薄層色譜法對飲料中色素的測定(精)_第1頁
薄層色譜法對飲料中色素的測定(精)_第2頁
薄層色譜法對飲料中色素的測定(精)_第3頁
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文檔簡介

1、薄層色譜法對飲料中色素的測定實驗?zāi)康恼莆毡由V法對飲料中色素的測定的方法。實驗原理薄層色譜法又稱薄板層析法。薄層色譜使用涂敷有支持介質(zhì)硅膠或氧化鋁的平板為支撐體 ,流動相的移動是依靠毛細(xì)作用。將試樣點在層析板的一端,并將該端浸入作為流動相的溶劑 (常稱之為展開劑中 ,試樣點隨著溶劑向上移動。由于不同物質(zhì)在固定相和流動相中具有不同的分配系數(shù),當(dāng)兩相作相對運(yùn)動時 ,這些物質(zhì)也隨流動相一起運(yùn)動 ,并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配,這就使得那些分配系數(shù)只有微小差別的物質(zhì) ,在移動速度上產(chǎn)生明顯的差別,從而使各組分分離。通常用比移值R 來標(biāo)記和比較各斑點的位置 ,其定義是溶質(zhì)移動速度與展開劑(流動相的移動

2、速度之比 :實驗儀器及藥品1 檸檬黃樣品2 帶有色素的飲料芬達(dá) (橙味3 無水乙醇4 層析缸5 玻璃毛細(xì)管 (直徑約 1 mm6 薄層色譜板實驗條件實驗步驟0.預(yù)備 :將層析板置于烘箱中 ,于 105活化 30 min 后,保存于干燥器中備用。洗凈展開缸 ,晾干待用1.點樣 :1 在離層析板的底端2 cm 處用鉛筆輕畫一條線 ,作為原點線 ,在頂端 2 cm 處也同樣畫一條線 ,作為前沿線。2 用管口平整的毛細(xì)管分別吸取少量各色素溶液及飲料,點樣3 毛細(xì)管垂直地輕輕接觸到層析板的原點線上點樣,斑點直徑約為 23 mm,間隔約 1 cm。2.層析 :1 在層析缸中加入展開劑約30 mL(在缸中液

3、層約厚1 cm,蓋上層析缸蓋。待展開劑蒸氣在層析缸內(nèi)達(dá)到飽和(約 15 min2 將點好樣的層析板斜擱或近垂直地擱在層析缸中,點有薹樣堂一鬻浸于展開劑,點有試樣的一端浸于展開劑內(nèi)。3.當(dāng)展開劑上升到前沿線時,取出層析板 ,晾干 ,觀察有色斑點。4.觀察現(xiàn)象 ,計算比移值 R : f實驗條件實驗數(shù)據(jù)與現(xiàn)象黃色帶與檸檬黃樣品達(dá)到同一高度 ,另有淺黃色低于該高度。飲料中含有檸檬黃和另一種未知色素。備注 :由于時間關(guān)系 ,未測定比移值問題與討論(1 點樣時 ,原點太大對實驗有何影響 ?答:展開時會造成各種組分交叉或拖尾。(2 層析缸中展開劑的液面高度若超過原點線,對薄層色譜分析有什么影響?答:會使原點到層析點之間距離的數(shù)據(jù)不精準(zhǔn),比移值偏小。(3

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