微量加樣器的質(zhì)控

1、微量加樣器的質(zhì)控微量加樣器是微量酶免疫測(cè)定中加樣時(shí)必用的設(shè)備，其使用和校準(zhǔn)對(duì)酶免疫測(cè)定結(jié)果有直接的影響，以下對(duì)如何正確地使用微量加樣器及其校準(zhǔn)等進(jìn)行介紹：1. 加樣器的使用1.1 吸液 標(biāo)準(zhǔn)吸液步驟如下： 把按鈕壓至第一停點(diǎn)； 垂直握持加樣器，使吸頭浸入液樣中，浸入液體深度視型號(hào)而定（見附表）不同加樣器允許浸入液體深度加樣器型號(hào)浸入液體深度P2和P101mmP20和P1002-3mmP200和P10002-4mmP50003-6mmP10ML5-7mm 緩慢、平穩(wěn)地松開按鈕，吸液樣。等一秒鐘，然后將吸頭提離液面。用藥用吸紙抹去吸嘴外面可能附著的液滴，小心勿觸及吸頭口。1.2. 放液 將吸頭口貼

2、到容器內(nèi)壁并保持10°-40°傾斜 平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點(diǎn)。第一秒鐘后再把按鈕壓至第二停點(diǎn)以排除剩余液體。 壓住按鈕，同時(shí)提起加樣器，使吸頭貼容器壁察過。 松開按鈕。 按吸頭彈射器除去吸頭（只有改用不同液體時(shí)才需要更換吸頭）。1.3. 預(yù)洗 當(dāng)裝上一個(gè)新吸頭（或改變吸取的容量值）時(shí)應(yīng)預(yù)洗吸頭，先吸入一次液樣并將之排回原容器中。預(yù)洗新吸頭能有效提高移液的精確度和重現(xiàn)性。這是因?yàn)榈谝淮挝〉囊后w會(huì)在吸頭內(nèi)壁形成液膜，導(dǎo)致計(jì)量誤差。而同一吸頭在連續(xù)操作時(shí)液膜相對(duì)保持不變，故第二次吸液時(shí)誤差即可消除。1.4. 致密及粘稠液體的吸取 對(duì)于密度高于水的液體，可將容量計(jì)的讀數(shù)調(diào)到低于所

3、需值來進(jìn)行補(bǔ)償。例如：用P20移液器轉(zhuǎn)移10ml血清。先將讀數(shù)調(diào)到10ml，吸取后以重量法測(cè)定。如實(shí)測(cè)體積為9.5ml，即偏差0.5ml并重復(fù)一次。如第二次測(cè)定仍不夠準(zhǔn)確，根據(jù)偏差再作調(diào)整。排放致密或粘稠液體時(shí)，宜在第一停點(diǎn)多等一二秒鐘再壓到第二停點(diǎn)。1.5. 加樣器吸頭 加樣器吸頭是整個(gè)移液系統(tǒng)的有機(jī)組成部分，對(duì)其基本要求是，必須有高機(jī)械、熱力學(xué)和化學(xué)穩(wěn)定性，且純度高，生產(chǎn)過程純凈，無有機(jī)或化學(xué)物質(zhì)（如染料）和重金屬污染。選擇密封良好的環(huán)口、薄壁和嘴口尖細(xì)的吸頭，將使得在加樣時(shí)，吸頭的安裝或卸脫更加容易。吸頭管壁有彈性，加樣吸液時(shí)不會(huì)產(chǎn)生旋渦，如此加樣的精度就更高。吸頭嘴口無毛刺，表面光潔平

4、滑，使得其沾濕性極小，可避免液體留外壁引起的誤差。吸頭應(yīng)與加樣器上吸頭套筒密封完好，可防止由于空氣泄漏而造成加樣精度或準(zhǔn)確度的誤差。此外，吸頭還應(yīng)有液體容積刻度線。D200吸頭在20ml和100ml處有標(biāo)記；D1000吸頭在300ml處有標(biāo)記，D10吸頭在2ml處有標(biāo)記。最后，吸頭應(yīng)可在1211Pa壓力下消毒20min。如果在使用加樣中，想絕對(duì)避免樣品與樣品、樣品與加樣器或樣品與操作人員之間的污染，建議使用Diamond帶濾芯吸頭。Diamond帶濾芯吸頭可以經(jīng)高溫消毒，其內(nèi)置濾芯不會(huì)損壞。2. 加樣器的校準(zhǔn)加樣器容量性能的鑒定，可依據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）文件ISO/DIS8655和國家技

5、術(shù)監(jiān)督局頒發(fā)的有關(guān)定量、可調(diào)移液器的中華人民共和國國家計(jì)量檢定規(guī)程定量、可調(diào)移液器試行檢定規(guī)程（JJG646-90）規(guī)定的重量測(cè)試方法。這是目前用于此類儀器有效的校準(zhǔn)方法。加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序2.1. 適用加樣器范圍 各種品牌、型號(hào)的固定、可調(diào)和多通道加樣器。2.2. 校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求 室溫20-25，測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.5。 電子天平：放置于無塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上，房間盡可能有空調(diào)。稱量時(shí)，為保證天平的濕度（相對(duì)濕度60%-90%），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。 小燒杯：5-10ml體積。 測(cè)定液體：溫度為20-25的去氣雙蒸水。2.3. 選定校準(zhǔn)體積 擬校

6、準(zhǔn)體積；加樣器標(biāo)定體積的中間體積；最小可調(diào)體積（不小于擬校準(zhǔn)體積的10%）。如為固定體積加樣器，則只有一種校準(zhǔn)體積。2.4. 校準(zhǔn)步驟 將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇合適的吸頭。 調(diào)節(jié)好天平。 來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭濕潤，用紗布拭干吸頭。 垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面2-3mm處，緩慢（1-3s）一致地吸取蒸餾水。 將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體。 將加樣器以30°角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一檔，等待1-3s，再壓至第二檔，使吸頭里的液體完全排出。 記錄稱量值。 擦干吸頭外面。 按上述步驟稱量10次。 取10次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量，按蒸餾水在不同溫度及氣壓下的重量與體積的換算因子計(jì)算體積。然后，按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器。2.5加樣器的維護(hù)保養(yǎng)程序加樣器應(yīng)根據(jù)使用頻率進(jìn)行維護(hù)，但至少應(yīng)每3個(gè)月進(jìn)行一次，具體方法如下：.一般維護(hù)可用中性洗滌劑清潔，或者用60的異丙醇，然后用蒸餾水反復(fù)洗滌，去除洗滌劑或異丙醇，晾干。清潔后活塞處可使用一定量的潤滑劑。.如果有液體進(jìn)入加樣器內(nèi)的嚴(yán)重污染，可將加樣器拆開后進(jìn)行清潔，具體拆開步驟參照加樣器說明書。.高壓消毒，有的加樣器的吸管部分可高壓消毒，但需注意的是消毒時(shí)不可超溫超時(shí)，也不能擠壓放置，以免造成變形。.可調(diào)式移液器在不使用時(shí)應(yīng)妥善地豎立放于支架上，