國內外柑桔黃龍病發(fā)生與其監(jiān)控技術應用

1、國內外柑桔黃龍病發(fā)生與其監(jiān)控技術應用主要內容主要內容重慶大學基因工程中心1.國內外柑桔黃龍病發(fā)生與研究重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病柑桔黃龍?。–itrus Huanglongbing Disease）重慶大學基因工程中心美國柑桔黃龍病研究現(xiàn)狀美國柑桔黃龍病研究現(xiàn)狀重慶大學基因工程中心HLB的國內外分布的國內外分布重慶大學基因工程中心世界柑桔黃龍病起源與擴散途徑世界柑桔黃龍病起源與擴散途徑重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心三種柑桔黃龍病菌的世界分布三種柑桔黃龍病菌的世界分布重慶大學基因工程中心美國佛州美國佛州HLB分布圖分布圖重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心中國中國HLB分布概況

2、分布概況重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心2. 柑桔黃龍病常規(guī)鑒定方法重慶大學基因工程中心黃龍病癥狀診斷要領重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病典型癥狀葉片斑駁柑桔黃龍病典型癥狀葉片斑駁重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病（HLB）典型癥狀（1）重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病不同癥狀類型重慶大學基因工程中心柑桔葉片疑似癥狀重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病危害癥狀重慶大學基因工程中心黃龍病田間不同癥狀表現(xiàn)黃龍病田間不同癥狀表現(xiàn)I重慶大學基因工程中心黃龍病疑似癥狀類型黃龍病疑似癥狀類型重慶大學基因工程中心疑似柑橘黃龍?。ㄒ伤聘涕冱S龍?。℉LB） 癥狀癥狀 PCR檢測檢測除草劑藥害除草劑藥害重慶大學基因工程

3、中心重慶大學基因工程中心癥狀識別與分子監(jiān)測技術癥狀識別與分子監(jiān)測技術重慶大學基因工程中心黃龍病癥狀診斷要領黃龍病癥狀診斷要領重慶大學基因工程中心3. 柑桔黃龍病分子檢驗技術柑桔黃龍病分子檢驗技術無癥帶菌樣品重慶大學基因工程中心診斷方法與檢測技術診斷方法與檢測技術重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心中心的硬件基礎中心的硬件基礎重慶大學基因工程中心已經建立的分子檢測技術體系已經建立的分子檢測技術體系重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病柑桔黃龍病重慶大學基因工程中心亞洲柑桔黃龍病病原細菌顯亞洲柑桔黃龍病病原細菌顯微鏡形態(tài)圖微鏡形態(tài)圖重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病菌常規(guī)柑桔黃龍病菌常

4、規(guī)PCR檢測步驟檢測步驟重慶大學基因工程中心黃龍病PCR樣品制備方法重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病樣品制備柑桔黃龍病樣品制備重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病柑桔黃龍病PCR檢測技術試劑檢測技術試劑重慶大學基因工程中心PCR擴增程序擴增程序重慶大學基因工程中心柑桔黃龍?。ǜ探埸S龍?。℉LB）常規(guī)）常規(guī)PCR 早期診斷早期診斷重慶大學基因工程中心定量定量PCR的主要方法的主要方法重慶大學基因工程中心PCR引物的設計引物的設計重慶大學基因工程中心實時定量實時定量PCR方法原理和類型方法原理和類型重慶大學基因工程中心SYBR Green熒光染料法熒光染料法重慶大學基因工程中心TaqMan探針探針重慶大學

5、基因工程中心實時熒光實時熒光PCR檢測設備檢測設備重慶大學基因工程中心各種檢測技術靈敏度應用比較各種檢測技術靈敏度應用比較重慶大學基因工程中心實時實時PCR與常規(guī)與常規(guī)PCR相比的優(yōu)勢相比的優(yōu)勢重慶大學基因工程中心已經建立的分子檢測技術體系已經建立的分子檢測技術體系重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病分子檢測試劑盒柑桔黃龍病分子檢測試劑盒技術指標技術指標重慶大學基因工程中心分子檢測的防治學意義分子檢測的防治學意義重慶大學基因工程中心4.柑桔木虱監(jiān)控技術柑桔木虱監(jiān)控技術重慶大學基因工程中心亞洲柑桔木虱形態(tài)特征亞洲柑桔木虱形態(tài)特征:(D.citri)重慶大學基因工程中心柑桔木虱成蟲與若蟲柑桔木虱成蟲與若

6、蟲亞洲柑桔木虱非洲二點木虱重慶大學基因工程中心HLB田間擴散方式：田間擴散方式：重慶大學基因工程中心柑桔木虱生物學特性：柑桔木虱生物學特性：重慶大學基因工程中心柑桔種子傳病柑桔種子傳病 ？重慶大學基因工程中心防治策略與方法防治策略與方法重慶大學基因工程中心黃龍病傳播介體黃龍病傳播介體柑桔木虱柑桔木虱重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病昆蟲傳播媒介柑桔黃龍病昆蟲傳播媒介柑桔木虱柑桔木虱重慶大學基因工程中心傳播媒介傳播媒介:柑桔木虱（柑桔木虱（Diaphorina citri)重慶大學基因工程中心HLB自然和人為傳播自然和人為傳播重慶大學基因工程中心柑桔木虱生物學特性柑桔木虱生物學特性重慶大學基因工程中

7、心柑桔木虱藥劑防治重慶大學基因工程中心柑桔木虱田間調查柑桔木虱田間調查重慶大學基因工程中心廣西岑溪市送檢樣品檢測結果廣西岑溪市送檢樣品檢測結果樣品編號采集地點品種癥狀檢測結果（Ct值）Cx01-0604-02市工農路農科所砂糖桔疑似癥狀N/ACx01-0604-02市工農路農科所砂糖桔葉片黃化N/ACx04-0604-01耀華村中間洞楊山桔疑似癥狀小葉N/ACx04-0604-02耀華村中間洞楊山桔疑似癥狀小葉N/ACx04-0604-03耀華村中間洞貢柑疑似癥狀N/ACx08-0604-01同福村沙洲組貢柑疑似癥狀N/ACx08-0604-02同福村沙洲組貢柑疑似癥狀N/ACx08-0604

8、-03同福村沙洲組貢柑疑似癥狀N/ACx00-0605-03樟木元凡8組砂糖桔葉片黃化27.7Cx16-0605-01新廉村河旁組夏橙黃化27.1Cx00-0606-03市岑羅路農科所砂糖桔 斑駁（典型）29.8Cx00-0606-04市岑羅路農科所砂糖桔 斑駁29.3Cx16-0606-02波塘街大南組砂糖桔疑似癥狀N/ACx16-0606-03波塘街大南組砂糖桔疑似癥狀N/ACx16-0606-04波塘鎮(zhèn)波塘社區(qū)楊山桔斑駁30.6Cx16-0606-05波塘社區(qū)石榔楊山桔黃化N/ACx16-0606-06波塘社區(qū)石榔楊山桔黃化32.2Cx16-0606-07波塘社區(qū)廟腳組楊山桔斑駁32.2

9、重慶大學基因工程中心廣西岑溪市送檢樣品檢測結果廣西岑溪市送檢樣品檢測結果重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心重慶大學基因工程中心5.柑桔黃龍病綜合防控策略柑桔黃龍病綜合防控策略重慶大學基因工程中心綜合防除策略與措施綜合防除策略與措施重慶大學基因工程中心柑桔木虱帶菌率動態(tài)監(jiān)測柑桔木虱帶菌率動態(tài)監(jiān)測重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病綜合防除實例柑桔黃龍病綜合防除實例重慶大學基因工程中心表表1. 柑橘黃龍病癥狀診斷和分子診斷柑橘黃龍病癥狀診斷和分子診斷 （廣西（廣西北海北海 1999年）年）第一輪 1 st round斑駁癥狀Routine Survey*分子診斷PCR Detection符合度Ag

10、reement %陽性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Positive / No. Total 106/214109/214陽性檢出率Positive Result %49.5350.9397.25陰性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Negative/ No. Total112/214108/214陰性檢出率Negative Result %52.3450.4796.43第二輪 2nd round 斑駁癥狀Routine Survey*分子診斷PCR Detection符合度Agreement%陽性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Positive / No. Total 88/18293/182陽性檢出率Positive Result %48.3551.194.62陰性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Negative / No. Total 94/18289/182陰性檢出率Negative Result %51.6548.994.68重慶大學基因工程中心柑桔黃龍病田間采樣柑桔黃龍病田間采樣重慶大學基因工程中心廣西北海農場柑桔黃龍病監(jiān)測與控制廣西北海農場柑桔黃龍病監(jiān)測與控制重慶大學基因工程中心國內外黃龍病防除案例國內外黃龍病防除案例重慶大學基因工程中心重慶大