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1、骨骨 髓髓 檢檢 查查 目的目的 1.掌握骨髓檢查的指針。掌握骨髓檢查的指針。 2.掌握骨髓細(xì)胞學(xué)的基掌握骨髓細(xì)胞學(xué)的基本知識(shí)。本知識(shí)。 3.掌握分析骨髓報(bào)告的掌握分析骨髓報(bào)告的方法。方法。 4.掌握常見(jiàn)的組織化學(xué)掌握常見(jiàn)的組織化學(xué)染色的臨染色的臨 床意義及常見(jiàn)病的骨床意義及常見(jiàn)病的骨髓象特點(diǎn)。髓象特點(diǎn)。 一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的臨床運(yùn)用一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的臨床運(yùn)用 (一骨髓檢查的適應(yīng)癥(一骨髓檢查的適應(yīng)癥 1.不明原因的發(fā)熱、骨痛、惡病質(zhì)。不明原因的發(fā)熱、骨痛、惡病質(zhì)。 2.不明原因的肝、脾、淋巴結(jié)腫大。不明原因的肝、脾、淋巴結(jié)腫大。 3.周?chē)谐霈F(xiàn)幼稚細(xì)胞,可疑細(xì)胞以及周?chē)谐霈F(xiàn)幼稚細(xì)胞,
2、可疑細(xì)胞以及血細(xì)胞的單項(xiàng)或多項(xiàng)原因不明的減少、血細(xì)胞的單項(xiàng)或多項(xiàng)原因不明的減少、增多時(shí)。增多時(shí)。 (二骨髓檢查的禁忌癥(二骨髓檢查的禁忌癥 有明顯出血傾向,特別是血友病患者禁有明顯出血傾向,特別是血友病患者禁忌進(jìn)行骨髓穿刺。忌進(jìn)行骨髓穿刺。 二、血細(xì)胞生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)二、血細(xì)胞生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn) (一血細(xì)胞的生成(一血細(xì)胞的生成 所有的血細(xì)胞均起源于全能干細(xì)胞所有的血細(xì)胞均起源于全能干細(xì)胞Totipotential Stem Cell、TSC),此),此細(xì)胞具有高度自我復(fù)制能力,可分為淋細(xì)胞具有高度自我復(fù)制能力,可分為淋巴系和髓系干細(xì)胞。巴系和髓系干細(xì)胞。 血細(xì)胞的發(fā)育是連續(xù)的過(guò)
3、程,需要血細(xì)胞的發(fā)育是連續(xù)的過(guò)程,需要造血微環(huán)境和造血生長(zhǎng)因子的支持。造血微環(huán)境和造血生長(zhǎng)因子的支持。造血干細(xì)胞存在骨髓、外周血、臍血、胎肝造血干細(xì)胞存在骨髓、外周血、臍血、胎肝 (二血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律(二血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律 1.細(xì)胞大小及形態(tài)細(xì)胞大小及形態(tài) 大?。河纱蟮叫?。大小:由大到小。2個(gè)例外:巨核細(xì)胞及早幼粒個(gè)例外:巨核細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞。細(xì)胞。 形狀:紅細(xì)胞始終圓形,粒細(xì)胞圓形或橢圓形,形狀:紅細(xì)胞始終圓形,粒細(xì)胞圓形或橢圓形,單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形,巨核細(xì)單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形,巨核細(xì)胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。 2.細(xì)胞核細(xì)胞核
4、大小:由大到小。巨核細(xì)胞除外。大?。河纱蟮叫 >藓思?xì)胞除外。 核形:各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。核形:各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。 核位置:紅系核居中,粒、單系核偏位,淋巴核位置:紅系核居中,粒、單系核偏位,淋巴細(xì)胞核一側(cè)著邊,僅一側(cè)有胞漿。細(xì)胞核一側(cè)著邊,僅一側(cè)有胞漿。 核染色質(zhì):顏色由淺到深,染色質(zhì)由核染色質(zhì):顏色由淺到深,染色質(zhì)由細(xì)致疏松到粗糙密集,最后緊縮成塊。細(xì)致疏松到粗糙密集,最后緊縮成塊。 核膜:不明顯到明顯。核膜:不明顯到明顯。 核仁:明晰、模糊、消逝。核仁:明晰、模糊、消逝。 3.細(xì)胞漿細(xì)胞漿 量:由少到多。量:由少到多。 顏色:粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到顏色:粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到淺紅
5、;淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色;淺紅;淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色;漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。 顆粒:從無(wú)到有,由非特異性到特異顆粒:從無(wú)到有,由非特異性到特異性。性。 4.胞核與胞漿之比:由大變小。胞核與胞漿之比:由大變小。 三、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查骨髓涂片檢查)三、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查骨髓涂片檢查) (一肉眼觀察涂片(一肉眼觀察涂片 觀察骨髓取材、制片情況。觀察骨髓取材、制片情況。 (二低倍鏡檢查(二低倍鏡檢查 1.骨髓涂片的取材、制片及染色是否滿(mǎn)意。骨髓涂片的取材、制片及染色是否滿(mǎn)意。 2.判斷骨髓增生程度判斷骨髓增生程度 部位:選擇涂片中段,細(xì)胞均勻的部分。部位:選擇涂片中段,細(xì)胞均
6、勻的部分。 判斷標(biāo)準(zhǔn):(見(jiàn)下頁(yè)表)判斷標(biāo)準(zhǔn):(見(jiàn)下頁(yè)表) 表5-2-1 骨髓增生程度分級(jí) 骨髓增生程度 成熟紅/有核細(xì)胞 有核細(xì)胞數(shù)/LP 增生極度活躍 1:1 600 增生明顯活躍 10:1 200600 增生活躍 20:1 20200 增生減低 50:1 1020 增生極度減低 300:1 10 3.計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞:多在片尾,計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞:多在片尾,計(jì)數(shù)。 4.注意有無(wú)特殊細(xì)胞。尾部及邊緣。注意有無(wú)特殊細(xì)胞。尾部及邊緣。 (三油鏡觀察(三油鏡觀察 1.有核細(xì)胞分類(lèi):通常計(jì)數(shù)有核細(xì)胞分類(lèi):通常計(jì)數(shù)200個(gè)。個(gè)。 2.計(jì)數(shù)粒:紅比值計(jì)數(shù)粒:紅比值M:E判斷臨床意義。判斷臨床意義。 (1正常
7、值正常值24:1 (2M:E正常正常 正常骨髓象;正常骨髓象; 粒、紅系以外的造血系統(tǒng)疾病如粒、紅系以外的造血系統(tǒng)疾病如ITP; 粒、紅系平行增多或減少。粒、紅系平行增多或減少。 (3M:E增高增高 粒系明顯增多;粒系明顯增多; 紅系明顯減少;紅系明顯減少; (4M:E減少減少 紅系增多紅系增多 粒系減少粒系減少 3.觀察細(xì)胞形態(tài)有無(wú)異常觀察細(xì)胞形態(tài)有無(wú)異常 4.觀察有無(wú)特殊細(xì)胞及寄生蟲(chóng)觀察有無(wú)特殊細(xì)胞及寄生蟲(chóng) (四結(jié)果分析(四結(jié)果分析 1.歸納骨髓檢查結(jié)果應(yīng)注意的問(wèn)題歸納骨髓檢查結(jié)果應(yīng)注意的問(wèn)題 (1骨髓增生程度。骨髓增生程度。 (2各系統(tǒng)之間的比例以及同一系統(tǒng)各各系統(tǒng)之間的比例以及同一系統(tǒng)
8、各階段的比例。階段的比例。 (3單個(gè)細(xì)胞形態(tài)有無(wú)異常。單個(gè)細(xì)胞形態(tài)有無(wú)異常。 (4有無(wú)正常骨髓片中不應(yīng)該存在的異有無(wú)正常骨髓片中不應(yīng)該存在的異常細(xì)胞和寄生蟲(chóng)。常細(xì)胞和寄生蟲(chóng)。 (5與骨髓細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的正常值比較。與骨髓細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的正常值比較。 2.正常骨髓象正常骨髓象 (見(jiàn)書(shū)(見(jiàn)書(shū)P280) 四、常用的細(xì)胞化學(xué)染色四、常用的細(xì)胞化學(xué)染色 細(xì)胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ),應(yīng)用細(xì)胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ),應(yīng)用特殊的染色方法,以觀察單個(gè)細(xì)胞內(nèi)在的生特殊的染色方法,以觀察單個(gè)細(xì)胞內(nèi)在的生化特征,有助于了解這些細(xì)胞的組成及病理化特征,有助于了解這些細(xì)胞的組成及病理生理改變,對(duì)于血液病特別是白血病的診斷
9、,生理改變,對(duì)于血液病特別是白血病的診斷,鑒別診斷有一定價(jià)值。鑒別診斷有一定價(jià)值。 過(guò)氧化物酶染色過(guò)氧化物酶染色 (peroxidase POX) (一試驗(yàn)原理(一試驗(yàn)原理 過(guò)氧化物酶POX存在于粒、單系細(xì)胞中,能分解試劑中底物的過(guò)氧化氫,產(chǎn)生氧,使聯(lián)苯胺氧化為聯(lián)苯胺藍(lán),后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成暗藍(lán)色的顆粒,定位于細(xì)胞漿中。 (二結(jié)果 1.陰性:細(xì)胞胞漿中無(wú)藍(lán)色顆粒 2.陽(yáng)性:細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)藍(lán)色顆粒者。 正常情況下,粒系細(xì)胞除早期原始粒細(xì)胞外以及各階段嗜酸性粒細(xì)胞均呈陽(yáng)性。 細(xì)胞越成熟,陽(yáng)性越強(qiáng)。細(xì)胞越成熟,陽(yáng)性越強(qiáng)。 單核細(xì)胞系列自幼單以下為弱陽(yáng)性。單核細(xì)胞系列自幼單以下為弱陽(yáng)性。 淋巴
10、細(xì)胞系列為陰性反應(yīng)。淋巴細(xì)胞系列為陰性反應(yīng)。 (三臨床意義(三臨床意義 本染色法主要用于急性白血病分型的鑒定:本染色法主要用于急性白血病分型的鑒定: 急粒為強(qiáng)陽(yáng)性。急粒為強(qiáng)陽(yáng)性。 急單為弱陽(yáng)性或陰性。急單為弱陽(yáng)性或陰性。 急淋為陰性。急淋為陰性。 中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色 (neutrophil alkaline phosphatase,NAP) (一)試驗(yàn)原理 NAP -甘油磷酸鈉 堿性條件 磷酸鈉 + 硝酸鈣、硝酸鈷、硫化胺 硫化鈷胞漿中的棕黑色顆粒) (二結(jié)果(二結(jié)果 1.胞漿中出現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽(yáng)性反胞漿中出現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽(yáng)性反應(yīng),反應(yīng)強(qiáng)度分為應(yīng),反應(yīng)強(qiáng)度分為5級(jí):級(jí):
11、“”陰性反應(yīng),胞漿呈淡紅色。陰性反應(yīng),胞漿呈淡紅色。 “+” 胞漿呈灰色,無(wú)顆?;蛴猩倭考?xì)小胞漿呈灰色,無(wú)顆粒或有少量細(xì)小 灰黑色顆粒?;液谏w粒。 “+”胞漿呈均勻的灰黑色或出現(xiàn)較粗胞漿呈均勻的灰黑色或出現(xiàn)較粗 的棕黑色顆粒。的棕黑色顆粒。 “+”胞漿中充滿(mǎn)棕黑色顆粒,密度較低。胞漿中充滿(mǎn)棕黑色顆粒,密度較低。 “+”胞漿中充滿(mǎn)粗大的棕黑色顆粒,致胞漿中充滿(mǎn)粗大的棕黑色顆粒,致 使全部胞漿呈深黑色,可掩蓋胞核。使全部胞漿呈深黑色,可掩蓋胞核。 2.積分法:計(jì)數(shù)積分法:計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞,個(gè)成熟中性粒細(xì)胞,記錄陽(yáng)性率,并按陽(yáng)性程度分級(jí),將其記錄陽(yáng)性率,并按陽(yáng)性程度分級(jí),將其百分率乘以級(jí)
12、數(shù),然后再相加,即為積百分率乘以級(jí)數(shù),然后再相加,即為積分。分。 NAP主要存在于成熟的中性粒細(xì)胞中。主要存在于成熟的中性粒細(xì)胞中。 (三參考值(三參考值 NAP 陽(yáng)性率陽(yáng)性率40% 積分積分80分分 (四臨床意義(四臨床意義 1.慢性粒細(xì)胞性白血病與類(lèi)白血病反應(yīng)的慢性粒細(xì)胞性白血病與類(lèi)白血病反應(yīng)的鑒別。鑒別。 2.急性白血病類(lèi)型的鑒別:急性白血病類(lèi)型的鑒別: 急粒急粒NAP明顯減低明顯減低 急淋急淋NAP增高增高 急單急單NAP正?;驕p低正常或減低 3.再障與再障與PNH的鑒別的鑒別 再障再障NAP增高增高 PNH的的NAP減低減低 4.感染性質(zhì)的區(qū)別感染性質(zhì)的區(qū)別 化膿性感染化膿性感染NA
13、P增高增高 病毒性感染病毒性感染NAP減低減低 五、常見(jiàn)血液病的血液學(xué)特點(diǎn)五、常見(jiàn)血液病的血液學(xué)特點(diǎn) (一貧血(一貧血 缺鐵性貧血缺鐵性貧血 iron deficiency anemia 1.血象:?jiǎn)我回氀〖?xì)胞低色素,中心血象:?jiǎn)我回氀?,小?xì)胞低色素,中心淺染區(qū)擴(kuò)大。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正淺染區(qū)擴(kuò)大。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正常。常。 2.骨髓象:增生明顯活躍,粒紅比減低,骨髓象:增生明顯活躍,粒紅比減低,紅系增生為主,細(xì)胞紅系增生為主,細(xì)胞“核老漿幼核老漿幼”,邊,邊緣裙邊狀。緣裙邊狀。 溶血性貧血溶血性貧血 hemolytic anemia 1.血象;單一貧血,白細(xì)胞、血血象;單一貧血,白
14、細(xì)胞、血小板反應(yīng)性增高。紅細(xì)胞大小不小板反應(yīng)性增高。紅細(xì)胞大小不均,易見(jiàn)大紅、有核紅細(xì)胞、染均,易見(jiàn)大紅、有核紅細(xì)胞、染色質(zhì)小體。網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯增多。色質(zhì)小體。網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯增多。 2.骨髓象:增生明顯活躍,粒紅骨髓象:增生明顯活躍,粒紅比減低或倒置,紅系增生顯著,比減低或倒置,紅系增生顯著,以中幼紅為主。以中幼紅為主。 再生障礙性貧血再生障礙性貧血 aplastic anemia 1.血象:全血細(xì)胞減少,網(wǎng)織紅血象:全血細(xì)胞減少,網(wǎng)織紅細(xì)胞比值或絕對(duì)值減低。細(xì)胞比值或絕對(duì)值減低。 2.骨髓象;增生減低,造血細(xì)胞骨髓象;增生減低,造血細(xì)胞系列粒系、紅系、巨核系減系列粒系、紅系、巨核系減少。非造
15、血細(xì)胞增多漿細(xì)胞、少。非造血細(xì)胞增多漿細(xì)胞、組織細(xì)胞等)組織細(xì)胞等) (二白血?。ǘ籽?急性白血病急性白血病 (acute leukemia) 急性淋巴細(xì)胞性白血病急性淋巴細(xì)胞性白血病 acute lymphocytic leukemia 血象:白細(xì)胞可增多、正常、減少,分類(lèi)以血象:白細(xì)胞可增多、正常、減少,分類(lèi)以原始、幼稚淋巴細(xì)胞為主,粒細(xì)胞減少。紅原始、幼稚淋巴細(xì)胞為主,粒細(xì)胞減少。紅細(xì)胞及血小板減少。細(xì)胞及血小板減少。 骨髓象:增生極度活躍,以淋巴細(xì)胞系列增骨髓象:增生極度活躍,以淋巴細(xì)胞系列增生為主,分類(lèi)以原始、幼稚細(xì)胞多,且出現(xiàn)生為主,分類(lèi)以原始、幼稚細(xì)胞多,且出現(xiàn)形態(tài)異常。粒細(xì)胞、紅系、巨核系受抑制。形態(tài)異常。粒細(xì)胞、紅系、巨核系受抑制。 急性非淋巴細(xì)胞性白血病急性非淋巴細(xì)胞性白血病 急性粒細(xì)胞性白血病急性粒細(xì)胞性白血病 acute myelocytic leukemia 血象:白細(xì)胞增高,也可正常、減低。分類(lèi)血象:白細(xì)胞增高,也可正常、減低。分類(lèi)以原始、幼稚為主,多見(jiàn)以原始、幼稚為主,多見(jiàn)Auer小體。紅細(xì)小體。紅細(xì)胞及血小板減少。胞及血小板減少。 骨髓象:增生極度活躍或明顯活躍,粒紅比骨髓象:增生極度活躍或明顯活躍,粒紅比增高,粒系過(guò)度增生,以原始、幼稚粒細(xì)胞增高,粒系過(guò)度增生,以原
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