一、項(xiàng)目名稱-山東大學(xué)齊魯醫(yī)院

1、根據(jù)山東省科技廳 山東省科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)勵(lì)申報(bào)和推薦工作管理辦法 的規(guī)定，現(xiàn)將我院張群業(yè)作為第二完成人申報(bào)山東省科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng)項(xiàng)目的相關(guān)內(nèi)容予以公示（具體內(nèi)容如下）。一、項(xiàng)目名稱小腸耶爾森氏菌蛋白與促甲狀腺素受體交叉抗原及表位的研究二、申報(bào)獎(jiǎng)種山東省科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng)三、推薦單位山東省衛(wèi)生與計(jì)劃生育委員會(huì)四、項(xiàng)目簡介本項(xiàng)目屬于臨床醫(yī)學(xué)內(nèi)分泌與代謝疾病領(lǐng)域。Gravesdisease （GD）是典型的自身免疫疾病，近年發(fā)病率不斷增加，患者血清中的抗促甲狀腺激素受體抗體 (TRAb)是其主要病因和標(biāo)志物。 GD 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，人們發(fā)現(xiàn)小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 (YE) 與 GD關(guān)系密切，但其具體分子機(jī)制目前仍未

2、完全闡明， 即使幾篇 YE中包膜蛋白和脂蛋白與 GD的研究也未闡明哪一種或幾種包膜蛋白與 GD有關(guān)，TRAb識(shí)別的抗原表位是什么， 產(chǎn)生的相應(yīng) TRAb 有無功能等關(guān)鍵問題。 因此，明確 YE中被 TRAb識(shí)別的蛋白， 以及其上功能相關(guān)的抗原表位和其致 GD作用，對揭示 GD發(fā)病機(jī)制和開發(fā)新的治療方案等都有重要價(jià)值。因此，本項(xiàng)目在國家自然基金面上項(xiàng)目（ 81070625）及山東省自然基金面上項(xiàng)目（ 2009ZRB14207）的資助下，借助先進(jìn)的免疫蛋白組學(xué)技術(shù)，并結(jié)合蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)模擬和分析，對上述問題進(jìn)行了研究，為優(yōu)化 GD治療方案提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)， ，有助于深入理解免疫耐受形成和破壞的

3、機(jī)制。 取得了如下創(chuàng)新性成果：1、首次發(fā)現(xiàn)并證實(shí) YE中的 O蛋白，即 ompF蛋白能被 GD患者血清識(shí)別， 而O蛋白 190-197 位氨基酸殘基與 TSHR LDR 198-205氨基酸殘基高度相似，且都位于蛋白表面的突出位置， 具有顯著的抗原性，能被抗人 TSHR單抗識(shí)別，與 TSHR具有交叉免疫原性。2、首次通過細(xì)胞功能試驗(yàn)證實(shí)ompF蛋白 190-197 氨基酸序列的多克隆抗體能激活原代人甲狀腺濾泡細(xì)胞TSHR信號(hào)通路，具有TSH的效應(yīng)，即該抗體具有一定 TRAb活性。這為明確YE在 GD發(fā)病和 TRAb產(chǎn)生中的作用提供了直接證據(jù)。3、首次用 O蛋白 190-197 位氨基酸序列短肽

4、免疫兔子和小鼠，發(fā)現(xiàn)兩種動(dòng)物血清 TT4 和 TRAb濃度都有升高；但在與Ad-TSHR-289聯(lián)合免疫的小鼠中則升高最顯著，且高于單獨(dú)免疫的小鼠。 揭示該抗原表位雖不足以致病，但與其它致病因素有顯著協(xié)同效果，YE在 GD發(fā)病中發(fā)揮關(guān)鍵協(xié)同作用。本項(xiàng)目發(fā)表相關(guān) SCI 論文 5 篇，國內(nèi)核心期刊論文1 篇，SCI 總影響因子約25.1 分，目前他引總次數(shù)達(dá)34 次，培養(yǎng)碩士研究生2 人。項(xiàng)目核心成果在在內(nèi)分泌領(lǐng)域頂級(jí)雜志J Clin Endocrinol Metab發(fā)表后得到國際同行的廣泛認(rèn)可，被 Lancet （IF=39）和 Endocrine Reviews（IF=15 ）等國際著名雜志

5、多次正面引用，促進(jìn)了本學(xué)科的科學(xué)發(fā)展和進(jìn)步。根據(jù)本項(xiàng)目的成果， 我們在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院、 山東省立醫(yī)院和山東大學(xué)第二醫(yī)院等六所省內(nèi)著名醫(yī)院開展并優(yōu)化了 GD患者 YE感染情況的檢測，在經(jīng)典用藥基礎(chǔ)上結(jié)合抗 YE感染治療，有效緩解了病情，降低了復(fù)發(fā)；也減少了患者痛苦和寶貴醫(yī)療資源的消耗， 取得了良好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。 總之，本項(xiàng)目的研究成果首次從分子水平， 通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)為揭示 YE蛋白在 GD發(fā)病中的作用提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，為利用免疫蛋白組學(xué)和蛋白空間結(jié)構(gòu)模擬技術(shù)揭示感染在其它嚴(yán)重自身免疫疾病中的作用提供了很好的借鑒；對并且于優(yōu)化 GD病治療方案，減少復(fù)發(fā)，節(jié)約有限的寶貴醫(yī)療資源也有重要意義

6、。 該項(xiàng)目對照山東省科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)授獎(jiǎng)條件，推薦該項(xiàng)目申報(bào) 2015 年度山東省科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)。五、主要完成人情況表1、姓名：王哲排名： 1/5技術(shù)職稱：副主任醫(yī)師工作單位：山東省立醫(yī)院完成單位：山東省立醫(yī)院對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：本人是該課題的負(fù)責(zé)人，該完成人在本項(xiàng)目中發(fā)揮主導(dǎo)作用，項(xiàng)目發(fā)表的論文均體現(xiàn)其對主要科技創(chuàng)新中的每一項(xiàng)都做出了創(chuàng)造性貢獻(xiàn)。 該完成人在長期臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌與 GD發(fā)病和復(fù)發(fā)存在聯(lián)系，結(jié)合對相關(guān)文獻(xiàn)的閱讀和總結(jié)， 發(fā)現(xiàn)目前研究中仍然存在的諸多問題， 因此構(gòu)思了本項(xiàng)目， 確定利用先進(jìn)的免疫蛋白組技術(shù)進(jìn)行研究， 并設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)， 這一方案有效提高了外源性

7、交叉反應(yīng)抗原的鑒定效率， 保證了項(xiàng)目的順利進(jìn)行。 在獲得國家和省相關(guān)經(jīng)費(fèi)支持后， 該完成人還協(xié)調(diào)指導(dǎo)相關(guān)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和臨床研究， 解決研究中碰到的問題；并負(fù)責(zé)相關(guān)文章的撰寫和發(fā)表。2、姓名：張群業(yè)排名： 2/5技術(shù)職稱：教授工作單位：山東大學(xué)齊魯醫(yī)院完成單位：山東大學(xué)齊魯醫(yī)院對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：本人對項(xiàng)目“主要科技創(chuàng)新”中第2-4 項(xiàng)創(chuàng)新做出了創(chuàng)造性貢獻(xiàn)，在項(xiàng)目發(fā)表的第 1 篇核心 SCI 論文中均有體現(xiàn)，其在本項(xiàng)目的免疫蛋白組學(xué)技術(shù)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該完成人優(yōu)化改良的胰蛋白酶PVDF膜上酶解技術(shù)， 操作簡便、干擾少、靈敏度高，是本項(xiàng)目的核心技術(shù)之一， 為本項(xiàng)目的順利完成提供了重要保證。另外，

8、該完成人利用Discovery Studio軟件同源構(gòu)建了O蛋白的空間結(jié)構(gòu)，為確定 TRAb識(shí)別表位提供了重要依據(jù)，為本項(xiàng)目的技術(shù)創(chuàng)新做出了重要貢獻(xiàn)。3、姓名：周潔排名： 3/5技術(shù)職稱：主治醫(yī)師工作單位：山東省立醫(yī)院完成單位：山東省立醫(yī)院對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：本人在本項(xiàng)目收集不同GD患者以及正常志愿者外周血樣品，利用這些樣品與小腸耶爾森氏菌總蛋白進(jìn)行免疫印跡等試驗(yàn)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，為本項(xiàng)目的順利完成提供了重要保證。同時(shí)該完成人還負(fù)責(zé)收集和分析納入研究的GD患者的臨床資料，為本項(xiàng)目的臨床意義研究做出了重要貢獻(xiàn)。4、姓名：葛秀榮排名： 4/5技術(shù)職稱：副主任醫(yī)師工作單位：山東省立醫(yī)院完成單位：山東

9、省立醫(yī)院對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：本人在本項(xiàng)目中主要負(fù)責(zé)Graves 病及其它甲狀腺疾病患者外周血樣的收集工作，利用這些樣品與小腸耶爾森氏菌總蛋白進(jìn)行免疫印跡等試驗(yàn)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，為本項(xiàng)目的順利完成提供了重要保證。同時(shí)該完成人還負(fù)責(zé)收集和分析納入研究的 GD患者的臨床資料，為本項(xiàng)目的臨床意義研究做出了重要貢獻(xiàn)。5、姓名：魯婷排名： 5/5技術(shù)職稱：其它工作單位：山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院完成單位：山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院對本項(xiàng)目主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：本人在本項(xiàng)目中主要負(fù)責(zé)利用不同甲狀腺疾病患者血清與小腸耶爾森氏菌蛋白進(jìn)行 western blot實(shí)驗(yàn)，協(xié)助整理數(shù)據(jù)，撰寫部分技術(shù)路線和論文。六、主要完成單位情況1、山東省立醫(yī)院排名： 1山東省立醫(yī)院作為該項(xiàng)目負(fù)責(zé)人所在單位，對該項(xiàng)目立項(xiàng)申請、課題實(shí)施等提供了人力和物質(zhì)保障， 在項(xiàng)目進(jìn)行過程中組織協(xié)調(diào)各方面力量，保證課題順利完成；開展年度進(jìn)展