苯那普利對(duì)胰島素抵抗影響的實(shí)驗(yàn)研究

1、    苯那普利對(duì)胰島素抵抗影響的實(shí)驗(yàn)研究        摘要目的：研究苯那普利對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠的胰島素抵抗(ISR)的影響。方法：選擇雄性SD大鼠飼以高蔗糖高鹽飼料4周后，用苯那普利(3 mg.kg-1.d-1，n=9;10 mg.kg-1.d-1，n=9)或安慰劑(n=10)治療4周。另一組飼以高蔗糖高鹽大鼠(SSFR)(n=9)開始即用苯那普利(10 mg.kg-1.d-1)治療4周。采用持續(xù)輸注葡萄糖(8 mg.kg-1.min-1)和胰島素(2.5 mu.kg-1.mi

2、n-1)的血糖平均值(SSPG)方法測定胰島素敏感性。觀察空腹血胰島素、血糖、甘油三酯、SSPG的變化。結(jié)果：SSFR大鼠4周時(shí)收縮壓明顯升高(148.4±18.8)mmHg：(125.5±13.2)mmHg，P0.05(1 mmHg=0.133 kPa)；SSPG明顯升高(10.80±2.39) mmol/L：(6.80±1.38) mmol/L,P0.05。表明大鼠產(chǎn)生高血壓和ISR。而同時(shí)用苯那普利治療組，血壓及SSPG無明顯升高。飼以高糖高鹽4周后用苯那普利3 mg.kg-1.d-1治療組和10 mg.kg-1.d-1治療組，SSPG由(11.2

3、0±2.32) mmol/L分別下降至(8.49±2.85) mmol/L(P0.05)和(7.45±1.50) mmol/L (P0.01)。 結(jié)論：苯那普利預(yù)防治療4周，大鼠未產(chǎn)生ISR，苯那普利治療能改善高糖高鹽飼養(yǎng)大鼠的ISR。關(guān)鍵詞胰島素抵抗高血壓苯那普利 An experimental study on the effect of benazeprilon insulin resistanceLu PinengXu Chengbin(Department of Medicine,Peoples Hospital,BeijingMedical Unive

4、rsity,Beijing,100044)AbstractObjective:To investigate the effects of angiotensin converting enzyme inhibitor-benazepril on insulin resistance hypertensive rat model high sucrose high salt fed rats(SSFR).Method:Male Sprapue-Darley rats fed on high sucrose and high salt diet (35% suscrose 4% salt by w

5、eight, SSFR) or standard chow for 4 weeks and treated with either benazepril (3 mg.kg-1.d-1,n=9; 10 mg.kg-1.d-1,n=9) or vehicle (n=10) for the later 4 weeks. Another SSFR group (n=9) preventively treated with benazepril for 4 weeks. Steady-state plasma glucose (SSPG) was measured, simultaneosly infu

6、sing insulin (2.5 mu.kg-1.min-1) and glucose (8 mg.kg-1.min-1) to determine insulin sensitivity of each group.Systolic blood pressure (SBP),serum trigliceride, glucose and insulin level were meassured. Result:SBP was higher in SSFR compared to control (148.4±18.8 mmHg vs 125.5±13.2 mmHg,P0

7、.05)，SSPG was also higher and decreased from control 11.20±2.32 mmol/L to 8.49±2.85 mmol/L(P0.05) in the 3 mg.kg-1.d-1 treated group and to 7.45±1.50 mmol/L (P0.01) in the 10 mg.kg-1.d-1 treated group after 4 weeks treatment , in the preventive group, SSPG was not higher than the cont

8、rol. Conclusion:High sucrose high salt induces ISR.Benazepril treatment improves ISR or may prevent ISR in the SSFR.Key wordsInsulin resistanceHypertensionBenazeprilSD大鼠飼以高蔗糖飼料可產(chǎn)生胰島素抵抗(ISR)1，2，同時(shí)增加食鹽攝入量可使大鼠血壓升高2。文獻(xiàn)報(bào)道3苯那普利可使自發(fā)性高血壓大鼠糖代謝改善，ISR減輕，但有關(guān)苯那普利對(duì)動(dòng)物ISR影響報(bào)道極少。筆者選擇苯那普利進(jìn)行研究，以了解苯那普利能否治療及預(yù)防ISR的產(chǎn)生。1材料

9、與方法1.1大鼠高血壓ISR模型的建立選取雄性SD大鼠，體重(150±23)g，由北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。自由進(jìn)食飲水，飼以高糖高鹽飼料(含35%蔗糖，25%淀粉及4%食鹽)；對(duì)照組大鼠飼以正常飼料(含55%淀粉，0.5%食鹽)，兩組飼料含蛋白質(zhì)9%，脂肪22%，其余成分相同。1.2動(dòng)物分組將大鼠隨機(jī)分成5組，A組(正常對(duì)照組，n=20)，飼以正常飼料，第4周(A1組，n=10)及第8周(A2組，n=10)分別測體重、收縮壓(SBP)、胰島素(INS)、空腹血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、血糖平均值(SSPG)、胰島素平均值(SSPI)。B組(n=20)飼以高糖高鹽飼料，也于第

10、4周(B1組，n=10)和第8周(B2組,n=10)進(jìn)行以上檢查，部分大鼠行血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)檢查。C組(n=9)飼料同B組，但開始即加苯那普利10 mg.kg-1.d-1，1次/d灌胃。D、E組(均n=9)飼料同B、C組，于第4周加苯那普利(D組3 mg.kg-1.d-1，E組10 mg.kg-1.d-1)，第8周進(jìn)行以上檢查。1.3檢測方法胰島素敏感性測定：用SSPG法。大鼠空腹12 h，次日晨予氯氨酮(100 mg/kg)麻醉，取鼠尾血1.5 ml，測GLU、INS、TG。切開左頸部皮膚，頸外靜脈穿刺，連續(xù)輸注葡萄糖(8 mg.kg-1.min-1)和INS(2.5 mu.kg-

11、1.min-1)3 h。后半小時(shí)間隔10 min取尾血1次，每次0.5 ml，共3次，測GLU、INS，以3次GLU平均值為SSPG值，3次INS平均值為SSPI。GLU、TG測定：當(dāng)天血液離心，取血清于日立7170生化儀進(jìn)行測定。INS測定：采用放射免疫分析法(藥盒由中國原子能科學(xué)研究院提供)，取血后離心，血清于-70貯存?zhèn)錅y，按說明書進(jìn)行。ACE測定：采用比色法，試劑盒由海軍總醫(yī)院提供，按說明書進(jìn)行測定，單位以u(píng)表示。血壓測定：在室溫25，大鼠安靜30 min后，38預(yù)熱5 min，采用血壓測量儀(中日友好醫(yī)院生產(chǎn)RBP-1型)于鼠尾進(jìn)行測定。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理各參數(shù)均以±s表示，

12、各組間參數(shù)采用方差分析。2結(jié)果2.1兩種飼料飼養(yǎng)4周時(shí)大鼠體重、SBP、空腹GLU、TG、INS、SSPG及SSPI的變化從表1所示，3組大鼠體重?zé)o明顯差異。B1組SBP、SSPG升高，有ISR，且TG也升高。C組SSPG較A組稍升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。表明4周的苯那普利預(yù)防，未產(chǎn)生ISR。同時(shí)，苯那普利可使高糖高鹽大鼠SBP不升高。2.2兩種飼料飼養(yǎng)8周時(shí)大鼠體重、SBP、空腹GLU、TG、INS、SSPG及SSPI的比較表1兩種飼料飼養(yǎng)4周時(shí)大鼠體重、SBP、GLU、TG、空腹INS、SSPG、SSPI的比較組別體重(g)SBP(mmHg)GLU(mmol/L)TG(mmol/

13、L)INS(g/ml)SSPG(mmol/L)SSPI(g/ml)A1308.0±21.4125.5±13.26.03±1.050.53±0.1526.97±8.716.6±1.3842.87±3.75B1290.0±27.5148.4±18.8*5.63±1.530.69±0.22*37.78±12.2*10.8±2.39*54.98±12.83C290.0±25.8130.5±16.74.76±0.910.73±

14、0.22*39.09±14.7*7.2±2.3060.21±13.211 mmHg=0.133 kPa。與A1組比較 *P0.05，與B1組比較P0.05 見表2。體重：B2、E組稍低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SBP：B2組明顯升高，D、E組較B2組明顯下降?？崭笹LU：各組無明顯差異。TG：B2、D、E組均較A2組高。INS和SSPG：B2組均較A2組明顯升高，表明B2組ISR存在；D、E組SSPG明顯較A2組下降，E組更明顯，而INS并無改變。表明苯那普利能改善大鼠ISR，苯那普利10 mg.kg-1.d-1組較3 mg.kg-1.d-1組治療效果明顯。但空腹INS并

15、不隨SSPG下降而下降。SSPI：B2、D、E組較A2組升高，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表2兩種飼料飼養(yǎng)8周時(shí)大鼠體重、SBP、空腹INS、TG、GLU、SSPG、SSPI的比較組別體重(g)SBP(mmHg)GLU(mmol/L)TG(mmol/L)INS(g/ml)SSPG(mmol/L)SSPI(g/ml)A2328.0±24.6128.5±10.25.90±1.120.67±0.2030.4±9.76.80±1.7646.0±16.1B2305.0±20.9146.5±12.4*5.89±1.16

16、0.75±0.23*39.8±8.6*11.20±2.32*55.7±17.6*D307.0±21.9135.8±13.35.25±1.471.01±0.39*52.0±13.2*8.49±2.8560.0±16.3*E328.0±25.3123.2±12.85.58±1.130.73±0.35*44.7±8.8*7.45±1.5057.9±20.7*與A2組比較*P0.05，*P0.01；與B2組比較P0.05，P

17、0.01 2.3正常飼料大鼠、高糖高鹽大鼠、用苯那普利3 mg.kg-1.d-1及10 mg.kg-1.d-1治療4周時(shí)大鼠血清ACE水平的比較結(jié)果以上各組大鼠血清ACE水平(均n=6)分別為(43.84±17.73)u、(40.67±15.68) u、(8.45±4.76) u及(1.13±1.89) u，采用苯那普利3 mg.kg-1.d-1及10 mg.kg-1.d-1治療大鼠血清ACE水平均明顯被抑制(P0.01)。3討論高蔗糖飲食可誘導(dǎo)SD大鼠產(chǎn)生ISR。其ISR的產(chǎn)生與攝入量及時(shí)間有關(guān)4。增加食鹽攝入量，高糖SD大鼠SBP升高2。我們的研究表

18、明，同時(shí)喂養(yǎng)高糖高鹽飲食，大鼠SBP及SSPG均升高，有ISR產(chǎn)生。文獻(xiàn)報(bào)道32%蔗糖飼料喂養(yǎng)4周可使SD大鼠SSPG升高至12.2 mmol/L左右，SSPI亦較對(duì)照組升高。我們的研究表明，應(yīng)用高糖高鹽(35%蔗糖，4%食鹽)大鼠SSPG升至(10.8±2.39) mmol/L，與文獻(xiàn)報(bào)道的稍低，可能與飼料成分中脂肪等含量不同有關(guān)。飲食中脂肪攝入量高也能誘發(fā)ISR。ISR的確切機(jī)制仍未明了。ACEI可使交感神經(jīng)系統(tǒng)活性下降，緩激肽增加，血流增加，因此可改善ISR。但可否預(yù)防ISR的產(chǎn)生，文獻(xiàn)未見報(bào)道。我們的研究表明，預(yù)防應(yīng)用4周的苯那普利(10 mg.kg-1.d-1)，高糖高鹽飲

19、食SD大鼠SSPG較對(duì)照組無明顯升高，可能苯那普利有預(yù)防高糖SD大鼠產(chǎn)生ISR的作用。但因4周的時(shí)間可能較短，是延遲還是防止ISR仍有待進(jìn)一步研究。Chow等3研究表明，用胰島素/葡萄糖耐量方法，苯那普利可以使自發(fā)性高血壓大鼠的血壓下降，葡萄糖利用增加。而血管緊張素受體抑制劑losartan并不能改善大鼠的葡萄糖代謝。我們用常用的胰島素敏感檢查方法SSPG法，也證實(shí)應(yīng)用苯那普利3 mg.kg-1.d-1和10 mg.kg-1.d-1可以使高糖高鹽SD大鼠胰島素敏感性提高，ISR下降。研究還證實(shí)，苯那普利在改善大鼠ISR的同時(shí)，升高的TG并不隨之下降，因此，苯那普利改善大鼠ISR的機(jī)制不是通過改變TG來實(shí)現(xiàn)。ACEI改善ISR的機(jī)制不明，有人認(rèn)為與血管緊張素受體有關(guān)，也有報(bào)道與緩激肽升高和鉀代謝有關(guān)。我們的結(jié)果顯示，高糖高鹽大鼠空腹INS升高，苯那普利能改善ISR，但I(xiàn)NS不隨之降低，與Chow等3觀察的結(jié)果相符。Wright等1研究觀察到，高糖大鼠SSPI較對(duì)照組升高。我們的結(jié)果與之相符，一般SSPI比較衡定，其原因不明。作者單位：北京醫(yī)科