不同型別肺炎克雷伯菌的毒力基因,ESBL,血清殺菌效果與生物膜形成的關(guān)系

1、不同型別肺炎克雷伯菌的毒力基因，ESBL， 血清殺菌效果與生物膜形成的關(guān)系1 .呼吸道感染病人臨床分離c K所口 hv KP的毒力基因、超廣譜B -內(nèi)酰胺酶、血清殺菌效果與生物膜形成的關(guān)系背景: 臨床常見(jiàn)的肺炎克雷伯菌被醫(yī)生和微生物學(xué)家稱(chēng)之為普通肺炎克雷伯菌(c KP) 。高毒力肺炎克雷伯菌(hv KP) 以莢膜多糖等為主要毒力因子, 具有較強(qiáng)的抗血清殺傷作用的能力和生物膜形成能力。本研收集呼吸道感染病人臨床分離的 c KP和hv KP菌株，檢測(cè)毒力基因、超 廣譜B-內(nèi)酰胺酶、血清殺菌效果與生物膜形成的關(guān)系。 材料和方法：本實(shí)驗(yàn)共收 集到肺炎克雷伯菌96 株 , 分離于呼吸道感染患者的痰液。對(duì)

2、菌株進(jìn)行了拉絲試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)和 ESBL確證試驗(yàn)。PC就應(yīng)檢測(cè)毒力基 因。NHS僉測(cè)血清殺菌作用，微孔板法檢測(cè)生物膜形成能力。結(jié)果:96株臨床分離肺炎克雷伯菌株有39 株 (40.6%) 通過(guò)拉絲試驗(yàn)被確定hv KP 菌株 ,57 株為 c KP菌株。藥敏實(shí)驗(yàn)顯示,c KP 菌株的耐藥程度明顯高于hv KP 株。 c KP 株攜帶 ESBL的菌株數(shù)量(28/5749.1%) 高于 hv KP 株 (11/3928.2%) 。此外,在c KP菌株中檢測(cè)到一種或多種類(lèi)型的 ESBL®因,而在hv KP菌株只 檢測(cè)到單一的ESBLXHo在hv KP菌株中多種肺炎克雷伯菌毒力基因如 K1、K

3、2、 Rmp A、 Uge、 Kfu 和產(chǎn)氣菌素等的檢出率高于c KP 菌株。但是,FIM-1基因和Mr KD3基因的檢出率沒(méi)有很大差異。在 c KP株和hv KP 株中,ESBL的產(chǎn)出與生物膜形成(both P<0.05)密切相關(guān)，與血清殺菌作用(both P<0.05) 也高度相關(guān)。但是,在產(chǎn)生ESBL的c KP菌株和hv KP菌株之間生物膜形成和血清殺菌作用沒(méi)有表現(xiàn)明顯差異（both P>0.05） 。結(jié)論 : 雖然 hv KP 株中包含更多的毒力基因，但與產(chǎn)生ESBLB c KP菌株相比,生物膜形成能力和血清殺菌作用并沒(méi)有任何明顯的區(qū)別。2 .

4、測(cè)定水楊酸鈉和N-乙酰半胱氨酸對(duì)莢膜多糖生物合成、生物膜形成以及K1型和K2型hm Kp菌株已形成的生物膜的影響背景：肺炎克雷伯菌攜帶大量的 CPSfg防止細(xì)菌免受吞噬細(xì)胞的吞噬和血清因子的殺傷作用并且可以富集細(xì)菌 形成生物膜。因此，我們需要一個(gè)可以減少CPS產(chǎn)生的一種化學(xué)藥劑，可以作為 hv KP 細(xì)菌感染的一個(gè)有效的輔助治療手段。實(shí)驗(yàn)的主要目的是評(píng)估水楊酸鈉和 N-乙酰半胱氨酸對(duì)莢膜多糖生物合成、生物膜形成以及K1型和K2型hv KP菌株已形成的生物膜的影響。材料和方法： 臨床分離hv KP的K1和K2型菌株被用于以下研究：SAL和NACft高黏液表型肺 炎克雷伯菌、CPSf成、K1和K2

5、基因表達(dá)、生物膜形成和對(duì)已形成的生物膜的 影響。結(jié)果:SAL可以明顯降低細(xì)菌黏性和 CPSa度。止匕外，實(shí)時(shí)定量PC期析表 明,SAL下調(diào)了 CPS成基因的m RNAC平。而NACE不影響細(xì)菌黏度也不影響 CPS成基因的表達(dá)。SAL和NACffi可以 抑制生物膜形成并清除已成熟的生物。SAL在濃度為48%（5仙g/ml）和84%（100仙g/ml）時(shí)可以抑制生物膜形成，在濃 度12%（5仙g/ml）和濃度51%（100仙g/ml）時(shí)可以清除已成熟的生物膜。NACE濃 度為 9%和 26%（0.5 and 1 mg/ml） 時(shí)可以抑制生物膜的形成, 在濃度38%和 49%（0.5and 1 mg/ml） 時(shí)可以清除已成熟的生物膜。可見(jiàn)，比起抑制生物膜形成，NAC對(duì)成熟生物膜的消除作用占主導(dǎo)地位。SAL 和NAC®合應(yīng)用對(duì)于抑制生物膜的合成和對(duì)成熟生物膜的消除作用有更加顯著的效果。結(jié)論:SAL可以抑制hv KP菌株生物膜的形成但是對(duì)于已成熟生物膜的消除 作用較小