蜱論文蜱 雄蜱性腺 長角血蜱 森林革蜱 cDNA文庫 飽血因

1、蜱論文：兩種硬蜱雄性性腺功能因子的研究【中文摘要】交配是蜱類繁殖過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),誘發(fā)雌蜱發(fā)生一系列的生理變化,并最終產(chǎn)卵。雄蜱性腺分泌物在交配過程中發(fā)揮著十分重要的作用,一方面保護、活化精子,促進授精,刺激卵巢發(fā)育和卵黃發(fā)生,另一方面對雌蜱的生理行為等產(chǎn)生影響,如誘導(dǎo)雌蜱快速吸血,加速產(chǎn)卵等。本文的綜述部分在簡要描述雄蜱性腺形態(tài)結(jié)構(gòu)和分泌物生化特性基礎(chǔ)上,系統(tǒng)闡述了雄蜱性腺分泌物中各種功能因子的研究現(xiàn)狀,著重論述其在精子獲能、誘導(dǎo)雌蜱吸血、促進雌蜱卵巢發(fā)育和卵黃發(fā)生方面的進展,并對未來的研究提出了展望,以期為今后此領(lǐng)域研究開拓思路,促進防治工作的開展。本研究以河北省廣泛分布的兩種硬蜱長角血蜱

2、和森林革蜱為研究對象。利用體腔注射、酶聯(lián)免疫分析對飽血雄蜱性腺分泌物的功能活性進行了研究;利用cDNA文庫構(gòu)建、cDNA末端快速擴增、反轉(zhuǎn)錄PCR、實時定量PCR技術(shù)擴增得到飽血因子的全長序列并對其階段和組織表達進行了系統(tǒng)分析;利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對長角血蜱飽血雄蜱性腺蛋白質(zhì)組進行了分析。以上工作為進一步探索蜱類引發(fā)雌蜱交配效應(yīng)的功能物質(zhì)以及利用它們開發(fā)抗蜱疫苗奠定了基礎(chǔ)。為了進一步加深對蜱類飽血因子的了解,并為蜱類飽血因子序列保守性研究提供基礎(chǔ),同樣采.【英文摘要】Mating is an important prerequisite for tick reproduction,and

3、 initiates a cascade of physiological changes in female that eventually leads to oviposition. Male accessory gland (MAG) plays an important role during mating,which protects and activates the spermatozoa,promotes ovary development and vitellogenesis, exerts inductivity effects on female reproductive

4、 physiological activity,induces or accelerates rapid feeding,ovulation,oviposition and many other functions. The morphological features and the secreti.【關(guān)鍵詞】蜱 雄蜱性腺 長角血蜱 森林革蜱 cDNA文庫 飽血因子 LC-MS 生殖【英文關(guān)鍵詞】tick male gonad Haemaphysalis longicornis Dermacentor silvarum cDNA library engorgement factor LC-M

5、S reproduction【索購全文】聯(lián)系Q1：138113721 Q2：139938848【目錄】兩種硬蜱雄性性腺功能因子的研究摘要4-6Abstract6-8第一章 綜述12-201.1 引言121.2 雄蜱生殖腺形態(tài)結(jié)構(gòu)及其分泌物生化特性12-141.3 MAG 分泌物的功能因子14-18 與精子發(fā)育有關(guān)的功能因子14-15 促進雌蜱吸血的功能因子15-16 促進雌蜱卵巢發(fā)育和卵黃發(fā)生的功能因子16-17 MAG 的其他功能因子17-181.4 昆蟲雄性生殖腺功能因子18-191.5 存在的問題及展望19-20第二章 長角血蜱雄蜱性腺分泌物交配效應(yīng)研究20-312.1 引言202.2

6、材料與方法20-22 長角血蜱的采集與喂養(yǎng)20-21 MAG 粗提液的收集21 粗提液的生物活性測定21 不同劑量粗提液生物活性測定21 雙抗體夾心ELISA 法測定樣品中Vn 或Vg 含量21-22 數(shù)據(jù)分析222.3 實驗結(jié)果22-30 粗提液的生物活性測定22-23 不同劑量粗提液生物活性測定23-302.4 結(jié)果分析與討論30-31第三章 構(gòu)建兩種硬蜱生殖腺全長cDNA 文庫31-393.1 引言313.2 材料與方法31-33 實驗材料31-32 總RNA 提取32 mRNA 純化32 cDNA 文庫構(gòu)建32 連接轉(zhuǎn)化32 庫容量測定32-33 重組率測定333.3 實驗結(jié)果與分析3

7、3-38 總RNA 提取33-35 cDNA 文庫構(gòu)建35-36 庫容量及重組率的測定36-383.4 結(jié)果分析與討論38-39第四章 兩種硬蜱飽血因子的基因克隆39-534.1 引言39-404.2 材料與方法40-42 兩種硬蜱飽血因子完整編碼序列(coding sequence, CDS)克隆40-41 HlEF在各發(fā)育階段及雌蜱各組織表達研究（RT-PCR）41 HlEF在飽血雄蜱各組織研究（Real-time PCR）41-424.3 結(jié)果與分析42-52 HlEF和DsEF基因克隆42-48 EF組織表達性分析48-524.4 結(jié)果分析與討論52-53第五章 兩種硬蜱飽血雄蜱性腺cDNA 文庫隨機篩庫53-555.1 引言535.2 材料與方法535.3 結(jié)果與討論53-55第六章 長角血蜱飽血性腺總蛋白鑒定55-606.1 引言556.2 材料與方法55-56 實驗材料55 實驗方法55-566.3 實驗結(jié)果與分析56-6