高二下冊(cè)生物微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)期中復(fù)習(xí)要點(diǎn)

1、.高二下冊(cè)生物微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)期中復(fù)習(xí)要點(diǎn)2019一、配制時(shí)的質(zhì)量控制1容器：配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶、平皿或試管等器材應(yīng)為中性，無酸、堿抑制物殘留，平皿底部要平，以免瓊脂厚薄不一，影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果。2成分來源：各種成分來源可靠，不含對(duì)目的菌生長(zhǎng)有抑制的物質(zhì)。特殊要求的培養(yǎng)基，如葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)O/F試驗(yàn)，除參加葡萄糖外，不能含有其他糖類，指示劑不能用乙醇溶液，防止O/F試驗(yàn)的假陽性。培養(yǎng)基配制用水應(yīng)是蒸餾水。3pH值調(diào)整：根據(jù)培養(yǎng)基的不同要求調(diào)整pH值，控制在要求范圍的0.2之內(nèi)。應(yīng)當(dāng)注意，培養(yǎng)基在高壓滅菌后其pH值降低0.10.2，故矯正時(shí)應(yīng)比實(shí)際需要pH值高0.10.2。4滅菌：根據(jù)培

2、養(yǎng)基所含成分及配制數(shù)量的不同，選擇不同的滅菌方式，既要到達(dá)滅菌效果，又不破壞培養(yǎng)基成分。一般對(duì)穩(wěn)定的培養(yǎng)基，如MH瓊脂、營養(yǎng)瓊脂可用高壓滅菌，即12115min而含糖的培養(yǎng)基那么以108滅菌為好，以防止糖類破壞。不耐高熱的物質(zhì)如血清、牛乳等，可采用間隙滅菌法滅菌。5分裝：根據(jù)使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養(yǎng)基所用的平皿、試管要求清潔，不殘留酸堿;制備平板培養(yǎng)基時(shí)，操作臺(tái)要程度，以防止瓊脂平板厚薄不一，同時(shí)確保無菌操作。二、配制后質(zhì)量控制1培養(yǎng)基外觀情況：包括顏色、透明度、有無沉淀和凝固。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基外表有裂紋或與培養(yǎng)皿的邊緣別離，說明培養(yǎng)基有脫水現(xiàn)象，必須丟棄。2無菌試驗(yàn)：每一批配好的培養(yǎng)

3、基均須進(jìn)展無菌試驗(yàn)。先滅菌后分裝的培養(yǎng)基，可采用抽樣方法試驗(yàn)，少于100個(gè)樣本通常選取5%10%的量，假如配制大量培養(yǎng)基，那么任意選取10個(gè)培養(yǎng)基;無菌分裝培養(yǎng)基那么需全部做無菌試驗(yàn)。樣本在35或其他適宜的溫度下隔夜培養(yǎng)，如培養(yǎng)基含有血液，那么需再置于室溫1天，以檢查嗜冷菌。選擇性培養(yǎng)基因含有抑制物質(zhì)，能抑制許多微生物，因此，可參加10倍量的無菌液體培養(yǎng)基，稀釋抑制物質(zhì)，以利于檢出污染菌。即使做過無菌試驗(yàn)，接種時(shí)，也要檢查每個(gè)平板上的可見菌落。3性能測(cè)試：每一批新制或新購的培養(yǎng)基，使用前均須取性質(zhì)的庫存菌種進(jìn)展性能測(cè)試。培養(yǎng)基按目的不同可分為增菌培養(yǎng)基、別離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。增菌培養(yǎng)基：接種少量難以生長(zhǎng)的細(xì)菌，在一定時(shí)間內(nèi)觀察增菌情況，細(xì)菌能生長(zhǎng)的最小接種濃度越小，說明增菌培養(yǎng)基性能愈好。別離培養(yǎng)基：要求目的菌生長(zhǎng)良好，非目的菌被抑制。一般要求生長(zhǎng)的目的菌接種量不可過多，較好的方法是將測(cè)試菌調(diào)成0.5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海儆?.001ml的標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)涂劃在培養(yǎng)基上，觀察菌落生長(zhǎng)。鑒定培養(yǎng)基：應(yīng)選擇具有典型特征的菌株作性能試驗(yàn)。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸桿菌、福氏志賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養(yǎng)基，