丙二醇_月桂氮_酮_胰島素傳遞體體外透皮吸收的研究

1、科研簡報丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體體外透皮吸收的研究郭偉英,王佩琪,王曉紅,錦州121001)微孔濾膜除菌,得胰島素的傳遞體溶液。取1mL做透皮給藥實驗。2.3 丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體的制備按上述方法制備胰島素傳遞體,體積先稀釋到4mL,超聲處理后,按總體積5mL加入10%丙二醇,再分別加入不同量的月桂氮2.4 丙二醇/月桂氮察酮,最后再由緩沖液稀釋到5mL,取1mL做透皮實驗。酮 胰島素傳遞體的形態(tài)觀盧靜華(錦州醫(yī)學院藥學系,遼寧中圖分類號:R943 43 文獻標識碼:A 文章編號:1001-2494(2005)03-0231-02胰島素的透皮吸收效率是目前研究的主攻方向,而高效

2、的透皮吸收促滲劑系統(tǒng)是胰島素透皮吸收制劑的關鍵。本實驗篩選了多種促滲劑組成了復合促滲劑胰島素傳遞體系統(tǒng),確立體外最佳滲透系統(tǒng),獲得了較為滿意的效果。1 藥品與儀器昆明種小鼠(體重1822g,本校實驗動物中心);胰島素原料藥(28IU mg-1,江蘇萬邦生化醫(yī)藥股份有限公司,批號020602);大豆磷脂酰膽堿(上海金伴藥業(yè)有限公司,批號20020904);去氧膽酸鈉(上?；瘜W制劑供應站);其他試劑均為分析純。TP-3型智能透皮擴散儀(南京新聯(lián)電子設備有限公司);放射免疫計數(shù)器(西安核儀器廠FJ-2008 免疫計數(shù)器);微孔濾膜(0.45 m,大連依利特科學儀器有限公司);PHS-3C型酸度計(上

3、海偉業(yè)儀器廠);125I 胰島素放射免疫試劑盒(濰坊開發(fā)區(qū)三維生物工程有限公司,3V 20030110版)。JEM-1200EX透射電鏡(日本)。2 實驗方法2 1 胰島素放射免疫分析工作曲線的建立以B/B0% logC做標準曲線。B/B0%為不同濃度的胰島素標準品存在下125I標記胰島素 抗體復合物的放射計數(shù)占最大結(jié)合的I標記胰島素 抗體復合物的放射計數(shù)的百分比。C為胰島素標準品的濃度( U mL-1)。2.2 胰島素傳遞體的制備參照文獻報道的方法,稱取8mg胰島素,加入352mg大豆磷脂酰膽堿,48mg去氧膽酸鈉,0.4mL乙醇,用0.01mol L-1三乙醇胺 HCl緩沖液(pH=6 2

4、)稀釋到5mL。混懸液經(jīng)超聲波粉碎處理后用基金項目:遼寧省教育廳科研項目(9805211048)1253%磷鎢酸鈉,使用前用1mol L-1NaOH調(diào)pH=6.5左右,將其滴加到蠟板上,另將原濃度的樣品滴加到銅網(wǎng)正面,用濾紙吸去過多的樣品液,負染色10min,用濾紙吸去過多的染液,晾干,在透射電鏡下觀察并照相。2.5 丙二醇/月桂氮測定酮 胰島素傳遞體包封率的用粒徑為100300 m的Sephedex G50于蒸餾水中溶脹后填充為凝膠柱(25cm 0.8cm),在室溫下進行色譜,洗脫液為0.01mol L-1三乙醇胺 HCl緩沖液,取1.0mL丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體上柱,緩慢加入保持液

5、面平移,流速0.5mL min-1,每2.0mL收集一次,用放射免疫分析法測定游離胰島素的量。包封率=(W總-W游)/W總 100%。W總表示胰島素總量,W游表示游離胰島素量。2.6 皮膚制備取小鼠背部皮膚,除毛,剝離脂肪層,生理鹽水浸泡,洗凈,置-200C以下冷凍保存,備用。2.7 透皮給藥實驗方法剪取適當形狀大小的備用皮夾于直立式擴散池兩室間,面積為(2.5!0.2)cm2,接受池充滿生理鹽水,定時取樣時將其全部取出,并補充全量生理鹽水,放射免疫測濃度。樣品和對照均平行做6次。3 結(jié)果與討論3.1 丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體的形態(tài)酮 胰島素從電鏡照片可見,丙二醇/月桂氮傳遞體的形態(tài)為球

6、形,較為規(guī)整,粒徑基本在200nm以下,見圖1。同法觀察未加丙二醇和月桂氮酮的胰島素傳遞體。大部分也為球形或近球形,只是規(guī)整性稍差,有些粒徑大于200nm。見圖2。作者簡介:郭偉英,男,教授,研究生導師 Tel:(0416)4673196 E mail:wyinguo40期2005February,40 3加藥物的溶解度,提高藥物的經(jīng)皮滲透量,丙二醇單獨應用效果往往不佳,但如果與其他促進劑合用,則可在起到增加藥物及促滲劑溶解度的同時發(fā)揮協(xié)同作用。因此,本實驗在傳遞體的基礎上又嘗試加入了滲透促進劑月桂氮酮和丙二醇。由于高濃度的丙二醇可能對皮膚產(chǎn)生刺激和損害,同時,我們也發(fā)現(xiàn)高濃度丙二醇可使傳遞體

7、膜增加溶解性導致藥物圖1 丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體透射電鏡照片的滲漏,因此我們采用10%的丙二醇,改變月桂氮酮的濃度,結(jié)果表明,月桂氮酮在2%8%濃度下促滲作用均很強,超過10%作用下降。3.5 丙二醇,月桂氮酮 胰島素傳遞體穩(wěn)定性觀察固定丙二醇和月桂氮酮濃度分別為10%和6%下,按2 3#方法制備復合促滲劑 胰島素傳遞體,置于溫度10下,分別于當天,第1,2,3,4,5,7天進行透皮吸收實驗,測定滲透量。結(jié)果表明,3d內(nèi)8h累積滲透量都可達到8%9%,3d后滲透量Fig1 Transmissionelectronphotomicrographoftransfersulinsys tem

8、withAzoneand1,2propanediol圖2 胰島素傳遞體透射電鏡照片F(xiàn)ig2 Transmissionelectronphotomicrographoftransfersulinsys tem則明顯降低。這比傳統(tǒng)的胰島素傳遞體需當天配制當天使用,放置時間有所延長,可能是該復合促滲劑系統(tǒng)對傳遞體的穩(wěn)定性提供了一定的有利條件或促進作用。此外,有報道pH=6.5脂質(zhì)體最穩(wěn)定,本實驗采取的pH=6.2緩沖液也許對傳遞體的穩(wěn)定酮 胰島素傳性有所幫助。4 結(jié) 論丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體經(jīng)皮給藥系統(tǒng)可進一步提高胰島素傳遞體的體外透皮滲透效率,同時,傳遞體的穩(wěn)定性也有所提高。(收稿日期:2

9、003 12 16)3.2 丙二醇/月桂氮定結(jié)果酮 胰島素傳遞體包封率測實驗結(jié)果表明,丙二醇/月桂氮遞體的出峰體積為1420mL,游離胰島素的出峰體積為2642mL,游離胰島素柱回收率為(98.95!1.95)%,丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體的包封率為(29.25!2.35)%(n=5),包封率還有待于進一步提高,這主要是由于胰島素的親水性所致。3.3 胰島素傳遞體的透皮吸收加入胰島素傳遞體后,胰島素的透皮吸收大為增加,為不加傳遞體的11倍,累積經(jīng)皮滲透量(Q)達3%以上,給藥23h左右濃度可達最大,而后趨于平穩(wěn),作用時間較長,證明了傳遞體在胰島素經(jīng)皮轉(zhuǎn)運中的作用。3.4 丙二醇和月桂氮收的影響月桂氮酮對胰島素傳遞體透皮吸超濾法測定龍膽苦苷的血漿蛋白結(jié)合率王長虹,王崢濤*(上海中醫(yī)藥大學中藥研究所,上海中藥標準化研究中心,上海201203)中圖分類號:R917 文獻標識碼:A 文章編號:1001-2494(2005)03-0232-03胰島素傳遞體溶液加入了丙二醇和不同濃度的酮,累積經(jīng)皮滲透量Q。比不加促滲劑的胰島素傳遞體增加滲透量23倍。月桂氮酮作為吸收促進劑應用較為廣泛。丙二醇屬低級醇類,能溶脹和提取角質(zhì)層中的類脂,增基金項目:上海市科學技術發(fā)展基金(02DZ19142)作者簡介:王長虹