新型整合素αvβ3受體拮抗劑的設(shè)計(jì)及抗腫瘤活性

1、新型整合素v3受體拮抗劑的設(shè)計(jì)及抗腫瘤活性程剛英、倪廣慧、張曼、趙娟、朱一婧、姜鳳超*華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，武漢（430030）摘要：目的：構(gòu)建v3受體拮抗劑的藥效團(tuán)模型，設(shè)計(jì)新型v3受體拮抗劑的先導(dǎo)化合物。方法：選擇對(duì)v3受體具有較高拮抗活性（IC50<1.5 nmolL-1）的四個(gè)類型的30個(gè)化合物為訓(xùn)練集，構(gòu)建整合素v3受體拮抗劑藥效團(tuán)模型。結(jié)合藥效團(tuán)模型和設(shè)計(jì)出新型結(jié)構(gòu)的先導(dǎo)化合物，合成并利用MTT法檢測(cè)化合物對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)與宮頸癌細(xì)胞株(Hela)的抑制作用。結(jié)果：最佳藥效團(tuán)含一個(gè)芳環(huán)中心, 一個(gè)疏水中心和兩個(gè)氫鍵受體，其相關(guān)系數(shù)與權(quán)重值數(shù)系數(shù)為：R

2、MS=0.44, Correl=0.90, Weight=1.31, Config=16.26。合成的8個(gè)目標(biāo)化合物經(jīng)UV、IR、1H-NMR，13C-NMR等光譜確證，目標(biāo)化合物對(duì)ECV304和Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)均有一定的抑制活性。在濃度為50mol/L 條件下，對(duì)ECV304細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用大于50%，對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用大于40%，最高達(dá)78%。關(guān)鍵詞：整合素v3受體拮抗劑；藥效團(tuán)模型；抑瘤活性；先導(dǎo)化合物腫瘤血管生成抑制劑1是一類能破壞或抑制血管生成，有效地阻止腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的藥物，整合素2是一種跨膜糖蛋白，分布于多種腫瘤細(xì)胞表面，是介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)粘附作用

3、的主要因子。其中v3在腫瘤誘導(dǎo)的血管生成過(guò)程中起重要作用3，近來(lái)被認(rèn)為一種血管新生的標(biāo)志。v3受體拮抗劑通過(guò)占據(jù)受體胞外區(qū)的特異性識(shí)別位點(diǎn)，阻止受體與內(nèi)源性配體結(jié)合，從而抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的生成以及促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，有效地阻止腫瘤血管生成，達(dá)到有望控制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的目的4。v3受體拮抗劑包括含RGD三肽序列（圖2）的小分子肽和擬肽化合物及模仿RGD三肽結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的非肽分子。由于IIb3、v5和51亦能識(shí)別RGD三肽序列，故設(shè)計(jì)v3拮抗劑時(shí)不僅要考慮其對(duì)v3受體的拮抗活性，還需注意選擇性。本文選擇已報(bào)道的v3受體拮抗劑中拮抗活性較高的化合物為樣本，構(gòu)建v3受體拮抗劑藥效團(tuán)模型。設(shè)計(jì)相應(yīng)的化

4、合物，并利用所得的藥效團(tuán)模型進(jìn)行虛擬篩選和類藥性分析，對(duì)設(shè)計(jì)的化合物進(jìn)行體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，設(shè)計(jì)的化合物對(duì)ECV304和Hela細(xì)胞均具有一定的作用。一、藥效團(tuán)模型構(gòu)建選擇30個(gè)文獻(xiàn)報(bào)道的活性較好，不同結(jié)構(gòu)類型的v3受體拮抗劑（IC50值在1.5 nmolL-1以下）作為訓(xùn)練集元素。根據(jù)結(jié)構(gòu)類型不同，將訓(xùn)練集中化合物按照中間連接部分（如烷基酰胺、哌嗪、哌啶和-內(nèi)酰胺等）不同分為相應(yīng)的子集等。利用計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)系統(tǒng)的CATALYST軟件，構(gòu)建出相應(yīng)的v3受體拮抗劑的藥效團(tuán)模型。其中的優(yōu)化模型含一個(gè)芳環(huán)中心（RA）, 一個(gè)可陰離子化部位（NI），兩個(gè)疏水作用基（HP），其相關(guān)系數(shù)與權(quán)

5、重值數(shù)等分別為：RMS=0.73, Correl=0.90, Weight=1.17, Config=14.00。檢驗(yàn)表明，構(gòu)建的藥效團(tuán)模型具有較好的活性預(yù)測(cè)能力，可用來(lái)指導(dǎo)v3受體選擇性拮抗劑的設(shè)計(jì)與篩選。 a b圖1藥效團(tuán)模型1(a)及其與化合物B-3的疊合圖(b)二、設(shè)計(jì)與合成利用構(gòu)建的藥效團(tuán)模型，在MDDR數(shù)據(jù)庫(kù)中搜索符合模型的化合物，參照作用于整合素v3受體的信號(hào)分子RGD三肽的基本結(jié)構(gòu)，以合成的現(xiàn)實(shí)性與合理性為依據(jù)，對(duì)搜索得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，設(shè)計(jì)了多種不同結(jié)構(gòu)類型的化合物。對(duì)設(shè)計(jì)的化合物利用藥效團(tuán)模型進(jìn)行虛擬活性預(yù)測(cè)，最后從中篩選出八個(gè)目標(biāo)化合物(圖2)。圖2 RGD及設(shè)計(jì)的

6、新化合物類藥性分析結(jié)果表明，設(shè)計(jì)的新型化合物符合利平斯基規(guī)則，初步顯示無(wú)明顯口服生物利用度或代謝分布差問(wèn)題。無(wú)致癌性，膜刺激性，致敏性，免疫毒性和神經(jīng)毒性，除了化合物II中個(gè)別化合物具有一定致突變性外，較安全?；衔锏暮铣陕肪€如下所示（圖3）：圖3. 合成反應(yīng)路線(a) 乙酰乙酸乙酯，哌啶，95%乙醇，2050；(b) KOH，回流；(c)HCl；(d) 乙酸酐，回流；(e) 3，丙酮，室溫；(f) 硫脲，碘，微波輻射；(g) 乙醚，濃氨水；(h) 3，丙酮，回流三、實(shí)驗(yàn)熔點(diǎn)由X-5型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀測(cè)定，溫度未校正。UV：紫外光譜儀：756PC Spectrum(上海光譜儀器有限公司)；IR：

7、Spectrum One傅立葉紅外光譜儀測(cè)定。1H-NMR，13C-NMR：均采用Parian Mercury VX-300型核磁共振儀。3.1 中間體的合成3.1.12，4-二乙酰基-3-芳香基戊二酸二乙酯(1a1d)的合成攪拌下緩慢將4.0ml六氫吡啶滴加到將0.1mol芳香醛，26.0ml乙酰乙酸乙酯(0.2mol)，100 ml95%乙醇的混合溶液中，滴加完后緩慢升溫，當(dāng)反應(yīng)瓶中出現(xiàn)固體后停止加熱，繼續(xù)攪拌兩小時(shí)。減壓過(guò)濾，濾餅用95%乙醇洗滌（20ml×3），得白色固狀物。粗產(chǎn)物用95%酒精重結(jié)晶，得白色針狀結(jié)晶，即為2，4-二乙酰基-3-芳香基戊二酸二乙酯5(1a1d)。

8、1a，-156.5；1b，產(chǎn)率：93.9%，mp.148.2-151.5；1c，產(chǎn)率：96.8%，mp.148.7-149.3；1d，產(chǎn)率：93.9%，mp.145.7-148.2；3.1.2 2,3-芳香基戊二酸(2a2d)的合成在55攪拌條件下，將0.05mol 2，4-二乙酰基-3-芳香基戊二酸二乙酯(1a1d)，分批加入到50ml濃度約為50%的KOH溶液中，加完后加熱回流半小時(shí)后若反應(yīng)體系為濁液，則加入少量水至反應(yīng)體系澄清?；亓?小時(shí)，停止加熱，冷卻至室溫后用濃鹽酸將反應(yīng)液調(diào)至PH=2，冷卻。過(guò)濾所得固體，用水洗濾餅至洗液PH=5-6后，用蒸餾水重結(jié)晶，干燥，得白色晶體，即3-芳香基

9、戊二酸(2a2d)。2a-181.4-182.9；2c-187.6-191.9；3.1.33-芳香基環(huán)戊二酸酐(3a3d)的合成將0.03mol 3-芳香基戊二酸(2a2d)與10ml乙酸酐混合，攪拌下加熱回流8小時(shí)，冷卻至室溫，過(guò)濾析出的固體，用乙醚洗滌（10ml×3），所得粗品，用丙酮/石油醚混合液重結(jié)晶，干燥得白色晶體，即3-芳香基環(huán)戊二酸酐6(3a3d)。3a，-107.9-144.8；3c-117.9-163.8；3.1.4 4-苯基噻唑-2-胺(4)的合成稱取7.6克硫脲(0.1mol)， 12.7克碘(0.05mol)，研細(xì)后加入250ml單口瓶中。裝上微波反應(yīng)裝置，粉

10、末攪拌均勻后加入5.2ml苯乙酮(0.05mol)。P=160W， 1min；而后P=80W，5 min。反應(yīng)體系稍冷后加入50ml乙醚攪拌10 min，析出黃色沉淀。抽濾，用20ml乙醚洗滌濾餅至黃色。抽干后棄去濾液，濾餅投入200ml的80熱水中。固體立即溶解，趁熱過(guò)濾。棄去沉淀，在濾液中滴加濃氨水至pH=8，產(chǎn)生白色絮狀沉淀。冷卻后抽濾，20 ml蒸餾水洗濾餅兩次，95%乙醇重結(jié)晶，干燥后得淺黃色針狀結(jié)晶8.7克，即4-苯基噻唑-2-胺7(4)，產(chǎn)率為49.4%，熔點(diǎn)：147.7150.0。3.2 目標(biāo)化合物的合成3.2.1 目標(biāo)化合物(IaId)的合成將0.01mol3-芳香基環(huán)戊二酸

11、酐(3a3d)溶于30ml丙酮后滴加到15ml含有1.8克N-芐基哌嗪(0.01mol)的丙酮溶液。滴加完畢后繼續(xù)攪拌兩小時(shí)。過(guò)濾，白色固體用丙酮（10ml×3）洗滌，用95%乙醇重結(jié)晶，真空干燥，得目標(biāo)化合物(IaId)。5-(4-芐基哌嗪基) -3-苯基-5-氧代戊酸5-（4-benzylpiperazin-1-yl）-5-oxo-3- phenylpentanoic acid ,Ia ，白色晶體，產(chǎn)率68.2%；mp. 172.9174.6；UV(0.001mol/L NaOH水溶液，/nm)：277.00(VW，B帶，*躍遷)，211.03(VS，E1帶，*躍遷)；IR(KB

12、r，/cm-1)：3440.23(O-H)， 3036.56 (=C-H)， 2955.82 (C-H)， 1690.96，1629.50 (C=O)，1461.60，1518.73 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng))， 749.05，705.99 (=C-H，苯環(huán)單取代) ；1H-NMR(300MHz ，NaOH，D2O ) /ppm：7.2057.147(2H，H-20，H-22，m)，7.1357.001(2H，H-9，H-13，m)，7.0986.999(3H，H-10，H-11，H-12，m)， 6.925，6.912(2H，H-19， H-23，d)， 6.738，6.724(H-21， d

13、)， 3.4953.582(H-17，m)，3.2293.156(2H，H-3b，H-5b，m)，3.1123.135(2H，H-7，m)， 3.0762.856(2H ，H-3a，H-5a，m)，2.5792.501(1H，H-16b，q)，2.4242.3043(3H，H-6b，H-2b，H-16a，m)，2.0902.023(2H，H-2a，H-6a，dd)，1.7671.520(1H，H-24b，d)，1.1280.886(1H，H-24a，d)；13C-NMR (300MHz ，NaOH，D2O)/ppm：180.464(C-25)，172.538(C-14)，142.772(C-1

14、8)，135.939(C-8)，135.473(C-20，C-22)， 131.583(C-19，C-23)， 129.95(C-9，C-13)， 128.858(C-10，C-12)， 128.508(C-11)， 127.707(C-21)，62.100(C-7)，55.282(C-2，C-6)，41.193(C-24)，40.450(C-16)， 40.158(C-17)，38.993(C-3)，38.235(C-5)5-(4-芐基哌嗪基) -3-(4-甲氧基苯基)-5-氧代戊酸（Ib，5-(4-benzylpiperazin-1-yl)-3-(4-methoxyphenyl)-5-ox

15、opentanoic acid），白色結(jié)晶，收率：60.5%，mp. 176.1178.2。UV(0.001mol/L NaOH水溶液，/nm)：208.03（s，E2帶），225.02（s，K帶）， 278.00（w，B帶）。IR(KBr，/cm-1)：3452.03(sb，O-H)， 3031.37 (=C-H)， 2939.65，2837.14 (C-H)， 1702.49，1630.48 (C=O)，1512.27，1461.82 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng))， 830.86，743.78，702.12 (=C-H，苯環(huán)1，4取代) ；1H-NMR(300MHz ，NaOH，D2O ) /

16、ppm：7.2317.197(2H，H-9，H-13，m)，7.0987.087(3H，H-10，H-11，H-12，m)，7.0347.021(2H，H-19，H-23，m)，6.778-6.764(2H，H-20，H-22，m)，3.661(3H，H-28，s)，3.5233.503(2H，H-7，s)，3.1403.069(1H，H-17，m)，2.909(2H，H-3b，H-5b，t)，2.6162.575(2H，H-3a，H-5a，t)，2.404，2.398(2H，H-16，m)，2.3872.349(2H，H-6b，H-2b，m)，2.325，2.132(2H，H-2a，H-6a

17、，m)，1.820，1.194(2H，H-24，d)；13C-NMR (300MHz ，NaOH，D2O)/ppm：180.604(C-25)，172.711(C-14)，157.801(C-21)，135.568(C-8)，135.337(C-18)， 130.213(C-19，C-23)，128.905(C-9，C-13)，128.597(C-10，C-12)，127.936(C-11)， 114.226(C-20，C-22)，61.989(C-7)，55.388(C-2，C-6)，51.849(C-24)，45.648(C-24)，44.171(C-16)，41.217(C-17)，40

18、.278(C-3)，39.078(C-5)。5-(4-芐基哌嗪基) -3-(3，5-二甲氧基苯基)-5-氧代戊酸（Ic，5-(4-benzylpiperazin-1-yl)-3-(3，5-dimethoxyphenyl)-5-oxopentanoic acid），白色結(jié)晶，收率：65.6%，mp.158.9161.0。UV(/ nm)：332.97(VW，R帶，n*躍遷)， 279.00(W，B帶，*躍遷)，211.03( M，E1帶，*躍遷)；207.03(M，E1帶，*躍遷)，226.02( VS，E1帶，*躍遷)；IR(KBr，/cm-1)： 3061.41， 3018.50 (=C-H

19、)， 2939.13，2838.40(C-H)，1701.26，1630.31 (C=O)， 1467.08，1511.86 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng))， 743.44，701.71 (=C-H，苯環(huán)單取代)；1H-NMR(300 MHz，NaOH，D2O)/ppm ：7.2537.194(2H，H-9，13，m) ，7.1047.033 (3H，H-10，H-11，H-12，m)，6.7846.770(3H，H-19，H-23，H-21，m)，3.666(6H，H-29，H-30，s)，3.5103.532(1H，H-17，m)，3.2853.264(1H，H-7b，d)，3.2253.193

20、(2H，H-3b，H-5b，t)，3.1373.116(1H，H-7a，d)，3.0893.055(2H，H-3b，H-5b，t)，2.9362.576(2H，H-3a，H-5a，t)，2.4332.360(2H，H-16，m)，2.3252.305(2H，H-2b，H-6b，m) ，2.1482.129(2H，H-2a，H-6a，d)，1.8381.808(1H，H-24b，s)，1.206(1H，H -24a，s) ；13C-NMR(300MHz，NaOH，D2O)/ppm ：180.639(C-25) 172.759(C-14)，157.843(C-20，C-22)，135.596(C-

21、18)，130.238(C-8)，128.917(C-9，C-13)，128.650(C-10，C-12)，127.997(C-11)，114.254(C-19，C-23)，62.028(C-21)，55.423(C-7)，51.891(C-2，C-6)，51.520(C-29，C-30)，45.658(C-24)， 44.218 (C-16)，41.250(C-17)，40.300(C-3)，39.113(C-5) 5-(4-芐基哌嗪基) -3-(4-溴苯基)-5-氧代戊酸（Id，5-(4-benzylpiperazin-1-yl)-3-(4-bromophenyl)-5-oxopentan

22、oic acid）白色結(jié)晶，收率：69.6%，mp. 199.1201.4。UV (/ nm)：208.03(M ，E1帶，*躍遷)， 227.02(VS，E1帶，*躍遷)；IR (KBr，/cm-1)：3031.39(=C-H)，2928.29cm-1，2837.67 (=C-H) ，1704.33，1628.64 (C=O)， 1488.27，1462.64 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng)) 740.58，700.41 (=C-H，苯環(huán)單取代)，631.39 (=C-Br)；1H-NMR (300MHz ， NaOH，D2O)/ppm：7.134(m，2H ，H-20，H-22)，7.1207.0

23、59(m，4H，H -9，H-13，H-19，H-23)，6.878-6.865(m，3H， H-10，H-11，H-12)， 3.184(m，1H，H-17)，3.1123.055(t，2H，H -3b，H-5b)，2.9362.916(m，1H，H-7b)， 2.8622.453(t，2H，H-3a，H-5a)，2.663(m，1H，H-7a，)，2.380(m，2H，H-16)，2.3662.263(m，2H，H -2b，H-6b) ，1.9871.969(d，2H，H-2a，H-6a) ，1.436(s，2H，H-24)；13C-NMR(300MHz，NaOH，D2O)/ppm：179

24、.968(C-25)，172.191(C-14)，142.566(C-18)，135.857(C-8)，131.791 (C-20，C-22)，130.128(C-19，C-23)，129.861(C-9，C-13)，128.674(C-10，C-12)，127.932(C-11)，120.362(C-21)，62.359(C-7)，52.177(C-2，C-6)，45.646(C-24)，43.747(C-16)，41.253(C-17)，40.541(C-3)，38.403(C-5) 3.2.2 目標(biāo)化合物(IIaIId)將0.01mol3-芳香基環(huán)戊二酸酐(3a3d)，溶于20ml丙酮，

25、與10ml含有1.8克4-苯基噻唑-2-胺(4)(0.01mol)的丙酮溶液混合，攪拌下加熱回流20小時(shí)。反應(yīng)完畢后，減壓蒸除溶劑，得灰色固狀物。用0.2mol/L 的Na2CO3溶液100ml處理上述固體，充分?jǐn)嚢韬筮^(guò)濾。濾液用稀鹽酸，調(diào)節(jié)至PH=4，有固體析出。過(guò)濾所的固體，用水洗滌（20ml×3），得粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用丙酮/石油醚重結(jié)晶，干燥得目標(biāo)化合物(IIaIId)。3-苯基-5-(4-苯基-1，3-噻唑-2-氨基 -5氧代戊酸（a，5-oxo-3-phenyl-5-(4-phenyl-1，3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid），白色結(jié)晶，收率

26、：46.4%，mp.108.1111.5。UV (/ nm)： 304.99 (W，R帶n*躍遷)，206.03(S，E1帶，*躍遷)，231.02( VS，E1帶，*躍遷) ；IR(KBr，/cm-1)：3184.27 (=O-H)，3058.85，3029.07 (=C-H)，2965.99 (C-H)，1692.39 (C=O)，1550.15 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng))， 770.76，729.82(=C-H，苯環(huán)單取代)；1H-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm ：11.107(1H，OH，s)，8.0667.840(2H ，H-5，H-12，s)，7.4617.368(6H

27、，H-10，H-11，H-13，H-14，H-18，H-22，m)，7.3567.254(2H ，H-19，H-21，m)，7.1857.161(1H， H-20，s)，3.8363.788(1H，H-16，m)，3.0562.968(2H，H-23，m)，2.8892.724(2H，H-15，dd)；13C-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm：173.319(C-24)， 170.265(C-7)，158.633(C-2)，150.416(C-4)，144.131(C-17)，135.961(C-9)， 129.406(C-18，C-22)，129.222(C-19，C-21)，12

28、8.514(C-12)，128.383(C-11，C-13)，127.198(C-20)，126.683(C-10，C-14)，108.196(C-5)，42.620(C-15)，40.605(C-23)，39.581(C-16) 3-(4-甲氧基苯基)-5-(4-苯基-1，3-噻唑-2-氨基 -5氧代戊酸（b，3-(4-methoxyphenyl)-5-oxo-5-(4-phenyl-1，3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid）白色結(jié)晶，收率：47.9%，mp.98.7100.0。UV (/ nm)：206.03(S ，E1帶， *躍遷)，231.02( VS，

29、 E1帶，*躍遷 )；IR(KBr，/cm-1)：3184.52(O-H，bm)，3058.31(=C-H)， 2958.49，2834.81 (C-H)， 1690.64(C=O)，1547.31，1513.36 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng))， 774.97，729.53 (=C-H，苯環(huán)單取代)，831.59(=C-H，苯環(huán)對(duì)位取代)；1H-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm：11.100-11.000(1H，OH，s)，7.8787.865(2H，H-5，H-12，m)，7.3997.364(2H，H-10，H-14，m)，7.2977.254(4H，H-11，H-13，H-18，H

30、-22，m)，6.8246.812(2H，H-19，H-21，m)，3.8053.741(3H，H-27，s)，3.7123.697(1H，H-16，m)，3.0382.923(2H，H-23，m)，2.8472.810(1H，H-15b，dd)，2.7112.672 (1H，H-15，dd)；13C-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm：173.640(C-24)，172.333(C-7)，170.502(C-2)，159.493(C-20)，158.447(C-4)，136.375(C-9)，134.59(C-17)，129.405(C-18，C-22)，129.321(C-12)，

31、 128.505(C-11，C-13)，126.690(C-10，C-14) ，114.527(C-19，C-21)， 108.196(C-5)，55.429(C-27)，43.143(C-15)，41.058(C-23)，38.858(C-16) 3-(3，5-二甲氧基苯基)-5-(4-苯基-1,3-噻唑-2-氨基 -5-氧代戊酸（c，3-(3，5-dimethoxyphenyl)-5-oxo-5-(4-phenyl-1,3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid）,白色結(jié)晶，收率：53.9%，mp.108.2110.0。UV (/ nm)：277.00( W，B帶

32、，*躍遷)，208.03( M， E1帶，*躍遷)；227.02( VS， E1帶，*躍遷)；IR(KBr，/cm-1)(附圖15)：3101.35 (=C-H)，2945.17 (C-H)，1802.12，1761.09 (C=O)，1460.38，1589.08 (C=C，苯環(huán)骨架振動(dòng))；1H-NMR (300MHz ，丙酮-6D)/ppm：6.540(9H，H-5， H-12， H-10，H-14，H-18，H-22，H-11，H-13 ，H-20，m)，3.7943.760(6H，H-27，H-29，m) ，3.0983.075(1H，H-16，m)，2.9002.600(2H，H-2

33、3，m)，2.0882.052(2H，H-15，m)3-(4-溴苯基)-5-(4-苯基-1，3-噻唑-2-氨基 -5氧代戊酸(IId，3-(4-bromophenyl)-5-oxo-5-(4-phenyl-1，3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid)白色結(jié)晶，收率：49.4%，mp.184.4186.0。UV (/nm)：296.99( VW，R帶，*躍遷)，207.03( W ，E1帶，*躍遷)； 227.02( VS ，E1帶，*躍遷)；IR(KBr，/cm-1)：25003300 (O-H，b，m)，3036.56(=C-H)， 1712.44 (C=O)，

34、1495.30 (C=C苯環(huán)骨架振動(dòng))，824.59 (=C- H苯環(huán)對(duì)位取代)；1H-NMR (300MHz，丙酮-6D)/ppm：10.910.4(1H，OH，s)，8.07.8(1H，H-5，m) ，7.4717.457(5H，H-12，H-10，H-14，H-18，H-22，m)，7.3197.305(4H， H-11，H-13，H-19，H-21，m)，3.6063.576(1H，H-16，s) ，2.8232.785(2H， H-23，d)，2.6902.648(2H，H-15，s)3.3 抗腫瘤活性測(cè)定 腫瘤細(xì)胞選取v3受體高度表達(dá)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)與宮頸癌細(xì)胞株

35、(Hela)。將目標(biāo)化合物和的8個(gè)化合物先配制成0.02mol/L的藥物原液，再用含10%胎牛血清的DMEM-1640培養(yǎng)液稀釋至所需的五個(gè)濃度100mol/L、50mol/L、25mol/L、12.5mol/L、6.25mol/L，供生物活性篩選。每個(gè)藥物五個(gè)濃度，以50mol/L 的5-氟尿嘧啶（5-Fu）為陽(yáng)性對(duì)照、空白對(duì)照、溶劑對(duì)照(1%DMSO)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。利用MTT法檢測(cè)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。四、結(jié)果與討論目標(biāo)化合物均為白色固體，難溶于水、苯、乙醚、氯仿等，易溶于DMF、DMSO。IaId不溶于丙酮，在乙醇中溶解度小，溶于NaHCO3溶液； IIaIId溶于丙酮，在乙醇中溶

36、解度較大，不溶于NaHCO3溶液，溶于Na2CO3溶液。目標(biāo)化合物對(duì)ECV304細(xì)胞和Hela細(xì)胞的抑制作用分別見(jiàn)圖4和圖5，由圖可以看出目標(biāo)化合物對(duì)于ECV304細(xì)胞和Hela細(xì)胞均有一定的抑制作用，但活性均低于陽(yáng)性對(duì)照5-Fu，并且的活性略低于。同時(shí)目標(biāo)化合物的b和 c 對(duì)ECV304細(xì)胞的活性較強(qiáng)，目標(biāo)化合物c與b對(duì)Hela細(xì)胞的活性略高于其他化合物。目標(biāo)化合物對(duì)ECV304和Hela細(xì)胞具有有一定的抑制活性，但是抑制活性不強(qiáng)。由于目標(biāo)化合物擬在于通過(guò)抑制細(xì)胞膜表面的v3受體，阻斷細(xì)胞的粘附來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，并不能像5-Fu一樣達(dá)到殺死細(xì)胞的能力，故生物活性小于5-Fu。v3受體在血管內(nèi)皮細(xì)胞以及惡性腫瘤細(xì)胞膜的表面有高度表達(dá)，這就意味著，抑制一個(gè)v3受體并不代表殺死一個(gè)細(xì)胞，當(dāng)拮抗劑占據(jù)細(xì)胞膜表面大部分v