洋蔥總黃酮的提取及鑒別(一)

1、洋蔥總黃酮的提取及鑒別(一)    作者：黃鎖義 覃成箭 姚小敏 梁宇【關(guān)鍵詞】 洋蔥摘要：目的為充分利用洋蔥植物資源，避免資源的浪費(fèi)，探討洋蔥總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用純物理的工藝流程過(guò)程和紫外線分光光度法從洋蔥中提取黃酮類物質(zhì)，對(duì)所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果測(cè)得樣品中總黃酮的含量C=4.84%。回收率為99.4%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何化學(xué)變化及污染，是提取洋蔥黃酮類物質(zhì)的有效途徑。關(guān)鍵詞：洋蔥； 總黃酮； 提取； 鑒別Extraction and Distinguishing of the Total Fla

2、vone from OnionAbstract:ObjectiveIn order to make use of the resources of onion, avoid wasting, approach the extraction of total flavone of onion.MethodsUsing purely physical process flow and spectrophotometry to extract and check the flavone of onion.ResultsBy this method getting the contents of th

3、e total flavone of onion is 4.84% and the rate of recovery is 99.4% with high outpat and purity.ConclusionThis method is a pure physical process, and has not any chemical change and pollution. It is an ideal way to extract the flavone of onion.Key words:Onion; Total flavone; Extraction; Distinguish

4、洋蔥，又稱蔥頭，屬百合科蔥屬草本植物，食用可生可熟，可葷可素，歐美國(guó)家譽(yù)其為“菜中皇后”。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，洋蔥性平，味甘、辛；其功能：健胃、消食、平肝、潤(rùn)腸、利尿、發(fā)汗。臨床上表明常吃洋蔥對(duì)身體有很多益處：促進(jìn)鈉鹽排泄，有降血壓、降血脂、抗動(dòng)脈硬化，預(yù)防血栓，減少心梗和腦血栓概率；降低血糖含量，治療糖尿??；緩解哮喘，抑制胃癌、食道癌、結(jié)腸癌、乳腺癌；預(yù)防骨質(zhì)疏松；預(yù)防老年斑等。另外，洋蔥含抗菌、抗炎物質(zhì)，吃洋蔥可防治腸炎痢疾，降低膽固醇，防治冠心病、腦梗塞、心肌梗塞、動(dòng)脈硬化、腦卒中、高血壓、頭痛、肩周炎、便秘、更年期綜合征及肥胖等1 。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，洋蔥含揮發(fā)油、硫化物、類黃酮、甾體皂苷類

5、和前列腺素類等化學(xué)成分，有多種藥用價(jià)值2 ，為了充分利用，筆者對(duì)洋蔥中黃酮類成分進(jìn)行提取與鑒別?，F(xiàn)將過(guò)程介紹如下。1 材料與方法1.1 材料市售新鮮的洋蔥。試劑：95%乙醇；甲醇CP；三氯化鋁CP；鹽酸CP；氨水CP；正丁醇CP；冰乙酸CP；乙醇乙酯CP；蘆丁對(duì)照品（中國(guó)生物制品檢定所）。儀器設(shè)備：UV-755B紫外線分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠）；DZF-150小型真空恒溫干燥箱（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)易有限公司）；80-2離心沉淀器（上海分析器械廠）；ZF-I型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)。1.2 方法1.2.1 工藝流程洋蔥中總黃酮提取工藝流程。見(jiàn)圖1。圖1 洋蔥中總黃酮提取工藝流程1.

6、2.2 操作步驟取市售新鮮洋蔥，切碎，烘干，取50 g，置于大的燒杯中，加蒸餾水煮沸3 h。冷卻后進(jìn)行粗濾，對(duì)濾渣用上述方法進(jìn)行再浸取2次，將3次濾液合并，濾液用高速離心機(jī)分離 15 min，1 500 r/min。并進(jìn)行加熱濃縮（加熱溫度在85左右）。濃縮冷卻后加入等體積95%乙醇，放入冰箱內(nèi)2 h。用高速離心機(jī)進(jìn)行分離15 min，1 500 r/min。過(guò)濾得濾液濾渣，棄去濾渣。對(duì)濾液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮（加熱溫度在85左右）。待乙醇蒸發(fā)完后，將濃液置于真空干燥箱中干燥成疏松固體，粉碎得終產(chǎn)物。1.3 總黃酮的含量測(cè)定1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備對(duì)照品溶液的制備：精密稱取蘆丁對(duì)照品200 mg，置

7、于100 ml容量瓶中，加入95乙醇溶液并稀釋至刻度，搖勻。精密稱取10 ml置于100 ml容量瓶中，加入95%乙醇使成100 ml,搖勻即得（每1ml含有無(wú)水蘆丁0.2 mg）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密吸取對(duì)照品溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，12.0 ml分置于50 ml容量瓶中，各加95%乙醇12 ml，加10%硝酸鈉溶液2.0 ml，混勻，放置6 min，再加10%硝酸鈉溶液2.0 ml，混勻，放置6 min，加5%氫氧化鈉溶液20 ml，最后用95%乙醇稀釋至刻度，搖勻，以第1瓶為空白溶液，用UV-755B紫外分光光度計(jì)，在500 nm3上測(cè)定吸光度。結(jié)果見(jiàn)表1。表1 紫外線

8、分光光度計(jì)測(cè)定吸光度C/mg?ml-1 (略) 1.3.2 提取物含量的測(cè)定精密稱定提取物1.500 0 g，置索氏提取器中，加95%乙醇回流至無(wú)色（68 h），將提取液置于燒杯中，沸水浴加熱濃縮至干，再用熱水洗滌3次，將洗液移至分液漏斗中，并加無(wú)水正丁醇液萃取35次，10 ml/次。合并萃取液于燒杯中，沸水浴蒸干，再加95%乙醇使其溶解，并移于50 ml容量瓶中，再加95%乙醇至刻度，搖勻。精密量取10 ml于50 ml容量瓶中，加95%乙醇至刻度，搖勻，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備操作測(cè)定吸光度，A=0.353。1.3.3 顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，在可見(jiàn)光下呈灰黃色，在紫外光

9、下呈灰褐色并有熒光斑點(diǎn)。濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，將濾紙?jiān)诎彼戏窖?0 s，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。三氯化鋁反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加1三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見(jiàn)光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點(diǎn)。乙酸鎂反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點(diǎn)。鹽酸鎂粉反應(yīng)：取乙醇提取液1 ml于試管中加鎂粉，再加入濃的鹽酸數(shù)滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。1.3.4 紙層析取樣品溶液10 l點(diǎn)在濾紙上。用正丁醇醋酸水=415為展開(kāi)劑，上行展開(kāi)5 h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見(jiàn)熒光斑點(diǎn)。2 結(jié)果A

10、=0.353，根據(jù)回歸方程：A=1.243 3C-0.008 1，計(jì)算樣品中總黃酮的含C=4.84%?；厥諏?shí)驗(yàn)：精密稱提取物1.500 0g，加入蘆丁對(duì)照品1.000 0g，同前樣品測(cè)定方法操作測(cè)定吸光度，求出回收率為99.4%。3 討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)方法工藝簡(jiǎn)單，回收率為99.4%，利用本文所提供的提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。此方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何化學(xué)變化及污染，且該方法操作簡(jiǎn)單方便，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑。黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中最常見(jiàn)的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷

11、醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等。天然來(lái)源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過(guò)血腦屏障，能進(jìn)入脂肪組織，進(jìn)而體現(xiàn)出如下功能：消除疲勞、保護(hù)血管、防動(dòng)脈硬化、擴(kuò)張毛細(xì)血管、疏通微循環(huán)、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其他臟器細(xì)胞的功能。黃酮類化合物具有抗癌抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗氧化抗衰老、抗輻射等作用48。近年來(lái)，世界上掀起了植物藥開(kāi)發(fā)的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點(diǎn)倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目，洋蔥分布廣泛，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，洋蔥中含有較為豐富的黃酮。因此，洋蔥具有廣泛開(kāi)發(fā)和利用價(jià)值，值得綜合利用和加強(qiáng)資源開(kāi)發(fā)。參考文獻(xiàn)：1 張京春,陳可冀.洋蔥-全球性保健食品J.國(guó)外醫(yī)學(xué)?中醫(yī)中藥分冊(cè),2003,25(6):335.2 唐傳核.植物功能性的食品M.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2004:121.3 李冬菊.山楂葉總黃酮的提取及鑒別J.遼寧中醫(yī)雜志,2003,30(7):578.4 華光軍,郭 勇.黃酮類化合物藥理研究進(jìn)展J.廣東藥學(xué),1999,9(4):9.5 黃河勝,馬傳庚,陳志武.黃酮類化合物藥理作用研