氫溴酸加蘭他敏貼劑體外釋藥性和經(jīng)皮滲透性能研究

1、氫溴酸加蘭他敏貼劑體外釋藥性和經(jīng)皮滲透性能研究    A faithful friend is hard to find.                        作者：鄧偉杰，張春鳳，趙樹(shù)進(jìn)，羅佳波 One cannot be in two place at once.  【摘要】 

2、0;目的 研究氫溴酸加蘭他敏貼劑的體外釋放和經(jīng)皮滲透性能。方法 采用Franz擴(kuò)散池裝置和一階導(dǎo)數(shù)光譜法考察氫溴酸加蘭他敏貼劑的藥物釋放性能;采用Franz擴(kuò)散池裝置和高效液相色譜法考察氫溴酸加蘭他敏貼劑經(jīng)離體豬皮的滲透性能。結(jié)果 氫溴酸加蘭他敏貼劑(1.7 mg·cm-2)24 h累積釋放量均超過(guò)95%，釋放曲線符合Higuchi方程，釋放速率為(461.9±41.9) g·cm-2·h-1/2(n=4);貼劑24 h累積滲透量為(20.904±3.050) g&

3、#183;cm-2，滲透曲線符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，透皮速率為(1.270±0.229) g·cm-2·h-1，透皮時(shí)滯為(6.4±0.7) h (n=6)。結(jié)論 本研究制備的氫溴酸加蘭他敏貼劑具有良好的藥物釋放性能和一定程度的體外經(jīng)皮滲透性能()。 【關(guān)鍵詞】  氫溴酸加蘭他敏 貼劑 釋放度 經(jīng)皮滲透Abstract:Objective To study the release and transd

4、ermal permeation of the transdermal patch of galanthamine hydrobromide in vitro. Methods The release of the transdermal patch of galanthamine hydrobromide was determined by Franz&#

5、160;diffusion cells and firstderivative spectrophotometry. The permeation across porcine skin in vitro was studied by Franz diffusion cells and HPLC. Results The cumulative releases

6、0;of the patches in 24 h (1.7 mg/cm2 ) were all larger than 95%, the release curve was fitted with Higuchi equation, and the release rate was (461.9±41.9) 

7、g/(cm2·h1/2)(n=4). The cumulative permeation of the patches in 24 h was (20.904±3.050) g/cm2, and the permeation curve was fitted with zeroorder kinetic equation, the per

8、meation rate and the lag time were (1.270±0.229) g/(cm2·h) and (4±0.7) h (n=6), respectively. Conclusion The transdermal patch of galanthamine hydrobromide had good trans

9、dermal release and permeation profile in vitro.Key words:galanthamine hydrobromide; patches; release rate; transdermal permeationEvery man has his hobby-horse.  氫溴酸加蘭他敏(galanthamine hydrobromide)系一種競(jìng)爭(zhēng)性和可逆性的乙酰膽堿酯酶抑制劑，臨床上主要用于治療

10、脊髓灰質(zhì)炎、重癥肌無(wú)力、術(shù)后腸肌麻痹、青光眼和阿爾茨海默氏病(Alzheimers disease,AD)，也用作解箭毒藥和非去極化肌松藥的拮抗劑。氫溴酸加蘭他敏易透過(guò)血腦屏障，其抑制作用時(shí)間長(zhǎng)且具有選擇性，是目前治療輕、中度AD有效且耐受性良好的藥物?？诜犹m他敏的不良反應(yīng)為輕度至中度的胃腸道癥狀，如惡心、嘔吐、腹疼和腹瀉，且AD的治療需要長(zhǎng)期給藥，因此以加蘭他敏為活性成分的透皮治療系統(tǒng)(Transdermal Therapeutic System,TTS)提供了很好的給藥途徑。徐子猷等1根據(jù)氫溴酸加蘭他敏的理化性質(zhì)和藥理性質(zhì)探討其經(jīng)皮給藥的可能性，同時(shí)比較pH

11、值和幾種常用促透劑對(duì)氫溴酸加蘭他敏透皮吸收的影響。趙維娟等2研究加蘭他敏經(jīng)皮給藥制劑在臨床應(yīng)用的可行性，將其制成透皮吸收乳劑。氫溴酸加蘭他敏(商品名：Nivalin)的使用方法有離子導(dǎo)入法3：0.25%的氫溴酸加蘭他敏溶液在0.20 mA/cm2的電流下通過(guò)離子電泳作用透過(guò)皮膚到達(dá)皮下組織的神經(jīng)，以治療外周神經(jīng)系統(tǒng)疾病。美國(guó)專利US57004804和US59322385公開(kāi)了以加蘭他敏為活性成分的透皮治療系統(tǒng)，可用于治療酒精依賴和AD，以適應(yīng)其長(zhǎng)期用藥的特點(diǎn)(醫(yī)藥學(xué)/藥學(xué)論文 )。本文研究的對(duì)象為氫溴酸加蘭他敏貼劑6，該貼劑采用親水性高分子材料為基質(zhì)，克服了親脂性高分子材料作為壓敏膠

12、貯庫(kù)層需采用低極性有機(jī)溶劑的缺陷，有利于保護(hù)環(huán)境和工作人員健康。體外藥物釋放和經(jīng)皮滲透性能研究是經(jīng)皮給藥制劑藥學(xué)性能研究的重要內(nèi)容，因此本文對(duì)該貼劑的體外藥物釋放和經(jīng)皮滲透性能進(jìn)行了研究。Manners make the man.  1 材料與方法1.1 儀器1.2 試藥氫溴酸加蘭他敏對(duì)照品：宜昌市夜明珠天然植物制品有限公司，純度99.25%，批號(hào)20040901;甲醇、乙腈:色譜純，德國(guó)，Merck;其他試劑均為分析純，購(gòu)自國(guó)內(nèi)供應(yīng)商;氫溴酸加蘭他敏貼劑:自制，藥物含量為1.7 mg·cm-2;該貼劑由背襯層、藥庫(kù)層、壓敏膠層和防粘

13、層構(gòu)成，其中藥庫(kù)層由氫溴酸加蘭他敏、水溶性高分子材料基質(zhì)和增塑劑組成，壓敏膠層由氫溴酸加蘭他敏、壓敏膠和透皮促滲劑組成。Everybody's business is nobody's business.  1.3 離體皮膚制備將家豬(3月齡，體質(zhì)量約35 kg，購(gòu)于廣州市太和家禽批發(fā)市場(chǎng))背部區(qū)域的毛剔掉，剝離皮膚，去除皮下脂肪、組織和毛細(xì)血管。將處理好的皮膚剪成直徑為2.4 cm的圓形小塊并夾于鋁箔中，放入-20 的冰箱中備用。實(shí)驗(yàn)前將皮膚取出，于生理鹽水中解凍，用濾紙吸干后立即使用。1.4 藥物釋放試驗(yàn)將貼劑剪成

14、圓形，揭去保護(hù)層，把貼劑固定在改良Franz擴(kuò)散池(容積為7 mL，有效接觸面積為3.14 cm2)上、下兩室之間，釋放面朝下。接受室中以蒸餾水為接受液，接受液與貼劑密切接觸。擴(kuò)散池置于恒溫水浴循環(huán)箱中保持32 ，接受室中置磁力攪拌子，以250 r/min轉(zhuǎn)速不斷攪拌。在0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、24、36 h從接受室取樣2 mL，取樣后補(bǔ)充相等體積相等溫度的空白釋放介質(zhì)。測(cè)定樣品溶液濃度并按公式(1)計(jì)算累積釋放量(Qn,g·cm-2)。以累積釋放量Qn對(duì)時(shí)間(t，h)和時(shí)間的平方根(t1/2，h1/2

15、)分別進(jìn)行零級(jí)擬合和Higuchi擬合，擬合方程的斜率為釋放速率J(零級(jí)擬合時(shí)單位為g·cm-2·h-1;Higuchi擬合時(shí)單位為g·cm-2·h-1/2)。You never know what you can do till you.  Qn=CnV+n-1i=1CiVsS(1)式中Cn為第n個(gè)時(shí)間點(diǎn)的被測(cè)液質(zhì)量濃度(g/mL)，Ci為第i個(gè)時(shí)間點(diǎn)的被測(cè)液質(zhì)量濃度(g/mL)，Vs為取樣體積(mL)，V為溶出介質(zhì)體積(mL)，S為有效接觸面積(cm2)。1.5 經(jīng)皮滲透試驗(yàn)將皮膚置于改良Franz擴(kuò)散池(容積為7 mL

16、，有效接觸面積為3.14 cm2)杯口上，角質(zhì)層向上。揭去貼劑防粘保護(hù)層后將黏性面粘貼于皮膚角質(zhì)層上，蓋上供藥池。接受池中以體積分?jǐn)?shù)30%乙醇為接受液，接受液與皮膚真皮層密切接觸。擴(kuò)散池置于恒溫水浴循環(huán)箱中保持32 ，接受池中置磁力攪拌子，以250 r/min轉(zhuǎn)速不斷攪拌。在4、6、8、10、12、14、24、36 h從接受池取樣1 mL，取樣后補(bǔ)充相等體積相等溫度的空白釋放介質(zhì)。測(cè)定透皮接受液濃度并按公式(1)計(jì)算累積滲透量(Qn, g·cm-2)。以累積滲透量Qn對(duì)時(shí)間(t，h)進(jìn)行線性回歸，所得直線斜率為透皮速率J&#

17、160;(g·cm-2·h-1)，所得直線在時(shí)間軸上的截距為透皮時(shí)滯tlag(h)。1.6 樣品溶液濃度測(cè)定藥物釋放試驗(yàn)中樣品溶液濃度的測(cè)定采用一階導(dǎo)數(shù)光譜法6：以286 nm處波峰和294 nm處波谷間的振幅為指標(biāo)，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量。經(jīng)皮滲透試驗(yàn)中樣品溶液濃度的測(cè)定采用高效液相色譜法7：以峰面積為指標(biāo)用外標(biāo)法進(jìn)行定量;其中色譜條件為：色譜柱為Alltima Phenyl (250 mm×4.6 mm,5 m)，流動(dòng)相為乙腈磷酸鹽緩沖液(20 mmol/L磷酸二氫鉀水溶液

18、1 000 mL加三乙胺1.4 mL，用磷酸調(diào)pH至3.3)(體積比892)，流速為0.65 mL/min，柱溫為30 ，檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm，進(jìn)樣量為20 L。2 結(jié)果與討論論文既是探討問(wèn)題進(jìn)行科學(xué)研究的一種手段，又是描述科研成果進(jìn)行學(xué)術(shù)交流的一種工具.  2.1 樣品溶液濃度測(cè)定采用一階導(dǎo)數(shù)光譜法測(cè)定藥物釋放試驗(yàn)中樣品溶液濃度的方法簡(jiǎn)單、快捷和準(zhǔn)確;氫溴酸加蘭他敏濃度在13130 g·mL-1范圍內(nèi)線性良好(r=0.999 9，n=6);方法平均回收率為97.

19、23%，RSD為1.12%。經(jīng)皮滲透試驗(yàn)中樣品溶液濃度低(達(dá)到 ng·mL-1級(jí))而且樣品含有無(wú)法消除干擾吸收的雜質(zhì)，因此采用高效液相色譜法測(cè)定(圖1);結(jié)果表明該方法氫溴酸加蘭他敏進(jìn)樣量在4.524  904.8 ng范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好(Y=0.11X，r2=1.000，n=10)，氫溴酸加蘭他敏在48 h內(nèi)穩(wěn)定性好(RSD=0.72%，n=5)，方法重復(fù)性好(RSD=0.72%，n=5)，精密度高(RSD=0.72%，n=5)。He that runs fastest gets the ring.  2.2

20、60;藥物釋放性能釋放度是衡量經(jīng)皮給藥系統(tǒng)藥物釋放能力的主要參數(shù)。在經(jīng)皮給藥系統(tǒng)中，藥物首先從貯庫(kù)中釋放出來(lái)，到達(dá)皮膚表面，進(jìn)而經(jīng)皮滲透進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮作用。本文采用擴(kuò)散池法對(duì)氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑的釋放度進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明該貼劑(藥物含量為1.7 mg·cm-2)24 h的累積釋放量均超過(guò)95%;釋放曲線(圖2)顯示藥物在初始階段快速釋放，而在后階段釋放速率減少但相對(duì)穩(wěn)定;擬合結(jié)果(表1)表明，氫溴酸加蘭他敏貼劑的釋放曲線符合Higuchi方程，即藥物的釋放量與時(shí)間的平方根呈線性關(guān)系，釋放速率為(461.9±41.9) g·cm-2&

21、#183;h-1/2(n=4)。A man cannot whistle and drink at he same time.  2.3 經(jīng)皮滲透性能體外經(jīng)皮滲透特征是評(píng)價(jià)經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的重要指標(biāo)之一。本文采用擴(kuò)散池法對(duì)氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑經(jīng)離體豬皮的滲透性能進(jìn)行考察，結(jié)果表明該貼劑(藥物含量為1.7 mg·cm-2)24 h累積滲透量為(20.904±3.050) g·cm-2(圖3)，擬合結(jié)果(表2)表明滲透曲線符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，其透皮速率為(1.270±0.229) g·cm-

22、2·h-1，透皮時(shí)滯為(6.4±0.7) h(n=6)。2.4 不同透皮貼劑經(jīng)皮滲透性能比較本研究制備的氫溴酸加蘭他敏貼劑具有良好的藥物釋放性能和一定程度的經(jīng)皮滲透性能，但經(jīng)皮(豬皮)滲透性能欠佳，24 h累積滲透量?jī)H為21 g·cm-2，透皮速率僅為1.3 g·cm-2·h-1，且透皮時(shí)滯較長(zhǎng)為6 h。為比較不同透皮貼劑經(jīng)皮滲透性能，筆者曾以加蘭他敏游離堿和煙堿為藥物以相同配方分別制得透皮貼劑并進(jìn)行經(jīng)離體豬皮滲透實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明(表3)加蘭他敏游離堿的滲透速率和24 h累積滲

23、透量約為其鹽的1.7倍;加蘭他敏游離堿比其鹽有更好的滲透特性但滲透性能仍然不佳，其滲透速率和24 h累積滲透量?jī)H為煙堿的6%，透皮時(shí)滯延長(zhǎng)3.5 h。表2 氫溴酸加蘭他敏貼劑的滲透速率和透皮時(shí)滯表3 不同透皮貼劑藥物透過(guò)豬皮的滲透性能2.5 經(jīng)皮滲透試驗(yàn)中皮膚的選擇在經(jīng)皮滲透試驗(yàn)中，一般選用適當(dāng)?shù)膭?dòng)物皮膚模型進(jìn)行透皮研究，如大鼠、小鼠、家兔、蛇、豬、裸鼠等。裸鼠其皮膚無(wú)毛，能避免脫毛時(shí)對(duì)角質(zhì)層的損傷，其皮膚結(jié)構(gòu)也與人相似，為較理想的選擇，但其價(jià)格昂貴。大鼠、小鼠和家兔皮膚常用作實(shí)驗(yàn)材料，但制備離體皮膚時(shí)需脫毛，化學(xué)脫毛與電動(dòng)剃刀脫毛效果均不理想。豬皮的滲透性和人皮的滲透性接近，脫毛較容易，且后續(xù)該貼劑藥效學(xué)研究(另文報(bào)道)采用豬為試驗(yàn)動(dòng)物，故本實(shí)驗(yàn)采