上棉塞,高壓滅菌備用,用前先將培養(yǎng)基融化,并冷卻到45。二、步驟:稱取新鮮土樣30.00克放入500毫升的三角錐瓶中,倒入無菌水270mL,然后放在搖床上震蕩20分鐘,靜置5分鐘,即制成10-1土壤懸液,隨后吸取1毫升上清液放入裝有9毫升滅菌水的試管中,吹吸三次使其完全混合均勻,從而制成了10-2土壤懸液,又在該試管中吸取1毫升土壤懸液放入裝有9毫升滅菌水的試管中從而制成了10-3土壤懸液,依次類推直到制成10-6土壤懸液然后待
2、用。在無菌操鏡臺(tái)中擺放好已滅菌的培養(yǎng)皿,用接種針吸取梯度土壤懸液1毫升置于培養(yǎng)皿中央,然后用滅菌量杯量取15毫升培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿,使土壤懸液與培養(yǎng)基完全混合均勻,然后標(biāo)上接種時(shí)間、接種樣。培養(yǎng)時(shí)間為3天,依據(jù)細(xì)菌形態(tài)特征記下每皿細(xì)菌數(shù)量。三、計(jì)算:每克干土含細(xì)菌菌數(shù)的計(jì)算方法:用記錄下來的菌落平均數(shù)乘以該稀釋度的稀釋倍數(shù)就得到每克鮮土的菌數(shù),按常規(guī)方法求出鮮土重和干土重的比值,再折算出每一克干土的菌數(shù): N= a*u*鮮土重/干土重 N:每一克干土的菌數(shù); a:培養(yǎng)皿中的平均菌落數(shù); u:稀釋倍數(shù)。根際微生物種群的測(cè)定真菌的測(cè)定一、試劑: 將蛋白棟5.0g、瓊脂粉20.0g、葡萄
3、糖10g、磷酸氫二鉀1.0g、七水硫酸鎂0.5g放到1000mL水混勻分裝于滅菌的三角瓶中,塞上棉塞,高壓滅菌備用,用前先將培養(yǎng)基融化,并冷卻到45。二、實(shí)驗(yàn)步驟:稱取新鮮土樣30.00克放入500毫升的三角錐瓶中,倒入無菌水270mL,然后放在搖床上震蕩20分鐘,靜置5分鐘,即制成10-1土壤懸液,隨后吸取1毫升上清液放入裝有9毫升滅菌水的試管中,吹吸三次使其完全混合均勻,從而制成了10-2土壤懸液,又在該試管中吸取1毫升土壤懸液放入裝有9毫升滅菌水的試管中從而制成了10-3土壤懸液,依次類推直到制成10-6土壤懸液然后待用。在無菌操鏡臺(tái)中擺放好已滅菌的培養(yǎng)皿,用接種針吸取梯度土壤懸液1毫升
4、置于培養(yǎng)皿中央,然后用滅菌量杯量取15毫升培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿,使土壤懸液與培養(yǎng)基完全混合均勻,然后標(biāo)上接種時(shí)間、接種樣。培養(yǎng)時(shí)間為5天,依據(jù)真菌形態(tài)特征記下每皿真菌數(shù)量。三、計(jì)算:每克干土含真菌菌數(shù)的計(jì)算方法:用記錄下來的菌落平均數(shù)乘以該稀釋度的稀釋倍數(shù)就得到每克鮮土的菌數(shù),按常規(guī)方法求出鮮土重和干土重的比值,再折算出每一克干土的菌數(shù): N= a*u*鮮土重/干土重 N:每一克干土的菌數(shù); a:培養(yǎng)皿中的平均菌落數(shù); u:稀釋倍數(shù)。根際微生物的測(cè)定放線菌的測(cè)定一、試劑: 將可溶性淀粉10.0g、瓊脂粉15.0g、磷酸氫二鉀3.0g、七水硫酸鎂0.5g、氫氧化鈉0.5g、七水硫酸亞鐵
5、0.01g放到1000mL水混勻,用氫氧化調(diào)節(jié)PH值為7.8,分裝于滅菌的三角瓶中,塞上棉塞,高壓滅菌備用,用前先將培養(yǎng)基融化,并冷卻到45。二、實(shí)驗(yàn)步驟:稱取新鮮土樣30.00克放入500毫升的三角錐瓶中,倒入無菌水270mL,然后放在搖床上震蕩20分鐘,靜置5分鐘,即制成10-1土壤懸液,隨后吸取1毫升上清液放入裝有9毫升滅菌水的試管中,吹吸三次使其完全混合均勻,從而制成了10-2土壤懸液,又在該試管中吸取1毫升土壤懸液放入裝有9毫升滅菌水的試管中從而制成了10-3土壤懸液,依次類推直到制成10-6土壤懸液然后待用。在無菌操鏡臺(tái)中擺放好已滅菌的培養(yǎng)皿,用接種針吸取梯度土壤懸液1mL置于培養(yǎng)皿中央,然后用滅菌量杯量取15毫升培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿,使土壤懸液與培養(yǎng)基完全混合均勻,然后標(biāo)上接種時(shí)間、接種樣。培養(yǎng)時(shí)間為7-14天,依據(jù)放線菌形態(tài)特征記下每皿放線菌菌落數(shù)量。三、計(jì)算:每克干土含放線菌數(shù)量的計(jì)算方法:用記錄下來的菌落平均數(shù)乘以該稀釋度的稀釋倍數(shù)就得到每克
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