食品中農殘的檢測技術

1、銀川能源學院論文(設計) 銀川能源學院 論文(設計)題 目 食品中農藥殘留的檢測技術 指導老師 專業(yè)班級 精細化工（1401）班 姓 名 周晶 學 號 1220150066 2016年5月2日 摘 要：最初農藥殘留檢測技術僅限于化學法、比色法和生物測定法，檢測方法缺乏專一性，靈敏度也不高。20世紀60年代氣相色譜應用于農藥和藥物殘留分析，大大提高了農藥和藥物殘留量的檢測水平。20世紀80年代以來，高效液相色譜法開始廣泛應用于對熱不穩(wěn)定和離子型農藥及其代謝物的分析。色譜法雖然定量準確、靈敏度高，但所需設備昂貴，需要專業(yè)人員操作，且分析時間長不利于現(xiàn)場監(jiān)測。本文就當前農藥和藥物殘留快速檢測分析技術

2、研究進展做一綜述。關鍵詞:農藥殘留檢測技術 目 錄引言31.農藥的殘留31.1危害31.2主要成份32.農藥檢測的必要性42.1農藥檢測43.檢測方法與發(fā)展43.1氣象色譜-質譜4 3.2快速檢測技術44. 農藥殘留速測儀55. 4.1概述5 4.2原理55.測試儀的使用方法6 5.1使用方法66.農藥殘留導致的急性中毒事件7 6.1農藥殘留的危害及事件7結論7參考文獻8引言 農業(yè)產業(yè)化的發(fā)展使農產品的生產越來越依賴于農藥、抗生素和激素等外源物質。我國農藥在農產品的用量居高不下，而這些物質的不合理使用必將導致農產品中的農藥殘留超標，影響消費者食用安全，嚴重時會造成消費者致病、發(fā)育不正常，甚至直

3、接導致中毒死亡。農藥殘留超標也會影響農產品的貿易，世界各國對農藥殘留問題高度重視，對各種農副產品中農藥殘留都規(guī)定了越來越嚴格的限量標準，使中國農產品出口面臨嚴峻的挑戰(zhàn)。目前農藥殘留快速檢測方法種類繁多，究其原理來說主要分為兩大類：生化測定法和色譜檢測法。其中生化測定法中的酶抑制率法由于具有快速、靈敏、操作簡便、成本低廉等特點，被列為國家推薦標準方法（GB/T 5009.199-2003），已成為對果蔬中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留進行現(xiàn)場快速定性初篩檢測的主流技術之一，得到了越來越廣泛的應用1. 農藥的殘留1.1危害 農藥殘留是指農藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農藥母體、衍生物、代謝物、

4、降解物和雜質的總稱。造成蔬菜農藥殘留量超標的主要是一些國家禁止在蔬菜生產 農藥殘留是指農藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農藥母體、衍生物、代謝物、降解物和雜質的總稱。造成蔬菜農藥殘留量超標的主要是一些國家禁止在蔬菜生產中使用的有機磷農藥和氨基甲酸酯類農藥，如甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷、對硫磷中使用的有機磷農藥和氨基甲酸酯類農藥，如甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷、對硫磷、甲基對硫磷等。食用含有大量高毒、劇毒農藥殘留引起的食物會導致人、畜急性中毒事故。長期食用農藥殘留超標的農副產品，雖然不會導致急性中毒，但可能引起人和動物的慢性中毒，導致疾病的發(fā)生，誘發(fā)癌癥，甚至影響到下一代。1.2主要成份 有機磷、

5、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯是目前市場上最主要的3 類殺蟲劑, 特別是有機磷類殺蟲劑仍在生產上起主導作用, 更是菜農首選使用的一類殺蟲劑。針對有機磷和氨基甲酸酯類農藥, 科學工作者在農藥殘留快速檢測技術方面做了大量的研究,并取得了較大的進步。2. 農藥檢測的必要性2.1農藥檢測 隨著農業(yè)產業(yè)化的發(fā)展，農產品的生產越來越依賴于農藥、抗生素和激素等外源物質。我國農藥在糧食、蔬菜、水果、茶葉上的用量居高不下，而這些物質的不合理使用必將導致農產品中的農藥殘留超標，影響消費者食用安全，嚴重時會造成消費者致病、發(fā)育不正常，甚至直接導致中毒死亡。農藥殘留超標也會影響農產品的貿易。3. 檢測方法與發(fā)展3.1氣象色譜

6、-質譜控制農藥殘留對人體的危害，最為有效的方法之一是加強對食品中農藥殘留檢測的力度。當今世界農殘的檢測分析向多殘留、快速分析發(fā)展，要保證高通量的檢測方法的準確性，需要有嚴格的農藥殘留確證技術。GC/MS是農藥殘留分析最廣泛使用的方法，使用GC/MS進行農殘分析，為了追求更高靈敏度和準確度，往往使用選擇離子模式（SIM），依據(jù)保留時間和特征離子及離子比例關系對目標物進行確證。在美國，一般要求樣品中目標物保留時間和標準品相比偏差小于0.05分鐘;每個目標物至少有3個特征離子， 其相對離子比例與標準品相比絕對值在10%以內;同時還要考慮基質對目標物帶來的其他影響;實驗回收率一般在70%120%之間。

7、在歐盟，使用SIM模式要求每個目標物至少有2個大于m/z200或3個大于m/z100的特征離子;目標物特征離子比例與標準品相比處于70%130%即可;日常檢測回收率控制在60%140%，確證分析則需要在70%110%之間。3.2快速檢測技術但是傳統(tǒng)的GC/MS等農殘分析技術檢測成本高、時間長，這就給食品安全監(jiān)管部門對農產品產前、產中、產后的監(jiān)督工作帶來了許多不便，因此也催生出大量的快速農藥殘留的檢測技術，常見的有化學速測法、免疫分析法、酶抑制法和活體檢測法等。（1）化學速測法，主要根據(jù)氧化還原反應，水解產物與檢測液作用變色，用于有機磷農藥的快速檢測，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質干

8、擾。（2）免疫分析法，主要有放射免疫分析和酶免疫分析，最常用的是酶聯(lián)免疫分析（ELISA），基于抗原和抗體的特異性識別和結合反應，對于小分子量農藥需要制備人工抗原，才能進行免疫分析。（3）酶抑制法，是研究最成熟、應用最廣泛的快速農殘檢測技術，主要根據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酶的特異性抑制反應。（4）活體檢測法，主要利用活體生物對農藥殘留的敏感反應，例如給家蠅喂食樣品，觀察死亡率來判定農殘量。該方法操作簡單，但定性粗糙、準確度低，對農藥的適用范圍窄。4.農藥殘留速測儀 4.1概述農藥殘留快速檢測儀是根據(jù)我國國情和市場需要而研制開的專用儀器?？梢詫崿F(xiàn)有機磷及氨基甲酸酯類農藥殘留量的現(xiàn)場快

9、速檢測。它可以廣泛適用于各級食品安全監(jiān)督部門、各級食品安全監(jiān)測部門、蔬菜生產基地、蔬菜批發(fā)基地、農貿市場、食品超市、食品安全檢測流動車、衛(wèi)生防疫、環(huán)境保護等領域的蔬菜、水果中農藥殘留檢測。4.2原理農藥殘留快速檢測儀是根據(jù)國家標準（GB/T5009.199-2003）和農業(yè)標準方法（NY/T448-2001）中的酶抑制率法，結合快速檢測方法研制的全新食品安全檢測設備，能準確、快速檢測出蔬菜、水果中有機磷類和氨基甲酸酯類農藥殘留量。在一定條件下，有機磷和氨基甲酸類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導代謝產物（乙酰膽堿）水解，其水解產物與顯色劑

10、反應，產生黃色物質，用分光光度計測定412nm下吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農藥的殘留。5. 測試儀的使用方法5.1使用方法1、開機插上電源，打開儀器背面綠色電源開關，儀器顯示開機畫面，按畫面提示操作，按下回車鍵，儀器開始自檢，時間約1min。自檢完畢后，儀器進入待機檢測狀態(tài)。2、試劑配制（配套試劑：LS農殘速測試劑）2.1、緩沖液：取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中，攪拌溶解制成磷酸緩沖液（pH7.6）, 常溫保存。2.2、顯色劑：取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解，使用時取100L，4冰箱保存。2.3、底 物：取1瓶底物加

11、12.5mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時取100L，4冰箱保存；或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解 ，使用時取20L，4冰箱保存。2.4、 膽堿酯酶：酶制劑無需配制，可直接取用，使用時取100L，4冰箱保存。3、樣品提取取2g果蔬樣品（塊莖類取4g)，葉菜剪成25px左右見方的碎片，塊莖類取橫截面樣品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL緩沖液，振蕩12min ，倒出提取液，靜置2min，待測。若提取液混濁或雜質太多可過濾后再測。4、 測試4.1、 對照測試：于反應瓶中加入2.5mL緩沖液，再分別加入100L酶液和顯色劑，混勻，靜置反應10min后加入100L（或20L）底物，搖勻并立即

12、倒入比色杯中，及時放入儀器的測量室第1通道，合上蓋。按B鍵，顯示屏下方延遲10s后，測量時間開始倒計時，計時完畢，顯示屏顯示吸光度增量(0)及抑制率。在進行對照測試時，28通道可同時進行樣品測試。4.2、樣品測試：于反應瓶中加入2.5mL待測液，再分別加入100L酶液和顯色劑，混勻，靜置反應10min后加入100L（或20L）底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時放入儀器的測量室通道，合上蓋。按M鍵，顯示屏下方延遲10s后，測量時間開始倒計時，計時完畢，顯示屏顯示吸光度增量（t)及抑制率。數(shù)據(jù)自動保存，如有需要按P鍵打印。 6.農藥殘留導致的急性中毒事件 6.1農藥殘留的危害及事件 農殘不僅導致急

13、性中毒，更嚴重的是慢性中毒； 菜該吃還得吃； 千萬別相信蟲眼菜；如果暫時還吃不上綠色蔬菜和無公害蔬菜，那么菜買回家后該洗的好好洗，該削皮的削皮；2003年5月23日，福州一幼兒園38名幼兒園幼兒因食用含有甲胺磷的空心菜而中毒。1999年4月，福建安溪60名小學生因誤食帶農殘的李子而中毒，另2名未上學女幼童在就醫(yī)途中死亡。這僅僅是每年農殘中毒事件中的兩例，這僅僅是"看得見"的急性中毒。其實，農藥殘留的后果更多的是蓄積在消費者體內，累積若干年后"突變"，引發(fā)或直接導致某些疾病。結論 目前農藥殘留檢測：發(fā)光菌技術主要應用于水質檢測及環(huán)境規(guī)劃，隨著技術的發(fā)展發(fā)光

14、菌法將和電子技術以及光電技術相結合，逐步發(fā)展為在線監(jiān)測系統(tǒng)，為有機磷農藥現(xiàn)場監(jiān)測提供更加快速的檢測分析手段。化學發(fā)光是近年來發(fā)展起來的一種高靈敏的微量及痕量有機磷殘留檢測分析技術，今后在改進和完善原有發(fā)光試劑和體系的同時，新發(fā)光試劑的合成及與其他技術(如微流控芯片技術、傳感器技術等)的聯(lián)用，更顯示出化學發(fā)光分析技術快速、靈敏、簡便的優(yōu)點。ELISA技術與生物傳感器技術目前還處于起步階段，隨著分析技術的不斷改進，ELISA減少交叉反應的發(fā)生，進一步提高靈敏度及穩(wěn)定性，免疫試劑盒不斷的商業(yè)化；生物傳感器的多功能化(1個傳感器可檢測多種農藥殘留)，降低產品成本，提高靈敏度、穩(wěn)定性和延長壽命，它們在農藥殘留檢測領