分析化學(xué)紫外可見光分光光度法-ppt課件

1、第十章吸光光度法化學(xué)分析法總結(jié)化學(xué)分析法總結(jié) 酸堿滴定法 配位滴定法 氧化-復(fù)原滴定法 沉淀滴定法 分量分析法化學(xué)分析化學(xué)分析常量組分常量組分(1%), Er 0.1%0.2%根據(jù)化學(xué)反響根據(jù)化學(xué)反響, 運(yùn)用玻璃儀器運(yùn)用玻璃儀器 儀器分析儀器分析微量組分微量組分(Ev (0.051eV) Er (0.0050.05eV)電子能級(jí)的躍遷電子能級(jí)的躍遷 當(dāng)用可見光或紫外光照射當(dāng)用可見光或紫外光照射分子時(shí)，價(jià)電子可以躍遷產(chǎn)生分子時(shí)，價(jià)電子可以躍遷產(chǎn)生吸收光譜，在電子能級(jí)變化的吸收光譜，在電子能級(jí)變化的同時(shí)，不可防止地伴隨分子振同時(shí)，不可防止地伴隨分子振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)的能級(jí)變化。因此他動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)的能級(jí)變化。因

2、此他包含了大量譜線，并由于這些包含了大量譜線，并由于這些譜線的重疊而成為延續(xù)的吸收譜線的重疊而成為延續(xù)的吸收帶。帶。 分子的激發(fā)分子的激發(fā)(Excitation) E = E2 - E1 = h 分子構(gòu)造的復(fù)雜性使其對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收程度不同； 用不同波長(zhǎng)的單色光照射，測(cè)吸收光的程度隨光波長(zhǎng)的變化 吸收曲線與最大吸收波長(zhǎng) max。 M + h M *基態(tài)基態(tài) 激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài) E1 E E2苯和甲苯在環(huán)己烷中的吸收光譜苯和甲苯在環(huán)己烷中的吸收光譜(Absorption spectra of benzene and toluene in cyclohexane)苯苯(254nm)甲苯甲苯(262nm

3、)A 230 250 270 第二節(jié)第二節(jié) 光吸收根本定律光吸收根本定律ItI0bdxI I-dIs1. 朗伯定律朗伯定律2. 比爾定律比爾定律 A=k2cA=lg(I0/It)=k1b光程光程3。朗伯。朗伯-比爾定律比爾定律0tIT =I=10=10T-kbc-AA = lg (I0/It) = lg(1/T) = k b c1) T透光率透光率A=k b cA 吸光度吸光度b 介質(zhì)厚度介質(zhì)厚度c 濃度濃度K 吸光系數(shù)吸光系數(shù)2吸光系數(shù)吸光系數(shù)a的單位的單位: Lg-1cm-1當(dāng)當(dāng)c的單位用的單位用gL-1表示時(shí)，用表示時(shí)，用a表示，表示， Aa b c 的單位的單位: Lmol-1cm-1

4、當(dāng)當(dāng)c的單位用的單位用molL-1表示時(shí)，用表示時(shí)，用表示表示. 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù) A b c 1%1cmE1%1cmE1%1cmE當(dāng)當(dāng)c的單位用的單位用g(100mL)-1表示時(shí)，用表示時(shí)，用 表表示，示，A b c， 叫做比消光系數(shù)叫做比消光系數(shù)3吸光度吸光度(A)、透光率、透光率(T)與濃度與濃度(c)的關(guān)系的關(guān)系A(chǔ)Tc= 10-kbcTA=kbc線性關(guān)系線性關(guān)系吸光度與光程的關(guān)系吸光度與光程的關(guān)系 A = A = bc bc 檢測(cè)器檢測(cè)器b樣品樣品光源光源0.22吸光度吸光度光源光源檢測(cè)器檢測(cè)器0.00吸光度吸光度光源光源檢測(cè)器檢測(cè)器0.44吸光度吸光度b樣品樣品b樣品樣品吸光

5、度與濃度的關(guān)系吸光度與濃度的關(guān)系 A = A = bcbc 吸光度吸光度0.00光源光源檢測(cè)器檢測(cè)器 吸光度吸光度0.22光源光源檢測(cè)器檢測(cè)器b 吸光度吸光度0.44光源光源檢測(cè)器檢測(cè)器b4 4摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)( () )的討論的討論1吸收物質(zhì)在一定波長(zhǎng)和溶劑條件下的特征吸收物質(zhì)在一定波長(zhǎng)和溶劑條件下的特征常數(shù)，可作為定性鑒定的參數(shù)；常數(shù)，可作為定性鑒定的參數(shù)；2不隨濃度不隨濃度c和光程長(zhǎng)度和光程長(zhǎng)度b的改動(dòng)而改動(dòng)。在的改動(dòng)而改動(dòng)。在溫度和波長(zhǎng)等條件一定時(shí)，溫度和波長(zhǎng)等條件一定時(shí)，僅與吸收物質(zhì)本身僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測(cè)物濃度無(wú)關(guān)；的性質(zhì)有關(guān)，與待測(cè)物濃度無(wú)關(guān)；3同一吸收物質(zhì)

6、在不同波長(zhǎng)下的同一吸收物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的值是不同的值是不同的。在最大吸收波長(zhǎng)。在最大吸收波長(zhǎng)max處的摩爾吸光系數(shù)，常處的摩爾吸光系數(shù)，常以以max表示。表示。max闡明了該吸收物質(zhì)最大限制闡明了該吸收物質(zhì)最大限制的吸光才干，也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)能夠到的吸光才干，也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)能夠到達(dá)的最大靈敏度。達(dá)的最大靈敏度。 4max越大闡明該物質(zhì)的吸光才干越強(qiáng)，用越大闡明該物質(zhì)的吸光才干越強(qiáng)，用光度法測(cè)定該物質(zhì)的靈敏度越高。光度法測(cè)定該物質(zhì)的靈敏度越高。 105：超高靈敏；：超高靈敏； =(610104 ：高靈敏；：高靈敏； 104*選擇性好，最好只與一種組分顯色選擇性好，最好只與一種組

7、分顯色*顯色劑在測(cè)定波優(yōu)點(diǎn)無(wú)明顯吸收。顯色劑在測(cè)定波優(yōu)點(diǎn)無(wú)明顯吸收。*對(duì)比度大對(duì)比度大, max60 nm .*反響生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定。反響生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定。*顯色條件易于控制，重現(xiàn)性好。顯色條件易于控制，重現(xiàn)性好。2.顯色劑顯色劑無(wú)機(jī)顯色劑無(wú)機(jī)顯色劑: Fe(SCN)2+，TiOH2O22+有機(jī)顯色劑有機(jī)顯色劑:一。顯色反響一。顯色反響1) 生色團(tuán)發(fā)色團(tuán)生色團(tuán)發(fā)色團(tuán) ONN，NO，OC=S,N 共軛雙鍵共軛雙鍵e2) 助色團(tuán)助色團(tuán)注：當(dāng)出現(xiàn)幾個(gè)發(fā)色團(tuán)共軛，那么幾個(gè)發(fā)色團(tuán)所注：當(dāng)出現(xiàn)幾個(gè)發(fā)色團(tuán)共軛，那么幾個(gè)發(fā)色團(tuán)所產(chǎn)生的吸收帶將消逝，代之出現(xiàn)新的共軛吸收產(chǎn)生的吸收帶將

8、消逝，代之出現(xiàn)新的共軛吸收帶，其波長(zhǎng)將比單個(gè)發(fā)色團(tuán)的吸收波長(zhǎng)長(zhǎng)，強(qiáng)帶，其波長(zhǎng)將比單個(gè)發(fā)色團(tuán)的吸收波長(zhǎng)長(zhǎng)，強(qiáng)度也加強(qiáng)度也加強(qiáng)3) 紅移和藍(lán)移紅移和藍(lán)移 由于化合物構(gòu)造變化共軛、引入助色團(tuán)取代基或采用不同溶劑后，吸收峰位置向長(zhǎng)波方向的挪動(dòng)，叫紅移; 吸收峰位置向短波方向挪動(dòng)，叫藍(lán)移.4) 增色效應(yīng)和減色效應(yīng) 增色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度加強(qiáng)的效應(yīng) 減色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減小的效應(yīng)5) 強(qiáng)帶和弱帶 max105 強(qiáng)帶(Strong band) min103 弱帶(Weak band)有機(jī)顯色劑有機(jī)顯色劑CH3CCCH3 HON NOH NNOHCOOHSO3HOO型：型：NNNOH OHON型：型：PARNH N

9、HNSNS型：型：雙硫腙雙硫腙NN型：型：丁二丁二酮肟酮肟鄰二鄰二氮菲氮菲磺基水楊酸磺基水楊酸二。二。 顯色條件的選擇顯色條件的選擇cRcRcR1. 顯色劑用量顯色劑用量(cM、pH一定一定)Mo(SCN)32+ 淺淺紅紅Mo(SCN)5 橙紅橙紅Mo(SCN)6- 淺紅淺紅Fe(SCN)n3-n2. 顯色反響酸度顯色反響酸度cM、 cR一定一定pH1pH儀器丈量誤差儀器丈量誤差%100lg434. 0%100ln%100%10001. 0TTTTTTAAccETdTr%100ln%100%100ln434. 0lg1lgTTdTAdAcdcETTTbcAr濃度丈量的相對(duì)誤差與濃度丈量的相對(duì)誤

10、差與T(或或A)的關(guān)系的關(guān)系1086420204060800.70.40.20.1AT%Err0.434lg(0.01)cTEcTTT (36.8)0.434實(shí)踐任務(wù)中，應(yīng)控制實(shí)踐任務(wù)中，應(yīng)控制T T在在10107070, , A A在在0.150.150 0。8 8之間之間例例1 鄰二氮菲光度法測(cè)鐵鄰二氮菲光度法測(cè)鐵 ，(Fe)=1.0 mg/L, b = 2cm , A = 0.38 ，計(jì)算，計(jì)算 和和解：解： cFe=1.0 mg/L=1.010-3/55.85 =1.810-5 mol/L1%1cmE4-1-1-50.38=1.1 10 L molcm2 1.8 10 c =1.0 m

11、g/L=1.010-3 g /1000mL = 1.010-4g/100mLbc1%1cmAE=1%m431c-=0.38/2.0 10=1.9 10E1%1cm53=10=1.1 10 /55.85=o1.9 10r E/M 第五節(jié)第五節(jié) 光度分析法的運(yùn)用光度分析法的運(yùn)用一。單一組分測(cè)定一。單一組分測(cè)定金屬離子金屬離子: Fe-phen, Ni-丁二酮肟丁二酮肟, Co-鈷試劑鈷試劑2) 磷的測(cè)定磷的測(cè)定: DNA中含中含P9.2%, RNA中含中含P9.5%, 可得核酸量可得核酸量.H3PO4+12(NH4)2MoO4+21HNO3=(NH4)3PO412MoO3+12NH4NO3+12H

12、2O磷鉬黃磷鉬黃(小小)磷鉬磷鉬(V)藍(lán)藍(lán)(大大)Sn2+多組分的測(cè)定多組分的測(cè)定 x1, y1, x2, y2x1, y1, x2, y2由由x,yx,y標(biāo)液標(biāo)液 在在 1, 1, 2 2處分別測(cè)得處分別測(cè)得在1處測(cè)組分x, 在2處測(cè)組分yb) 在1處測(cè)組分x; 在2處測(cè)總吸收,扣除x吸收,可求yc) x,y組分不能直接測(cè)定組分不能直接測(cè)定A1=exl1bcx+ eyl1bcy(在在 1處測(cè)得處測(cè)得A1) A2 =exl2bcx+ eyl2bcy(在在 2處測(cè)處測(cè)得得A2)二。示差吸光光度法二。示差吸光光度法 普通分光光度法普通只適于測(cè)定微量組分，普通分光光度法普通只適于測(cè)定微量組分，當(dāng)待測(cè)

13、組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測(cè)溶液濃度的規(guī)范溶液作參比溶液。低于待測(cè)溶液濃度的規(guī)范溶液作參比溶液。設(shè)：待測(cè)溶液濃度為設(shè)：待測(cè)溶液濃度為cx，規(guī)范溶液濃度為，規(guī)范溶液濃度為cs(cs cx)。那么：。那么：Ax= b cx， As = b cs=x s =b(cx cs =bc 測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與規(guī)測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與規(guī)范溶液的吸光度之差范溶液的吸光度之差。由規(guī)范曲線上查得相。由規(guī)范曲線上查得相應(yīng)的應(yīng)的c值，那么待測(cè)溶液濃度

14、值，那么待測(cè)溶液濃度cx ： cx = cs + c 示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理：示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理： 普通法：普通法： cs的的T=10%；cx的的T=5% 示差法：示差法： cs 做參比，調(diào)做參比，調(diào)T=100% 那么：那么： cx的的T=50% ；標(biāo)尺擴(kuò)展；標(biāo)尺擴(kuò)展10倍倍三。雙波長(zhǎng)分光光度法三。雙波長(zhǎng)分光光度法 不需空白溶液作參比；但需求兩個(gè)單色器獲得兩束單色光(1和2)；以參比波長(zhǎng)1處的吸光度A1作為參比，來(lái)消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時(shí)顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、丈量精細(xì)度等方面都比單波長(zhǎng)法有所提高。 雙波長(zhǎng)分光光度法雙波長(zhǎng)分光光度法A A2 A1 (2 1)b c

15、 兩波優(yōu)點(diǎn)測(cè)得的吸光度差值兩波優(yōu)點(diǎn)測(cè)得的吸光度差值A(chǔ)與待測(cè)組分濃與待測(cè)組分濃度度c成正比。成正比。1和和2分別表示待測(cè)組分在分別表示待測(cè)組分在1和和2處的摩爾吸光系數(shù)。處的摩爾吸光系數(shù)。丈量波長(zhǎng)丈量波長(zhǎng)2和參比波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)1的選擇與組合的選擇與組合根本要求：根本要求：在選定的兩個(gè)波長(zhǎng)在選定的兩個(gè)波長(zhǎng)11和和22處待測(cè)組分的吸光處待測(cè)組分的吸光度應(yīng)具有足夠大的差值。度應(yīng)具有足夠大的差值。 選定的波長(zhǎng)1和2處干擾組分應(yīng)具有一樣吸光度，即：Ay = A y2 A y1 = 0故：Ax+y = A x=(x2x1)bcx此時(shí)：測(cè)得的吸光度差A(yù)只與待測(cè)組分x的濃度呈線性關(guān)系，而與干擾組分y無(wú)關(guān)。假設(shè)x

16、為干擾組分，那么也可用同樣的方法測(cè)定y組分。雙波長(zhǎng)分光光度法消除干擾雙波長(zhǎng)分光光度法消除干擾在2， A2 = Ax2+Ay2在1， A1= Ax1+Ay1 A= A 2 - A 1 = Ax2+Ay2 (Ax1+Ay1) = Ax2 Ax1 = AxAy2 Ay1 Ax =( x2 x1)bcx消除了消除了y的干擾的干擾X被測(cè)被測(cè)Y干擾干擾211Ay1AX1Ay2AX2A/nm雙波長(zhǎng)分光光度法消除渾濁背景干擾雙波長(zhǎng)分光光度法消除渾濁背景干擾 1 2AA 1 -A 2 = A Ac例例 牛奶中微量牛奶中微量Fe的測(cè)定的測(cè)定四。導(dǎo)數(shù)分光光度法四。導(dǎo)數(shù)分光光度法 導(dǎo)數(shù)分光光度法在多組分同時(shí)測(cè)定、渾濁

17、樣品分析、消除背景干擾、加強(qiáng)光譜的精細(xì)構(gòu)造以及復(fù)雜光譜的辨析等方面，顯示了很大的優(yōu)越性。 利用吸光度(或透光度)對(duì)波長(zhǎng)的導(dǎo)數(shù)曲線來(lái)進(jìn)展分析： 0 e-bc假定入射光強(qiáng)度0 在整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)堅(jiān)持恒定： dI 0 /d0那么：dI/d0 bc e -bc d/d 0 bc d/d 導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法dI/d dI/d 0 bc d/d 0 bc d/d 一階導(dǎo)數(shù)信號(hào)與試樣濃度呈一階導(dǎo)數(shù)信號(hào)與試樣濃度呈線性關(guān)系；線性關(guān)系；測(cè)定靈敏度依賴于摩爾吸光測(cè)定靈敏度依賴于摩爾吸光系數(shù)對(duì)波長(zhǎng)的變化率系數(shù)對(duì)波長(zhǎng)的變化率d/dd/d。吸收曲線的拐點(diǎn)處。吸收曲線的拐點(diǎn)處d/dd/d最大，故其靈敏度最高。最大

18、，故其靈敏度最高。同理可以導(dǎo)出其二階和三階同理可以導(dǎo)出其二階和三階導(dǎo)數(shù)光譜導(dǎo)數(shù)光譜 導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法混合物導(dǎo)數(shù)光譜混合物導(dǎo)數(shù)光譜A 圖圖01234A 圖圖中藥降壓片中氫氯噻嗪含量的測(cè)定中藥降壓片中氫氯噻嗪含量的測(cè)定1.氫氯噻嗪氫氯噻嗪.2.硫酸雙肼肽硫酸雙肼肽嗪嗪3. 鹽酸可樂定鹽酸可樂定4.中藥降壓片中藥降壓片 250 290 330 412312AA 肝中茚滿二酮類抗凝血?dú)⑹髣┑墓滔噍腿「沃熊釢M二酮類抗凝血?dú)⑹髣┑墓滔噍腿》椒ǎ焊蝿驖{用乙腈浸提，浸提液方法：肝勻漿用乙腈浸提，浸提液用用6的的HClO4稀釋，然后用稀釋，然后用GDX100大孔樹脂萃取，用二氯甲大孔樹脂萃取，用二氯

19、甲烷烷5mL洗脫殺鼠劑，洗脫殺鼠劑，40揮干，揮干，剩余物用剩余物用0.1molL-1NaOH4mL溶溶解后，紫外導(dǎo)數(shù)光譜測(cè)定。解后，紫外導(dǎo)數(shù)光譜測(cè)定。A22ddA 0.0cdabDa.空白肝普通光譜空白肝普通光譜b.2.5 mg/L敵鼠溶液的普通光譜敵鼠溶液的普通光譜c.空白肝二階導(dǎo)數(shù)光譜空白肝二階導(dǎo)數(shù)光譜d.2.5 mg/L敵鼠溶液的二階導(dǎo)數(shù)光譜敵鼠溶液的二階導(dǎo)數(shù)光譜五。一元弱酸離解常數(shù)的測(cè)定五。一元弱酸離解常數(shù)的測(cè)定HL HLHLHLL=HL+LKccAKK +L+aaa(HL)H (HL)=+H +H KaH+L/HL高酸度下，幾乎全部以高酸度下，幾乎全部以HL存在，可測(cè)得存在，可測(cè)得

20、AHLHLc(HL)；低酸度下，幾乎全部以低酸度下，幾乎全部以L存在，可測(cè)得存在，可測(cè)得AL Lc(HL).代入整理：代入整理：AAKAA +HLaL-=H -HLLL HLAAKAAa-p= pH+lg-或配制一系列配制一系列c一樣一樣,pH不同的溶液不同的溶液,測(cè)測(cè)A(設(shè)設(shè)b=1cm).MO吸收曲線吸收曲線Aa(HL)Ab(L)123456Ab654321Aa350400450500550600 /nmA曲線曲線pHpH1 11.10, 1.381.10, 1.382 22.652.653 33.063.064 43.483.485 53.983.986 65.53,6.805.53,6.

21、80由每份溶液的由每份溶液的一對(duì)一對(duì)pH、A，可求得一個(gè)可求得一個(gè)Ka, 取平均值即可取平均值即可.MO離解常數(shù)的測(cè)定離解常數(shù)的測(cè)定作圖法作圖法LHLappHlgAAKAA HLL2AAA AHL3.32(pKa)123456ApH=pKapHpHA曲曲線線ALLHLlgpHAAAA 曲曲線線0.60.40.20-0.2-0.4-0.63.04.0pHHLLHLlggLlAAAA 3.34六。六。 絡(luò)合物組成的測(cè)定絡(luò)合物組成的測(cè)定(1)(1)摩爾比法摩爾比法: : 固定固定cM ,cM ,改動(dòng)改動(dòng)cR cR 1:13:1c(R)/c(M)A1.0 2.0 3,0 (2)(2)等摩爾延續(xù)變化法等

22、摩爾延續(xù)變化法: :M:R=1:10.50.33cM/ccM/cM:R=1:2MR=MRnn MR(ccc） 常常數(shù)數(shù)表觀構(gòu)成常數(shù)的測(cè)定表觀構(gòu)成常數(shù)的測(cè)定 (設(shè)設(shè)M、R均無(wú)吸收均無(wú)吸收)0.5cM/cM:R=1:1A0A00ccc00-=A AA cM + cR= c)2MR(1-=M R 1-=cKccc MmRn型型 ? 七。光度滴定七。光度滴定NaOH滴定滴定 對(duì)硝基苯酚對(duì)硝基苯酚 pKa=7.15 間硝基苯酚間硝基苯酚 pKa=8.39 pKa =1.24V1V2VNaOH/mL對(duì)硝基苯酚對(duì)硝基苯酚間硝基苯酚間硝基苯酚酸形酸形均無(wú)均無(wú)色色. .堿形堿形均黃均黃色色典型的光度滴定曲線典型

23、的光度滴定曲線根據(jù)滴定過程中溶液吸光度變化來(lái)確定終點(diǎn)的滴定分析方根據(jù)滴定過程中溶液吸光度變化來(lái)確定終點(diǎn)的滴定分析方法。法。Vsp滴定劑與待滴定劑與待測(cè)物均吸收測(cè)物均吸收Vsp滴定劑吸收滴定劑吸收Vsp被滴物吸收被滴物吸收Vsp產(chǎn)物吸收產(chǎn)物吸收例：例：維生素維生素B12 的水溶液在的水溶液在361nm處的百分處的百分吸光系數(shù)為吸光系數(shù)為207，用，用1cm比色池測(cè)得某維比色池測(cè)得某維生素生素B12溶液的吸光度是溶液的吸光度是0.414，求該溶，求該溶液的濃度液的濃度解：解：mLgmLgbEACcm/0 .20100/00200. 01207414. 01%1例例1： 精細(xì)稱取精細(xì)稱取B12樣品樣

24、品25.0mg，用水溶液配成，用水溶液配成100ml。精細(xì)汲取。精細(xì)汲取10.00ml，又置，又置100ml容量瓶容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，的吸收池中，于于361nm處測(cè)定吸光度為處測(cè)定吸光度為0.507，求，求B12的百分的百分含量？百分吸光系數(shù)為含量？百分吸光系數(shù)為207 解：解：mLgmLgCi/1045. 2100/1045. 21207507. 053mLgC/1050. 2100101001050. 252樣%0 .98%1001050. 21045. 2%100%5512樣CCBi例例2：解：解：%)0 .764(591. 010

25、01025000.201%1255367iEAmLmLmLmgcmmlmLHCl求已知測(cè)移取稀至樣品稀至吡啶 mLgmLgbEACcmi/1092. 7100/1092. 7764591. 0641%1%0 .99%10010010250100 . 21092. 7%100%26樣CCii習(xí)題習(xí)題1.朗伯朗伯-比耳定律的物理意義是什么比耳定律的物理意義是什么？什么叫吸收曲線？什么叫規(guī)范曲線？什么叫吸收曲線？什么叫規(guī)范曲線？習(xí)題習(xí)題2.摩爾吸光系數(shù)的物理意義是什么摩爾吸光系數(shù)的物理意義是什么？習(xí)題習(xí)題3.為什么目視比色法可采用復(fù)合光為什么目視比色法可采用復(fù)合光日光，而吸光光度法那么必需采用單日光

26、，而吸光光度法那么必需采用單色光？分光光度計(jì)是如何獲得單色光的？色光？分光光度計(jì)是如何獲得單色光的？習(xí)題習(xí)題4.符合朗伯符合朗伯比爾定律的有色溶液比爾定律的有色溶液，當(dāng)其濃度增大后，當(dāng)其濃度增大后，max、T、A和和有無(wú)有無(wú)變化？有什么變化？變化？有什么變化？習(xí)題習(xí)題5,6習(xí)題習(xí)題5.同吸收曲線的肩部波長(zhǎng)相比，為什么在同吸收曲線的肩部波長(zhǎng)相比，為什么在最大吸收波優(yōu)點(diǎn)丈量能在較寬的濃度范圍內(nèi)使規(guī)最大吸收波優(yōu)點(diǎn)丈量能在較寬的濃度范圍內(nèi)使規(guī)范曲線呈線性關(guān)系？范曲線呈線性關(guān)系？習(xí)題習(xí)題6.兩種藍(lán)色溶液，知每種溶液僅含有一種兩種藍(lán)色溶液，知每種溶液僅含有一種吸光物質(zhì)，同樣條件下用吸光物質(zhì)，同樣條件下用1

27、cm比色皿測(cè)得如下的比色皿測(cè)得如下的吸光度值。問這兩種溶液能否是同一種吸光物質(zhì)吸光度值。問這兩種溶液能否是同一種吸光物質(zhì)？試解釋之。？試解釋之。溶液溶液A770 A82010.6220.41720.3910.240習(xí)題習(xí)題7, 8, 9, 10習(xí)題習(xí)題7.什么是適宜的吸光度讀數(shù)范圍？此什么是適宜的吸光度讀數(shù)范圍？此范圍的大小取決于什么要素？測(cè)定時(shí)如何范圍的大小取決于什么要素？測(cè)定時(shí)如何才干獲得合理的吸光度讀數(shù)？才干獲得合理的吸光度讀數(shù)？習(xí)題習(xí)題8.顯色劑的選擇原那么是什么？顯色顯色劑的選擇原那么是什么？顯色條件是指的哪些？如何確定適宜的顯色條條件是指的哪些？如何確定適宜的顯色條件？件？習(xí)題習(xí)題

28、9.分光光度計(jì)由哪些部分組成？各部分光光度計(jì)由哪些部分組成？各部分有什么作用？分有什么作用？習(xí)題習(xí)題10.某試液用某試液用2cm比色皿丈量時(shí)，比色皿丈量時(shí)，T=100%。假設(shè)用。假設(shè)用1cm或或3cm比色皿進(jìn)展丈比色皿進(jìn)展丈量，量，T及及A各是多少？答：各是多少？答：77.4%、0.111；46.5%、0.333。習(xí)題習(xí)題11, 12習(xí)題習(xí)題12.以以MnO4-方式丈量合金中的錳。方式丈量合金中的錳。液解液解0.500g合金試樣并將錳全部氧化為合金試樣并將錳全部氧化為MnO4-后，將溶液稀釋至后，將溶液稀釋至500mL，用，用1cm比色皿在比色皿在525nm處測(cè)得該溶液的吸光度處測(cè)得該溶液的吸

29、光度A=0.400；而；而1.0010-4 molL-1的的KMnO4在一樣條件下測(cè)得的在一樣條件下測(cè)得的A=0.585。設(shè)。設(shè)KMnO4溶液在此范圍內(nèi)服從光的吸收定律。試求溶液在此范圍內(nèi)服從光的吸收定律。試求合金試樣中合金試樣中Mn的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。答：的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。答：0.376習(xí)題習(xí)題11.含含Cu2+為為0.510mgL-1的溶液，用的溶液，用雙環(huán)己酮草酰二腙顯色后，在雙環(huán)己酮草酰二腙顯色后，在600nm處用處用2cm比色皿測(cè)得比色皿測(cè)得A=0.300。求透光率。求透光率T、吸、吸光系數(shù)光系數(shù)a和摩爾吸光系數(shù)和摩爾吸光系數(shù)。 答答:79.1%；2.9102 Lg-1cm-1；1.9104Lmo

30、l-1cm-1習(xí)題習(xí)題13.習(xí)題習(xí)題13.兩種無(wú)色物質(zhì)兩種無(wú)色物質(zhì)X和和Y經(jīng)反響生成一種在經(jīng)反響生成一種在550nm處處=450Lmol-1cm-1的有色配合物的有色配合物XY。該配合物的規(guī)范離解常數(shù)是該配合物的規(guī)范離解常數(shù)是6.0010-4。當(dāng)?shù)润w積。當(dāng)?shù)润w積混合濃度均為混合濃度均為0.00100 molL-1的的X和和Y溶液時(shí)，用溶液時(shí)，用1cm的比色皿在的比色皿在550nm處測(cè)得的處測(cè)得的A是多少？是多少？答：答：1.59光吸收定律、吸收曲線、任務(wù)曲線及其運(yùn)光吸收定律、吸收曲線、任務(wù)曲線及其運(yùn)用；提高吸光分析法選擇性和準(zhǔn)確度的主用；提高吸光分析法選擇性和準(zhǔn)確度的主要途徑；吸光分析法的原理

31、和實(shí)踐運(yùn)用要途徑；吸光分析法的原理和實(shí)踐運(yùn)用 難點(diǎn)：丈量條件的選擇，任務(wù)曲線的繪制難點(diǎn)：丈量條件的選擇，任務(wù)曲線的繪制和運(yùn)用和運(yùn)用 教學(xué)內(nèi)容：、概述：吸光光度法的意教學(xué)內(nèi)容：、概述：吸光光度法的意義和運(yùn)用；比色分析法和分光光度法的特義和運(yùn)用；比色分析法和分光光度法的特點(diǎn)。點(diǎn)。 、吸光光度法的根本原理。、吸光光度法的根本原理。 光的性質(zhì)和物質(zhì)對(duì)光光的性質(zhì)和物質(zhì)對(duì)光的吸收；的吸收； 溶液顏色和光吸收的關(guān)系溶液顏色和光吸收的關(guān)系, ,吸收曲線；朗伯吸收曲線；朗伯- -比比耳定律耳定律( (吸光度吸光度A A與透光度與透光度T T的關(guān)系的關(guān)系, ,吸光系數(shù)、摩爾吸光系吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)、靈敏度及其意義數(shù)、靈敏度及其意義)。 、比色和分光光度法的方法和儀器：光度分析法