培養(yǎng)基的種類

1、培養(yǎng)基的種類繁多。因考慮的角度不同，可將培養(yǎng)基分成以下一些類型：（一）根據(jù)所培養(yǎng)微生物的種類作分類根據(jù)微生物的種類可分為：細菌、放線菌、酵母菌和霉菌培養(yǎng)基。常用的異養(yǎng)型細菌培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，常用的自養(yǎng)型細菌培養(yǎng)基是無機的合成培養(yǎng)基，常用的放線菌培養(yǎng)基為高氏一號合成培養(yǎng)基，常用的酵母菌培養(yǎng)基為麥芽汁培養(yǎng)基，常用的霉菌培養(yǎng)基為察氏合成培養(yǎng)基。（二）根據(jù)對培養(yǎng)基成分的了解程度作分類1. 天然培養(yǎng)基指一類利用動、植物或微生物體包括用其提取物制成的培養(yǎng)基，這是一類營養(yǎng)成分既復雜又豐富、難以說出其確切化學組成的培養(yǎng)基。例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。天然培養(yǎng)基的優(yōu)點是營養(yǎng)豐富、種類多樣、配制方便、價格低

2、廉；缺點是化學成分不清楚、不穩(wěn)定。因此，這類培養(yǎng)基只適用于一般實驗室中的菌種培養(yǎng)、發(fā)酵工業(yè)中生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)和某些發(fā)酵產(chǎn)物的生產(chǎn)等。常見的天然培養(yǎng)基成分有：麥芽汁、肉浸汁、魚粉、麩皮、玉米粉、花生餅粉、玉米漿及馬鈴薯等。實驗室中常用牛肉膏、蛋白胨及酵母膏等。2. 合成培養(yǎng)基又稱組合培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基，是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設計后用多種高純化學試劑配制成的培養(yǎng)基。例如高氏一號培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基的優(yōu)點是成分精確、重演性高；缺點是價格較貴，配制麻煩，且微生物生長比較一般。因此，通常僅適用于營養(yǎng)、代謝、生理、生化、遺傳、育種、菌種鑒定或生物測定等對定量要求較高的研究工作中。3. 半合

3、成培養(yǎng)基又稱半組合培養(yǎng)基，指一類主要以化學試劑配制，同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如培養(yǎng)真菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基等。嚴格地講，凡含有未經(jīng)特殊處理的瓊脂的任何合成培養(yǎng)基，實質上都是一種半合成培養(yǎng)基。半合成培養(yǎng)基特點是配制方便，成本低，微生物生長良好。發(fā)酵生產(chǎn)和實驗室中應用的大多數(shù)培養(yǎng)基都屬于半合成培養(yǎng)基。（三）根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)作分類1. 液體培養(yǎng)基呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。它廣泛用于微生物學實驗和生產(chǎn)，在實驗室中主要用于微生物的生理、代謝研究和獲取大量菌體，在發(fā)酵生產(chǎn)中絕大多數(shù)發(fā)酵都采用液體培養(yǎng)基。2. 固體培養(yǎng)基呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基都稱為固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基有加入凝固劑后制成

4、的；有直接用天然固體狀物質制成的，如培養(yǎng)真菌用的麩皮、大米、玉米粉和馬鈴薯塊培養(yǎng)基；還有在營養(yǎng)基質上覆上濾紙或濾膜等制成的，如用于分離纖維素分解菌的濾紙條培養(yǎng)基。常用的固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑（約2的瓊脂或 5 12的明膠），加熱至 100，然后再冷卻并凝固的培養(yǎng)基。常用的凝固劑有瓊脂、明膠和硅膠等。其中，瓊脂是最優(yōu)良的凝固劑?，F(xiàn)將瓊脂與明膠兩種凝固劑的特性列在表4-4 中。固體培養(yǎng)基在科學研究和生產(chǎn)實踐中具有很多用途，例如用于菌種分離、鑒定、菌落計數(shù)、檢測雜菌、育種、菌種保藏、抗生素等生物活性物質的效價測定及獲取真菌孢子等方面。在食用菌栽培和發(fā)酵工業(yè)中也常使用固體培養(yǎng)基。3. 半

5、固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基是指在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑（如0.2 0.5的瓊脂）而制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基有許多特殊的用途，如可以通過穿刺培養(yǎng)觀察細菌的運動能力，進行厭氧菌的培養(yǎng)及菌種保藏等。4. 脫水培養(yǎng)基又稱脫水商品培養(yǎng)基或預制干燥培養(yǎng)基，指含有除水以外的一切成分的商品培養(yǎng)基，使用時只要加入適量水分并加以滅菌即可，是一類既有成分精確又有使用方便等優(yōu)點的現(xiàn)代化培養(yǎng)基。(四 )根據(jù)培養(yǎng)基的功能作分類1. 選擇性培養(yǎng)基一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某些物理、化學因素的抗性而設計的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領域?；旌暇鷺又袛?shù)量很少的某種

6、微生物，如直接采用平板劃線或稀釋法進行分離，往往因為數(shù)量少而無法獲得。選擇性培養(yǎng)的方法主要有兩種，一是利用待分離的微生物對某種營養(yǎng)物的特殊需求而設計的，如：以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可用于分離纖維素分解菌；用石蠟油來富集分解石油的微生物；用較濃的糖液來富集酵母菌等；二是利用待分離的微生物對某些物理和化學因素具有抗性而設計的，如分離放線菌時，在培養(yǎng)基中加入數(shù)滴10的苯酚，可以抑制霉菌和細菌的生長；在分離酵母菌和霉菌的培養(yǎng)基中，添加青霉素、四環(huán)素和鏈霉素等抗生素可以抑制細菌和放線菌的生長；結晶紫可以抑制革蘭氏陽性菌，培養(yǎng)基中加入結晶紫后，能選擇性地培養(yǎng)G 菌； 7.5NaCl 可以抑制大多數(shù)細菌，

7、但不抑制葡萄球菌，從而選擇培養(yǎng)葡萄球菌；德巴利酵母屬中的許多種酵母菌和醬油中的酵母菌能耐高濃度 (18 20)的食鹽，而其他酵母菌只能耐受3 11濃度的食鹽，所以，在培養(yǎng)基中加入15 20濃度的食鹽，即構成耐食鹽酵母菌的選擇性培養(yǎng)基。2. 鑒別培養(yǎng)基一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應的指示劑，從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養(yǎng)基。最常見的鑒別培養(yǎng)基是伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基，即 EMB 培養(yǎng)基。它在飲用水、牛奶的大腸菌群數(shù)等細菌學檢查和在 E.coli 的遺傳學研究工作中有著重要的用途。EMB 培養(yǎng)基中的伊紅和美藍兩種苯胺染料可抑制G 細菌和一些難

8、培養(yǎng)的G 細菌。在低酸度下，這兩種染料會結合并形成沉淀，起著產(chǎn)酸指示劑的作用。因此，試樣中多種腸道細菌會在 EMB 培養(yǎng)基平板上產(chǎn)生易于用肉眼識別的多種特征性菌落，尤其是大腸桿菌，因其能強烈分解乳糖而產(chǎn)生大量混合酸，菌體表面帶H ，故可染上酸性染料伊紅，又因伊紅與美藍結合，故使菌落染上深紫色，且從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光，其他幾種產(chǎn)酸力弱的腸道菌的菌落也有相應的棕色。屬于鑒別培養(yǎng)基的還有：明膠培養(yǎng)基可以檢查微生物能否液化明膠；醋酸鉛培養(yǎng)基可用來檢查微生物能否產(chǎn)生 H2S 氣體等。選擇性培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的功能往往結合在同一種培養(yǎng)基中。例如上述 EMB 培養(yǎng)基既有鑒別不同腸道菌的作用，又有抑制 G 菌和選擇性培養(yǎng) G 菌的作用。3. 種子培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基是為了保證在生長中能獲得優(yōu)質孢子或營養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基。一般要求氮源、維生素豐富，原料要精。同時應盡量考慮各種營養(yǎng)成分的特性，使pH 在培養(yǎng)過程中能穩(wěn)定在適當?shù)姆秶鷥?nèi)，以有利菌種的正常生長和發(fā)育。有時，還需加入使菌種能適應發(fā)酵條件的基質。菌種的質量關系到發(fā)酵生產(chǎn)的成敗