氣相殘留溶劑的出峰順序的一般規(guī)律

1、文件名 殘留溶劑測(cè)定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頁(yè)碼： 1/18編碼：SOP-02-03-45/3起草：日期：審核：日期：批準(zhǔn)：日期：執(zhí)行日期：簽 字：變更記載：執(zhí)行2010年版中國(guó)藥典。分發(fā)部門(mén)：質(zhì)量部、中心化驗(yàn)室印制份數(shù)： 3目 的：為殘留溶劑測(cè)定建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，以確保正確操作。范 圍：所有需進(jìn)行殘留溶劑測(cè)定的實(shí)驗(yàn)操作。責(zé)任人：檢驗(yàn)員。內(nèi) 容： 1. 儀器與用具 1.1 氣相色譜儀一臺(tái),帶火焰離子化檢測(cè)器。 1.2 積分儀或色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)。 1.3 色譜柱 1. 3.1毛細(xì)管柱除另有規(guī)定外，極性相近的同類(lèi)色譜柱之間可以互相使用。（1） 非極性色譜柱 固定液為100%的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。（2

2、） 極性色譜柱 固定液為聚乙二醇（PEG-20M）的毛細(xì)管柱。（3） 中極性色譜柱 固定液為（35%）二苯基-（65%）甲基聚硅氧烷、（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷、（35%）二苯基-（65%）二甲基聚硅氧烷、（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱等。（4） 弱極性色譜柱 固定液為（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱等。 填充柱 以直徑為0.180.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料作為固定相。2. 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) （1）用待測(cè)物的色譜

3、峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)一般不低于5000；填充柱的理論板數(shù)一般不低于1000. （2）色譜圖中，待測(cè)物色譜峰與相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5.編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼2/18 （3）以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于5%；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)峰面積的RSD應(yīng)不大于10%。3.供試品溶液的制備3.1頂空進(jìn)樣除另有規(guī)定外，精密稱(chēng)取供試品0.11g；通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物，可采用N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或其他適宜溶劑；根據(jù)供試品和待測(cè)溶劑的溶解度，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)定。根據(jù)各

4、品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。3.2 溶液直接進(jìn)樣精密稱(chēng)取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解；根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。4對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液；如用水作溶劑，應(yīng)先將待測(cè)有機(jī)溶劑溶解在50%二甲基亞砜或N,N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。若為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對(duì)照品溶液的濃度；若為定量測(cè)定，為保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶液的濃度；通常對(duì)照品溶液

5、色譜峰面積不宜超過(guò)供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑色譜峰面積的2倍。必要時(shí)，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛取? 測(cè)定法5.1第一法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法）當(dāng)需要檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量不多，且極性差異較小時(shí)，可采用此法。色譜條件 柱溫一般為40100；常以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘1.02.0ml；以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為7085，頂空瓶平衡時(shí)間為3060分鐘；進(jìn)樣口溫度為200；如采用火焰離子化檢測(cè)器（FID），溫度為250。測(cè)定法 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。對(duì)色譜圖中未知有機(jī)溶劑的鑒別，可參考附表2進(jìn)行初篩。編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼3

6、/185.2 第二法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法）當(dāng)需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多，且極性差異較大時(shí)，可采用此法。色譜條件 柱溫一般先在40維持8分鐘，再以每分鐘8的升溫速率升至120，維持10分鐘；以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘2.0ml；以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為7085，頂空瓶平衡時(shí)間為3060分鐘；進(jìn)樣口溫度為200；如采用FID檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度為250。具體到某個(gè)品種的殘留溶劑檢查時(shí)，可根據(jù)該品種項(xiàng)下殘留溶劑的組成調(diào)整升溫程序。測(cè)定法 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。對(duì)色譜圖中未知有機(jī)溶劑的鑒別，可參考附表3進(jìn)行初篩。5.3第三法（溶液直接進(jìn)樣法

7、）可采用填充柱，亦可采用適宜極性的毛細(xì)管柱。測(cè)定法 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣23次,測(cè)定待測(cè)峰的峰面積.計(jì)算法 (1)限度檢查 除另有規(guī)定外,按各品種項(xiàng)下規(guī)定的供試品溶液濃度測(cè)定。以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得被測(cè)溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對(duì)照品溶液的相應(yīng)比值。以外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得被測(cè)溶劑峰面積不得大于對(duì)照溶液的相應(yīng)峰面積。 （2）定量測(cè)定 按內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法計(jì)算各殘留溶劑的量。6 附注6.1除另有規(guī)定外，頂空條件的選擇：應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點(diǎn)選擇頂空平衡溫度。對(duì)沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的平衡溫度；但此時(shí)應(yīng)兼顧供試品的熱分解特性，盡量避免供試品產(chǎn)生的

8、揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對(duì)測(cè)定的干擾。頂空平衡時(shí)間一般為3045分鐘，以保證供試品溶液的氣-液兩相有足夠的時(shí)間達(dá)到平衡。頂空平衡時(shí)間通常不宜過(guò)長(zhǎng)，如超過(guò)60分鐘，可能引起頂空瓶的氣密性變差，導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼4/18對(duì)照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件。6.2定量方法的驗(yàn)證 當(dāng)采用頂空進(jìn)樣時(shí)供試品與對(duì)照品處于不完全相同的基質(zhì)中，故應(yīng)考慮氣液平衡過(guò)程中的基質(zhì)效應(yīng)（供試品溶液與對(duì)照品溶液組成差異對(duì)頂空氣-液平衡的影響）。由于標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除供試品溶液基質(zhì)與對(duì)照品溶液基質(zhì)不同所致的基質(zhì)效應(yīng)的影響，故通常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法驗(yàn)證定量方法的準(zhǔn)確性；當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)加入法與其他定

9、量方法的結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果為準(zhǔn)。6.3干擾峰的排除 供試品中的未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物易對(duì)殘留溶劑的測(cè)定產(chǎn)生干擾。干擾作用包括在測(cè)定的色譜系統(tǒng)中未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物與待測(cè)物的保留值相同（共出峰）；或熱降解產(chǎn)物與待測(cè)物的結(jié)構(gòu)相同（如甲氧基熱裂解產(chǎn)生甲醇）。當(dāng)測(cè)定的殘留溶劑超出限度，但未能確定供試品中是否有未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對(duì)測(cè)定有干擾作用時(shí)，應(yīng)通過(guò)試驗(yàn)排除干擾作用的存在。對(duì)第一類(lèi)干擾作用，通常采用在另一種極性不同的色譜柱系統(tǒng)中對(duì)相同供試品再進(jìn)行測(cè)定，比較不同色譜系統(tǒng)中測(cè)定結(jié)果的方法。如兩者結(jié)果一致，則可以排除測(cè)定中有共出峰的干擾；如兩者結(jié)果不一致，則表明測(cè)定中有共

10、出峰的干擾。對(duì)第二類(lèi)干擾作用，通常要通過(guò)測(cè)定已知不含該溶劑的對(duì)照樣品來(lái)加以判斷。6.4含氮堿性化合物的測(cè)定 普通氣相色譜儀中的不銹鋼管路、進(jìn)樣器的襯管等對(duì)有機(jī)胺等含氮堿性化合物具有較強(qiáng)的吸附作用，致使其檢出靈敏度降低，應(yīng)采用惰性的硅鋼采蓮或鎳鋼材料管路；采用溶液直接進(jìn)樣法測(cè)定時(shí)，供試品溶液應(yīng)不呈酸性，以免待測(cè)物與酸反應(yīng)后不易汽化。通常采用弱極性的色譜柱或其填料預(yù)先經(jīng)堿處理過(guò)的色譜柱分析含氮堿性化合物，如果采用胺分析專(zhuān)用柱進(jìn)行分析，效果更好。對(duì)不宜采用氣相色譜法測(cè)定的含氮堿性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等，可采用其他方法如離子色譜法等測(cè)定。6.5檢測(cè)器的選擇 對(duì)含鹵素元素的殘留溶劑如三氯甲烷等，采

11、用電子捕獲檢測(cè)器（ECD），易得到高的靈敏度。6.6由于不同的實(shí)驗(yàn)室在測(cè)定同一供試品時(shí)可能采用了不同的實(shí)驗(yàn)方法，當(dāng)測(cè)定結(jié)果處于合格與不合格邊緣時(shí)，以采用內(nèi)標(biāo)法或標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)。 6.7頂空平衡溫度一般應(yīng)低于溶解供試品所用溶劑的沸點(diǎn)10以下，能滿足檢測(cè)靈敏度即可；對(duì)于沸點(diǎn)過(guò)高的溶劑，如甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等，用頂空進(jìn)樣測(cè)定的靈敏度不如直接進(jìn)樣，一般不宜用編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼5/18頂空進(jìn)樣方式測(cè)定。6.8利用保留值定性是氣相色譜中最常用的定性方法。色譜系統(tǒng)中載氣的流速、載氣的溫度和柱溫等的變化都會(huì)使保留值改變、從而影響定性結(jié)果。校正相對(duì)

12、保留時(shí)間（RART）只受柱溫和固定相性質(zhì)的影響，以此作為定性分析參數(shù)較可靠。應(yīng)用中通常選用甲烷測(cè)定色譜系統(tǒng)的死體積（ t。）： 式中 tR 為組分的保留時(shí)間； tR 為參比物的保留時(shí)間。 附表1 藥品中常見(jiàn)的殘留溶劑及限度 溶劑名稱(chēng)限度/%溶劑名稱(chēng)限度/%第一類(lèi)溶劑(應(yīng)該避免使用)苯四氯化碳1，2-二氯乙烷1，1- 二氯乙烯1，1，1-三氯乙烷第二類(lèi)溶劑（應(yīng)該限制使用）乙腈氯苯三氯甲烷環(huán)己烷1，2- 二氯乙烯二氯甲烷1， 2-二甲基乙酰N,N-二甲基乙酰胺N,N-二甲基甲酰胺0.00020.00040.00050.00080.150.0410.0360.0060.3880.1870.060.0

13、10.1090.088第二類(lèi)溶劑（應(yīng)該限制使用）二氧六環(huán)2-乙氧基乙醇乙二醇甲酰胺正己烷甲醇2-甲氧基乙醇甲基丁基酮甲基環(huán)己烷N-甲基吡咯烷酮硝基甲烷吡啶四氫噻吩四氫化萘四氫呋喃甲苯1，1，2-三氯乙烯二甲苯0.0380.0160.0620.0220.0290.30.0050.0050.1180.0530.0050.020.0160.010.0720.0890.0080.217 編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼6/18溶劑名稱(chēng)限度/%溶劑名稱(chēng)限度/%第三類(lèi)溶劑（藥品GMP或其他質(zhì)量要求限制使用）醋酸丙酮甲氧基苯正丁醇仲丁醇乙酸丁酯叔丁基甲基醚異丙基苯二甲基亞砜乙醇乙酸乙酯乙醚甲酸乙酯甲酸正

14、庚烷乙酸異丁酯乙酸異丙酯乙酸甲酯3-甲基-1-丁醇丁酮0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5第三類(lèi)溶劑（藥品藥品GMP或其他質(zhì)量要求限制使用）甲基異丁基酮異丁醇正戊烷正戊醇正丙醇異丙醇乙酸丙酯第四類(lèi)溶劑（尚無(wú)足 夠毒理學(xué)資料）1，1-二乙氧基丙烷1，1-二甲氧基甲烷2，2-二甲氧基丙烷異辛烷異丙醚甲基異丙基酮甲基四氫呋喃石油醚三氯醋酸三氟醋酸0.50.50.50.50.50.50.50.5 通常含有60間二甲苯、14對(duì)二甲苯、9鄰二甲苯和17乙苯。 藥品生產(chǎn)企業(yè)在使用時(shí)應(yīng)提供該類(lèi)溶劑在制劑中殘留水平的合理性論證報(bào)

15、告。編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼7/18附表2 常見(jiàn)有機(jī)溶劑在等溫法測(cè)定時(shí)相對(duì)于丁酮的保留值參考值非極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART柱溫40甲醇乙醇乙腈丙酮異丙醇正戊烷乙醚甲酸乙酯二甲氧基甲烷1，1- 二氯乙烯乙酸甲酯二氯甲烷硝基甲烷正丙醇1，2-二氯乙烯叔丁基甲基醚丁酮仲丁醇1.8282.0902.1792.2762.3562.4872.4892.5222.5842.6092.6352.6552.8072.9823.1093.2523.4493.6660.1260.2680.3150.3680.4110.4810.4820.5010.5340.5470.5610.5720.65

16、40.7480.8170.8941.0001.117編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼8/18極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART柱溫40正戊烷正己烷乙醚異辛烷異丙醚叔丁基甲基醚正庚烷環(huán)己烷1，1-二氯乙烯二甲氧基甲烷甲基環(huán)己烷丙酮甲酸乙酯乙酸甲酯1，2-二氯乙烯四氫呋喃甲基四氫呋喃四氯化碳1.6821.7871.8421.9261.9432.0052.0212.1592.2092.2432.4052.8762.9673.0003.3473.4033.4813.6350.0320.0750.0970.1310.1380.1630.1690.2250.2450.2590.3240.5150.

17、5510.5640.7050.7270.7580.821 編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼9/18非極性色譜溶劑名稱(chēng)Tr/minRART柱溫40正己烷異丙醚乙酸乙酯三氯甲烷四氫呋喃異丁醇1，2-二氯乙烷1，1，1-三氯乙烷甲基異丙基酮1，2-二甲氧基乙烷苯乙酸異丙酯正丁醇四氯化碳環(huán)己烷甲基四氫呋喃三氯乙烯二氧六環(huán)異辛烷正庚烷乙酸丙酯甲基環(huán)己烷甲基異丁基酮3-甲基-1-丁醇吡啶甲苯正戊醇甲烷3.8983.9083.9133.9544.2644.2644.5174.8084.9764.9855.2815.3115.3405.4705.5835.6766.7606.8236.9577.4347.

18、4788.6288.7388.8709.28311.18011.3821.5941.2421.2471.2501.2721.4391.4401.5761.7331.8231.8281.9882.0042.0192.0892.1502.2012.7852.8192.8913.1483.1723.7923.8513.9224.1455.1685.276 編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼10/18非極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART柱溫80乙酸異丁酯甲基丁基酮乙酸丁酯氯苯甲氧基苯異丙基苯丁酮甲烷柱溫120四氫化萘丁酮甲烷3.6113.8594.2995.2537.4368.1482.5021

19、.4938.0671.6301.4052.0992.3452.7783.7265.8906.5891.00029.6091.000編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼11/18極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART柱溫401，1，1-三氯乙烷乙酸乙酯乙酸異丙酯甲醇丁酮1，2-二甲氧基乙烷甲基異丙基酮二氯甲烷異丙醇乙醇苯乙酸丙酯三氯乙烯甲基異丁基酮乙腈乙酸異丁酯三氯甲烷仲丁醇甲苯正丙醇二氧六環(huán)1，2-二氯乙烷乙酸丁酯甲基丁基酮甲烷3.6533.8103.9804.0624.0794.6044.7164.7584.8224.9754.9776.0206.6437.2027.3687.4977.98

20、58.3908.7469.23810.33510.82711.01211.4861.6020.8280.8910.9600.9931.0001.2121.2571.2741.3001.3621.3621.7842.0352.2612.3282.3802.5772.7402.8843.0833.2563.7243.7993.990編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼12/18極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART柱溫80異丁醇正丁醇硝基甲烷異丙基苯吡啶3-甲基-1-丁醇氯苯正戊醇丁酮甲烷柱溫120甲氧基苯四氫化萘丁酮甲烷3.5774.4604.8855.2885.6255.9346.4397.3

21、322.1761.4913.8377.4721.6501.4043.0454.3344.9485.5436.0356.4867.2238.5271.0009.89024.4841.000編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼13/18附表3 常見(jiàn)有機(jī)溶劑在程序升溫法測(cè)定時(shí)相對(duì)于丁酮的保留值參考值非極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART甲醇乙醇乙腈丙酮異丙醇正戊烷乙醚甲酸乙酯二甲氧基甲烷1，1- 二氯乙烯乙酸甲酯二氯甲烷硝基甲烷正丙醇1，2- 二氯乙烯叔丁基甲基醚丁酮仲丁醇正己烷異丙醚乙酸乙酯三氯甲烷1.8462.1212.2012.3032.4012.5122.5192.5442.6112.62

22、32.6652.6742.8393.0513.1283.3023.5073.7563.9663.9713.9814.0050.1270.2720.3140.3670.4190.4770.4810.4940.5290.5350.5580.5620.6490.7600.8010.8921.0001.1311.2411.2441.2491.262編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼14/18附表3 常見(jiàn)有機(jī)溶劑在程序升溫法測(cè)定時(shí)相對(duì)于丁酮的保留值參考值非極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART四氫呋喃異丁醇1，2-二氯乙烷1，1，1-三氯乙烷甲基異丙基酮1，2-二甲氧基乙烷苯乙酸異丙酯正丁醇四氯化碳環(huán)

23、己烷甲基四氫呋喃三氯乙烯異辛烷二氧六環(huán)正庚烷乙酸丙酯甲基環(huán)己烷甲基異丁基酮3-甲基-1-丁醇吡啶甲苯4.3874.3974.61244.8435.0875.0995.3805.3985.4025.5015.6495.7396.8156.9286.9287.5637.5838.5818.8308.9689.17810.2591.4621.4681.5811.7021.8301.8371.9841.9941.9962.0482.1262.1732.7382.7982.7983.1313.1423.6663.7973.8703.9804.548編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼15/18附表3 常

24、見(jiàn)有機(jī)溶劑在程序升溫法測(cè)定時(shí)相對(duì)于丁酮的保留值參考值非極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART正戊醇乙酸異丁酯甲基丁基酮乙酸丁酯氯苯甲氧基苯異丙基苯四氫化萘甲烷10.44810.63811.02512.17513.16615.27015.72422.4091.6044.6474.7474.9515.5556.0767.1817.42010.933編碼SOP-02-03-45/3頁(yè)碼16/18附表3 常見(jiàn)有機(jī)溶劑在程序升溫法測(cè)定時(shí)相對(duì)于丁酮的保留值參考值極性色譜柱溶劑名稱(chēng)Tr/minRART正戊烷正己烷乙醚異辛烷異丙醚叔丁基甲基醚正庚烷環(huán)己烷1，1- 二氯乙烯二甲氧基甲烷甲基環(huán)己烷丙酮甲酸乙酯乙酸甲酯1，2- 二氯乙烯四氫呋喃甲基四氫呋喃四氯化碳1，1，1-三氯乙烷乙酸乙酯乙酸異丙酯甲醇丁酮1.6911.8071.8561.9571.9662.0532.0632.2172.2672.3032.4882.9883.0943.1263.5113.561