編寫教師阮源萍

1、編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?了解了解HPLC儀器基本結(jié)構(gòu)儀器基本結(jié)構(gòu),掌握實(shí)驗(yàn)儀器的一般使掌握實(shí)驗(yàn)儀器的一般使用方法；用方法； 加深對(duì)色譜分離原理的理解，掌握主要實(shí)驗(yàn)條件加深對(duì)色譜分離原理的理解，掌握主要實(shí)驗(yàn)條件的選擇；的選擇； 掌握液相色譜定性定量分析技術(shù)。掌握液相色譜定性定量分析技術(shù)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容反相高效液相色譜法分離測(cè)定烷基苯系物反相高效液相色譜法分離測(cè)定烷基苯系物 編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2

2、006年年9月月實(shí)驗(yàn)講解要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)講解要點(diǎn) 一一、色譜分離原理色譜分離原理 二二、色譜分析技術(shù)色譜分析技術(shù) 三三、 HPLC儀器和使用方法儀器和使用方法 四四、 HPLC和和GC的比較的比較 五五、 RP-HPLC測(cè)定烷基苯化合物原理測(cè)定烷基苯化合物原理 編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月一、色譜分離原理一、色譜分離原理色譜法是一類高效分離方法。色譜法是一類高效分離方法。 色譜分離原理是什么？色譜分離原理是什么？ HPLCHPLC和和GCGC儀器的分離部件是什么？?jī)x器的分離部件是什么？它們有什么不同？它們有什么不同？ HPLCHPLC和和GCGC的

3、主要差別？的主要差別？編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月二、色譜分析技術(shù)二、色譜分析技術(shù) 色譜分析是一類重要的儀器分析方法，其色譜分析是一類重要的儀器分析方法，其特點(diǎn)是分離能力強(qiáng)、定量準(zhǔn)確，適合于復(fù)雜特點(diǎn)是分離能力強(qiáng)、定量準(zhǔn)確，適合于復(fù)雜樣品或多組分樣品分析。樣品或多組分樣品分析。 常見的色譜定性方法？常見的色譜定性方法？ 色譜定量分析的依據(jù)？色譜定量分析的依據(jù)？ 氣相色譜實(shí)驗(yàn)采用那種定量分析方法？有氣相色譜實(shí)驗(yàn)采用那種定量分析方法？有何特點(diǎn)？何特點(diǎn)？ HPLCHPLC和和GCGC的應(yīng)用特點(diǎn)的應(yīng)用特點(diǎn) 編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授

4、編寫日期：編寫日期：2006年年9月月三、三、 HPLC儀器和實(shí)驗(yàn)技術(shù)儀器和實(shí)驗(yàn)技術(shù) HPLC HPLC儀器的基本組分？?jī)x器的基本組分？ 主要部件的工作原理？主要部件的工作原理？ HPLCHPLC和和GCGC儀器的比較儀器的比較 HPLCHPLC和和GCGC實(shí)驗(yàn)技術(shù)的比較實(shí)驗(yàn)技術(shù)的比較 有人認(rèn)為色譜分析實(shí)驗(yàn)很簡(jiǎn)單，就是打一有人認(rèn)為色譜分析實(shí)驗(yàn)很簡(jiǎn)單，就是打一針樣品而已，你是怎么認(rèn)為的？你是否給病針樣品而已，你是怎么認(rèn)為的？你是否給病人打過針？為什么沒有？人打過針？為什么沒有？編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月四、高效液相色譜儀的基本組成四、高效液

5、相色譜儀的基本組成分幾個(gè)系統(tǒng)？分幾個(gè)系統(tǒng)？和和GCGC有何不同？有何不同？高壓泵工作原理？高壓泵工作原理？GCGC是如何進(jìn)樣的？是如何進(jìn)樣的？記錄系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)和GCGC一樣一樣嗎？嗎？編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月高壓泵工作原理（單向閥）高壓泵工作原理（單向閥） 高壓液體有危險(xiǎn)嗎？高壓液體有危險(xiǎn)嗎？ 高壓泵如何改變流速？高壓泵如何改變流速？編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月高壓泵工作原理（單向閥）高壓泵工作原理（單向閥） HPLC HPLC進(jìn)樣針與進(jìn)樣針與GCGC有何不同？有何不同？ 為什么為

6、什么HPLCHPLC與與GCGC進(jìn)樣要求不同？進(jìn)樣要求不同？六通閥工作原理（流路切換）六通閥工作原理（流路切換）編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月五、五、 RP-HPLC測(cè)定烷基苯化合物原理測(cè)定烷基苯化合物原理 什么是正相色譜？什么是反相色譜？什么是正相色譜？什么是反相色譜？ 什么是鍵合固定相？什么是鍵合固定相？ 預(yù)測(cè)一下苯和甲苯在預(yù)測(cè)一下苯和甲苯在C18C18反相柱上的保留反相柱上的保留順序？順序？ 什么是反相色譜疏水機(jī)理？什么是反相色譜疏水機(jī)理？ 本實(shí)驗(yàn)的主要色譜分析條件有那些？本實(shí)驗(yàn)的主要色譜分析條件有那些？ 流動(dòng)相組成對(duì)保留時(shí)間有何影響？

7、舉例說流動(dòng)相組成對(duì)保留時(shí)間有何影響？舉例說明？明？ 改變檢測(cè)波長(zhǎng)對(duì)色譜圖有何影響？改變檢測(cè)波長(zhǎng)對(duì)色譜圖有何影響？編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月HPLC的溶劑選擇的溶劑選擇 本實(shí)驗(yàn)采用什么流動(dòng)相？本實(shí)驗(yàn)采用什么流動(dòng)相？ 什么是什么是HPLCHPLC級(jí)甲醇、乙腈溶劑？級(jí)甲醇、乙腈溶劑？ 如何獲得超純水？如何獲得超純水？ 本實(shí)驗(yàn)所用的流動(dòng)相如何配制？本實(shí)驗(yàn)所用的流動(dòng)相如何配制？ 流動(dòng)相為什么要除氣？如何除氣？流動(dòng)相為什么要除氣？如何除氣？編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月六、實(shí)驗(yàn)部分六、實(shí)驗(yàn)部分 一、

8、溶液配制一、溶液配制1 1 配制標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制標(biāo)準(zhǔn)系列溶液 三組分混標(biāo)液：每三組分混標(biāo)液：每mLmL溶液分別含溶液分別含1.00mg1.00mg苯、甲苯和苯、甲苯和乙苯。乙苯。 分別準(zhǔn)確移取分別準(zhǔn)確移取0.400.40、0.800.80、1.201.20、1.601.60和和2.00mL2.00mL三三組分混標(biāo)液于組分混標(biāo)液于10mL10mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶劑定容。容量瓶中，用流動(dòng)相溶劑定容。2 2 流動(dòng)相的配制、過濾和除氣。流動(dòng)相的配制、過濾和除氣。 五組分混標(biāo)液：含適量苯、甲苯、乙苯、丙苯和丁五組分混標(biāo)液：含適量苯、甲苯、乙苯、丙苯和丁苯。苯。 標(biāo)準(zhǔn)苯測(cè)試液。標(biāo)準(zhǔn)苯測(cè)試液。 未知樣品

9、未知樣品1 1號(hào)、號(hào)、2 2號(hào)和號(hào)和3 3號(hào)。號(hào)。 編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月二、色譜實(shí)驗(yàn)條件二、色譜實(shí)驗(yàn)條件 A A組：組：Waters HPLCWaters HPLC儀儀色譜柱：色譜柱：Nova Pak C18 (3.9Nova Pak C18 (3.9150mm, 4m)150mm, 4m)流動(dòng)相：流動(dòng)相：CH3OH-H2O (70/30, v/vCH3OH-H2O (70/30, v/v) )流速：流速：0.8 mL0.8 mL/min/min檢測(cè)波長(zhǎng)：檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm254nm進(jìn)樣體積：進(jìn)樣體積：20L20LB B組：組：T

10、SP HPLCTSP HPLC儀儀色譜柱：色譜柱：HypersilHypersil BDS C18 (4.0 BDS C18 (4.0200mm, 5m)200mm, 5m)流動(dòng)相：流動(dòng)相：CH3OH-H2O (80/20, v/vCH3OH-H2O (80/20, v/v) )流速：流速：0.8 mL0.8 mL/min/min檢測(cè)波長(zhǎng)：檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm254nm進(jìn)樣體積：進(jìn)樣體積：20L20L 編寫教師：阮源萍編寫教師：阮源萍 教教 授授編寫日期：編寫日期：2006年年9月月三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與主要步驟三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與主要步驟1 1 更換流動(dòng)相。更換流動(dòng)相。2 2 開動(dòng)儀器，讓色譜柱平衡。開動(dòng)儀器，讓色譜柱平衡。3 3 設(shè)置色譜工作站參數(shù)。設(shè)置色譜工作