藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中安全性項(xiàng)目的設(shè)定

1、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中安全性檢查項(xiàng)目的確定主要內(nèi)容主要內(nèi)容u 熱原檢查熱原檢查u 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查u 異常毒性檢查異常毒性檢查u 特異性毒性檢查特異性毒性檢查u 降壓物質(zhì)檢查降壓物質(zhì)檢查u 無菌檢查無菌檢查u 微生物限度檢查微生物限度檢查熱原檢查熱原檢查一、方法一、方法 系將一定劑量的供試品溶液系將一定劑量的供試品溶液, , 靜脈注射家兔體內(nèi)靜脈注射家兔體內(nèi), , 在在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)規(guī)定的時(shí)間內(nèi), , 觀察家兔體溫升高的情況觀察家兔體溫升高的情況, , 以判定供試品以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。 熱原檢查是一種限度試驗(yàn)，反映了熱原質(zhì)引起哺乳動(dòng)熱原檢查

2、是一種限度試驗(yàn)，反映了熱原質(zhì)引起哺乳動(dòng)物復(fù)雜的升溫反應(yīng)過程，具有物復(fù)雜的升溫反應(yīng)過程，具有直觀、代表性好的優(yōu)點(diǎn)，是直觀、代表性好的優(yōu)點(diǎn)，是一種成熟方法，各國(guó)藥典均有收載一種成熟方法，各國(guó)藥典均有收載。熱原檢查熱原檢查二、適用品種二、適用品種 主要用于生物制品、抗生素、生化藥品類注射劑及在主要用于生物制品、抗生素、生化藥品類注射劑及在生產(chǎn)過程中容易被微生物污染或適宜微生物繁殖化學(xué)藥品生產(chǎn)過程中容易被微生物污染或適宜微生物繁殖化學(xué)藥品的注射劑；的注射劑； 做靜脈注射的注射液，尤其是劑量較大的靜脈滴注藥，做靜脈注射的注射液，尤其是劑量較大的靜脈滴注藥，更要注意熱原檢查。更要注意熱原檢查。 某些抗生素

3、、抗腫瘤藥品、放射性藥品等影響家兔正某些抗生素、抗腫瘤藥品、放射性藥品等影響家兔正常體溫常體溫, , 因此不適宜采用熱原檢查法。因此不適宜采用熱原檢查法。 目前存在著細(xì)菌內(nèi)毒素檢查逐步替代熱原檢查的趨勢(shì)。目前存在著細(xì)菌內(nèi)毒素檢查逐步替代熱原檢查的趨勢(shì)。熱原檢查熱原檢查三、劑量限值的確定三、劑量限值的確定家兔美家兔美1Kg1Kg體重注射體積不得少于體重注射體積不得少于0.5ml0.5ml；注射給藥體積不超過注射給藥體積不超過10ml/kg10ml/kg；如果供試品溶液濃度太低，給藥體積需超過如果供試品溶液濃度太低，給藥體積需超過10ml/kg10ml/kg才才能保證制劑安全性的，一建議改用細(xì)菌內(nèi)

4、毒素檢查；能保證制劑安全性的，一建議改用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查；對(duì)大容量注射劑，應(yīng)考慮供試品溶液的等滲、對(duì)大容量注射劑，應(yīng)考慮供試品溶液的等滲、pHpH值等，值等，必要時(shí)需進(jìn)行調(diào)整。必要時(shí)需進(jìn)行調(diào)整。 熱原檢查熱原檢查四、結(jié)果判定四、結(jié)果判定如果如果3 3只家兔中，體溫升高均低于只家兔中，體溫升高均低于0.60.6，并且，并且3 3只家兔只家兔體溫升高總和低于體溫升高總和低于1.41.4。或在復(fù)試的或在復(fù)試的5 5只家兔中，體溫升高只家兔中，體溫升高0.60.6或或0.60.6以上的以上的家兔僅有一只，并且初試復(fù)試合并家兔僅有一只，并且初試復(fù)試合并8 8只家兔的體溫的總只家兔的體溫的總和為和為3.53

5、.5或或3.53.5以下，均認(rèn)為供試品的熱原檢查符以下，均認(rèn)為供試品的熱原檢查符合規(guī)定。合規(guī)定。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查一、方法：一、方法： 系利用鱟試劑來檢測(cè)或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)系利用鱟試劑來檢測(cè)或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。種方法。 在在GMPGMP條件下，無內(nèi)毒素即無熱原，控制內(nèi)毒素就是控制條件下，無內(nèi)毒素即無熱原，控制內(nèi)毒素就是控制熱原，這是用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法代替熱原檢查法的依據(jù)。熱原，這是用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法代替熱原檢查法的依據(jù)。 u兩種方法：凝膠法和光度測(cè)定法

6、兩種方法：凝膠法和光度測(cè)定法u凝膠法為凝膠法為限量限量測(cè)定方法，光度測(cè)定法為測(cè)定方法，光度測(cè)定法為定量定量測(cè)定方法測(cè)定方法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查u凝膠法分為：限量試驗(yàn)和半定量試驗(yàn)；凝膠法分為：限量試驗(yàn)和半定量試驗(yàn)； 光度測(cè)定法包括：動(dòng)態(tài)濁度法、終點(diǎn)濁度法、光度測(cè)定法包括：動(dòng)態(tài)濁度法、終點(diǎn)濁度法、 動(dòng)態(tài)顯色法、終點(diǎn)顯色法動(dòng)態(tài)顯色法、終點(diǎn)顯色法u兩種方法可任選一種進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測(cè)兩種方法可任選一種進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測(cè)u當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除有另有規(guī)定外，以凝膠法結(jié)當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除有另有規(guī)定外，以凝膠法結(jié)果為準(zhǔn)果為準(zhǔn)u標(biāo)準(zhǔn)品：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定、復(fù)核、仲裁標(biāo)定、復(fù)核、仲裁 工作

7、標(biāo)準(zhǔn)品工作標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)核、陽性對(duì)照復(fù)核、陽性對(duì)照細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查二、適用品種：二、適用品種： 制劑：靜脈注射、鞘內(nèi)注射制劑：靜脈注射、鞘內(nèi)注射 原料：無菌分裝原料原料：無菌分裝原料 靜脈注射用的抗生素類原料靜脈注射用的抗生素類原料 不可滅菌制劑的原料（如生化藥品、生物制品）不可滅菌制劑的原料（如生化藥品、生物制品） 制備分裝過程無法控制內(nèi)毒素的注射劑的原料制備分裝過程無法控制內(nèi)毒素的注射劑的原料細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查確定細(xì)菌內(nèi)毒素限值（確定細(xì)菌內(nèi)毒素限值（L）和最大有效稀釋）和最大有效稀釋倍數(shù)（倍數(shù)（MVD） L=K/M MVD=cL/生物制品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值 L=K/M L為供

8、試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值 K為人每千克體重每小時(shí)最大可 接受的內(nèi)毒素劑量以EU/(Kgh）表示，注射劑K=5EU/(Kgh），放射性藥品注射劑K=2.5EU/(Kgh），鞘內(nèi)注射劑K=0.25EU/(Kgh） M為人用每千克體重每小時(shí)的最大供試品劑量，以ml/(Kgh） mg/(Kgh）細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查u適用情況：適用情況： 當(dāng)進(jìn)行新藥的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)前，或無細(xì)菌內(nèi)當(dāng)進(jìn)行新藥的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)前，或無細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)的品種建立內(nèi)毒素檢查法時(shí)，須進(jìn)行干擾毒素檢查項(xiàng)的品種建立內(nèi)毒素檢查法時(shí)，須進(jìn)行干擾試驗(yàn)試驗(yàn); 當(dāng)鱟試劑、供試品的配方、生產(chǎn)工藝改變或試驗(yàn)環(huán)當(dāng)鱟試劑、供試品的配方、生產(chǎn)

9、工藝改變或試驗(yàn)環(huán)境中發(fā)生了任何有可能影響試驗(yàn)結(jié)果的變化時(shí)，須重境中發(fā)生了任何有可能影響試驗(yàn)結(jié)果的變化時(shí)，須重新進(jìn)行干擾試驗(yàn)。新進(jìn)行干擾試驗(yàn)。 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查u注意點(diǎn)：注意點(diǎn)：最大有效稀釋倍數(shù)是指供試品溶液被允許稀釋的最大倍數(shù)，它最大有效稀釋倍數(shù)是指供試品溶液被允許稀釋的最大倍數(shù)，它和具體選用的鱟試劑的靈敏度有關(guān)。和具體選用的鱟試劑的靈敏度有關(guān)。由于不同廠商生產(chǎn)的鱟試劑其生產(chǎn)工藝、配方、質(zhì)量參數(shù)等存由于不同廠商生產(chǎn)的鱟試劑其生產(chǎn)工藝、配方、質(zhì)量參數(shù)等存在一定的差異，鱟試劑其抗干擾能力存在差別，因此應(yīng)重視對(duì)在一定的差異，鱟試劑其抗干擾能力存在差別，因此應(yīng)重視對(duì)鱟試劑的選擇，或?qū)c試劑

10、靈敏度的考察。鱟試劑的選擇，或?qū)c試劑靈敏度的考察。 三、驗(yàn)證試驗(yàn)三、驗(yàn)證試驗(yàn) 至少三批樣品，按確定的限值和方法進(jìn)行試驗(yàn)。至少三批樣品，按確定的限值和方法進(jìn)行試驗(yàn)。異常毒性檢查異常毒性檢查一、方法一、方法 系將一定劑量的供試品溶液注入小鼠體內(nèi)或口服給藥系將一定劑量的供試品溶液注入小鼠體內(nèi)或口服給藥, , 在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)觀察小鼠出現(xiàn)的死亡情況在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)觀察小鼠出現(xiàn)的死亡情況, , 以判定供試品以判定供試品中是否符合規(guī)定的一種方法。中是否符合規(guī)定的一種方法。 異常毒性是檢查藥品在生產(chǎn)制造過程中外來引入的異異常毒性是檢查藥品在生產(chǎn)制造過程中外來引入的異物或藥物降解產(chǎn)生的不正常毒性反應(yīng)，主要與生產(chǎn)

11、工藝水物或藥物降解產(chǎn)生的不正常毒性反應(yīng)，主要與生產(chǎn)工藝水平有關(guān)，而不是檢查藥物本身毒性。平有關(guān)，而不是檢查藥物本身毒性。異常毒性檢查異常毒性檢查二、適用品種二、適用品種生化藥注射劑生化藥注射劑( (如肽、蛋白質(zhì)、酶及輔酶、多糖、脂質(zhì)如肽、蛋白質(zhì)、酶及輔酶、多糖、脂質(zhì)等等) )及抗生素類注射劑；及抗生素類注射劑；某些中藥注射劑；某些中藥注射劑；在藥品生產(chǎn)工藝進(jìn)行較大改變后，特別是改變提煉、在藥品生產(chǎn)工藝進(jìn)行較大改變后，特別是改變提煉、精制工藝時(shí)，需要在生產(chǎn)過程中追蹤檢查各工藝段的精制工藝時(shí)，需要在生產(chǎn)過程中追蹤檢查各工藝段的半成品及成品的毒性試驗(yàn)。半成品及成品的毒性試驗(yàn)。異常毒性檢查異常毒性檢查

12、三、劑量限值的確定三、劑量限值的確定首先測(cè)定樣品小鼠單次靜脈給藥的半數(shù)致死量（首先測(cè)定樣品小鼠單次靜脈給藥的半數(shù)致死量（LDLD5050）和最小致死量（和最小致死量（LDLD5 5），并了解其毒性反應(yīng)癥狀；），并了解其毒性反應(yīng)癥狀；異常毒性檢查劑量應(yīng)低于樣品正常毒性劑量（異常毒性檢查劑量應(yīng)低于樣品正常毒性劑量（LDLD5 5），），并應(yīng)高于人臨床最大用藥劑量；并應(yīng)高于人臨床最大用藥劑量；對(duì)于未測(cè)出對(duì)于未測(cè)出LDLD5050的注射液，以每只小鼠的注射液，以每只小鼠0.8ml0.8ml的劑量按的劑量按常規(guī)速度（常規(guī)速度（3-53-5秒）靜脈注射，仍未見死亡或毒性反應(yīng)，秒）靜脈注射，仍未見死亡或毒性

13、反應(yīng)，可以該劑量作為異常毒性檢查限值?？梢栽搫┝孔鳛楫惓６拘詸z查限值。 異常毒性檢查異常毒性檢查四、相關(guān)進(jìn)展四、相關(guān)進(jìn)展目前異常毒性檢查法僅中國(guó)藥典和英國(guó)藥典有收載；目前異常毒性檢查法僅中國(guó)藥典和英國(guó)藥典有收載；國(guó)外藥典中，對(duì)大多數(shù)生物提取的生化藥或由現(xiàn)代生國(guó)外藥典中，對(duì)大多數(shù)生物提取的生化藥或由現(xiàn)代生物技術(shù)得到的組份單一、結(jié)構(gòu)明確的產(chǎn)品物技術(shù)得到的組份單一、結(jié)構(gòu)明確的產(chǎn)品, ,一般不設(shè)定一般不設(shè)定異常毒性檢查項(xiàng)；異常毒性檢查項(xiàng)；WHO WHO 生物測(cè)定專家委員會(huì)在生物測(cè)定專家委員會(huì)在19971997年曾開會(huì)討論異常毒年曾開會(huì)討論異常毒性檢查的必要性問題，認(rèn)為其缺乏專屬性和科學(xué)性，性檢查的必要

14、性問題，認(rèn)為其缺乏專屬性和科學(xué)性，在實(shí)施在實(shí)施GMPGMP條件下生產(chǎn)的藥品應(yīng)當(dāng)取消該項(xiàng)檢查。條件下生產(chǎn)的藥品應(yīng)當(dāng)取消該項(xiàng)檢查。降壓物質(zhì)檢查降壓物質(zhì)檢查一、方法一、方法 系比較組胺對(duì)照品與供試品引起麻醉貓血壓下降的程系比較組胺對(duì)照品與供試品引起麻醉貓血壓下降的程 度，以判定供試品中所含降壓物質(zhì)的限度是否符合規(guī)定。度，以判定供試品中所含降壓物質(zhì)的限度是否符合規(guī)定。 降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低的雜降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低的雜 質(zhì)，包括組胺、類組胺或其他導(dǎo)致血壓降低的物質(zhì)。質(zhì)，包括組胺、類組胺或其他導(dǎo)致血壓降低的物質(zhì)。 降壓物質(zhì)檢查降壓物質(zhì)檢查二、適用品種二、適用品種

15、有可能產(chǎn)生類組織胺樣急性降血壓反應(yīng)的靜脈注射劑，有可能產(chǎn)生類組織胺樣急性降血壓反應(yīng)的靜脈注射劑，如生化藥注射劑如生化藥注射劑( (肽、蛋白質(zhì)、酶及輔酶、多糖、脂質(zhì)肽、蛋白質(zhì)、酶及輔酶、多糖、脂質(zhì)等等) )及抗生素注射劑；及抗生素注射劑；在用動(dòng)物臟器或組織為原料制備生化藥物的過程中，在用動(dòng)物臟器或組織為原料制備生化藥物的過程中，正常組織內(nèi)存在的組胺及部分氨基酸脫羧形成的組胺、正常組織內(nèi)存在的組胺及部分氨基酸脫羧形成的組胺、酪胺等胺類物質(zhì)，均為這類雜質(zhì)的來源。酪胺等胺類物質(zhì)，均為這類雜質(zhì)的來源。 降壓物質(zhì)檢查降壓物質(zhì)檢查三、動(dòng)物靈敏度檢查三、動(dòng)物靈敏度檢查 自靜脈依次注入上述對(duì)照品稀釋液，劑量按自

16、靜脈依次注入上述對(duì)照品稀釋液，劑量按動(dòng)物體重每動(dòng)物體重每1kg注射組胺注射組胺0.05ug、0.1ug及及0.15ug，重復(fù)，重復(fù)23次，如次，如0.1ug劑量所致的血?jiǎng)┝克碌难獕合陆抵稻恍∮趬合陆抵稻恍∮?.67kPa，同時(shí)相應(yīng)各劑量，同時(shí)相應(yīng)各劑量所致反應(yīng)的平均值有差別，可認(rèn)為該動(dòng)物的所致反應(yīng)的平均值有差別，可認(rèn)為該動(dòng)物的靈敏度符合規(guī)定。靈敏度符合規(guī)定。注： 組胺濃度為0.5ug/ml，則給藥量為0.1、0.2、0.3ml/kg降壓物質(zhì)檢查降壓物質(zhì)檢查 取對(duì)照品稀釋液按動(dòng)物體重每取對(duì)照品稀釋液按動(dòng)物體重每1kg注射組胺注射組胺0.1ug的劑量的劑量(ds)，供試品溶液按品種項(xiàng)下規(guī)，供

17、試品溶液按品種項(xiàng)下規(guī)定的劑量定的劑量(dT),照下列次序注射一組照下列次序注射一組4個(gè)劑量：個(gè)劑量：ds、dT、dT、ds。然后以第一與第三、第二與第四劑量所致的然后以第一與第三、第二與第四劑量所致的反應(yīng)分別比較；如反應(yīng)分別比較；如dT致的反應(yīng)值均不大于致的反應(yīng)值均不大于ds所致反應(yīng)值的一半，即認(rèn)為供試品的降壓物所致反應(yīng)值的一半，即認(rèn)為供試品的降壓物質(zhì)檢查符合規(guī)定。質(zhì)檢查符合規(guī)定。無菌檢查無菌檢查微生物限度檢查法非無菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑非無菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑及對(duì)患者健康潛在的危害而制訂的。及對(duì)患者健康潛在的危害而制訂的。（三）細(xì)菌與霉菌（三）細(xì)菌與霉菌口服給藥制劑口服給藥制劑細(xì)菌數(shù)每細(xì)菌數(shù)每1g不得過不得過l000cfu。每。每lml不得過不得過100cfu。霉菌和酵母菌數(shù)每霉菌和酵母菌數(shù)每lg或或lml不得過不得過100cfu。大腸埃希菌每大腸埃希菌每1g或或lml不得檢出不得檢出.活螨活螨 不得檢出不得檢出（一）致病菌 口服制劑每g或每ml不得檢出大腸埃希菌，含動(dòng)物藥及臟器的藥品同時(shí)不得檢出沙門菌 含中藥原生藥粉還不得檢出大腸菌群（大腸桿菌） 外用每g或每ml不得檢出銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）、金黃色葡萄球菌；梭菌；大腸埃希菌（眼、鼻、呼吸） 陰道、創(chuàng)傷、潰瘍用制