天然藥物化學(xué)(全部課件)

1、n1.1.天然藥物的定義：天然藥物的定義： 天然來(lái)源天然來(lái)源n2.2.天然藥物的來(lái)源：天然藥物的來(lái)源： 植物植物 動(dòng)物動(dòng)物 礦物礦物 微生物微生物 海洋天然藥物海洋天然藥物正確理解成分的劃分正確理解成分的劃分光合作用糖糖代謝ATPNADPH丙酮酸磷酸烯醇丙酮酸赤蘚糖-4-磷酸核糖乙酰輔酶A丙二酸單酰輔酶AMVA小分子有機(jī)酸核酸三羧酸循環(huán)脂族氨基酸萜類萜類甾體類甾體類脂質(zhì)莽草酸芳族氨基酸肽類蛋白質(zhì)脂肪酸酚類蒽醌生物堿桂皮酸苯丙素類木脂素木質(zhì)素黃酮類CO2 H2On提取前的準(zhǔn)備提取前的準(zhǔn)備F系統(tǒng)的文獻(xiàn)調(diào)研系統(tǒng)的文獻(xiàn)調(diào)研F原材料的處理原材料的處理F保留憑證標(biāo)本保留憑證標(biāo)本n提取分離一般原則提取分離一

2、般原則F已知物或已知結(jié)構(gòu)類型已知物或已知結(jié)構(gòu)類型文獻(xiàn)方法，工業(yè)方法文獻(xiàn)方法，工業(yè)方法F未知物未知物活性跟蹤（定向分離）活性跟蹤（定向分離）n一、一、中草藥有效成分的提取中草藥有效成分的提取n二、二、中藥有效成分的分離與精制中藥有效成分的分離與精制 n水蒸汽蒸餾法：揮發(fā)性水蒸汽蒸餾法：揮發(fā)性n升華法升華法 ：升華性：升華性 n溶劑提取法溶劑提取法：最常用：最常用 n1.1.選擇溶劑考慮因素選擇溶劑考慮因素n2.2.常見溶劑的種類及其特點(diǎn)常見溶劑的種類及其特點(diǎn)n3.3.常用溶劑提取方法常用溶劑提取方法n4.4.影響溶劑提取效率的因素影響溶劑提取效率的因素1.1.選擇溶劑考慮因素：選擇溶劑考慮因素：

3、n溶劑盡可能多地溶出有效成分溶劑盡可能多地溶出有效成分, ,雜質(zhì)少溶或不溶雜質(zhì)少溶或不溶n有效成分、雜質(zhì)、溶劑的極性：相似相溶原理有效成分、雜質(zhì)、溶劑的極性：相似相溶原理n溶劑的安全性、價(jià)廉易得、回收方便等溶劑的安全性、價(jià)廉易得、回收方便等常見溶劑的種類及其特點(diǎn)常見溶劑的種類及其特點(diǎn)n環(huán)己烷，石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇，水環(huán)己烷，石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇，水極性：極性：親脂性：親脂性：親水性：親水性：比水重的有機(jī)溶劑：比水重的有機(jī)溶劑：與水可以以任意比例混溶的有機(jī)溶劑：與水可以以任意比例混溶的有機(jī)溶劑：與水分層的有機(jī)溶劑：與水分

4、層的有機(jī)溶劑：能與水分層的極性最大的有機(jī)溶劑：能與水分層的極性最大的有機(jī)溶劑：常用來(lái)從水中萃取苷類、水溶性生物堿類成分的有機(jī)溶劑：常用來(lái)從水中萃取苷類、水溶性生物堿類成分的有機(jī)溶劑：溶解范圍最廣的有機(jī)溶劑：溶解范圍最廣的有機(jī)溶劑：n浸漬法：浸漬法： 水水/ /稀醇，冷提稀醇，冷提n滲漉法：滲漉法： 乙醇，冷提乙醇，冷提 提取效率高，但溶劑用量大提取效率高，但溶劑用量大n超聲提?。撼曁崛。焊鞣N溶劑，可加熱，但所需溫度低各種溶劑，可加熱，但所需溫度低n煎煮法：煎煮法： 水水n回流提取回流提?。河袡C(jī)溶劑：有機(jī)溶劑 溶劑用量大溶劑用量大n連續(xù)回流提取：連續(xù)回流提?。河袡C(jī)溶劑，索氏提取器有機(jī)溶劑，索氏

5、提取器 溶劑反復(fù)利用溶劑反復(fù)利用n溶劑溶劑n方法方法n粉碎度粉碎度n溫度溫度n時(shí)間時(shí)間二、中藥有效成分的分離與精制二、中藥有效成分的分離與精制分離依據(jù)：共存成分的性質(zhì)差異分離依據(jù)：共存成分的性質(zhì)差異n1. 1. 溶解度差異溶解度差異n2. 2. 分配比不同分配比不同n3. 3. 吸附性差異吸附性差異n4 4分子大小差異分子大小差異n5 5離解程度不同離解程度不同n調(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)溫度n改變混合溶劑的極性改變混合溶劑的極性n調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)PHPHn加入某種沉淀試劑加入某種沉淀試劑n溫度不同溫度不同溶解度改變?nèi)芙舛雀淖?結(jié)晶、重結(jié)晶結(jié)晶、重結(jié)晶待純化物待純化物A+A+雜質(zhì)雜質(zhì)B B、C C加加MeOHMeO

6、H熱溶熱溶熱濾熱濾殘?jiān)鼩堅(jiān)– C）濾液濾液（A+BA+B）冷置析晶冷置析晶母液母液（B B）結(jié)晶結(jié)晶（A A）n加另一種極性相差較大的溶劑加另一種極性相差較大的溶劑混合溶劑極性混合溶劑極性改變改變部分物質(zhì)沉淀析出部分物質(zhì)沉淀析出 A A 水水/ /醇法醇法：除去水提液中的水溶性雜質(zhì)：除去水提液中的水溶性雜質(zhì) B B 醇醇/ /水法水法：除去醇提液中的脂溶性雜質(zhì)：除去醇提液中的脂溶性雜質(zhì) C C 醇醇/ /醚法醚法（醇（醇/ /丙酮法）：純化皂苷丙酮法）：純化皂苷改變混合溶劑極性改變混合溶劑極性A A 水水/ /醇法醇法除去水提液中的水溶性雜質(zhì)除去水提液中的水溶性雜質(zhì)中藥中藥水提取液水提取液加

7、數(shù)倍量加數(shù)倍量濃醇濃醇靜置過(guò)夜靜置過(guò)夜母液母液（目標(biāo)成分）（目標(biāo)成分）沉淀沉淀（水溶性雜質(zhì)水溶性雜質(zhì)）（如蛋白質(zhì)、多糖、果膠、粘液質(zhì)）（如蛋白質(zhì)、多糖、果膠、粘液質(zhì)）B B 醇醇/ /水法：除去醇提液中的脂溶性雜質(zhì)水法：除去醇提液中的脂溶性雜質(zhì)中藥中藥醇提取液醇提取液加數(shù)倍加數(shù)倍水水靜置過(guò)夜靜置過(guò)夜母液母液（目標(biāo)成分）（目標(biāo)成分）沉淀沉淀（脂溶性雜質(zhì)脂溶性雜質(zhì)）（如油脂、葉綠素等）（如油脂、葉綠素等）C C 醇醇/ /醚法（醇醚法（醇/ /丙酮法）：純化皂苷丙酮法）：純化皂苷皂苷的皂苷的醇溶液醇溶液加數(shù)倍量加數(shù)倍量乙醚，乙醚，靜置靜置母液母液（脂溶液雜質(zhì)）（脂溶液雜質(zhì)）沉淀沉淀（皂苷皂苷）n酸

8、、堿、兩性成分酸、堿、兩性成分n調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)PHPH改變的分子存在狀態(tài)改變的分子存在狀態(tài)改變?nèi)芙舛雀淖內(nèi)芙舛?解離型解離型/ /離子態(tài)離子態(tài)游離型游離型/ /分子態(tài)分子態(tài)H H+ +BHBH+ +B BOHOH- -H H+ +A A- -HAHAOHOH- -脂溶性脂溶性水溶性水溶性n酸、堿、兩性成分酸、堿、兩性成分n調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)PHPH改變分子存在狀態(tài)改變分子存在狀態(tài)改變?nèi)芙舛雀淖內(nèi)芙舛華 A酸酸/ /堿法堿法（酸提取堿沉淀法）：（酸提取堿沉淀法）： 生物堿的提取、純化生物堿的提取、純化B B堿堿/ /酸法酸法（堿提取酸沉淀法）：（堿提取酸沉淀法）： 黃酮、蒽醌等酚性成分的提取、純化黃酮、蒽醌等酚

9、性成分的提取、純化C. C. 調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)PHPH至等電點(diǎn)，沉淀蛋白至等電點(diǎn)，沉淀蛋白 A A酸酸/ /堿法（酸提取堿沉淀法）堿法（酸提取堿沉淀法） 生物堿的提取、純化生物堿的提取、純化H H+ +BHBH+ +B BOHOH- -醇提物浸膏（醇提物浸膏（B）藥渣藥渣酸水提取液酸水提取液稀酸水提取稀酸水提?。?BH+ ）堿化堿化沉淀沉淀（B）堿水液堿水液（水溶性雜質(zhì)）（水溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）藥材（藥材（HA）藥渣藥渣堿水提取液堿水提取液堿水提取堿水提?。?A- ）酸化酸化沉淀沉淀（HA）酸水液酸水液（水溶性雜質(zhì)）（水溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）B B堿堿/ /酸法（堿提

10、取酸沉淀法）酸法（堿提取酸沉淀法） 黃酮、蒽醌等酚性成分的提取、純化黃酮、蒽醌等酚性成分的提取、純化H H+ +A A- -HAHAOHOH- -n酸、堿成分酸、堿成分加入某種沉淀試劑加入某種沉淀試劑水不溶性鹽水不溶性鹽A A酸性成分酸性成分 PbPb2+2+、BaBa2+2+ 、CaCa2+2+ 水懸浮，通水懸浮，通H H2 2S S 母液（母液（ ）B. B. 堿性化合物堿性化合物 苦味酸苦味酸/ /苦酮酸，磷鉬酸苦酮酸，磷鉬酸/ /磷鎢酸磷鎢酸/ /鐳氏鹽鐳氏鹽 強(qiáng)強(qiáng)H H+ + ，EtEt2 2O O萃取萃取 H2OH2O層（層（ ） 上層上層下層下層n（1 1）簡(jiǎn)單液液萃取法簡(jiǎn)單液液

11、萃取法n（2 2）逆流分溶法逆流分溶法（ CCDCCD， countercurrent distributioncountercurrent distribution）n（3 3）紙色譜）紙色譜（PCPC，paper chromatographypaper chromatography）n（4 4）液液分配柱色譜液液分配柱色譜n（5 5）液滴逆流色譜液滴逆流色譜 （DCCCDCCC，droplet countercurrent chromarographydroplet countercurrent chromarography）n （6)6)高速逆流色譜高速逆流色譜 (HSCCC(HSCCC

12、，high speed countercurrent chromarographyhigh speed countercurrent chromarography） n 50 50 nA A有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑/ /水水nB B有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑/ /酸、堿水酸、堿水 PHPH 物質(zhì)存在狀態(tài)物質(zhì)存在狀態(tài)溶解性溶解性K KnC CPHPH梯度萃取梯度萃取 梯度調(diào)節(jié)梯度調(diào)節(jié)PHPH，每次改變一種成分的存在狀態(tài)，依次分離，每次改變一種成分的存在狀態(tài)，依次分離n缺點(diǎn)：手工操作繁瑣、溶劑用量大缺點(diǎn)：手工操作繁瑣、溶劑用量大、易乳化、易乳化（1 1）簡(jiǎn)單液液萃取法）簡(jiǎn)單液液萃取法上層上層下層下層PH 12 B

13、A- 3 BH+ HA （2 2）逆流分溶法）逆流分溶法n50n工作原理：多次、連續(xù)的液液萃取工作原理：多次、連續(xù)的液液萃取ncraigcraig逆流分溶儀萃取單元及工作過(guò)程逆流分溶儀萃取單元及工作過(guò)程n優(yōu)點(diǎn)：避免手工操作優(yōu)點(diǎn)：避免手工操作n缺點(diǎn)：溶劑用量大缺點(diǎn)：溶劑用量大 機(jī)械操作導(dǎo)致破損、漏液機(jī)械操作導(dǎo)致破損、漏液 乳化乳化（3 3）紙色譜（）紙色譜（paper chromatography, PCpaper chromatography, PC）n濾紙濕重濾紙濕重/ /干重干重=2=2時(shí)時(shí)n= Rfa (1-Rf b) / Rfb= Rfa (1-Rf b) / Rfb (1-Rf a)

14、 (1-Rf a)n固定相涂覆于硅膠等多孔載體上，裝柱固定相涂覆于硅膠等多孔載體上，裝柱n流動(dòng)相通過(guò)色譜柱進(jìn)行洗脫流動(dòng)相通過(guò)色譜柱進(jìn)行洗脫n物質(zhì)在兩相溶劑中作逆流分布物質(zhì)在兩相溶劑中作逆流分布 分配比不同，被洗脫速度不同分配比不同，被洗脫速度不同（4 4）液液分配柱色譜液液分配柱色譜定義定義正相色譜與反相色譜正相色譜與反相色譜（4 4）液液分配柱色譜液液分配柱色譜 （4 4）液液分配柱色譜液液分配柱色譜加壓液相色譜加壓液相色譜n 特點(diǎn)特點(diǎn)n加壓流動(dòng)相，流速快加壓流動(dòng)相，流速快n載體顆粒小，機(jī)械強(qiáng)度大，比表面極大載體顆粒小，機(jī)械強(qiáng)度大，比表面極大n耐壓柱材耐壓柱材n自動(dòng)檢測(cè)、收集、分部自動(dòng)檢測(cè)、

15、收集、分部 （4 4）液液分配柱色譜液液分配柱色譜加壓液相色譜加壓液相色譜n 種類：種類：n快速色譜快速色譜 Flash chromatographyFlash chromatography 2.02 2.0210105 5Pa Pa n低壓液相色譜低壓液相色譜 LPLC, LPLC, 5.055.0510105 5PaPan中壓液相色譜中壓液相色譜 MPLC, 5.05MPLC, 5.0520.220.210105 5PaPan高壓液相色譜高壓液相色譜 HPLC, HPLC, 20.220.210105 5Pa Pa high performance liquid chromatograph

16、y high performance liquid chromatography （4 4）液液分配柱色譜液液分配柱色譜克服了簡(jiǎn)單萃取及克服了簡(jiǎn)單萃取及CCDCCD溶劑容量大、易乳化的缺點(diǎn)溶劑容量大、易乳化的缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)缺點(diǎn)載體可能造成化學(xué)吸附，如硅膠載體可能造成化學(xué)吸附，如硅膠（5 5）液滴逆流色譜）液滴逆流色譜 DCCCDCCC droplet countercurrent chromarography droplet countercurrent chromarographyn流動(dòng)相液滴垂直上下，經(jīng)過(guò)固定相液流動(dòng)相液滴垂直上下，經(jīng)過(guò)固定相液（6 6）高速逆流色譜）高速逆流色譜 H

17、SCCCHSCCC high speed countercurrent chromarography high speed countercurrent chromarographyn（1 1）吸附的類型）吸附的類型 n（2 2）物理吸附的基本規(guī)律）物理吸附的基本規(guī)律n（3 3）極性及強(qiáng)弱判斷）極性及強(qiáng)弱判斷n（4 4）簡(jiǎn)單吸附法用于物質(zhì)的濃縮與精制）簡(jiǎn)單吸附法用于物質(zhì)的濃縮與精制 n（5 5）吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離）吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離 n（6 6）聚酰胺柱色譜聚酰胺柱色譜 n（7 7）大孔吸附柱色譜大孔吸附柱色譜（1 1）吸附的類型）吸附的類型 n物理吸附：物理吸附： 分子間力，

18、無(wú)選擇性，可逆。分子間力，無(wú)選擇性，可逆。 硅膠、氧化鋁、活性炭硅膠、氧化鋁、活性炭n化學(xué)吸附：化學(xué)鍵，選擇性較強(qiáng)，常不可逆?；瘜W(xué)吸附：化學(xué)鍵，選擇性較強(qiáng)，常不可逆。 硅膠硅膠生物堿生物堿 堿性氧化鋁堿性氧化鋁黃酮、蒽醌等黃酮、蒽醌等n半化學(xué)吸附半化學(xué)吸附：氫鍵，選擇性較弱，多可逆：氫鍵，選擇性較弱，多可逆 聚酰胺聚酰胺物理吸附的基本規(guī)律物理吸附的基本規(guī)律n 極性相似者易于吸附極性相似者易于吸附n 非極性吸附劑：活性炭非極性吸附劑：活性炭 對(duì)非極性成分吸附強(qiáng)對(duì)非極性成分吸附強(qiáng) 溶劑極性溶劑極性 吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附力吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附力 溶質(zhì)可被極性弱的溶劑洗脫溶質(zhì)可被極性弱的溶劑洗脫n 極性吸

19、附劑：硅膠、氧化鋁極性吸附劑：硅膠、氧化鋁 對(duì)極性物質(zhì)親和力強(qiáng)對(duì)極性物質(zhì)親和力強(qiáng) 溶劑極性溶劑極性 吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附力吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附力 溶質(zhì)可被極性強(qiáng)的溶劑洗脫溶質(zhì)可被極性強(qiáng)的溶劑洗脫 （3 3）極性及強(qiáng)弱判斷）極性及強(qiáng)弱判斷一般物質(zhì)：官能團(tuán)的種類、數(shù)目、位置、碳鏈長(zhǎng)短一般物質(zhì)：官能團(tuán)的種類、數(shù)目、位置、碳鏈長(zhǎng)短 R-COOHR-COOHArAr-OH-OHR-OHR-OHR-NH-R-NH-R-CO-NH-R-CO-NH- R-CHOR-CHOR-CO-RR-CO-R R-COO-RR-COO-R R-O-RR-O-R R-XR-X R-HR-Hn溶劑：介電常數(shù)溶劑：介電常數(shù) ，極性，

20、極性 環(huán)己烷（環(huán)己烷（1.881.88） 苯（苯（2.292.29） 無(wú)水乙醚（無(wú)水乙醚（4.474.47） 氯仿（氯仿（5.205.20） 乙酸乙酯（乙酸乙酯（6.116.11） 乙醇（乙醇（26.026.0） 甲醇（甲醇（31.231.2） 水（水（81.081.0）（4 4）簡(jiǎn)單吸附法用于物質(zhì)的濃縮與精制）簡(jiǎn)單吸附法用于物質(zhì)的濃縮與精制n 活性炭吸附法活性炭吸附法G結(jié)晶、重結(jié)晶中脫色、脫臭結(jié)晶、重結(jié)晶中脫色、脫臭A從大量稀水液中濃縮微量物質(zhì)從大量稀水液中濃縮微量物質(zhì)一葉秋堿的濃一葉秋堿的濃縮、精制縮、精制 （5 5）吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離）吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離n 硅膠吸附柱色譜

21、硅膠吸附柱色譜n 氧化鋁吸附柱色譜氧化鋁吸附柱色譜 A A吸附劑：吸附劑：30306060倍，有時(shí)倍，有時(shí)100100200200倍倍 B B裝柱：裝柱： 徑高比（徑高比（d/hd/h）1:151:151:201:20 干法裝柱干法裝柱/ /濕法裝柱濕法裝柱 C C上樣：上樣： 干法上樣干法上樣/ /濕法上樣濕法上樣 D D洗脫：洗脫： 等度等度/ /梯度（洗脫劑極性遞增）梯度（洗脫劑極性遞增） E E托尾：托尾： 化學(xué)吸附：硅膠化學(xué)吸附：硅膠堿性成分堿性成分 洗脫劑中加入堿洗脫劑中加入堿 氧化鋁氧化鋁酸性成分酸性成分 洗脫劑中加入酸洗脫劑中加入酸 F F洗脫系統(tǒng)的選擇：洗脫系統(tǒng)的選擇： TL

22、C RfTLC Rf=0.2=0.20.30.3（6 6）聚酰胺柱色譜）聚酰胺柱色譜n高分子聚合物高分子聚合物n不溶于常見有機(jī)溶劑不溶于常見有機(jī)溶劑n對(duì)堿穩(wěn)定對(duì)堿穩(wěn)定n對(duì)酸特別是無(wú)機(jī)酸穩(wěn)定性差對(duì)酸特別是無(wú)機(jī)酸穩(wěn)定性差 可溶于濃鹽酸、冰乙酸、甲酸中可溶于濃鹽酸、冰乙酸、甲酸中性性 質(zhì)質(zhì)（6 6）聚酰胺柱色譜）聚酰胺柱色譜分子間氫鍵分子間氫鍵半化學(xué)吸附半化學(xué)吸附吸附原理吸附原理（6 6）聚酰胺柱色譜）聚酰胺柱色譜u化合物在含水溶劑中大致有以下規(guī)律：化合物在含水溶劑中大致有以下規(guī)律：n形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目：越多，越強(qiáng)。形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目：越多，越強(qiáng)。n形成氫鍵的基團(tuán)所處的位置：形成氫鍵的基團(tuán)所處的位置

23、： 處于易形成分子內(nèi)氫鍵者，減弱。處于易形成分子內(nèi)氫鍵者，減弱。n分子中芳香化程度：高，增強(qiáng)。分子中芳香化程度：高，增強(qiáng)。影響吸附力的因素影響吸附力的因素OHHOOHOHOHOHOHOHOHOHOHOH（6 6）聚酰胺柱色譜）聚酰胺柱色譜u各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力n水水 甲醇甲醇 乙醇乙醇 氫氧化鈉水溶液氫氧化鈉水溶液 甲酰胺甲酰胺 二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺 尿素水溶液尿素水溶液影響吸附力強(qiáng)弱的因影響吸附力強(qiáng)弱的因素素u化合物在不同溶劑中的吸附力，隨溶劑極性增強(qiáng)而增強(qiáng)化合物在不同溶劑中的吸附力，隨溶劑極性增強(qiáng)而增強(qiáng)n水中最強(qiáng)水中最強(qiáng)常以水裝柱、樣品以水溶解上

24、樣常以水裝柱、樣品以水溶解上樣n含水醇中次之含水醇中次之n醇中最弱醇中最弱常以濃度漸高的含水醇梯度洗脫常以濃度漸高的含水醇梯度洗脫 EtOH-HEtOH-H2 2O O最常用最常用弱弱強(qiáng)強(qiáng)（6 6）聚酰胺柱色譜）聚酰胺柱色譜n醌類、黃酮類等酚性的制備和分離。醌類、黃酮類等酚性的制備和分離。n脫鞣處理脫鞣處理n生物堿、萜類、甾類、糖類、氨基酸等極性生物堿、萜類、甾類、糖類、氨基酸等極性與非極性化合物的分離也有用途與非極性化合物的分離也有用途應(yīng)應(yīng) 用用（7 7）大孔吸附樹脂）大孔吸附樹脂n高分子聚合物高分子聚合物n白色球形顆粒白色球形顆粒n多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)n不溶于酸、堿、有機(jī)溶劑不溶于酸、

25、堿、有機(jī)溶劑n吸附原理：分子間吸附原理：分子間力力 氫鍵氫鍵n分子篩分子篩 性質(zhì)性質(zhì)原理原理（7 7）大孔吸附樹脂）大孔吸附樹脂n樹脂的性質(zhì)：非極性樹脂樹脂的性質(zhì)：非極性樹脂 易吸附非極性化合物易吸附非極性化合物 極性樹脂極性樹脂 易吸附極性化合物易吸附極性化合物n溶劑的性質(zhì)：溶劑的性質(zhì)：物質(zhì)在溶劑中的溶解度大，樹脂對(duì)此物質(zhì)的吸附力就小物質(zhì)在溶劑中的溶解度大，樹脂對(duì)此物質(zhì)的吸附力就小影響吸附力強(qiáng)弱的因影響吸附力強(qiáng)弱的因素素（7 7）大孔吸附樹脂）大孔吸附樹脂n水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。n最常用：乙醇最常用：乙醇水水 n廣泛應(yīng)用于化合物的分離與富集工作中

26、廣泛應(yīng)用于化合物的分離與富集工作中 如：如：苷類、糖類的分離苷類、糖類的分離 生物堿的精制生物堿的精制 多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。 洗脫劑洗脫劑應(yīng)應(yīng) 用用n透析法透析法n超濾法超濾法n超速離心超速離心n凝膠濾過(guò)法凝膠濾過(guò)法 gel filtrationgel filtration： 凝膠滲透色譜凝膠滲透色譜 gel permeation chromtographygel permeation chromtography 分子篩濾過(guò)分子篩濾過(guò) molecular sieve filtrationmolecular sieve filtration凝膠濾過(guò)法凝

27、膠濾過(guò)法 gel filtrationgel filtration： n凝膠三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的分子篩作用凝膠三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的分子篩作用n按分子量由大到小的順序分離按分子量由大到小的順序分離原原 理理凝膠濾過(guò)法凝膠濾過(guò)法 gel filtrationgel filtration： 葡聚糖凝膠葡聚糖凝膠SephadexSephadex G G： 葡聚糖葡聚糖+ +交聯(lián)劑（環(huán)氧氯丙烷）交聯(lián)劑（環(huán)氧氯丙烷） 分子篩分子篩 水中應(yīng)用水中應(yīng)用 分離水溶性成份分離水溶性成份 商品型號(hào)按交聯(lián)度分類，以商品型號(hào)按交聯(lián)度分類，以1010倍吸水量（倍吸水量（ml/gml/g）表示）表示羥丙基葡聚糖凝膠羥丙基葡聚糖凝膠Se

28、phadexSephadex LH-20: LH-20: SephadexSephadex G-25 G-25羥丙基化所得羥丙基化所得 分子篩和反相色譜相結(jié)合分子篩和反相色譜相結(jié)合 水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿中使用水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿中使用 水溶性、脂溶性成分都可分水溶性、脂溶性成分都可分凝膠的種類、性質(zhì)及應(yīng)用凝膠的種類、性質(zhì)及應(yīng)用n離子交換樹脂為固定相，水，含水溶劑裝柱離子交換樹脂為固定相，水，含水溶劑裝柱n含水流動(dòng)相通過(guò)樹脂含水流動(dòng)相通過(guò)樹脂n可交換離子與樹脂上的交換基團(tuán)交換，吸附到樹脂上可交換離子與樹脂上的交換基團(tuán)交換，吸附到樹脂上 n中性及無(wú)交換離子的成分流出

29、中性及無(wú)交換離子的成分流出n將吸附到柱上的成分洗脫下來(lái)將吸附到柱上的成分洗脫下來(lái)離子交換原理離子交換原理n離子交換樹脂為固定相，水，含水溶劑裝柱離子交換樹脂為固定相，水，含水溶劑裝柱n含水流動(dòng)相通過(guò)樹脂含水流動(dòng)相通過(guò)樹脂n可交換離子與樹脂上的交換基團(tuán)交換，吸附到樹脂上可交換離子與樹脂上的交換基團(tuán)交換，吸附到樹脂上 n中性及無(wú)交換離子的成分流出中性及無(wú)交換離子的成分流出n將吸附到柱上的成分洗脫下來(lái)將吸附到柱上的成分洗脫下來(lái)離子交換原理離子交換原理n球形顆粒，不溶于水，可在水中溶脹離子交換樹脂的性質(zhì)離子交換樹脂的性質(zhì)離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)n母核n離子交換基團(tuán)離子交換樹脂的種類離子交換

30、樹脂的種類離子交換樹脂的應(yīng)用離子交換樹脂的應(yīng)用NOOCH3COCHPhCH2OHNOCH3CO CHPhCH2OHN+OH-OOCH3OCH3 堿性堿性 堿性不同的生物堿的分離堿性不同的生物堿的分離第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究法結(jié)構(gòu)研究法o 結(jié)構(gòu)研究的特點(diǎn)：難于合成品結(jié)構(gòu)研究的特點(diǎn)：難于合成品 o 結(jié)構(gòu)研究的總原則結(jié)構(gòu)研究的總原則: : 盡可能不消耗或少消耗試樣盡可能不消耗或少消耗試樣 波譜綜合分析波譜綜合分析 與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比較與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比較 必要時(shí)輔以化學(xué)手段必要時(shí)輔以化學(xué)手段第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究法結(jié)構(gòu)研究法o一、一、純度的測(cè)定純度的測(cè)定o二、二、結(jié)構(gòu)研究的主要程序結(jié)構(gòu)研究的主要程序o三、三、結(jié)構(gòu)

31、研究中采用的主要方法結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法一、純度的測(cè)定一、純度的測(cè)定o 純度檢查法：純度檢查法：o 均一的晶形均一的晶形o 敏銳的熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、折光率、比旋度敏銳的熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、折光率、比旋度o TLCTLC、PCPC、GCGC、HPLCHPLC二、結(jié)構(gòu)研究的主要程序二、結(jié)構(gòu)研究的主要程序三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法o1. 1. 確定分子式，計(jì)算不飽和度確定分子式，計(jì)算不飽和度o2. 2. 質(zhì)譜質(zhì)譜 （MSMS，mass spectrummass spectrum）o3. 3. 紅外光譜紅外光譜（IRIR，infrared spectrainfrared spect

32、ra）o4. 4. 紫外紫外- -可見吸收光譜可見吸收光譜（UV-visUV-vis) ) (ultraviolet-visible spectra (ultraviolet-visible spectra）o5. 5. 核磁共振核磁共振（NMRNMR，nuclear magnetic resonancenuclear magnetic resonance）o6. 6. 其他：其他： x-x-單晶衍射法單晶衍射法 旋光光譜（旋光光譜（ORDORD） 園二色譜（園二色譜（CDCD） 三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法 1. 1. 確定分子式，計(jì)算不飽和度確定分子式，計(jì)算不飽

33、和度o 分子式的確定分子式的確定o 元素定量分析結(jié)合分子量測(cè)定元素定量分析結(jié)合分子量測(cè)定o 同位素豐度比法同位素豐度比法o 高分辨質(zhì)譜（高分辨質(zhì)譜（HR-MSHR-MS，high resolution mass spectrum high resolution mass spectrum ） o 不飽和度的計(jì)算不飽和度的計(jì)算o u=u=/2/2/2/21 1 ：一價(jià)原子數(shù)：一價(jià)原子數(shù) 如如H H、X X ：三價(jià)原子數(shù)，如：三價(jià)原子數(shù)，如N N、P P ：四價(jià)原子數(shù)，如：四價(jià)原子數(shù)，如C C三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法 2. 2. 質(zhì)譜質(zhì)譜 （MSMS，mass sp

34、ectrummass spectrum）o 作用：作用：p 確定分子量、分子式確定分子量、分子式p 提供部分結(jié)構(gòu)信息提供部分結(jié)構(gòu)信息 丟失碎片的大小丟失碎片的大小 如如1515、1717 碎片的碎片的m/zm/z及裂解方式及裂解方式三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法 2. 2. 質(zhì)譜質(zhì)譜 （MSMS，mass spectrummass spectrum）o 常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)o 電子轟擊質(zhì)譜（EI-MS，electron impact ionization）o 場(chǎng)解析質(zhì)譜（FD-MS，field desorption ionization） o 快速原子

35、轟擊質(zhì)譜（FAB-MS，fast atom bombardment）o 電噴霧質(zhì)譜（ESI-MS，electrospray ionization） o 基質(zhì)輔助激光解析質(zhì)譜（MALDI-MS） matrix-assisted laser desorption ionization 常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)電子轟擊質(zhì)譜（電子轟擊質(zhì)譜（EI-MSEI-MS） （electron impact ionizationelectron impact ionization）o 樣品需加熱氣化，離化，得到樣品需加熱氣化，離化，得到M M+ +o 難氣化、易熱解的成份測(cè)不到難氣化、易熱解的成份測(cè)不

36、到M M+ + 如糖、苷、氨基酸、肽、蛋白、核酸、抗生素如糖、苷、氨基酸、肽、蛋白、核酸、抗生素常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)場(chǎng)解析質(zhì)譜（場(chǎng)解析質(zhì)譜（FD-MSFD-MS） field desorptionfield desorption ionization ionizationo 試樣稀液涂于鎢絲上作陽(yáng)極，對(duì)面加陰極，通高壓，使電離試樣稀液涂于鎢絲上作陽(yáng)極，對(duì)面加陰極，通高壓，使電離o 難氣化、易熱解的成份，可得到難氣化、易熱解的成份，可得到 分子離子相關(guān)峰：分子離子相關(guān)峰：MMHH+ +、MMNaNa+ +、MMKK+ + 逐個(gè)脫去糖基的碎片峰：逐個(gè)脫去糖基的碎片峰：MMH-162

37、H-162+ +、MMH-162-146H-162-146+ +o 苷元的碎片離子相對(duì)少苷元的碎片離子相對(duì)少常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)快速原子轟擊質(zhì)譜（快速原子轟擊質(zhì)譜（FAB-MSFAB-MS） fast atom bombardmentfast atom bombardmentp 離子槍發(fā)射高能離子與另一中性粒子碰撞，交換電荷，離子槍發(fā)射高能離子與另一中性粒子碰撞，交換電荷， 形成高速中性粒子，與樣品碰撞，使其電離形成高速中性粒子，與樣品碰撞，使其電離p 難氣化、易熱解的成份，可得到難氣化、易熱解的成份，可得到 分子離子相關(guān)峰：分子離子相關(guān)峰：MMHH+ +、MMNaNa+ +、

38、MMKK+ + 逐個(gè)脫去糖基的碎片峰：逐個(gè)脫去糖基的碎片峰：MMH-162H-162+ +、MMH-162-146H-162-146+ + p 可得到苷元的碎片可得到苷元的碎片常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)電噴霧質(zhì)譜（電噴霧質(zhì)譜（ESI-MSESI-MS） electrosprayelectrospray ionization ionization p 強(qiáng)靜電場(chǎng)使試樣電離，強(qiáng)靜電場(chǎng)使試樣電離，p 難氣化、易熱解、大分子、小分子，均可得到難氣化、易熱解、大分子、小分子，均可得到 分子離子相關(guān)峰：分子離子相關(guān)峰：MMHH+ +、MMNaNa+ +、MMKK+ + 常用質(zhì)譜技術(shù)及特點(diǎn)常用質(zhì)譜技

39、術(shù)及特點(diǎn)基質(zhì)輔助激光解析質(zhì)譜（基質(zhì)輔助激光解析質(zhì)譜（MALDI-MSMALDI-MS） matrix-assisted laser desorptionmatrix-assisted laser desorption ionization ionization p 用于研究結(jié)構(gòu)復(fù)雜，不易氣化的大分子物質(zhì)的分子量用于研究結(jié)構(gòu)復(fù)雜，不易氣化的大分子物質(zhì)的分子量 如多糖、蛋白、核酸等如多糖、蛋白、核酸等 三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法 3. 3. 紅外光譜（紅外光譜（IRIR，infrared spectrainfrared spectra）o 原理：原理： 化學(xué)鍵的振動(dòng)在

40、紅外光區(qū)（化學(xué)鍵的振動(dòng)在紅外光區(qū)（40004000625cm625cm-1-1）引起的吸收譜圖）引起的吸收譜圖o 作用：作用：o 特征頻率區(qū)（特征頻率區(qū)（functional group regionfunctional group region） 400040001500 cm1500 cm-1-1確定官能團(tuán)類型確定官能團(tuán)類型o 指紋區(qū)（指紋區(qū)（fingerprint regionfingerprint region）cm600 cm-1-1構(gòu)象、構(gòu)型、取代模式等構(gòu)象、構(gòu)型、取代模式等三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法 4. 4. 紫外紫外-

41、-可見吸收光譜（可見吸收光譜（UV-visUV-vis) ) (ultraviolet-visible spectra (ultraviolet-visible spectra）o原理原理 電子由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)（電子由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)（、n n） 在紫外可見光區(qū)（在紫外可見光區(qū)（200200700nm700nm）引起的吸收譜圖）引起的吸收譜圖o作用作用o對(duì)含有共軛雙鍵、對(duì)含有共軛雙鍵、,- -不飽和羰基、芳香化合物的結(jié)構(gòu)鑒定有重要價(jià)值不飽和羰基、芳香化合物的結(jié)構(gòu)鑒定有重要價(jià)值o特定的吸收譜特征特定的吸收譜特征骨架類型的判斷骨架類型的判斷 如：黃酮、香豆素、蒽醌如：黃酮、香豆素、蒽醌o加診斷試

42、劑前后譜圖的規(guī)律性變化加診斷試劑前后譜圖的規(guī)律性變化取代圖式的推斷取代圖式的推斷 如：黃酮、香豆素如：黃酮、香豆素三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法三、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法5. 5. 核磁共振（核磁共振（NMRNMR） （nuclear magnetic resonancenuclear magnetic resonance）o 原理：原理： 1 1H H、1313C C等具有磁矩的原子在外加磁場(chǎng)中受電磁波照射，吸收等具有磁矩的原子在外加磁場(chǎng)中受電磁波照射，吸收一定能量電磁波，產(chǎn)生能級(jí)變化，引起核磁共振一定能量電磁波，產(chǎn)生能級(jí)變化，引起核磁共振o 氫核磁共振（氫核磁共振（1 1H-NMRH-NM

43、R）o 碳核磁共振譜（碳核磁共振譜（1313C-NMRC-NMR）o 二維核磁共振譜二維核磁共振譜 （2D-NMR2D-NMR）氫核磁共振（氫核磁共振（1 1H-NMRH-NMR）n 應(yīng)用：應(yīng)用： 提供提供H H的類型、數(shù)目、相鄰原子團(tuán)的信息的類型、數(shù)目、相鄰原子團(tuán)的信息n 四個(gè)參數(shù)：四個(gè)參數(shù)：o 化學(xué)位移（化學(xué)位移（ ）：）：1 1101020ppm 20ppm H H的類型的類型 屏蔽效應(yīng)屏蔽效應(yīng)o 積分值積分值/ /積分面積積分面積 同一環(huán)境下同一環(huán)境下H H的個(gè)數(shù)的個(gè)數(shù)o 自旋偶合裂分的峰數(shù)自旋偶合裂分的峰數(shù) 鄰位與其不等同的鄰位與其不等同的H H的個(gè)數(shù)的個(gè)數(shù) 符合符合 n+1n+1律

44、律 s, d, t, qs, d, t, qo 偶合常數(shù)（偶合常數(shù)（J J） H H核間的距離核間的距離 相隔鍵數(shù)：相隔鍵數(shù)： 越少，越少，J J大，通常為大，通常為3 3J JH-HH-H 二面角：二面角： 越接近越接近9090，J J越小越小 越接近越接近0 0、180180，J J越大越大氫核磁共振（氫核磁共振（1 1H-NMRH-NMR）CCHbHaCHcHaHbHcHdn 遠(yuǎn)程偶合遠(yuǎn)程偶合( (4 4J JH-HH-H) )： JacJac=1.6=1.62.0Hz2.0HzJbcJbc=0=01.5Hz1.5Hz烯丙偶合烯丙偶合芳環(huán)上的偶合芳環(huán)上的偶合Jab=6Jab=610 Hz

45、10 HzJacJac=1=13Hz3HzJadJad=0=01 Hz1 Hz氫核磁共振（氫核磁共振（1 1H-NMRH-NMR）o 同核去偶技術(shù)（同核去偶技術(shù)（homodecouplinghomodecoupling）：）： 消除或部分消除相鄰消除或部分消除相鄰H H核的偶合，簡(jiǎn)化圖譜核的偶合，簡(jiǎn)化圖譜 CHCH3 3CHCH2 2OCOOCOCHCH3 3CH3 t 照射H-2 sCH2 q 照射H-1 sCH3 s碳核磁共振譜（碳核磁共振譜（1313C-NMRC-NMR）o 最重要的參數(shù)：最重要的參數(shù)： 化學(xué)位移化學(xué)位移 ：1 1200ppm 200ppm C C的類型的類型 o1313

46、C C的信號(hào)裂分的信號(hào)裂分 1313C-NMRC-NMR：異核偶合：異核偶合1 1H-NMRH-NMR：同核偶合：同核偶合o 偶合裂分峰數(shù)：偶合裂分峰數(shù)：C C的級(jí)別的級(jí)別 符合符合n+1n+1律，律，s, d, t, qs, d, t, q，o 有有1 1J JC-HC-H 2 2J JC-HC-H 3 3J JC-HC-H碳核磁共振譜（碳核磁共振譜（1313C-NMRC-NMR）o 常見碳譜類型及特征：常見碳譜類型及特征： o 噪音去偶譜噪音去偶譜（proton noise decoupling spectrumproton noise decoupling spectrum） 全氫去偶全

47、氫去偶（COMCOM，proton complete decouplingproton complete decoupling） 寬帶去偶寬帶去偶（BBDBBD，broad band decouplingbroad band decoupling） o 選擇氫核去偶譜選擇氫核去偶譜（SPDSPD） selective proton decoupling spectrumselective proton decoupling spectrum 遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜（LSPDLSPD） long range selective proton decoupling spectruml

48、ong range selective proton decoupling spectrumo 無(wú)畸變極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)法無(wú)畸變極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)法(DEPT(DEPT） distortionlessdistortionless enhancement by polarization transfer enhancement by polarization transfer 常見碳譜類型及特征常見碳譜類型及特征噪音去偶譜噪音去偶譜o 噪音去偶譜噪音去偶譜（proton noise decoupling spectrumproton noise decoupling spectrum） 全氫去偶全氫去偶（C

49、OMCOM，proton complete decouplingproton complete decoupling） 寬帶去偶寬帶去偶（BBDBBD，broad band decouplingbroad band decoupling）p寬頻照射，消除所有寬頻照射，消除所有H H對(duì)對(duì)C C的偶合的偶合p譜中所有譜中所有C C均為均為s sp無(wú)對(duì)稱因素強(qiáng)況下，譜中信號(hào)數(shù)即無(wú)對(duì)稱因素強(qiáng)況下，譜中信號(hào)數(shù)即C C數(shù)數(shù)常見碳譜類型及特征常見碳譜類型及特征選擇氫核去偶譜選擇氫核去偶譜 遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜o 選擇氫核去偶譜（選擇氫核去偶譜（SPDSPD） selective proton decoupling spectrum selective proton decoupling spectrum 遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜（遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜（LSPDLSPD） long range selective proton