生物技術(shù)與作物育種ppt課件

1、第十五章第十五章 生物技術(shù)與作物育種生物技術(shù)與作物育種第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)胞工程與作物育種細(xì)胞工程與作物育種植物細(xì)胞工程：是以植物組織植物細(xì)胞工程：是以植物組織和細(xì)胞培育技術(shù)為根底開展起和細(xì)胞培育技術(shù)為根底開展起來的一門科學(xué)。來的一門科學(xué)。它以細(xì)胞為單位，在體外它以細(xì)胞為單位，在體外in vitro條件下進(jìn)展培育、繁衍條件下進(jìn)展培育、繁衍或人為地使細(xì)胞某些生物學(xué)特或人為地使細(xì)胞某些生物學(xué)特性按人們的志愿消費某種物質(zhì)性按人們的志愿消費某種物質(zhì)過程。包括花藥培育、體細(xì)胞過程。包括花藥培育、體細(xì)胞變異挑選、幼胚培育、試管受變異挑選、幼胚培育、試管受精和原生質(zhì)體交融等精和原生質(zhì)體交融等實際根底：實際根底：

2、 細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性cell totipotency。指細(xì)胞所。指細(xì)胞所具有的構(gòu)成各種細(xì)胞類型的潛在才干。具有的構(gòu)成各種細(xì)胞類型的潛在才干。由于細(xì)胞核內(nèi)有堅持物種遺傳性所需求的全套遺由于細(xì)胞核內(nèi)有堅持物種遺傳性所需求的全套遺傳物質(zhì)所以高度分化的體細(xì)胞具有發(fā)育成一個生傳物質(zhì)所以高度分化的體細(xì)胞具有發(fā)育成一個生物體的才干。物體的才干。一、植物細(xì)胞和組織培育技術(shù)一、植物細(xì)胞和組織培育技術(shù)一培育基及其組成一培育基及其組成1、培育基的種類和特點、培育基的種類和特點1MS培育基培育基2B5培育基培育基3White培育基培育基4N6培育基培育基5KM-8p培育基培育基6SH培育基培育基2、培育基的成分

3、、培育基的成分無機鹽和水大量元素C.H.O.N.P.K.Ca.Mg.S.Cl微量元素Fe.Cu.Mo.Zn.Mn.Co.B.Na 水蒸餾水、雙蒸水或使用去離子水有機化合物 糖碳源和能源氨基酸類有機氮源維生素類 維生素b1(鹽酸硫胺素)、維生素b6(鹽酸砒哆醇)、生物素、煙酸、葉酸等生長調(diào)節(jié)物質(zhì) 生長素IAA、NAA、2,4-D、IBA細(xì)胞分裂素天然： 6-BA、KT（激動素，糠基酰嘌呤）人工：ZT（玉米素）、2-iP 赤霉素 GA成份不定物質(zhì) 椰乳、酵母提取物、番茄汁、香蕉泥瓊脂 從海藻中提取的一種高分子碳水化合物3、培育基的配置、培育基的配置(1)水和藥品水和藥品 水必需采用蒸餾水或無離子水

4、，藥品最好采水必需采用蒸餾水或無離子水，藥品最好采用分析純，至少是化學(xué)純藥品。用分析純，至少是化學(xué)純藥品。(2)母液的配置母液的配置 為方便培育基的制備，現(xiàn)將培育基的各種成為方便培育基的制備，現(xiàn)將培育基的各種成份分類配成濃縮的母液，正式配制時按規(guī)定用份分類配成濃縮的母液，正式配制時按規(guī)定用量稀釋混合。量稀釋混合。(3)制備培育基制備培育基 混合各成分母液混合各成分母液 熔化瓊脂熔化瓊脂(4)培育基的消毒培育基的消毒 主要有高溫高壓滅菌和過濾滅菌兩種方法。主要有高溫高壓滅菌和過濾滅菌兩種方法。調(diào)調(diào)pH值值分裝分裝滅菌滅菌放置備用放置備用攪拌混勻攪拌混勻 4、無菌操作方法、無菌操作方法1消毒劑消毒

5、劑 消毒劑消毒劑 運用濃度運用濃度% 消除難易消除難易 消毒時間消毒時間min 消毒效果消毒效果次氯酸鈉次氯酸鈉 2 易易 530 很好很好次氯酸鈣次氯酸鈣 910 易易 530 很好很好過氧化氫過氧化氫 1012 最易最易 515 好好溴水溴水 12 易易 210 很好很好硝酸銀硝酸銀 1 較難較難 530 好好氯化汞氯化汞 0.11 較難較難 210 最好最好抗生素抗生素 450mg/L 中中 3060 較好較好2無菌操作無菌操作3無菌培育無菌培育二、細(xì)胞和組織培育與作物育種二、細(xì)胞和組織培育與作物育種一體細(xì)胞克隆變異及其育種利用一體細(xì)胞克隆變異及其育種利用1、體細(xì)胞克隆變異的遺傳根底、體

6、細(xì)胞克隆變異的遺傳根底1染色體數(shù)目變異染色體數(shù)目變異2染色體構(gòu)造變異染色體構(gòu)造變異3點突變點突變2、突變體的挑選、突變體的挑選3、在作物改良上運用、在作物改良上運用1抗病抗病2抗除草劑抗除草劑3抗氨基酸或氨基酸類似物抗氨基酸或氨基酸類似物4耐鹽耐鹽5耐旱耐旱優(yōu)良種類優(yōu)良種類細(xì)胞培育細(xì)胞培育R0R0群體群體改良體細(xì)胞克隆改良體細(xì)胞克隆確定遺傳方式確定遺傳方式遺傳穩(wěn)定性測試遺傳穩(wěn)定性測試田間實驗田間實驗育種新品系育種新品系多點田間實驗多點田間實驗區(qū)域?qū)嶒瀰^(qū)域?qū)嶒灷^續(xù)田間實驗、種子富集繼續(xù)田間實驗、種子富集審定審定投入消費投入消費利用體細(xì)胞克隆變異技術(shù)道路利用體細(xì)胞克隆變異技術(shù)道路二單倍體細(xì)胞培育及

7、育種利用二單倍體細(xì)胞培育及育種利用1 1、單倍體細(xì)胞培育在遺傳和育種中的運用價值、單倍體細(xì)胞培育在遺傳和育種中的運用價值1 1后代的快速純合后代的快速純合2 2提高選擇效率提高選擇效率3 3排除雜種優(yōu)勢對后代選擇干擾排除雜種優(yōu)勢對后代選擇干擾4 4遺傳研討的良好實驗資料體系遺傳研討的良好實驗資料體系5 5突變體的挑選突變體的挑選 母本母本 X 父本父本F1F2品系比較實驗品系比較實驗區(qū)域?qū)嶒瀰^(qū)域?qū)嶒灮ㄋ幣嗷ㄋ幣嘤ㄋ幣嗷ㄋ幣嘤颖都颖哆x擇鑒定選擇鑒定雜交育種與單倍體育種周期比較雜交育種與單倍體育種周期比較2、離體培育條件下的小孢子發(fā)育、離體培育條件下的小孢子發(fā)育1營養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑營養(yǎng)細(xì)胞發(fā)

8、育途徑2生殖細(xì)胞發(fā)育途徑生殖細(xì)胞發(fā)育途徑3營養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞并進(jìn)發(fā)育途徑營養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞并進(jìn)發(fā)育途徑4花粉均等發(fā)育途徑花粉均等發(fā)育途徑3、影響花藥培育的要素、影響花藥培育的要素1供體植株的生長條件供體植株的生長條件2供體植株的年齡供體植株的年齡3花粉發(fā)育時期花粉發(fā)育時期4花蕾和花藥處置花蕾和花藥處置5培育基培育基6培育條件培育條件4、單倍體細(xì)胞培育與植物育種、單倍體細(xì)胞培育與植物育種A種類種類XB種類種類F1雜種雜種單倍體培育單倍體培育重組純合體重組純合體重組了重組了A和和B種類優(yōu)點的純系種類優(yōu)點的純系遺傳穩(wěn)定性測試遺傳穩(wěn)定性測試新品系新品系種類種類親本親本推行利用推行利用雜種優(yōu)勢利用雜種優(yōu)

9、勢利用田間測試田間測試自交，田間測試自交，田間測試確定遺傳根底確定遺傳根底雜交和分別測試雜交和分別測試選擇選擇染色體加倍染色體加倍小孢子培育或花藥培育小孢子培育或花藥培育三、植物原生質(zhì)體培育和體細(xì)胞雜交三、植物原生質(zhì)體培育和體細(xì)胞雜交植物原生質(zhì)體：指用特殊方法脫去細(xì)胞壁的、裸植物原生質(zhì)體：指用特殊方法脫去細(xì)胞壁的、裸露的、有生活力的原生質(zhì)團。露的、有生活力的原生質(zhì)團。一原生質(zhì)體的分別一原生質(zhì)體的分別原那么：保證原生質(zhì)體不受損傷及不損害它的再生才原那么：保證原生質(zhì)體不受損傷及不損害它的再生才干，先決條件要有一個適宜浸透壓。干，先決條件要有一個適宜浸透壓。1、分別方法、分別方法1機械法機械法2酶法

10、酶法n2、影響原生質(zhì)體分別要素、影響原生質(zhì)體分別要素n1資料來源資料來源n2浸透壓浸透壓n3酶酶n4分別培育基分別培育基n5培育條件培育條件n6組織前處置組織前處置n3、原生質(zhì)體的搜集、純化和活力測定、原生質(zhì)體的搜集、純化和活力測定n二原生質(zhì)體培育二原生質(zhì)體培育n三細(xì)胞交融體細(xì)胞雜交三細(xì)胞交融體細(xì)胞雜交n1、交融方法、交融方法n1NaNO3處置誘發(fā)交融處置誘發(fā)交融n2高高pH-高濃度鈣離子處置高濃度鈣離子處置n3PEG處置處置n4電交融電交融n2、交融方式、交融方式n3、雜種細(xì)胞挑選、雜種細(xì)胞挑選n1形狀互補形狀互補n2遺傳互補遺傳互補n3代謝互補代謝互補n4生長互補生長互補n4、雜種鑒定、雜

11、種鑒定n5、細(xì)胞交融與作物育種、細(xì)胞交融與作物育種第二節(jié)第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因技術(shù)與作物育種轉(zhuǎn)基因技術(shù)與作物育種l作物轉(zhuǎn)基因育種：根據(jù)育種目的，從供作物轉(zhuǎn)基因育種：根據(jù)育種目的，從供體生物中分別目的基因，經(jīng)體生物中分別目的基因，經(jīng)DNADNA重組與重組與遺傳轉(zhuǎn)化或直接運載進(jìn)入受體作物，經(jīng)遺傳轉(zhuǎn)化或直接運載進(jìn)入受體作物，經(jīng)過挑選獲得穩(wěn)定表達(dá)的遺傳工程體，在過挑選獲得穩(wěn)定表達(dá)的遺傳工程體，在經(jīng)過田間實驗與大田選擇育成轉(zhuǎn)基因新經(jīng)過田間實驗與大田選擇育成轉(zhuǎn)基因新種類或種質(zhì)資源。種類或種質(zhì)資源。l常規(guī)育種技術(shù)相比，轉(zhuǎn)基因育種具有很常規(guī)育種技術(shù)相比，轉(zhuǎn)基因育種具有很大優(yōu)勢：大優(yōu)勢：l 1.可以利用的基因資源大大拓

12、寬?？梢岳玫幕蛸Y源大大拓寬。l 2.為培育優(yōu)良種類提供了嶄新的育種為培育優(yōu)良種類提供了嶄新的育種途徑。途徑。l 3.可以對植物的目的性狀進(jìn)展定向變可以對植物的目的性狀進(jìn)展定向變異和定向選擇。異和定向選擇。l 4.可以大大提高選擇效率，加速育種可以大大提高選擇效率，加速育種進(jìn)程。進(jìn)程。 n一作物的轉(zhuǎn)基因技術(shù)一作物的轉(zhuǎn)基因技術(shù)n1、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的開展現(xiàn)狀、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的開展現(xiàn)狀n1國際轉(zhuǎn)基因植物研討與現(xiàn)狀國際轉(zhuǎn)基因植物研討與現(xiàn)狀作物 1996年 1997年 1997年/1996年 大豆玉米煙草棉花油菜合計 50301008012280 5103201601401201250 10.210.71.6

13、1.8104.5 全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積比較全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積比較 單位：萬公頃單位：萬公頃2我國轉(zhuǎn)基因作物研討與利用概略我國轉(zhuǎn)基因作物研討與利用概略轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉對棉鈴蟲的抗性表現(xiàn)基因抗蟲棉對棉鈴蟲的抗性表現(xiàn)二轉(zhuǎn)基因育種程序二轉(zhuǎn)基因育種程序 目的基因或DNA的獲取含有目的基因或者DNA的重組質(zhì)粒的構(gòu)建受體資料的選擇和再生系統(tǒng)的建立轉(zhuǎn)基因方法確實定和外源基因的轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化體的挑選和鑒定轉(zhuǎn)基因植株的育種利用n1、目的基因的獲得n1根據(jù)基因表達(dá)的產(chǎn)物-蛋白進(jìn)展基因克隆n分別和純化控制目的性狀的蛋白質(zhì)或多態(tài)，進(jìn)展氨基酸序列分析;n根據(jù)所的氨基酸序列推導(dǎo)相應(yīng)的核苷酸序列;n采用化學(xué)合成的方法合成該

14、基因;n經(jīng)過相應(yīng)的功能鑒定來確定所推導(dǎo)的序列能否為目的基因。n2從基因組DNA或mRNA序列克隆基因n A、同源序列法和表達(dá)序列標(biāo)簽法n同源序列法是根據(jù)基因家族成員所編碼的蛋白質(zhì)構(gòu)造中具有保守氨基酸序列的特點開展的一條快捷克隆即因家族未知成員的新途徑，即基于同源序列的候選基因法。n表達(dá)序列標(biāo)簽是指可以特異性標(biāo)志某個基因的部分序列，通常包含了該基因足夠的信息區(qū)，因此可以和其他基因相區(qū)分。目前，表達(dá)序列標(biāo)簽主要是經(jīng)過cDNA的途徑獲得。B、根據(jù)連鎖圖譜克隆的基因亞克隆文庫含目的基因 的亞克隆序列分析及 基因克隆C、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法轉(zhuǎn)座子探針亞克隆片斷做探針D D、差別顯示法、差別顯示法在生物個體發(fā)育的

15、不同階段或是在不同的組在生物個體發(fā)育的不同階段或是在不同的組織、空間進(jìn)展有序表達(dá)的方式，叫做基因織、空間進(jìn)展有序表達(dá)的方式，叫做基因的差別表達(dá)。的差別表達(dá)。差別顯示差別顯示PCRPCR是指經(jīng)過對來源特定組織類型的是指經(jīng)過對來源特定組織類型的總總mRNAmRNA進(jìn)展進(jìn)展PCRPCR擴增、電泳，并找出待測組擴增、電泳，并找出待測組織和對照之間的特異擴增條帶，該條代就織和對照之間的特異擴增條帶，該條代就有能夠是全長或是部分特異表達(dá)的基因，有能夠是全長或是部分特異表達(dá)的基因，利用這種方法進(jìn)展基因克隆的方式就是差利用這種方法進(jìn)展基因克隆的方式就是差別顯示法基因克隆。別顯示法基因克隆。如今又出現(xiàn)了限制性消

16、減雜交如今又出現(xiàn)了限制性消減雜交SSHSSH和和RNARNA恣意引物恣意引物PCRPCRRAD-PCRRAD-PCR等多種方法。等多種方法。2、目的基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建質(zhì)粒重組的根本步驟：從原核生物中獲取目的基因的載體并進(jìn)展改造；利用限制性內(nèi)切核酸酶將載體切開，并用銜接酶把目的基因銜接到載體上，獲得DNA重組體。3、受體資料的選擇、受體資料的選擇1良好的植物基因轉(zhuǎn)化系統(tǒng)應(yīng)具有的條件：良好的植物基因轉(zhuǎn)化系統(tǒng)應(yīng)具有的條件：高校穩(wěn)定的再生才干；高校穩(wěn)定的再生才干；受體資料要有較高的遺傳才干；受體資料要有較高的遺傳才干；具有穩(wěn)定的外植體來源；具有穩(wěn)定的外植體來源；對挑選劑敏感。對挑選劑敏感。2常用受體資

17、料的類型：常用受體資料的類型：愈傷組織再生系統(tǒng)愈傷組織再生系統(tǒng)直接分化再生系統(tǒng)直接分化再生系統(tǒng)原生質(zhì)體再生系統(tǒng)原生質(zhì)體再生系統(tǒng)胚狀體再生系統(tǒng)胚狀體再生系統(tǒng)生殖細(xì)胞再生系統(tǒng)生殖細(xì)胞再生系統(tǒng) 4、轉(zhuǎn)基因方法確實定和外源基因的轉(zhuǎn)化1.載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)移系統(tǒng) 將外源基因重組進(jìn)入適宜的載體系統(tǒng)，經(jīng)過載體攜帶將外源基因?qū)胫参锛?xì)胞并整合在核染色體組中隨著核染色體組一同復(fù)制和表達(dá)。 主要方法有：葉盤法真空滲入法原生質(zhì)體共培育法2.外源基因直接導(dǎo)入法 這是一種不需求借助載體介導(dǎo)，直接利用理化要素進(jìn)展外援遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的方法。 主要方法有：化學(xué)刺激法基因槍轟擊法(gene gun )高壓電穿孔法(electropora

18、tion)微注射法(microfibers )超聲波介導(dǎo)法脈沖電泳法離子束介導(dǎo)法5、轉(zhuǎn)化體的挑選和鑒定 1.轉(zhuǎn)化體的挑選 2.轉(zhuǎn)化體的鑒定 1DNA程度的鑒定 2轉(zhuǎn)錄程度的鑒定 3翻譯程度的鑒定二、轉(zhuǎn)基因作物的遺傳特點n一、外源基因整合機制n1、同源重組整合homologous recombinationn 外源DNA與受體細(xì)胞染色體DNA上的同源序列之間發(fā)生交換替代，并整合到受體染色體組上。n2、位點特異性重組site-specific recombinationn 在兩條DNA的特異位點上，經(jīng)過位點特異性重組酶的作用對DNA進(jìn)展特異性切割，實現(xiàn)外源基因的整合。3、轉(zhuǎn)座作用transposi

19、tion 經(jīng)過體外重組將外源基因插入到轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)中，當(dāng)攜帶有目的DNA片段的重組轉(zhuǎn)座成分復(fù)制并整合插入到染色體其他區(qū)域時實現(xiàn)外源基因的整合。4、異常重組illegimate recombination 異常重組整合是外源基因整合到植物基因組的最常見方式。二、整合后的外源基因在植物體內(nèi)的表現(xiàn)共抑制：向受體植物種導(dǎo)入一個與受體內(nèi)某基因同源的基因，導(dǎo)入的基因及受體內(nèi)與它同源的基因表達(dá)都能夠減弱的景象?；虺聊恨D(zhuǎn)基因植株由于外源基因的構(gòu)造被破壞或者外源基因插入了染色體異染色質(zhì)區(qū)域，出現(xiàn)外源基因序列不表達(dá)。(三)、外源基因在后代中的遺傳規(guī)律分離類型家系數(shù)百分率 1各位點的整合（3:1）8152 2各位

20、點的整合 不連鎖（15:1）3221 連鎖（3:1,15:1）96 3各位點的整合 不連鎖（63:1）96 3各以上位點（255:1）53 例外（3:1）2013合計156100三、轉(zhuǎn)基因作物種類的選育一、轉(zhuǎn)基因作物育種目的的制定四轉(zhuǎn)基因作物的生物平安性第三節(jié)、分子標(biāo)志輔助選擇育種第三節(jié)、分子標(biāo)志輔助選擇育種n一、分子標(biāo)志的類型和作用原理n1、分子標(biāo)志的類型和特點n類型按技術(shù)特性分類Hibridisation-based markersHibridisation-based markers以分子雜以分子雜交為根底的交為根底的DNADNA標(biāo)志技術(shù)標(biāo)志技術(shù)RFLPRFLP標(biāo)志、標(biāo)志、DNADNA指

21、紋技術(shù)、原位雜交指紋技術(shù)、原位雜交 PCR-based markersPCR-based markers以以PCRPCR反響為中心德反響為中心德DNADNA指指紋技術(shù)紋技術(shù) RAPDRAPD標(biāo)志、標(biāo)志、SSRSSR標(biāo)志、標(biāo)志、SSLPSSLP標(biāo)志、標(biāo)志、SCARSCAR標(biāo)志標(biāo)志 、AFLPAFLP標(biāo)志、標(biāo)志、STSSTS標(biāo)志標(biāo)志 Sequencing based markersSequencing based markers新型的分子標(biāo)志新型的分子標(biāo)志SNPSNP標(biāo)志、標(biāo)志、ESTEST標(biāo)志標(biāo)志 2、原理和遺傳特性(1)RFLP(1)RFLP標(biāo)志標(biāo)志A.RFLPA.RFLP標(biāo)志的原理標(biāo)志的原理

22、 植物基因組植物基因組DNADNA上的上的堿基交換、插入、缺失堿基交換、插入、缺失或反復(fù)等，呵斥某種限或反復(fù)等，呵斥某種限制性內(nèi)切酶酶切位點的制性內(nèi)切酶酶切位點的添加或喪失，從而產(chǎn)生添加或喪失，從而產(chǎn)生限制性片斷長度多態(tài)限制性片斷長度多態(tài)性。性。根本步驟DNA提取提取用用DNA限制性內(nèi)切酶消化限制性內(nèi)切酶消化凝膠電泳分別，轉(zhuǎn)移到濾膜上凝膠電泳分別，轉(zhuǎn)移到濾膜上Southern雜交雜交 放射性自顯影或酶學(xué)檢測放射性自顯影或酶學(xué)檢測 nB、RFLP標(biāo)志的特點標(biāo)志的特點n 1遍及于整個基因組，遍及于整個基因組，n 數(shù)量數(shù)量 幾乎是無限的；幾乎是無限的；n 2無表型效應(yīng)，無表型效應(yīng)，n 不受發(fā)育階段器

23、官特異性限制；不受發(fā)育階段器官特異性限制；n 3共顯性，共顯性，n 可區(qū)分純合子和可區(qū)分純合子和 雜合子；雜合子；n 4結(jié)果穩(wěn)定、可靠；結(jié)果穩(wěn)定、可靠；n 5DNA需求量大，檢測技術(shù)繁雜，需求量大，檢測技術(shù)繁雜， n 難以用于大規(guī)模的育種實際中難以用于大規(guī)模的育種實際中n2RAPD標(biāo)志nA、 RAPD標(biāo)志原理nB、 RAPD標(biāo)志的特點n3AFLP標(biāo)志nA、 AFLP標(biāo)志原理nB、 AFLP標(biāo)志的特點n4SSR標(biāo)志nA、 SSR標(biāo)志原理n根據(jù)微衛(wèi)星DNA兩端的單n拷貝序列設(shè)計一對特異引n物，利用PCR技術(shù)，擴增每個n位點的微衛(wèi)星DNA序列，經(jīng)過n電泳分析中心序列的長度多n態(tài)性。設(shè)計探針，挑選重組

24、克隆設(shè)計探針，挑選重組克隆根據(jù)根據(jù)SSRSSR兩側(cè)序列設(shè)計并合成引物兩側(cè)序列設(shè)計并合成引物 PCRPCR擴增反響擴增反響 建立基因組建立基因組DNADNA的質(zhì)粒文庫的質(zhì)粒文庫對陽性克隆對陽性克隆DNADNA插入序列測序插入序列測序凝膠電泳檢測多態(tài)性凝膠電泳檢測多態(tài)性B B、SSRSSR標(biāo)志的特點標(biāo)志的特點1 1SSRSSR標(biāo)志為共顯性標(biāo)志，可鑒別出純合子和標(biāo)志為共顯性標(biāo)志，可鑒別出純合子和雜合子。雜合子。2 2反復(fù)性高，穩(wěn)定可靠。反復(fù)性高，穩(wěn)定可靠。3 3DNADNA用量少，對用量少，對DNADNA的質(zhì)量要求也不太高。的質(zhì)量要求也不太高。4 4運用運用SSRSSR技術(shù)需求知道反復(fù)序列兩翼的技術(shù)

25、需求知道反復(fù)序列兩翼的DNADNA序列。序列。二、重要農(nóng)藝性狀基因連鎖二、重要農(nóng)藝性狀基因連鎖標(biāo)志的挑選技術(shù)標(biāo)志的挑選技術(shù)一、遺傳圖譜的構(gòu)建與重要農(nóng)業(yè)性狀基因的標(biāo)志1、遺傳作圖的原理 其原理是基于染色體的交換與重組。在細(xì)胞減數(shù)分裂時，非同源染色體上的基因相互獨立，自在組合，而位于同源染色體上的連鎖基因在減數(shù)分裂前期I非姊妹染色單體間的交換而發(fā)生基因重組，用重組率來表示基因間的遺傳間隔。遺傳圖譜只顯示基因間在染色體上的位置，并不反映DNA的實踐長度。2、構(gòu)建遺傳圖譜的主要環(huán)節(jié)：根據(jù)遺傳資料之間的多態(tài)性確定親本組合，建立作圖群體。對群體中不同植株的標(biāo)志進(jìn)展基因性分析。借助計算機程序構(gòu)建連鎖群3、構(gòu)

26、建遺傳圖譜，首先要選擇適宜的親本及分別群體，而且親本之間的差別不宜過大，否那么會降低所建圖譜的準(zhǔn)確度和適用性。4、用于分子標(biāo)志的遺傳作圖可分為兩類：暫時性分別群體，包括F2群體、BC等 永久性分別群體，包括重組自交系群體、加倍單倍體群體等自花授粉作物作圖群體的構(gòu)建方法自花授粉作物作圖群體的構(gòu)建方法P1P2F1F2F3F4F1B1:BC1F1P1F1P1F1P1B2:BC2DHL異花授粉作物作圖群體的構(gòu)建方法異花授粉作物作圖群體的構(gòu)建方法ABCDEfGABCDEfGAbcdEfgAbcdEfgAbCDEfGAbCDEfGaBCdefgaBCdefg雜合雜合F1對對B、D、G位點來說，相當(dāng)于位點來說，相當(dāng)于F2對對A、C、E位點來說，相當(dāng)于測交位點來說，相當(dāng)于測交F位點不分別位點不分別F2F2BC1