福建醫(yī)科大學研究生生物化學考試經(jīng)典總結(jié)

1、福建醫(yī)科大學生物化學考試經(jīng)典總結(jié)生物化學導入泛素化：泛素與選擇性被降解蛋白質(zhì)形成共價連接，并使其激活，即泛素化。自噬（autophagy）：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)雙層膜包裹細胞內(nèi)需降解的細胞器、蛋白質(zhì)等成分形成自噬體(autophagosome)，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體(autolysosome)，降解其所包裹的內(nèi)容物的生物學過程。未折疊蛋白應答（unfolded protein response，UPR）：分泌性蛋白和膜蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)未能形成正確折疊，未折疊蛋白的累積，則引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激（endoplasmic reticulum stress，ERS）。細胞出現(xiàn)的一系列反應，以應對ERS，稱為未折疊

2、蛋白應答（unfolded protein response，UPR）蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶（折疊酶）（protein disulfide isomerase，PDI）：蛋白質(zhì)二硫鍵的形成影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和折疊，在細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)催化二硫鍵的酶也具有異構(gòu)作用，稱為二硫鍵異構(gòu)酶。脯氨酰順-反異構(gòu)酶(peptide prolyl-cis-trans isomerase, PPI)：多肽鏈中肽酰-脯氨酸間形成的肽鍵有順反兩種異構(gòu)體，空間構(gòu)象差別明顯。脯氨酰順-反異構(gòu)酶可促進上述順反兩種異構(gòu)體之間的轉(zhuǎn)換。脯氨酰順-反異構(gòu)酶催化這種異構(gòu)化的過程，可加速蛋白質(zhì)的折疊。蛋白質(zhì)質(zhì)量調(diào)控的研究內(nèi)容及意義研究內(nèi)容：1.

3、合成正確蛋白質(zhì) 2.降解異常蛋白質(zhì) 3.選擇結(jié)構(gòu)、功能正確的蛋白蛋白質(zhì)質(zhì)量調(diào)控意義：1. 細胞維持自穩(wěn)狀態(tài)的一種選擇性代謝機制。2. 失效的蛋白質(zhì)質(zhì)量控制是許多疾病的分子病因。蛋白質(zhì)折疊模式有哪幾種1. 自組裝模式（空間結(jié)構(gòu)按等級進行、非極性殘基間疏水作用介導、牛胰RNAase恢復天然構(gòu)象和功能）2. 輔助性蛋白參與（輔助性蛋白、分子伴侶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶（折疊酶）、脯氨酰順-反異構(gòu)酶）輔助性蛋白的種類及功能種類：1）分子伴侶 (molecular chaperon) 2）蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3） 肽-脯氨酰順反異構(gòu)酶(p

4、eptide prolyl-cis-trans isomerase, PPI) 。功能：1）封閉蛋白疏水區(qū)段，保護新生肽段；2）構(gòu)成隔離環(huán)境，蛋白質(zhì)互不干擾進行折疊；3）應激時，使已折疊的蛋白質(zhì)去折疊，再誘導其正確折疊。4）促進二硫鍵形成正確的配對。分子伴侶的定義、分類及作用定義為：能夠協(xié)助其它蛋白質(zhì)分子，使之折疊成具有天然構(gòu)象蛋白質(zhì)的分子。分類：熱休克蛋白、伴侶分子、核質(zhì)蛋白。生物學功能： 輔助蛋白質(zhì)折疊；直接參與炎癥反應、細胞凋亡等。自噬過程1.自噬體膜包裹降解物：在應激時，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高爾基膜識別并包裹降解物；2.自噬體形成：自噬體膜延伸、閉合形成自噬體；3.自噬溶酶體形成：自噬體與溶

5、酶體融合形成自噬溶酶體，降解內(nèi)容物。未折疊蛋白應答（UPR）作用1. 保護細胞存活通過上調(diào)細胞存活基因的表達，減少新生肽的合成，增加分子伴侶和折疊酶的產(chǎn)量，以促進蛋白質(zhì)的正確折疊。2. 激活泛素化，清除未折疊蛋白UPR通過泛素化蛋白途徑介導內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白質(zhì)降解（ER-associated degradation，ERAD），清除未折疊蛋白。3. 促進細胞凋亡UPR通過三種蛋白激酶作用，將持續(xù)激活線粒體依賴和線粒體非依賴細胞凋亡途徑，清除未折疊蛋白累積的細胞。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與疾病超二級結(jié)構(gòu)：在許多蛋白質(zhì)分子中，二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個有規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)組合，被稱為超二級

6、結(jié)構(gòu)。模體：在許多蛋白質(zhì)分子中，二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個特殊的空間構(gòu)象，具有特殊功能，稱為模體。結(jié)構(gòu)域：大分子蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)常可分割成一個或數(shù)個球狀或纖維狀的區(qū)域，折疊得較為緊密，各行使其功能，稱為結(jié)構(gòu)域。分子伴侶：是細胞內(nèi)一類通過提供一個保護環(huán)境，可識別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊的保守蛋白質(zhì)。熱休克蛋白HSP：熱休克蛋白屬于應激反應性蛋白質(zhì)，高溫應激可誘導該蛋白質(zhì)合成。熱休克蛋白包括HSP70、HSP40和GrpE三族。變構(gòu)效應(allosteric effect)：蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變伴隨其功能的變化，稱為變構(gòu)效應。分子病：任何由

7、遺傳原因引起的蛋白質(zhì)功能異常所帶來的疾病都是分子病。朊蛋白：又名蛋白質(zhì)傳染因子, 是一種非常特殊的傳染病的病原體。蛋白質(zhì)在生命活動中的作用1. 酶的催化作用2.控制生長與分化3.轉(zhuǎn)化和儲存功能4.運動功能5.結(jié)構(gòu)支持作用6.免疫保護作用 7.代謝調(diào)節(jié)作用 8.接受和傳遞信息9.生物膜功能10.感染和毒性作用11.其它作用 常見的膜體結(jié)構(gòu)有哪些1. 鈣結(jié)合膜結(jié)構(gòu) 2.DNA結(jié)合膜結(jié)構(gòu)模體（鋅指結(jié)構(gòu)）根據(jù)結(jié)構(gòu)域可將蛋白分為哪幾類1.反平行螺旋結(jié)構(gòu)域（全-結(jié)構(gòu)）2.平行或混合型折疊片結(jié)構(gòu)域（，-結(jié)構(gòu)）3.反平行折疊片結(jié)構(gòu)域(全-結(jié)構(gòu))4.富含金屬或二硫鍵結(jié)構(gòu)域（不規(guī)則小蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)）分子伴侶的定義及功

8、能分子伴侶是細胞內(nèi)一類通過提供一個保護環(huán)境，可識別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊的保守蛋白質(zhì)。主要作用：封閉待折疊蛋白質(zhì)的暴露的疏水區(qū)段；創(chuàng)建一個隔離的環(huán)境，可以使蛋白質(zhì)的折疊互不干擾；誘導錯誤聚集的肽段解聚誘導二硫鍵的形成。蛋白質(zhì)構(gòu)象改變導致疾病的機制蛋白質(zhì)錯誤折疊后相互聚集，聚集蛋白抵抗蛋白水解酶，產(chǎn)生淀粉樣纖維沉淀，而致病?！昂芸赡転锳D”的新診斷標準核心癥狀（早期、顯著的情景記憶障礙）+至少1項支持特征 存在內(nèi)側(cè)顳葉萎縮； 腦脊液生物標志物異常； (AD相關(guān)蛋白標志物:如淀粉樣蛋白42、總tau蛋白及磷酸化tau蛋白） 雙側(cè)顳葉糖代謝率降低或其他示蹤劑預見的AD病

9、理改變； 直系親屬中有被證實的常染色體顯性遺傳突變所致AD。新標準強調(diào)了早期場景記憶（3W：什么時間、什么地點和發(fā)生了什么事）障礙的重要性。脂蛋白與疾病血脂：血漿所含脂質(zhì)統(tǒng)稱血脂，包括：甘油三酯、磷脂、膽固醇及其酯以及游離脂肪酸。脂蛋白：血脂與血漿中的蛋白質(zhì)結(jié)合，以脂蛋白(lipoprotein)形式而運輸。脂蛋白受體：血液中脂蛋白可與細胞膜上存在的特異受體相結(jié)合，被攝取進入細胞內(nèi)進行代謝。脂蛋白受體在決定脂類代謝途徑、參與脂類代謝、調(diào)節(jié)血漿脂蛋白水平等方面起重要的作用。清道夫受體：是吞噬細胞表面的一組異質(zhì)性分子，至少以6種不同的分子形式存在?？勺R別乙?；兔芏戎鞍准案裉m氏陰性菌LPS，格蘭

10、氏陽性菌的磷壁酸等陰離子聚合體，也可識別由細胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸。它們參與對病原體的識別和清除，同時也對喪失唾液酸的陳舊紅細胞和某些凋亡細胞的清除。原發(fā)性高脂血癥：排除由于全身性疾病所致的繼發(fā)性高脂血癥后，所有的血脂升高均統(tǒng)稱為原發(fā)性高脂血癥。這是一類多因素引起的疾病, 是環(huán)境因素與遺傳基因異常相互作用的結(jié)果。繼發(fā)性高脂血癥：繼發(fā)性高脂血癥是指由于系統(tǒng)性疾病或藥物所引起的血脂異常。 常見疾病有：甲狀腺功能減退癥、糖尿病、腎病綜合征、腎功能衰竭、肝臟疾病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、糖原累積癥、骨髓瘤、脂肪萎縮癥、急性卟啉病等。此外, 某些藥物如利尿劑、受體阻滯劑、糖皮質(zhì)激素等也可引起繼發(fā)性血脂

11、升高。脂蛋白a /LP（a）：主要是在肝臟合成,主要的功能是阻止血管內(nèi)血塊溶解，促進動脈粥樣硬化形成,脂蛋白水平持續(xù)升高與心絞痛、心肌梗死、腦溢血有密切關(guān)系,是冠心病的獨立危險因子。脂蛋白代謝的影響因素膳食、職業(yè)、營養(yǎng)、代謝、疾病、年齡糖尿病血脂異常的機制1、 胰島素作用下降2、血脂代謝紊亂3、糖化、氧化應激導致脂蛋白結(jié)構(gòu)異常小而密的LDL致動脈粥樣硬化的作用動脈粥樣硬化的發(fā)病機理引起AS的起始因子是什么?1.損害反應學說認為血小板凝集能力亢進，引起血管壁損害是其起始因子。2.起始因子是使血管內(nèi)皮細胞層下發(fā)生完整的剝脫，并以泡沫細胞為主，外加平滑肌細胞的浸入，使單核細胞在循環(huán)血液中發(fā)生。3.變

12、性LDL經(jīng)巨噬細胞清道夫受體結(jié)合形成AS，為AS早期起始因子。4.氧化LDL是早期AS的起始，即OXLDL學說；5.LDL的磷脂經(jīng)氧化產(chǎn)生溶血卵磷脂，成為循環(huán)中單核細胞的趨化物，起主要作用。蛋白組與蛋白組學蛋白質(zhì)：是由許多氨基酸(amino acids)通過肽鍵(peptide bond)相連形成的高分子含氮化合物。蛋白質(zhì)組：一個細胞或一個組織基因組所表達的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學：指應用各種技術(shù)手段來研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學，其目的是從整體的角度分析細胞內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細胞生命活動規(guī)律。雙向凝膠電泳：2DE，利用

13、蛋白質(zhì)的等電點和分子量大小，結(jié)合凝膠化學性質(zhì)，分別在凝膠二維空間上對蛋白質(zhì)分子進行等電聚焦和電泳來分離與純化蛋白質(zhì)的方法。氨基酸組成分析：通過測定蛋白質(zhì)中各氨基酸所占摩爾百分數(shù)或各氨基酸的摩爾比率，然后與數(shù)據(jù)庫中已知蛋白質(zhì)的理論值進行比較。簡述雙向凝膠電泳的原理及其優(yōu)缺點原理：第一向在高壓電場下對蛋白質(zhì)進行等電聚焦，再在第一向垂直方向上進行第二向SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。優(yōu)點:1、可分離10-100kD分子量的蛋白質(zhì) 2.高靈敏度和分辨率 3.便于計算機進行圖像分析處理 4.與質(zhì)子譜分析匹配。缺點：1.極酸、極堿性蛋白質(zhì)，疏水性蛋白質(zhì)，極大蛋白質(zhì)、極小蛋白質(zhì)、以及低豐度蛋白質(zhì)用此種技術(shù)難于有效

14、分離；2.膠內(nèi)酶解過程費時、費力，難于與質(zhì)譜聯(lián)用實現(xiàn)自動化。試述蛋白質(zhì)組學常用的研究方法表達模式：1、雙向凝膠電泳 2.新型非凝膠技術(shù)（蛋白質(zhì)微量測序、氨基酸組成分析、質(zhì)譜法MS功能模式：1、酵母雙雜交系統(tǒng) 2.噬菌體表面展示技術(shù)3.基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)（親和層析偶聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、免疫共沉淀藕聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、生物傳感器耦聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、串聯(lián)親和純化耦聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)）蛋白芯片技術(shù)試舉2例敘述蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)1、酵母雙雜交系統(tǒng)；2、噬菌體表面展示技術(shù)糖蛋白與糖組學酶學一、名詞 酶：由生物活細胞產(chǎn)生的一類能對特定底物起高效催化作用，由蛋白質(zhì)和/或核酸組成的具有活性中心特定構(gòu)象的生物催化劑。 米氏常

15、數(shù)Km：Km = (K2+K3)/K1，它是ES的分解速度和ES的形成速度的比值，是速度常數(shù)K1、K2 、K3的函數(shù)，對特定酶反應、特定反應條件（如PH、溫度、底物）來說，Km值是酶的特征性常數(shù)之一，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，和酶的濃度無關(guān)。 酶的鈍化作用：主要指在某些物理或化學因素作用下酶蛋白分子的次級鍵受破壞，酶蛋白的空間構(gòu)象改變，酶蛋白因變性而失去了酶活性，稱之酶的鈍化作用。 酶的抑制作用：由酶的必需基團或活性部位的化學性質(zhì)發(fā)生改變，引起的酶活性的降低或喪失的作用。這時酶蛋白一般并未變性，可用物理或化學方法使酶恢復活性。能引起這種抑制作用的物質(zhì)稱為抑制劑。 酶的活力單位：1961年國際酶學會統(tǒng)一

16、規(guī)定：在特定的條件下，1分鐘轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量，或轉(zhuǎn)化1微摩爾的底物有關(guān)基團的酶量為1個酶的活力單位（國際單位IU)。 酶的比活力：酶的活力與蛋白質(zhì)的量相聯(lián)系的1種活力單位。如每mg酶蛋白所具有的酶活力 (單位mg蛋白)，每ml酶制劑含有的酶活力(單位m1)，或每g酶制劑具有的活力單位(單位g)等。對同一種酶來講，比活力愈高則酶越純。 酶活力測定的空白試驗和對照試驗：空白試驗：是指雜質(zhì)反應和自發(fā)反應引起的變化量，它提供的是未知因素的影響?？瞻字悼梢酝ㄟ^不加酶，或不加底物，或二者都加(酶預先經(jīng)過失效處理)。對照試驗：是指用純酶或標準酶制劑測得的結(jié)果，主要作為比較或標定的標準。二、問答試述酶的

17、催化作用的獨特特點。1. 酶催化反應的高效性 2. 酶催化作用對象的專一性（特異性） 3. 酶的不穩(wěn)定性（易變性）4. 酶活性的可調(diào)節(jié)性敘述雙底物反應的順序機制和乒乓機制的特征。順序機制：(Sequential Mechanism) 底物A和B順序結(jié)合在一個酶的活性部位，形成EAB三元復合物，反應才能進行，然后釋放產(chǎn)物。乒乓機制：（Ping Pong Mechanism）是指底物和產(chǎn)物交替進出的機制，兩底物不能同時與酶結(jié)合形成EAB復合物。酶E轉(zhuǎn)變?yōu)樾揎椥问紼。哪些激活劑會影響酶反應速度？1. 無機離子：包括金屬離子和非金屬離子，常見的有K+、Na+、Mg2+、Zn2+、Fe2+、 Ca2+、

18、Cl-、Br-和H+。葡糖-6-磷酸脫氫酶需要Mg2+，而-淀粉酶需要Cl-。有些離子可相互替代，如Mn2+可取代Mg2+，作為激酶的激活劑。有些離子間有拮抗作用，如Na+抑制K+的激活作用，Ca2+抑制Mg2+的激活作用等。2. 分子：一些有機化合物分子能使酶分子中發(fā)揮活性作用的基團保持本身狀態(tài)，保證和提高酶活性。a、某些還原劑如：GSH，半胱氨酸b、 EDTA（乙二胺四乙酸）能除去酶中重金屬離子雜質(zhì)，從而解除重金屬離子對酶的抑制作用。3. 蛋白質(zhì)：主要指的是酶，能夠切斷酶原分子中特定肽鍵，使無活性的酶原轉(zhuǎn)變成有活性的酶。如胰蛋白酶原在腸激酶的作用下，切去酶原中的六肽，轉(zhuǎn)變成胰蛋白酶，腸激酶為胰蛋白酶原的激活