不動桿菌屬的耐藥性分析

1、不動桿菌屬的耐藥性分析    作者：任麗娟 作者單位：許昌市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南許昌 461000 【摘要】 目的 研究許昌地區(qū)不動桿菌屬的產(chǎn)酶情況及其耐藥性。方法 收集2009年19月臨床分離的74株不動桿菌屬細(xì)菌，雙紙片協(xié)同實(shí)驗(yàn)法檢測其超廣譜內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生情況，改良的Hodge試驗(yàn)法檢     作者：任麗娟    作者單位：許昌市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南許昌 461000   【摘要】  目的 研究許昌地區(qū)不動桿菌屬的產(chǎn)酶情況及其耐藥性。方法 收集2009

2、年19月臨床分離的74株不動桿菌屬細(xì)菌，雙紙片協(xié)同實(shí)驗(yàn)法檢測其超廣譜內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生情況，改良的Hodge試驗(yàn)法檢測其碳青霉烯酶的產(chǎn)生情況，并對這些細(xì)菌的耐藥情況進(jìn)行分析。結(jié)果 74株不動桿菌屬細(xì)菌中，11株產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶，2株產(chǎn)生碳?xì)涿赶┟福溆?2株非產(chǎn)酶菌對各種抗生素的耐藥率也較高。結(jié)論 不動桿菌屬細(xì)菌由于產(chǎn)酶及自身的耐藥特性，對抗生素的耐藥性較強(qiáng)，要重視該屬細(xì)菌抗生素的應(yīng)用。 【關(guān)鍵詞】  不動桿菌屬;超廣譜內(nèi)酰胺酶;耐藥性 Antibiotic Resistance of Acinetobacter Bacteria REN Lijuan (Xuchang Central

3、 Hospital，Xuchang 461000，China ) Abstract:Objective To study the acinetobacter bacteria generation circumstances in Xuchang Area and their antibiotics resistance. Methods To collect 74 strain Acinetobacter bacteria from January 2009 to September 2009, twopapercooperatetest determined which one gener

4、ated broad spectrum lactamase, Improved Hodgetest determined which one generated KPC, in addition, analyze the bacterial antibiotics resistance of those did not generate enzyme. Results In those 74 strain Acinetobacter bacteria,there were 11 strains that generated ESBLs,2 strains generated KPC, Thou

5、gh the rest 62 strains didnt generate enzymes, their antibiotics resistance was wide. Conclusion The antibiotics resistance of Acinetobacter bacteria is very strong because of generation of enzyme and their own character. we must attach importance to the bacteria so as to prevent their antibiotics r

6、esistance. Key words:Acinetobacter bacteria;extended spectrum lactamase;antibiotics resistance 不動桿菌屬細(xì)菌廣泛分布于自然界，是醫(yī)院常見的條件致病菌之一。近些年來隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，大量激素和高效廣譜抗菌藥物在臨床的廣泛使用，導(dǎo)致不動桿菌的分離率越來越高，特別是鮑曼不動桿菌，不但耐藥性強(qiáng)，且出現(xiàn)了一些菌株的廣泛耐藥，給臨床治療帶來了很大困難。為了更好的了解不動桿菌屬的院內(nèi)感染情況，作者針對我院2009年19月臨床分離的不動桿菌屬細(xì)菌進(jìn)行了全面分析，為臨床提供科學(xué)可靠的數(shù)據(jù)資料，更好地指導(dǎo)臨床用藥

7、。 1 材料和方法 1.1 菌株來源 臨床菌株各病區(qū)送檢的各種標(biāo)本，包括呼吸道標(biāo)本64例(86.5%)，分泌物標(biāo)本6例(8.1%)，胸水1例(1.35%)，膿液標(biāo)本1例(1.35%)，腹腔引流物1例(1.35%)，口腔刮取物1例(1.35%)。質(zhì)控菌株包括大腸埃希菌ATCC25922、ATCC25923，肺炎克雷伯菌ATCC700603(購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心);鮑曼不動桿菌ATCC19606(購自中國科學(xué)院微生物所)。 1.2 試劑和儀器 血平板購自鄭州蘭森生物技術(shù)有限公司，中國蘭瓊脂和MH瓊脂購自杭州天和微生物試劑有限公司，藥敏紙片包括頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸、美

8、羅培南均購自杭州天和微生物試劑有限公司，菌株鑒定和MIC藥敏測試采用珠海迪爾生物工程有限公司的相應(yīng)測試板。 1.3 菌種鑒定 所有菌株按常規(guī)方法分離，經(jīng)革蘭氏染色、氧化酶反應(yīng)、觸酶試驗(yàn)，將菌株做成0.5麥?zhǔn)蠁挝粦乙?，加入各對?yīng)測試板的小孔中，經(jīng)35孵育24 h，在其對應(yīng)軟件上判讀結(jié)果。 1.4 碳青霉烯酶檢測方法(改良Hodge法) 在MH平板上均勻涂布ATCC25923的大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)株，在平板中央放置一個(gè)10 g的美羅培南紙片，用接種環(huán)將待測菌株自紙片方向向外劃線，在其相對的一邊接種陰性對照菌，35孵育1824 h，如果大腸埃希菌向著美羅培南紙片方向生長，則碳青霉烯酶陽性。 1.5 超廣譜

9、內(nèi)酰胺酶檢測方法 將待測菌液稀釋成0.5麥?zhǔn)蠁挝唬瑢⒕壕鶆蛲坎荚贛H平板上，將頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸4個(gè)紙片貼在平板上，35孵育1824 h，若出現(xiàn)頭孢他啶/棒酸比頭孢他啶和或頭孢噻肟/棒酸比頭孢噻肟的抑菌圈直徑大5 mm，則該菌產(chǎn)超廣譜內(nèi)酰胺酶陽性，即ESBLs陽性。以大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603為標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株。 2 結(jié)果 74株不動桿菌屬細(xì)菌中，鮑曼不動桿菌53株，醋酸鈣不動桿菌6株，洛非不動桿菌11株，溶血不動桿菌4株，這些不同種的細(xì)菌的耐藥性差異較大，其中，耐藥性最為廣泛的是鮑曼不動桿菌，它除對黏菌素、碳?xì)涿赶╊?、頭孢哌酮

10、/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和美滿霉素5類藥物耐藥率較低外，對其他抗生素的耐藥性均超過50%，有8種藥物的耐藥率超過90%，對復(fù)方新諾明的耐藥率達(dá)到100%。另外，溶血不動桿菌雖然分離率較低，但它的耐藥性僅次于鮑曼不動桿菌，對多數(shù)抗生素的耐藥率較高。與之相比，醋酸鈣不動桿菌的耐藥率最低，其次是洛菲不動桿菌(見表1)。表1 不動桿菌屬不同菌種的耐藥率比較(%) 74株不動桿菌屬細(xì)菌中，有11株產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶，2株產(chǎn)生碳青霉烯酶，13株產(chǎn)酶菌中，11株超廣譜內(nèi)酰胺酶全部來自鮑曼不動桿菌，1株碳青霉烯酶來自鮑曼不動桿菌，另1株碳青霉烯酶來自溶血不動桿菌，產(chǎn)酶后細(xì)菌的耐藥性在原有基礎(chǔ)上又進(jìn)一步加強(qiáng)

11、，甚至有3株細(xì)菌出現(xiàn)了除黏菌素敏感外的廣泛耐藥。 3 討論 不動桿菌是一類無動力、專性需氧、非發(fā)酵、氧化酶陰性、硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性、革蘭氏染色陰性的球桿菌，臨床標(biāo)本中分離到的不動桿菌絕大多數(shù)是鮑曼不動桿菌，其他菌株引起的感染比較少見。據(jù)熊勁芝等報(bào)道1，不動桿菌屬細(xì)菌在臨床分離出的非發(fā)酵菌中居第2位，僅次于銅綠假單胞菌。我院不動桿菌屬的分離率在2009年19月為1.56%，在總的細(xì)菌分離率中排第4位，主要分布于呼吸道和各種分泌物標(biāo)本中，不動桿菌屬的分離率低于熊勁芝等報(bào)道的2.59%水平1，也低于張靜萍等報(bào)道的4.44%的水平2。分離的這些不動桿菌屬細(xì)菌有57株分離自ICU、CCU、EICU等重癥

12、監(jiān)護(hù)病區(qū)，占77%，說明在這些醫(yī)院感染的高?？剖乙訌?qiáng)院內(nèi)感染的控制，尤其加強(qiáng)對機(jī)械通氣管道的消毒處理，加強(qiáng)對介入性導(dǎo)管的留置時(shí)間的控制，盡最大能力改善病房空氣質(zhì)量。 不動桿菌屬細(xì)菌的耐藥性較強(qiáng)，對氨芐青霉素，一代、二代頭孢菌素，氯霉素和一代喹諾酮類抗菌藥物大多耐藥，一般情況下，對復(fù)方新諾明、哌拉西林/他唑巴坦、氟喹諾酮類敏感性較好，對碳青霉烯類敏感性也較好。但是近年來，不動桿菌對這些敏感性較好的藥物的耐藥性有上升趨勢，就本文而言，鮑曼不動桿菌不但沒有對復(fù)方新諾明表現(xiàn)出較好的敏感性，反而對它的耐藥率高達(dá)100%，屬內(nèi)總耐藥率也高達(dá)89.9%。另外，鮑曼不動桿菌對氟喹諾酮類的左氧氟沙星的耐藥率高

13、達(dá)83.0%。對氨基糖甙類的慶大霉素和阿米卡星耐藥率分別是93.9%和63.4%，這與鮑曼不動桿菌攜帶的氨基糖苷修飾酶的基因表達(dá)有關(guān)，該類基因常與含多種耐藥基因的基因盒插入到整合子上一起傳播。國外曾有文獻(xiàn)報(bào)道3，氨芐西林/舒巴坦治療鮑曼不動桿菌療效與亞胺培南相似。我院情況卻非常不同，鮑曼不動桿菌對氨芐西林/舒巴坦的耐藥率高達(dá)62.3%，而對亞胺培南和美羅培南保持了較低的4.1%和3.8%的耐藥率，這明顯低于彭敬紅等報(bào)道的13.5%4的水平。同時(shí)，在我院對不動桿菌屬的治療中，黏菌素一直保持了較好的療效，其耐藥率為0，遠(yuǎn)低于陸春雨等的報(bào)道5，這在很大程度上緩解了臨床的治療難度。 近年來的研究資料顯

14、示，不動桿菌屬的耐藥機(jī)制包括染色體基因突變、外膜孔蛋白改變、藥物主動外排系統(tǒng)和產(chǎn)生滅活酶等。Chau等報(bào)道的adeB基因表達(dá)增強(qiáng)可使鮑曼不動桿菌產(chǎn)生多藥耐藥5，adeB基因是Magnet等首次在鮑曼不動桿菌中檢測到的細(xì)菌主動外排泵基因6，近年來已成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)，我們有望通過越來越多的對細(xì)菌的研究，逐漸改善細(xì)菌的耐藥性，為臨床治療難治性感染找到出路。 【參考文獻(xiàn)】   1 熊勁芝，黃強(qiáng)，王紅衛(wèi)，等.鮑曼不動桿菌感染分布及耐藥性分析J.中國感染控制雜志，2009，8(2)：120-121.    2 張靜萍，朱婉，禇云卓，等.200120

15、06年鮑曼不動桿菌的耐藥性變遷分析J.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009，19(2)：217-219.    3Jellison TK, Mckinnon PS, Rybak MJ. Epidemiology, resistance, and outcomes of Acinetobacter baumannii bacterenia treated with imipinemcilastatin or ampicillinsulbactamJ. Pharmacotherapy,2001,21(2):142-148.   

16、0;4 彭敬紅，黃漢菊，婁國平，等.鮑曼不動桿菌感染病區(qū)分布及耐藥性分析J.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009，19(2)：220-221.    5 陸春雨，張正.鮑曼不動桿菌對碳青酶烯類抗生素耐藥機(jī)制的研究J.臨床檢驗(yàn)雜志，2006，24(4)：295-298.    6Chau SL,Chu YW,Houang ET.Novel resistancenodulation cell division efflux system AdeDE in Acinetobacter genomic DNA group 3J. Antimicrob Agents Chemothe