尼卡地平對戊四唑化學(xué)性點(diǎn)燃的拮抗作用

1、    尼卡地平對戊四唑化學(xué)性點(diǎn)燃的拮抗作用        摘要目的：研究二氫吡啶類鈣通道阻滯劑尼卡地平對大鼠戊四唑(PTZ)化學(xué)性點(diǎn)燃(kindling)的拮抗作用。 方法： 建立大鼠PTZ化學(xué)性點(diǎn)燃模型， 觀察尼卡地平對PTZ點(diǎn)燃發(fā)展進(jìn)程和點(diǎn)燃發(fā)作的影響。 結(jié)果： 尼卡地平2mg.kg-1ip明顯抑制PTZ點(diǎn)燃的發(fā)展進(jìn)程(P<0.001)； 220mg.kg-1ip顯著抑制PTZ點(diǎn)燃發(fā)作(P<0.01), 并呈量效關(guān)系； 尼卡地平20mg.kg-1ip對小鼠P

2、TZ驚厥有保護(hù)作用(P<0.01)。結(jié)論： 尼卡地平對PTZ化學(xué)性點(diǎn)燃的發(fā)展和發(fā)作有拮抗作用。關(guān)鍵詞尼卡地平戊四唑點(diǎn)燃模型鈣通道阻滯劑癲癇 Antagonism of nicardipine against pentylentetrazol kindling in ratsWang LeiZhang FangYue Wang（Department of pharamacology,Medical college,Qingdao University,Qingdao 266021）AbstractObjective： To study the antagonism of dihydropy

3、ridine calcium channel blocker nicardipine against pentylenetetrazol (PTZ) kindling. Methods: PTZ kindling model was established in rats, to investigate the effects of nicardipine on kindling development and kindled seizures.Results:Nicardipine 2mg.kg-1 ip significantly delayed the development of PT

4、Z kindling (P<0.001)，220mg.kg-1 ip dose-dependently inhibited the seizure severity in PTZ kindled rats (P<0.01).Nicardipine 20 mg.kg-1 ip had protective effects in ptz-induced seizures of mice.Conclusion: The results suggested that nicardipine had antagonism against PTZ-kindling in rats.Key wo

5、rdsnicardipinepentylenetetrazolkindling modelcalcium channel blockerepilepsy尼卡地平(nicardipine)是二氫吡啶類L-型鈣通道阻滯劑，是臨床常用于治療心、腦血管疾病的新一代鈣拮抗劑。Ca2+內(nèi)流與癲癇發(fā)作密切相關(guān)1。點(diǎn)燃(kindling)模型是研究人類慢性癲癇的理想模型2，包括腦核團(tuán)電刺激點(diǎn)燃和化學(xué)性點(diǎn)燃，前者與復(fù)雜性部分性發(fā)作相似3，后者與原發(fā)性癲癇全身性發(fā)作相似4。其它癲癇模型的研究已有報(bào)道5，但戊四唑化學(xué)性點(diǎn)燃模型的作用未見報(bào)道，本文為戊四唑點(diǎn)燃模型研究尼卡地平的抗癲癇作用。材料和方法一、材料：Wist

6、ar大鼠，雌性，體重190±10g；昆明種小鼠，體重22±2g，雌雄兼有，均由青島市藥品檢驗(yàn)所動物中心提供。尼卡地平(nicardipine)、戊四唑(pentylenetetrazole,PTZ)、Sigma公司產(chǎn)品；二甲基亞砜(dimethylsulphoxide,DMSO)、上海亨達(dá)精細(xì)化學(xué)品有限公司產(chǎn)品。二、方法1.大鼠PTZ化學(xué)性點(diǎn)燃模型的制備：用生理鹽水新鮮配制1.75%的PTZ溶液，隔日ip亞驚厥劑量的PTZ 35mg.kg-1，注射容積為2mg.kg-1，觀察每次ip后1h內(nèi)的行為變化。行為發(fā)作指標(biāo)按Ono法6分級，即0級：無反應(yīng)；級：點(diǎn)頭或頭部抽搐；級：全

7、身肌陣攣；級：頭部抽搐伴前肢陣攣；級：陣攣驚厥伴后肢站立；級：跌倒；級：全身強(qiáng)直-陣攣性驚厥。連續(xù)出現(xiàn)5次級或級以上者，即為點(diǎn)燃(kindled)大鼠。2.尼卡地平對PTZ點(diǎn)燃發(fā)展進(jìn)程的影響：健康大鼠隨機(jī)均分2組(n=8)，尼卡地平組2mg.kg-1ip，溶媒對照組ip等量DMSO，30min后ip PTZ35mg.kg-1，觀察1h內(nèi)Ono分級，記錄發(fā)作潛伏期和持續(xù)時(shí)間，計(jì)算Ono分級與給藥次數(shù)的關(guān)系。3.尼卡地平對PTZ點(diǎn)燃發(fā)作的作用：取點(diǎn)燃大鼠，分別ip尼卡地平2，5，7.5，10，20mg.kg-1(n=7)，30min后ip PTZ35mg.kg-1，注射容積均為2ml.kg-1，觀

8、察1h內(nèi)Ono分級，計(jì)算給藥前后級(全身強(qiáng)直-陣攣發(fā)作)發(fā)生百分率。實(shí)驗(yàn)前ip等量DMSO作自身對照。4.尼卡地平對小鼠戊四唑驚厥的作用：小鼠隨機(jī)均分4組(n=10)，分別ip尼卡地平2，10，20mg.kg-1或DMSO預(yù)處理。30min后sc驚厥劑量的PTZ85mg.kg-17。PTZ需新鮮溶于生理鹽水，注射容積均為10ml.kg-1。以出現(xiàn)陣攣性驚厥為指標(biāo)，記錄驚厥發(fā)生率、強(qiáng)直發(fā)生率及死亡率。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)均用x±s，組間均數(shù)的比較采用配對t檢驗(yàn)，記數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)。結(jié)果1.尼卡平對PTZ點(diǎn)燃發(fā)展進(jìn)程的抑制作用：對照組ip亞驚厥劑量PTZ，在25.0±3.0次后

9、即出現(xiàn)-級反應(yīng)，尼卡地平組則在ipPTZ44.6±2.6次后才達(dá)到-級，所需ipPTZ次數(shù)顯著高于對照組(n=8,P<0.001)，尼卡地平對點(diǎn)燃達(dá)Ono各級所需的ipPTZ次數(shù)見表1。表1尼卡地平對PTZ點(diǎn)燃Ono各分級的影響(x±s，n=8)-DMSO5.6±1.417.0±1.225.0±3.0尼卡地平8.6±2.6*25.4±4.0*44.6±2.6*與DMSO溶媒對照組比較*P<0.01,*P<0.0012.尼卡地平對PTZ點(diǎn)燃發(fā)作的拮抗作用：尼卡地平220mg.kg-1ip顯著降低點(diǎn)燃

10、發(fā)作的Ono分級，并呈量效關(guān)系(n=7，P<0.01)。在10，20mg.kg-1ip時(shí)，Ono級反應(yīng)百分率明顯下降(P<0.01)，見表2。 表2尼卡地平對大鼠PTZ點(diǎn)燃的作用(x±s,n=7)劑量(mg.kg-1)Ono分級級發(fā)作保護(hù)率(%)給藥前給藥后2.04.9±1.53.9±1.528.65.05.4±1.13.3±1.7*57.17.55.1±1.53.0±2.1*57.110.05.6±1.33.0±1.4*71.4*20.05.1±1.52.4±0.8*71

11、.4*與給藥前對照組比較*P<0.05,*P<0.013.尼卡地平對小鼠PTZ驚厥的抑制作用：尼卡地平10，20mg.kg-1ip，可分別顯著延長驚厥發(fā)作陣攣相和強(qiáng)直相的潛伏期(P<0.01)，見表3。 表3尼卡地平對小鼠PTZ驚厥的保護(hù)作用(x±s,n=10)劑量(mg.kg-1)陣攣潛伏期(min)強(qiáng)直潛伏期(min)DMSO13.0±6.918.1±12.3尼卡地平2.018.2±8.631.6±9.410.023.8±10.9*43.9±22.4*20.026.9±5.3*48.6

12、7;21.8*與DMSO溶媒對照組比較*P<0.05,*P<0.01,*P<0.001 討論化學(xué)性點(diǎn)燃是指反復(fù)給予亞驚厥劑量致驚劑，逐漸誘發(fā)的慢性癲癇發(fā)作8，PTZ作為工具藥常用于化學(xué)性點(diǎn)燃9。該點(diǎn)燃模型可外周給藥，在腦內(nèi)不形成致癇灶8，一旦形成即具永久性，是研究人類原發(fā)性癲癇全身性發(fā)作的理想模型4。Ca2+不僅是重要的細(xì)胞內(nèi)第二信使，還參與對多種遞質(zhì)合成與釋放的調(diào)控。已證明Ca2+內(nèi)流參與各種癲癇發(fā)作1。二氫吡啶類鈣通道阻滯劑尼卡地平易通過血腦屏障。本文在PTZ化學(xué)性點(diǎn)燃模型的研究證明：尼卡地平在低劑量可明顯抑制大鼠PTZ點(diǎn)燃發(fā)展的進(jìn)程，220mg.kg-1ip能顯著降低化

13、學(xué)性點(diǎn)燃的發(fā)作強(qiáng)度，降低級反應(yīng)的發(fā)生率，并呈量效關(guān)系；此外，對小鼠的PTZ急性驚厥也有保護(hù)作用。以上結(jié)果表明鈣通道滯劑對急慢性癲癇發(fā)作有明顯的拮抗作用。多數(shù)抗癲癇藥物的作用機(jī)制與Ca2+等離子通道和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA密切相關(guān)10。本文用尼卡地平在PTZ點(diǎn)燃模型和杏仁核點(diǎn)燃模型獲得相似的拮抗效果，并證明尼卡地平抗點(diǎn)燃效應(yīng)與其阻斷Ca2+內(nèi)流、升高腦內(nèi)GABA含量有關(guān)(待發(fā)表)，這與經(jīng)典的抗癲癇藥物苯妥英鈉、苯巴比妥即阻斷Ca2+通道又能提高GABA功能的新機(jī)理相吻合11。綜上所述，尼卡地平在多種癲癇模型都有拮抗作用，又兼有抗腦缺血、缺氧和增強(qiáng)記憶等現(xiàn)有的抗癲癇藥所不具有的優(yōu)點(diǎn)，這對開發(fā)鈣拮劑

14、治療某些癲癇的臨床新用途有重要意義。本題為山東省衛(wèi)生廳青年基金資助課題(1999CA2CBA1)作者單位：王蕾（266021青島大學(xué) 醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室）張芳（266021青島大學(xué) 醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室）岳旺（266021青島大學(xué) 醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室）參考文獻(xiàn)1，Meldrum B, Champman AG, et al. Research Progress in epilepsy. London: Pitman, 1983133138.2，Moshe SL, Ludring N, et al. Recnt Advances in Epilepsy London: Churchil Living

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